加味当归补血汤对小鼠造血功能的影响

对急性失血性贫血、溶血性贫血模型小鼠给予加味当归补血汤进行观察,对小鼠外周血ＷＰＣ、ＲＢＣ、Ｈｂ、网织红细胞（ＲＣ）及骨髓有核细胞（ＢＭＣ）等多项指标进行检测,同时从多能造血干细胞（ＣＦＵ－Ｓ）及骨髓ＤＮＡ合成代谢方面探讨加味当归补血汤对小鼠造血功能的影响,结果表明：加味当归补血汤具有明显促进外周血细胞回升及骨髓造血功能的作用。     

当归补血汤对内皮细胞和骨髓造血细胞的增殖和分化作用

目的：探讨当归补血汤对内皮细胞及骨髓造血细胞的刺激增殖和诱导分化作用。方法：在培养的内皮细胞及骨髓造血细胞半固体和液体培养体系中加入不同浓度的当归补血汤，采用流式细胞术、双抗夹心法检测其对内皮细胞及骨髓造血细胞增殖的影响。结果：当归补血汤能够促进内皮细胞由G1期进入S期及细胞因子的分泌，但对BFU—E，CFU—E，CFU—GM和CFU—MK集落产率的提高及细胞表面表达CD13和CD71的细胞数量没有统计学上的意义。结论：在体外，当归补血汤能够促进内皮细胞的增殖及细胞因子的分泌，但未发现促进骨髓造血干细胞增殖与分化的作用。     

当归补血汤对体外造血微环境中小鼠肌源性干细胞分化的影响

目的:观察当归补血汤对体外造血微环境中小鼠肌源性干细胞分化的影响。方法:分离小鼠肌源性干细胞并培养鉴定。制备含有不同剂量当归补血汤的大鼠载药血清及对应剂量的骨髓基质细胞条件培养基。将肌源性干细胞随机分为8组:正常大鼠血清组、当归补血汤载药血清1～3组、正常大鼠血清条件培养基组、条件培养基1～3组,免疫组化法检测CD45的表达情况。结果:培养的肌源性干细胞呈desmin染色阳性;培养3天时载药血清3组、条件培养基两组及3组阳性细胞与正常大鼠血清组之间相比CD45表达量有显著性差异;随当归补血汤载药血清浓度增大CD45表达量增多,10倍剂量载药血清作用效果最佳,条件培养基也呈同样的变化趋势,经10倍剂量载药血清干预的条件培养基作用效果显著。结论:当归补血汤载药血清及含载药血清的条件培养基可促进肌源性干细胞向造血细胞方向分化。     

当归补血汤对体外造血微环境中小鼠肌源性干细胞分化的影响

目的：观察当归补血汤对体外造血微环境中小鼠肌源性干细胞分化的影响。方法：分离小鼠肌源性干细胞并培养鉴定。制备含有不同剂量当归补血汤的大鼠载药血清及对应剂量的骨髓基质细胞条件培养基。将肌源性干细胞随机分为8组：正常大鼠血清组、当归补血汤载药血清1～3组、正常大鼠血清条件培养基组、条件培养基1～3组,免疫组化法检测CD45的表达情况。结果：培养的肌源性干细胞呈desmin染色阳性;培养3天时载药血清3组、条件培养基两组及3组阳性细胞与正常大鼠血清组之间相比CD45表达量有显著性差异;随当归补血汤载药血清浓度增大CD45表达量增多,10倍剂量载药血清作用效果最佳,条件培养基也呈同样的变化趋势,经10倍剂量载药血清干预的条件培养基作用效果显著。结论：当归补血汤载药血清及含载药血清的条件培养基可促进肌源性干细胞向造血细胞方向分化。     

当归补血汤及其拆方对骨髓抑制模型小鼠Wnt蛋白及其受体的影响*

目的探讨当归补血汤及其拆方对骨髓抑制模型小鼠Wnt蛋白及其受体的影响。方法应用环磷酰胺所致的骨髓抑制小 鼠模型,全自动血细胞分析仪检测外周血白细胞、红细胞、血小板数,ELISA法检测骨髓Wnt3a蛋白,qPCR法检测骨髓造血 干细胞Frizzled 2 mRNA表达水平。结果与正常组比较,模型组外周血白细胞、红细胞、血小板计数明显降低（P<0.05或 P<0.01）,骨髓Wnt3a蛋白、骨髓造血干细胞Frizzled 2 mRNA表达水平显著降低（P<0.01）;与模型组比较,当归补血汤 组外周血红细胞、血小板数明显升高（P<0.05或P<0.01）,骨髓Wnt3a蛋白、骨髓造血干细胞Frizzled 2 mRNA表达水平明 显提高（P<0.05或P<0.01）;黄芪组、当归组上述指标与模型组比较,差异均无显著性意义（P>0.05）。结论① 当归补血 汤具有提高骨髓Wnt3a蛋白及骨髓造血干细胞Frizzled 2 mRNA表达水平的作用;② 当归补血汤及其拆方对Wnt3a及其受体 Frizzled 2 mRNA的调控作用,体现了中医气血相生理论。     

当归补血汤粗多糖对气血双虚大鼠血象的影响及组方合理性探讨

目的：探讨当归补血汤粗多糖的补气生血作用和组方的合理性。方法：以失血与环磷酰胺并用所致气血双虚模型大鼠为研究对象,观察药物对外周血红细胞（RBC）、白细胞（WBC）、血红蛋白（Hb）及血小板（PLT）水平的影响。结果：当归补血汤粗多糖及单味药多糖可显著提高失血与环磷酰胺并用致气血双虚模型大鼠外周血RBC、WBC、Hb及PLT的水平,以当归补血汤粗多糖的作用最好。结论：当归补血汤粗多糖可提高机体的造血功能,组方合理。     

当归多糖诱导胎儿胸腺细胞、脾细胞表达GM-CSF、IL-3的实验研究

目的：研究“补血活血”要药当归的主要有效成分-当归多糖（APS）对胎儿胸腺细胞、脾细胞表达造血生长因子GM-CSF、IL-3的影响。方法：采用造血祖细胞体外培养、造血生长因子生物学活性检测、免疫细胞化学、核酸探针原位杂交等实验技术。结果：APS诱导的胸腺细胞、脾细胞培养上清液可促进早期造血祖细胞CFU-Mix增殖分化；APS诱导可促进胸腺细胞、脾细胞表达GM-CSF、IL-3蛋白及mRNA。结论：APS可促进淋巴细胞表达造血生长因子GM-CSF、IL-3，进而促进人早期造血细胞发生。     

当归造血作用研究进展

再生障碍性贫血是血液系统常见病、多发病,由多种原因造成骨髓造血功能衰竭,以全血细胞减少为特征的一种临床综合征。中医学认为"再生障碍性贫血"的发病机制为气血两虚。当归为益气、补血中药有造血刺激作用。随着细胞培养技术、药物学、分子生物学等研究技术的发展,不少学者对当归造血刺激作用机制进行深入研究并取得许多成果,结合近年文献,主要从促进造血干细胞增殖、抑制其凋亡、改善造血微环境、调节免疫及相关信号通路等方面阐述当归造血刺激作用机制。     

当归补血汤对内皮细胞增殖和粘附分子表达的影响

目的　了解当归补血汤对内皮细胞增殖及分泌粘附分子 (ICAM- 1)的影响 ,探讨当归补血汤对造血调控的机理。方法　建立人脐静脉内皮细胞体外培养模型 ,将 HU VEC与当归补血汤不同剂量 (0、4、40、40 0和40 0 0 μg/ m l)一起培养 ,以流式细胞分析术测定内皮细胞增殖周期 ,同时对粘附分子进行测定。结果　当归补血汤能够促进内皮细胞分泌粘附分子 ,对照组 CD5 4(ICAM- 1)仅有少量表达 ,而实验组 CD5 4(ICAM- 1)表达明显较对照组增多 (P<0 .0 5 )。细胞周期分析结果表明 ,实验组与对照组相比 ,有更多的细胞处于 S期 (P<0 .0 5 )。提示当归补血汤能够促进细胞由静止期进入增殖期。结论　当归补血汤能够促进内皮细胞的增殖以及细胞粘附分子的表达。     

补心方剂对小鼠外周血造血干细胞移植模型骨髓造血的影响

目的:观察补心方剂对外周血造血干细胞移植小鼠的影响.方法:将BALB/e小鼠随机分为正常对照组、模型组、单纯干细胞移植组、干细胞移植+炙甘草汤组、干细胞移植+天王补心丹组、干细胞移植+当归补血汤组、干细胞移植+参附汤组,每组25只.每组有10只用于观察死亡率,另15只用于检测血象及有核细胞数.结果:5天后观察小鼠死亡情...     

Hematopoietic-supportive effect of (2S, 3R)-ent-catechin on marrow-depressed mice

Hematopoiesis is an active process of cell proliferation, differentiation and release. It is the process during which hematopoietic stem cells (HSCs) proliferate and differentiate to mature blood cells under the effect of hemetopoietic growth factors (HGFs) in certain hematopoietic microenvironment. HSCs are sources of hematopoiesis of a body that can self-renew, differentiate to blood cells of every lineage and maintain the constancy of them. As the major tissue of hematopoiesis bone marrow is filled with all kinds of blood cells in various developmental stages. Under the normal conditions, the ordered proliferation and differentiation of hematopoietic stem cells/hematopoietic progenitor cells (HSC/HPC) depend on the regulation of cytokine network.     

造血调控的主要细胞因子及通路

血液中的血细胞均来自于造血干细胞,发育中的脊椎动物的许多结构中都存在造血干细胞.造血过程是一个持续的动态的过程,在此过程中,造血干细胞及造血祖细胞的活动均要受到各种细胞因子的调节.一些特殊的细胞因子可以作用于多个靶细胞,具有多种活性.它们通过与受体的相互作用进行信号转导,通过信号转导来调节造血干细胞及祖细胞的生存、增殖、分化及迁移.本文主要就近期对造血细胞特别是髓系干细胞增殖及分化中主要信号转导通路的研究进展作一综述.     

异基因干细胞移植患者基因状态研究

目的：应用PCR-STR技术,研究干细胞移植患者外周血、口腔黏膜上皮细胞及毛根的基因型变化。方法：对44例干细胞移植患者的血液、口腔拭子及毛根进行分型。结果：44例患者移植后外周血检出单一供者基因分型,毛根均检出单一受者基因分型,口腔黏膜上皮细胞有16例检出单一受者的基因分型,28例检出供者、受者的混合基因分型。结论：移植后外周血干细胞可以转变为口腔黏膜上皮细胞,这对干细胞治疗各种血液恶性疾病及法医学应用具有较高的参考价值。     

人脐血基质细胞自发分泌多种造血生长因子的实验研究

目的探讨体外培养的人脐血基质细胞分泌血小板生成素(thrombopoietin,TPO)、粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)、干细胞生长因子(stem cell factor,SCF)的能力.方法留取不同培养时相点的培养液上清,ELISA法检测上清中TPO、GM-CSF、SCF的浓度,并与骨髓基质细胞的培养上清液对照比较其特点.结果人脐血基质细胞和骨髓基质细胞均可分泌TPO、GM-CSF和SCF等造血生长因子,二者造血生长因子的分泌随着培养时间的延长而逐渐下降,其中人脐血基质细胞分泌TPO和SCF的高峰期出现在第7天,而GM-CSF的分泌则无高峰期的出现;通过与骨髓基质细胞分泌三种造血生长因子量进行对比发现,人脐血基质细胞SCF和GM-CSF的分泌量低于骨髓基质细胞,而TPO的分泌高于同期培养的骨髓基质细胞.结论人脐血基质细胞与骨髓基质细胞一样具有分泌造血生长因子,支持调控造血的作用.     

bcl-2基因转染小鼠造血干细胞重建造血的生物学特性

目的 观察ｂｃｌ－２基因转染小鼠造血干细胞重建造血的小鼠对放化疗的抵抗作用。方法 （１）含ｂｃｌ－２ｃＤＮＡ的逆转录病毒载体质粒,经脂质体介导转染ＰＡ３１７包装细胞,通过Ｇ４１８筛选和克隆,获得高病毒滴度的细胞株（Ｄ３）;（２）用Ｄ３细胞株的病毒上清转染小鼠胚胎肝造血干细胞;（３）经致死剂量照射小全注ｂｃｌ－２转 造血干细胞重建造血;（５）采用脾集落形成和再增殖能力观察ｂｃｌ－２转因干细胞重建造血     

异基因造血干细胞移植治疗骨髓增生异常综合征临床疗效分析

回顾性分析异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的适应证、治疗时机、移植物的选择、移植预处理方案的选择和移植疗效。22例患者中21例获得造血重建,1例非血缘脐血移植(UCBT)未获得植入的成人患者,于非血缘脐血移植(UCBT)后38 d进行母亲HLA4/6相合的外周血联合骨髓造血干细胞移植解救治疗获得植入。22例中死亡3例,无1例复发。MDS患者何时进行Allo-HSCT需依据国际预后积分系统(IPSS)对患者分组,评分属于高危组的患者宜在疾病确诊后尽早进行移植,而低危组的患者可在其他药物治疗效果不佳的时候进行;不仅可选择血缘关系的骨髓移植(BMT)和外周血造血干细胞移植(PBSCT),也可进行非血缘人类白细胞共同抗原(HLA)不全相合的UCBT;移植预处理如采用减低强度的方案(RIC)并不影响移植效果。     

脂多糖对脐血CD34^＋细胞体外增殖的影响

目的：研究脂多糖（LPS）对脐血干／祖细胞体外增殖的影响,探寻脐血干／祖细胞体外扩增的新方法。方法：将不同浓度的自制脂多糖和标准脂多糖分别加入含有脐血CD34^＋细胞的液体培养体系中培养,采用MTT测定方法分别测定脐血CD34^＋细胞增殖率。结果：不同浓度的自制脂多糖与标准脂多糖均可出现低浓度促进脐血CD34^＋细胞增殖,高浓度抑制其增殖的作用。最佳效应浓度分别在30U／mL及10mg／L。结论：脂多糖对脐血CD34^＋细胞体外增殖可能具有调节作用。     

CD133~+人脐血造血祖细胞的干性维持培养及鉴定

目的从人脐带血中分选出CD133+造血祖细胞,并进行长时间干性维持培养。方法通过免疫磁珠法分选出人脐带血中的CD133+造血祖细胞,经流式细胞仪检测免疫磁珠分选后的CD133+造血祖细胞。采用五种方法扩增培养该细胞,8周后,再通过细胞形态学、流式细胞术、免疫细胞化学和免疫荧光对细胞进行干性鉴定,探索最佳干性维持培养方法。结果通过免疫磁珠法可以从人脐带血中分选出80%以上的CD133+造血祖细胞。采用优化的无血清培养基培养8周之后,CD133+造血祖细胞可得到有效扩增。而其他的培养基会使CD133+造血祖细胞由半悬浮细胞分化为梭形贴壁细胞,并且细胞状态欠佳。结论利用免疫磁珠法分选出的CD133+造血祖细胞,采用优化的无血清培养基能够有效扩增该细胞,并可长期有效的维持其干性。     

健康供者骨髓血造血干细胞采集效果分析

目的：研究影响骨髓造血干细胞动员及采集的因素。方法方便选取2013年3月＿2016年6月期间就诊该院的77名健康供者,经重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF﹚动员后第4天采集骨髓,分析不同健康供者的年龄和性别对骨髓造血干细胞采集的影响以及采集时外周血白细胞数与采集效果的关系。结果77名供者均成功采集,骨髓采集物单个核细胞数(BM-MNCs)为(4.3±0.43﹚×108/kg,骨髓采集物CD34+细胞数(BM-CD34+﹚为(1.84±0.30﹚×106/kg,健康供者年龄和性别差异无统计学意义,采集时外周血白细胞数不能预测骨髓采集物中CD34+细胞的数量。结论采用5~10μg/kg G-CSF动员,健康供者均可成功采集骨髓干细胞。