短期大剂量氢化可的松诱发小鼠药源性证候的评价研究

目的:研究大剂量氢化可的松短期给药诱发小鼠药源性证候的特征及对肾上腺皮质功能的影响。方法:32只雄性ICR小鼠随机分为对照组与氢化可的松不同剂量干预组(12.5 mg·kg~(-1)·d~(-1)组、25 mg·kg~(-1)·d~(-1)组、50 mg·kg~(-1)·d~(-1)组),每组8只。氢化可的松不同剂量组小鼠分别灌胃给予相应浓度的氢化可的松溶液,对照组小鼠灌胃给予相同体积灭菌水,连续5 d。分别于给药第1、3、5天称量每只小鼠体质量。末次给药后,采用课题组前期建立的小鼠辨证论治实验方法学检测小鼠表征信息(躯体不同部位红外温度、腋温、抓力);取各只小鼠胸腺、脾脏称重,计算脏器指数;分离肾上腺组织,实时荧光定量PCR技术检测类固醇激素合成酶(Star、Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp11b1)基因表达,Western blot检测StAR、SRBI与LDLR蛋白表达。结果:①给药1、3、5 d后,氢化可的松25 mg·kg~(-1)·d~(-1)和50 mg·kg~(-1)·d~(-1)组小鼠的体质量均较对照组显著降低(P0.05,P0.01)。②给药5 d后,氢化可的松12.5 mg·kg~(-1)·d~(-1)和25 mg·kg~(-1)·d~(-1)组小鼠的头部最高温度均较对照组显著降低(P0.05),但氢化可的松各剂量组小鼠的躯干平均温度、尾部最低温度、腋温、抓力无明显变化。③与对照组相比,氢化可的松各剂量组小鼠的脾脏指数均明显下降(P0.01),且呈剂量依赖性;50 mg·kg~(-1)·d~(-1)组小鼠的胸腺指数较对照组显著降低(P0.01)。④与对照组相比,氢化可的松25 mg·kg~(-1)·d~(-1)和50 mg·kg~(-1)·d~(-1)组肾上腺组织中Star、Cyp11a1、Cyp11b1和Cyp21a1的mRNA表达均显著减少(P0.05,P0.01),StAR、LDLR和SRBI蛋白表达均显著降低(P0.05,P0.01)。结论:大剂量氢化可的松(25 mg·kg~(-1)·d~(-1)和50 mg·kg~(-1)·d~(-1))短期给药5 d可显著抑制小鼠肾上腺皮质功能,其证候表现以药源性阴虚证为主。     

氢化可的松减停给药致小鼠药源性阴虚证及其对肾上腺皮质功能的影响

目的:研究小剂量氢化可的松长期给药及减停后对小鼠证候和肾上腺皮质功能的影响。方法:96只雄性ICR小鼠随机分为对照组和氢化可的松低、中、高剂量(0.33、0.66、1.32mg·kg~(-1)·d~(-1))组,每组24只。氢化可的松组小鼠实验第1～28天灌胃给予相应剂量的氢化可的松溶液,实验第29～35天灌胃给予原剂量减半的氢化可的松溶液,实验第36～49天停药。对照组小鼠实验第1～35天灌胃给予等体积灭菌水。实验期间,每周定期测定每只小鼠的体质量。分别于实验第27、41、48天,采用小鼠辨证论治实验方法学检测小鼠腋温、四肢抓力和旷场活动度。分别于实验第28、42、49天,取每组8只小鼠,分离胸腺、脾脏、肾上腺组织,采集血清。计算胸腺与脾脏的脏器指数;ELISA检测血清皮质酮含量;PCR检测肾上腺类固醇激素合成急性调节蛋白(Star/StAR)、Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp11b1的mRNA表达;Western blot检测StAR、B族Ⅰ型清道夫受体(SRBⅠ)、低密度脂蛋白受体(LDLR)的蛋白表达。结果:(1)药物干预期间,氢化可的松各剂量组小鼠体质量增长缓慢,显著低于同期对照组(P0.05,P0.01);停药后各剂量组小鼠体质量快速增长,与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。实验第28天,氢化可的松高剂量组小鼠的腋温较对照组显著下降(P0.01),停药后恢复正常水平。在各观察时间点,各组小鼠四肢抓力和旷场活动度比较,差异均无统计学意义(P0.05)。(2)与对照组同期相比,实验第28天,氢化可的松各剂量组小鼠的脾脏指数和胸腺指数均显著下降(P0.05,P0.01);实验第42天,中、高剂量组小鼠的脾脏指数显著降低(P0.05);实验第49天,高剂量组小鼠的脾脏指数仍显著降低(P0.05)。(3)在各观察时间点,氢化可的松各剂量组小鼠的血清皮质酮含量较对照组均显著降低(P0.01)。(4)与对照组同期相比,实验第28天,氢化可的松中剂量组小鼠肾上腺组织Cyp21a1 mRNA表达显著下降(P0.05),高剂量组Star、Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp11b1的mRNA表达显著下降(P0.05,P0.01);实验第42天,中剂量组Star mRNA表达恢复性上调(P0.05);实验第49天,低剂量组Cyp21a1、Cyp11b1的mRNA表达恢复性上调(P0.01),中剂量组Star、Cyp11a1的mRNA表达恢复性上调(P0.01),高剂量组Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp11b1的mRNA表达恢复性上调(P0.01)。(5)与对照组同期相比,实验第28天,氢化可的松低剂量组小鼠肾上腺StAR蛋白表达量显著降低(P0.01),中剂量组StAR、SRBⅠ蛋白表达量显著降低(P0.01),高剂量组LDLR、StAR、SRBⅠ蛋白表达量均显著降低(P0.01);实验第42天,低剂量组LDLR蛋白表达量显著升高(P0.05);实验第49天,低剂量组LDLR、SRBⅠ、StAR蛋白表达水平与对照组相比,差异无统计学意义(P0.05),中剂量组StAR以及高剂量组LDLR和StAR蛋白表达水平仍显著下降(P0.05,P0.01)。结论:小剂量氢化可的松长期给药可诱发小鼠阴虚证表象,抑制其肾上腺皮质功能;药物减停后,小鼠外观表征恢复较快,而肾上腺皮质酮分泌功能恢复较慢。     

榄香烯乳联合化疗对小鼠Lewis肺癌组织S100A4及MMP-9蛋白表达的影响

【目的】观察榄香烯乳联合化疗对Lewis肺癌的抑瘤作用及其对S100A4及MMP-9表达的影响,探讨其作用机制。【方法】将24只接种Lewis肺癌瘤株的C57BL/6小鼠随机分为肺癌模型组、化疗组、榄香烯乳组、榄香烯乳联合化疗组,每组6只。接种后第11天开始给药治疗,化疗组给予小鼠腹腔注射足叶乙甙(3 mg·kg~(-1)·d~(-1))、顺铂(3 mg·kg~(-1)·d~(-1)),榄香烯乳组给予小鼠腹腔注射榄香烯乳(100 mg·kg~(-1)·d~(-1)),榄香烯乳联合化疗组小鼠腹腔注给予射榄香烯乳(100 mg·kg~(-1)·d~(-1))、足叶乙甙(3 mg·kg~(-1)·d~(-1))、顺铂(3 mg·kg~(-1)·d~(-1))。连续给药7 d后,观察各组小鼠瘤体质量,脾脏、胸腺指数变化,计算抑瘤率及抑制转移率,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测瘤组织中S100A4蛋白和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)含量,采用免疫组化法检测瘤组织中S100A4和MMP-9蛋白表达。【结果】与化疗组比较,榄香烯乳联合化疗组抑瘤率及抑制转移率均明显升高,肺癌小鼠脾脏指数、胸腺指数显著增加,瘤组织中S100A4和MMP-9含量明显降低,S100A4和MMP-9蛋白阳性表达率降低明显(P0.05或P0.01)。【结论】榄香烯乳联合化疗可抑制小鼠Lewis肺癌的生长转移,其机制可能与降低癌组织中S100A4、MMP-9蛋白的表达有关。     

辛伐他汀对急性病毒性心肌炎小鼠心肌病变的影响

目的观察辛伐他汀对急性病毒性心肌炎(VMC)小鼠的心肌病变和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法给BALB/c小鼠腹腔接种柯萨奇病毒B组3型(CVB_3)病毒建立急性VMC模型。随机均分为模型对照组、辛伐他汀5mg·kg~(-1)·d~(-1)治疗组(5mg组)、20mg·kg~(-1)·d~(-1)治疗组(20mg组)及40mg·kg~(-1)·d~(-1)治疗组(40mg组)。用药14d后,观察各组小鼠的心肌病理改变和死亡率,采用实时定量聚合酶链反应检测心肌中TNF-αmRNA表达水平,酶联免疫吸附试验检测血清TNF-α水平。结果模型对照组的心脏病变积分、心肌TNF-αmRNA表达和血清TNF-α水平分别为(2.84±0.62)分、0.139±0.029和(147.4±13.3)ng/L,5mg组分别为(2.48±0.55)分、0.124±0.026和(139.0±20.2)ng/L,20mg组分别为(1.56±0.58)分、0.057±0.012和(113.0±11.8)ng/L,40mg组分别为(1.61±0.62)分、0.051±0.012和(101.3±13.8)ng/L,20mg和40mg组均显著低于模型对照组(P值均<0.01),5mg组与模型对照组的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。各组间小鼠死亡率的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论辛伐他汀可减轻急性VMC小鼠心肌炎症和心肌病变程度,其机制部分与减少TNF-α表达有关。     

邓老冠心方对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块NOX4的影响

【目的】探讨邓老冠心方防治动脉粥样硬化(AS)不稳定斑块发生发展的可能作用机制。【方法】以高脂饲料喂养雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))鼠12周,复制AS小鼠模型。将AS小鼠随机分成模型组,中药高剂量组、低剂量组,辛伐他汀组,每组10只。另设C57BL/6J小鼠10只作为正常对照组。中药高剂量组、低剂量组给予邓老冠心方(剂量分别为3 500、700mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃,辛伐他汀组给予辛伐他汀(剂量为0.005 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃,共给药12周。采用苏木素—伊红(HE)染色法观察小鼠胸主动脉组织病理学变化,采用实时定量PCR(qPCR)法检测各组小鼠胸主动脉组织尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶4(NOX4)mRNA的表达。【结果】与模型组比较,中药高、低剂量组及辛伐他汀组的斑块面积/管腔面积比值呈不同程度降低(P 0.05或P 0.01)。与正常对照组比较,模型组小鼠胸主动脉组织NOX4 mRNA表达水平明显升高(P 0.001);各药物处理组小鼠胸主动脉组织NOX4 mRNA表达水平较模型组均显著降低(P 0.01),其中中药高剂量组下降最明显,与辛伐他汀组、中药低剂量组比较,差异均有统计学意义(P 0.05)。【结论】邓老冠心方可增加斑块的稳定性,并具有剂量依赖性,其机制可能与降低AS小鼠胸主动脉组织中NOX4 mRNA的表达有关。     

甲状腺激素对免疫抑制药物作用的影响

甲状腺激素(THY 150mg·kg~(-1)·d~(-1),ig×10d和200mg·kg~(-1)·d~(-1),ig×10d)能够显著促进正常昆明种成年小鼠对二硝基氯苯(DNCB)所致的迟发型皮肤超敏反应(DCH).在连续应用甲状腺激素(200mg·kg~(-1)·d~(-1).ip×10d)的小鼠,不同剂量的环磷酰胺(25mg·kg~(-1)·d~(-1),ip×10d)以及氢化可的松(25mg·kg~(-1)·d~(-1),im×10d)抑制小鼠的DNCB所致DCH的作用减弱甚至消失.     

左乙拉西坦治疗难治性癫痫效果及其对细胞免疫水平的影响

目的观察左乙拉西坦治疗难治性癫痫效果及其对细胞免疫水平的影响。方法将2013年2月—2015年2月延安大学附属医院神经内科二病区收治难治性癫痫患者84例,随机数字表法分为观察组和对照组各42例。对照组予卡马西平片,初始剂量5 mg·kg~(-1)·d~(-1),以后每周增加10 mg·kg~(-1)·d~(-1),直至增至20 mg·kg~(-1)·d~(-1);托吡酯片初始剂量0.5 mg·kg~(-1)·d~(-1),以后每周增加2 mg·kg~(-1)·d~(-1),逐步增至8 mg·kg~(-1)·d~(-1)。观察组应用左乙拉西坦,初始剂量10 mg·kg~(-1)·d~(-1),2次/d,每隔1周增加10 mg·kg~(-1)·d~(-1),4周后增至35 mg·kg~(-1)·d~(-1)并维持治疗。2组患者均连续治疗6个月。比较2组患者临床效果,治疗前后癫痫发作次数、CD3~+、CD4~+、CD8~+、DR~+水平变化情况,并记录不良反应发生情况。结果治疗后观察组总有效率95.2%显著高于对照组81.0%(x~2=4.086,P=0.044);治疗后,观察组癫痫发作次数、CDg~+、DR~+明显低于对照组,CD3~+、CD4~+、IgA、IgG、IgM显著高于对照组(t=3.021、8.793、7.761、3.924、5.962、1.845、4.427、2.113,P<0.05,P<0.01);2组患者未发生药物中毒,治疗过程中发生恶心、头晕、嗜睡、食欲减退、记忆力减退、白细胞降低、皮疹、情绪异常等不良反应,减缓加量速度后缓解,2组各不良反应发生情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论左乙拉西坦治疗难治性癫痫患者疗效确切,减少发作次数,有效改善细胞免疫水平,安全可靠,值得临床推广应用。     

红树莓根茎煎剂对S180模型小鼠细胞因子水平和胸腺、脾指数的影响

目的:观测红树莓根茎煎剂(RRD)对S180模型小鼠血清细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-10(IL-10)水平和胸腺、脾脏指数的影响,探究肿瘤被RRD抑制的机理。方法:选50只昆明健康小鼠,雌雄各半,按随机原则分5组,正常对照组、模型对照组、环磷酰胺组(CTX组)、红树莓组(RRD组)及红树莓和环磷酰胺联合用药组(RRD+CTX组),每组10只。除正常对照组外,其余40只小鼠在右腋窝处注射0.2 mL S180瘤株混悬液做造模实验。第二天给小鼠灌胃,正常对照组和模型对照组:0.02 mL·g~(-1)·d~(-1)生理盐水灌胃;CTX组:0.4 mL·20 g~(-1)·d~(-1)生理盐水灌胃,20 mg·kg~(-1)·d~(-1) CTX腹腔注射;RRD组:0.4 mL·20 g~(-1)·d~(-1) RRD灌胃;RRD+CTX组:0.4 mL·20 g~(-1)·d~(-1)RRD灌胃,20 mg·kg~(-1)·d~(-1) CTX腹腔注射,连续10 d,1次/d。用酶联免疫吸附法测量血清IL-2、IL-10水平;测定胸腺、脾脏指数。结果:红树莓根茎水煎剂能使S180模型小鼠血清IL-2水平升高(P<0.05), IL-10水平下降(P<0.05);还能提升S180模型小鼠胸腺指数(P<0.05)、降低脾脏指数(P<0.05)。结论:红树莓根茎水煎剂的抑瘤作用很可能和调节机体的免疫抑制状态和提高荷瘤机体的免疫器官功能有关。     

不同造模因素复制小鼠高尿酸血症模型的比较研究

[目的]通过观察不同造模因素对两种品系小鼠血尿酸(uric acid,UA)水平的影响,筛选简单、有效的小鼠高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)造模方法,为HUA的防治和药物早期筛选提供参考。[方法](1)采用氧嗪酸钾250mg·kg~(-1)、次黄嘌呤300mg·kg~(-1)+氧嗪酸钾250mg·kg~(-1)、腺嘌呤100mg·kg~(-1)+乙胺丁醇125mg·kg~(-1)、腺嘌呤200mg·kg~(-1)+乙胺丁醇250mg·kg~(-1)、黄嘌呤300mg·kg~(-1)+乙胺丁醇125mg·kg~(-1)、黄嘌呤600mg·kg~(-1)+乙胺丁醇250mg·kg~(-1)、次黄嘌呤300mg·kg~(-1)+乙胺丁醇125mg·kg~(-1)等7种造模因素,对昆明(Kunming mate,KM)小鼠灌胃7d,检测血清UA、肌酐(creatinine,CR)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平,比较不同造模因素造模效果的差异。(2)从实验一的7种造模因素中筛选出效果较好的造模因素对ICR小鼠灌胃7d,检测血清UA、CR、BUN水平,比较相同造模因素作用于不同品系小鼠造模效果的差异。[结果](1)KM小鼠连续造模7d后,氧嗪酸钾250mg·kg~(-1)、次黄嘌呤300mg·kg~(-1)+氧嗪酸钾250mg·kg~(-1)可使KM小鼠血清UA水平显著升高(P0.01),成功诱导HUA模型,且后者造模效果更佳;而腺嘌呤100mg·kg~(-1)+乙胺丁醇125mg·kg~(-1)组、腺嘌呤200mg·kg~(-1)+乙胺丁醇250mg·kg~(-1)组、黄嘌呤300mg·kg~(-1)+乙胺丁醇125mg·kg~(-1)组KM小鼠血清UA水平不升反降(P0.01,P0.05),且伴随CR、BUN水平显著升高(P0.01,P0.05);黄嘌呤600mg·kg~(-1)+乙胺丁醇250mg·kg~(-1)组、次黄嘌呤300mg·kg~(-1)+乙胺丁醇125mg·kg~(-1)组KM小鼠血清UA水平无统计学差异(P0.05)。(2)用氧嗪酸钾250mg·kg~(-1)、次黄嘌呤300mg·kg~(-1)+氧嗪酸钾250mg·kg~(-1)灌胃后,ICR小鼠血清UA水平与正常对照组比较,无统计学差异(P0.05)。[结论]UA前体物质(次黄嘌呤)复合尿酸酶抑制剂(氧嗪酸钾)可成功诱导KM小鼠HUA模型,且造模效果优于单独氧嗪酸钾250mg·kg~(-1)。在相同造模因素作用下,KM小鼠造模敏感度高于ICR小鼠,更适合HUA造模。     

温补肾阳中药对虚证模型小鼠肾上腺皮质激素合成的调节作用

  目的：研究温补肾阳中药及其配伍对虚证模型小鼠肾上腺皮质激素合成的影响。  方法：120只雄性ICR小鼠随机分成10组,即对照组、模型组、淫羊藿(5.3 mg·kg-1·d-1)组、仙茅(4.3 mg·kg-1·d-1)组、巴戟天(4.3 mg·kg-1·d-1)组、杜仲(5.3 mg·kg-1·d-1)组、补骨脂(5.3 mg·kg-1·d-1)组、菟丝子(6.0 mg·kg-1·d-1)组、肉苁蓉(5.3 mg·kg-1·d-1)组以及配伍(各单味中药等比例混合,4.7 mg·kg-1·d-1)组,每组12只。除对照组外,其他各组小鼠灌胃给予0.66 mg·kg-1·d-1氢化可的松溶液,连续14 d,以复制药源性虚证模型。造模同时,各中药干预组及配伍组小鼠灌胃给予相应药液,连续14 d。末次给药后,称量小鼠体质量;采集血清和双侧肾上腺组织。ELISA检测血清皮质酮含量;PCR检测肾上腺相关基因的表达,包括类固醇激素合成酶(Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp11b1、Hsd3b1)、胆固醇转运分子(Star、StarD3、Npc1、Npc2)、胆固醇摄取分子(Ldlr、Scarb1)、胆固醇合成限速酶(Hmgcr)、胆固醇储存分子(Lipe、Acat1)、胆固醇流出分子(Abca1、Abcg1)、胆固醇稳态分子(Srebf2、Nr1h3);Western blot检测肾上腺CYP11A1、CYP21A2、HSD11B1、StAR、NPC1、NPC2、LDLR、SRBI、HSL、ACAT1的蛋白表达。  结果：①与模型组相比,各中药干预组及配伍组小鼠的体质量和血清皮质酮含量无明显变化(P>0.05)。②与对照组相比,模型组小鼠肾上腺Cyp21a1 mRNA表达和CYP11A1蛋白表达显著降低(P＜0.01);与模型组相比,淫羊藿组和仙茅组Cyp21a1 mRNA表达明显上调(P<0.05),各中药组及配伍组CYP11A1蛋白表达呈上调趋势。③与对照组相比,模型组小鼠肾上腺Star和Npc1的mRNA表达及StAR和NPC1蛋白表达显著降低(P<0.05,P＜0.01),NPC2蛋白表达显著升高(P＜0.01);与模型组相比,淫羊藿组、仙茅组、杜仲组、菟丝子组及配伍组StAR蛋白表达明显升高(P<0.05,P＜0.01),各中药组NPC1蛋白表达量增多,以补骨脂作用最为显著(P<0.05),除杜仲组外其他中药干预组及配伍组NPC2蛋白表达明显下调(P＜0.01)。④与对照组相比,模型组小鼠肾上腺Ldlr、Scarb1的mRNA表达以及LDLR、SRBI的蛋白表达均显著降低(P<0.05,P＜0.01);与模型组相比,仙茅组、补骨脂组、菟丝子组、肉苁蓉组及配伍组Ldlr mRNA表达明显下调(P＜0.01),杜仲组、菟丝子组及配伍组SRBI蛋白表达显著升高(P<0.05,P＜0.01)。⑤模型组小鼠肾上腺Hmgcr mRNA表达及HSL蛋白表达较对照组显著降低(P＜0.01);与模型组相比,仙茅组、巴戟天组、杜仲组、补骨脂组、肉苁蓉组Hmgcr mRNA表达明显降低(P<0.05,P＜0.01),淫羊藿组、补骨脂组、菟丝子组、肉苁蓉组及配伍组HSL蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。⑥模型组小鼠肾上腺Abcg1 mRNA表达较对照组显著升高(P＜0.01);与模型组比较,除肉苁蓉组外,其他各中药干预组及配伍组的Abcg1 mRNA表达均显著降低(P<0.05,P＜0.01)。⑦模型组小鼠肾上腺Srebf2 mRNA表达较对照组显著降低(P＜0.01);与模型组相比,补骨脂组、肉苁蓉组及配伍组Srebf2 mRNA表达显著降低(P<0.05,P＜0.01),且补骨脂组、菟丝子组、肉苁蓉组及配伍组Nr1h3 mRNA表达显著降低(P<0.05)。  结论：温补肾阳中药可调节氢化可的松诱导的虚证模型小鼠肾上腺皮质激素的合成能力,其中以淫羊藿、仙茅、杜仲、菟丝子的作用较为显著。     

五味子乙素对苯并芘致不育模型小鼠精液质量的影响

目的探讨五味子乙素(Sch B)对苯并芘(Bap)所致不育模型小鼠精液质量降低的保护作用及其机制。方法选取性成熟雄性美国癌症研究所小鼠60只,随机分为对照组、Bap组和Sch B+Bap组,每组20只。Bap用橄榄油配成0.2 g·L-1混悬液,Sch B用9 g·L-1氯化钠注射液配成20 g·L-1混悬液。Bap组小鼠给予Bap 2 mg·kg-1·d-1灌胃,Sch B+Bap组小鼠给予Bap(2 mg·kg-1·d-1)及Sch B(200 mg·kg-1·d-1)灌胃,对照组小鼠给予相同剂量的9 g·L-1氯化钠注射液与橄榄油灌胃,30 d后处死小鼠取出睾丸组织,观察各组小鼠的精子密度、活率及动态参数曲线运动速度(VCL)、直线运动速度(VSL)、平均路径速度(VAP)、平均移动角度(MAD)、精子头侧摆幅度(ALH)、鞭打频率(BCF)、直线性(LIN)、摆动性(WOB)、向前性(STR),并测定睾丸组织细胞色素P450(CYP450)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及凋亡相关基因Bax、Bcl-2 mRNA表达水平。结果与对照组小鼠比较,Bap组小鼠的精子密度、活率以及a级精子与b级精子活率均显著降低(P<0.05);Sch B+Bap组小鼠的精子密度、活率、a级精子与b级精子活率显著高于Bap组(P<0.05)。Sch B+Bap组小鼠精子密度低于对照组(P<0.05),但2组小鼠间精子活率比较差异无统计学意义(P>0.05)。Bap组小鼠的各项精子动态参数均低于对照组(P<0.05)。Sch B+Bap组小鼠的各项精子动态参数均高于Bap组(P<0.05)。Sch B+Bap组小鼠精子的ALH、STR、BCF均显著低于对照组(P<0.05),VCL、VSL、VAP、LIN、MAD、WOB与对照组小鼠比较差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组小鼠比较,Bap组、Sch B+Bap组小鼠睾丸组织中CYP450活性显著增高(P<0.05),GSH-PX、SOD活性显著降低(P<0.05)。Sch B+Bap组小鼠睾丸组织中CYP450活性显著低于Bap组(P<0.05),GSH-PX、SOD活性显著高于Bap组(P<0.05)。与对照组小鼠比较,Bap组、Sch B+Bap组小鼠睾丸组织中Bcl-2 mRNA水平显著降低(P<0.05),Bax mRNA水平及Bax/Bcl-2显著增高(P<0.05)。Sch B+Bap组小鼠睾丸组织中Bcl-2 mRNA水平显著高于Bap组(P<0.05),Bax mRNA水平及Bax/Bcl-2显著低于Bap组(P<0.05)。结论五味子乙素可以改善苯并芘导致的小鼠精液质量降低,其作用可能是通过提高抗氧化酶活力及调节凋亡相关因子而实现。     

糖皮质激素诱发小鼠药源性证候模型规范化研究及其评价标准

目的:对糖皮质激素诱发的小鼠药源性证候模型建立规范化的造模方法及评价标准。方法:对模型动物、糖皮质激素类药物及其干预的剂量、时间等进行考察,采用小鼠辨证论治实验方法学以及反映肾上腺皮质功能的实验指标综合评价小鼠证候属性。结果:对糖皮质激素诱发的小鼠药源性证候模型,建议首选ICR小鼠,常规造模采用3.3 g·kg~(-1)·d~(-1)氢化可的松连续灌胃14 d;大剂量短期造模采用25 g·kg~(-1)·d~(-1)氢化可的松连续灌胃5 d;小剂量长期造模采用0.33 g·kg~(-1)·d~(-1)氢化可的松连续灌胃28 d;小剂量减停干预造模采用0.66 g·kg~(-1)·d~(-1)氢化可的松连续灌胃给药28 d、再剂量减半7 d、停药14 d。较理想的评价指标包括:体质量、脾脏指数、胸腺指数、腋温、体表红外温度、自主行为活跃度、四肢抓力、血液皮质酮、肾上腺类固醇激素合成酶特异性分子(StAR、CYP11A1、CYP11B1、CYP21A1、SRBI、LDLR)、肾上腺皮质形态及超微结构。结论:对糖皮质激素诱发的小鼠药源性证候模型建立了规范化的造模方法及可量化的疗效评价标准,为中药及其复方的药效研究提供理想的小鼠证候模型。     

过氧化物增殖激活受体α激动剂非诺贝特下调大鼠肝脏糖皮质激素受体表达

目的 探讨过氧化物增殖激活受体α(PPAR-α)激动剂非诺贝特对大鼠糖皮质激素受体(GR)表达调节作用.方法 30 只雄性SD大鼠随机分为对照组,FE1组(非诺贝特50mg·kg~(-1)·d~(-1),1个月),FE2组(非诺贝特100 mg·kg~(-1)·d~(-1),1个月),FE3组(非诺贝特100mg·kg~(-1)·d~(-1),2个月),MK886组[同时给予非诺贝特(100 mg·kg~(-1)·d~(-1))和PPARa抑制剂MK886(30 mg·kg~(-1)·d~(-1)),1个月].检测SD大鼠肝脏、肌肉、脂肪组织GR基因和蛋白表达水平,同时测定肾上腺11β-羟化酶(CYP11B1)基因表达水平,并以放免法测定大鼠血皮质酮水平.结果 非诺贝特显著下调了大鼠肝脏组织GR基因和蛋门质表达水平,FE1、FE2和FE3 3组GR mRNA水平分别较正常组降低55%、54%、68%,蛋白质表达水平分别降低了28%、77%和99%;并升高.肾上腺CYP11B1表达水平及血中皮质酮水平,而MK886完全逆转了非诺贝特的这些效应[正常组、FE1、FE2、FE3、MK886组皮质酮水平分别为(393±23)、(495±44)、(516±18)、(622±93)、(382±37)ng/ml],提示非诺贝特可抑制肝脏GR表达,并促进肾上腺皮质酮合成增多,这些作用依赖于PPARα激活.结论 PPARα激活剂非诺贝特可抑制肝脏GR表达.     

石上柏颗粒对肝癌模型小鼠瘤组织中Cyclin D1、CKS表达的影响

目的:研究石上柏颗粒对肝癌模型小鼠瘤组织中Cyclin D1、CKS表达的影响。方法:选取48只肝癌模型小鼠,随机分为为模型组、氟尿嘧啶组、石上柏颗粒组、联合给药组,每组各12例。氟尿嘧啶组给予氟尿嘧啶20 mg·kg~(-1)灌胃,石上柏颗粒组给予石上柏颗粒120 mg·kg~(-1)灌胃,联合给药组同时灌胃氟尿嘧啶20 mg·kg~(-1)和石上柏颗粒120mg·kg~(-1),模型组小鼠给予同体积纯净水,各组小鼠连续灌胃不同药物4周,比较各组小鼠治疗期间肿瘤生长情况,采用RT-PRC法测定各组小鼠瘤组织中Cyclin D1 mRNA、CKS mRNA的表达,采用West-blot法测定瘤组织中Cyclin D1、CKS蛋白的表达。结果:(1)给药1周、2周、3周、4周时氟尿嘧啶组小鼠移植瘤体积均较模型组小鼠显著降低(P0.05),给药2周、3周、4周时石上柏颗粒组小鼠移植瘤体积均较模型组小鼠显著降低(P0.05),给药3周、4周时联合给药组移植瘤体积均较氟尿嘧啶组小鼠显著降低,差异有统计学意义(P0.05);(2)给药4周时氟尿嘧啶组、石上柏颗粒组和联合给药组小鼠瘤组织Cyclin D1 mRNA、CKS mRNA均较模型组显著降低(P0.05),而联合给药组小鼠瘤组织Cyclin D1mRNA、CKS mRNA较氟尿嘧啶组显著降低,差异有统计学意义(P0.05);(3)给药4周时,氟尿嘧啶组、石上柏颗粒组和联合给药组小鼠瘤组织Cyclin D1和CKS蛋白均较模型组显著降低(P0.05),而联合给药组小鼠瘤组织Cyclin D1和CKS蛋白较氟尿嘧啶组显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:石上柏颗粒有显著抗肝癌作用,且可以增强氟尿嘧啶的疗效,其抗肝癌作用可能与其抑制Cyclin D1和CKS表达有关。     

苦参胶囊对高脂饮食诱导的ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化的干预效果研究

目的:观察苦参胶囊对载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化的干预作用。方法:高脂饲料喂养30只ApoE~(-/-)小鼠10周建立动脉粥样硬化小鼠模型,随机分为模型组、阳性对照组及药物高、中、低剂量组,每组6只,药物组分别灌胃苦参胶囊1.287 g/(kg·d~(-1))、0.643 5 g/(kg·d~(-1))、0.321 75 g/(kg·d~(-1)),阳性对照组给予阿托伐他汀钙1.3 mg/(kg·d~(-1))灌胃,模型组以等量生理盐水灌胃,连续给药6周。另设ApoE~(-/-)小鼠和C57各6只为对照组,普通饲料喂养,记录体质量变化,实验结束后处死,取血清、主动脉和心脏样本,观察各组主动脉病理变化、主动脉窦脂质沉积,检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平。结果:与ApoE~(-/-)对照组比,模型组体重增长迅速,TG、TC、LDL-C水平显著升高(P0.01),HDL-C水平显著降低(P0.05),主动脉壁可见大量泡沫细胞形成,主动脉窦脂质沉积明显(P0.01);与模型组比,苦参胶囊高、低剂量组TG、TC明显降低(P0.01),HDL-C水平显著升高(P0.05),主动脉壁泡沫细胞形成明显减少,主动脉窦脂质沉积明显减少(P0.01)。结论:苦参胶囊对动脉粥样硬化具有较好的治疗作用。     

活血潜阳祛痰方对肥胖高血压大鼠左室重构的影响

目的:观察活血潜阳祛痰方对肥胖高血压大鼠左室重构的干预作用,并探讨其作用机制。方法:以5周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)为对象,随机选取SHR 9只作为普食对照组(SHR组)予普通饮食,其余54只予高脂饮食共10周进行肥胖高血压大鼠模型造模并随机分为模型组、中药组和西药组;以周龄和性别相匹配的正常WKY大鼠为WKY对照组。中药组予活血潜阳祛痰方42 g·kg~(-1)·d~(-1)药液灌胃,西药组予缬沙坦30 mg·kg~(-1)·d~(-1)配液灌胃,WKY对照组、SHR组和模型组均用等容量饮用水灌胃,均灌胃2次/d,持续8周。观察体质量、血压、糖脂代谢指标、心肌血管紧张素(Ang)Ⅱ水平,观察大鼠左室重构、心肌结构和细胞凋亡情况;分别采用RTPCR和Western blot检测内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein,GRP78)、Caspase-12的mRNA和蛋白表达。结果:(1)与模型组比较,中药组和西药组大鼠血压(P0.05,P0.01)、空腹血糖(FPG)(P0.01)、三酰甘油(TC)(P0.05)、低密度脂蛋白(LDL-C)(P0.01)水平均显著降低;(2)中药组大鼠体质量(P0.05)、Lee’s指数(P0.05)及胰岛素抵抗指数(HOME-IR)(P0.01)均显著低于模型组;(3)中药组心脏质量指数(P0.01)、左室质量指数(LVMI)(P0.05)、心肌细胞凋亡率(P0.05)均明显低于模型组。(4)SHR组心肌AngⅡ水平显著高于WKY对照组(P0.01),模型组AngⅡ显著高于SHR组(P0.01);中药组心肌AngⅡ水平明显低于模型组(P0.01)。(5)模型组心肌GRP78、Caspase-12基因的mRNA和蛋白表达水平显著高于SHR组(P0.01),中药组GRP78、Caspase-12基因的mRNA和蛋白表达水平均明显低于模型组(P0.05,P0.01)。结论:活血潜阳祛痰方可显著改善肥胖高血压大鼠肥胖状态、血压、糖脂代谢及左室重构,可能与其调控心肌局部AngⅡ-GRP78-Caspase-12凋亡信号通路的作用相关。     

易瑞莎对H22肝癌小鼠的抑癌作用

目的　探讨易瑞莎 (IRESSA)对小鼠H2 2肝癌移植瘤生长的抑制作用。方法　H2 2肝癌移植瘤小鼠随机分为口服对照组、生理盐水对照组、顺铂d1 5组、顺铂d6 10组、易瑞莎组、易瑞莎 顺铂先合用组、易瑞莎 顺铂后合用组。易瑞莎用量为 10 0mg/kg体重 ,每日灌胃 1次 ,共 10d(d1 10 )。顺铂用量为 1 2mg/kg体重 ,每日腹腔内注射 1次 ,共 5d(d1 5或d6 10 )。检测肿瘤生长抑制率 (抑瘤率 ,IR)、小鼠体重变化、脾脏指数 (SI)、血白细胞数和血红蛋白值。结果　易瑞莎组抑瘤率与顺铂d1 5组、顺铂d6 10组、易瑞莎 顺铂先合用组抑瘤率相近 (P >0 0 5 ) ,分别为 4 1%、5 4 %、4 6 %和 5 6 %。易瑞莎 顺铂后合用组的抑瘤率 (2 6 % )明显低于易瑞莎 顺铂先合用组 (P <0 0 1)和顺铂d6 10组 (P <0 0 5 )。与口服对照或生理盐水对照组比较 ,易瑞莎组脾脏指数和净体重差异无显著意义 (P >0 0 5 )。易瑞莎 顺铂先或后合用两组的脾脏指数和净体重 ,与易瑞莎组比较明显下降 (P <0 0 1)。结论　易瑞莎对小鼠H2 2肝癌移植瘤生长具有显著抑制作用。     

恩度联合顺铂治疗恶性腹腔积液的疗效及安全性评估

目的评估恩度联合顺铂治疗恶性腹腔积液的疗效及增效机制。方法建立小鼠H22肿瘤腹水模型,随机分为生理盐水组、单独恩度组(10 mg/kg/d)、单独顺铂组(2.5 mg/kg/5 d)和恩度顺铂联合组1(每日给予恩度)、联合组2(隔日给予恩度),每组18只。治疗结束后每组取6只动物腹水样品进行蛋白浓度、红细胞数量、肿瘤细胞数量、肿瘤细胞凋亡比例测定,其余小鼠观察各组荷瘤寿命,以对照组基本死亡为实验结束的节点。结果 (1)与生理盐水组相比,恩度、顺铂单独或联合处理组给药期间体质量、腹围增长速度和腹水量均显著降低(P0.01),其中联合组小鼠体质量、腹围增长速度和腹水量显著低于单纯恩度或顺铂组小鼠(P0.01)。(2)联合组2小鼠腹水中红细胞含量显著低于生理盐水组、单纯恩度组和单纯顺铂组(P0.01)。生理盐水组小鼠腹水中肿瘤细胞数量显著高于恩度、顺铂单独或联合处理组(P0.01)。生理盐水组小鼠腹水中肿瘤细胞凋亡率显著低于单纯顺铂组、联合组1和联合组2(P0.01),但与单纯恩度组相比差异无统计学意义。(3)Logrank分析显示恩度联合顺铂对于小鼠的生存时间有显著延长作用(P0.01)。结论恩度和顺铂联用具有协同作用,可有效抑制小鼠腹水产生,减少腹水中红细胞渗透率,延长小鼠生存期;其中每日给予恩度效果优于隔日给予。     

小半夏汤对化疗呕吐模型大鼠膈下迷走神经放电的影响

目的:观察小半夏汤对化疗呕吐模型大鼠膈下迷走神经放电的影响,探讨小半夏汤的止吐机制。方法:雄性SD大鼠分为空白组、模型组、昂丹司琼治疗组(2.6 mg·kg~(-1))、阿瑞匹坦治疗组(11.08 mg·kg~(-1))、小半夏汤大中小剂量治疗组(3.2 g·kg~(-1)、1.6 g·kg~(-1)、0.8 g·kg~(-1))、小半夏汤正常对照组(1.6 g·kg~(-1))。造模前3 d开始给药,上述剂量每天分2次给予(间隔12 h),空白组、模型组灌胃等容积蒸馏水。第三天第5次灌胃1 h后,麻醉动物,颈静脉分别注射顺铂、1-苯基双缩胍(1-PBG)和P物质建立大鼠化疗性呕吐模型,采用电生理方法记录注射上述3种工具药前后大鼠膈下迷走神经放电幅度变化。结果:分别注射上述3种工具药后,与空白组比较,模型组大鼠膈下迷走神经各时间点放电活动均显著增强(P0.05,P0.01,P0.001);与模型组比较,小半夏汤大、中剂量均可显著抑制上述工具药所致的膈下迷走神经放电增强(各时间点均P0.001)。结论:小半夏汤可显著抑制顺铂、1-PBG和P物质所致的大鼠膈下迷走神经放电活动增强,提示小半夏汤通过阻断膈下迷走神经末梢上的5-羟色胺3(5-HT_3)受体和神经激肽1(NK_1)受体,阻断了迷走神经传入纤维将呕吐信号传至呕吐中枢,从而发挥防治化疗性恶心呕吐作用。     

氯氰菊酯对雄性小鼠肝脏组织的氧化损伤

目的:研究氯氰菊酯(cypermethrin,CYP)对雄性小鼠肝脏组织的氧化损伤。方法:将40只昆明种雄性小鼠随机均分为双蒸水灌胃(阴性对照组)和CYP 5、10和20 mg/kg染毒组,连续3周经口灌胃染毒。观察小鼠肝脏脏器系数,同时检测小鼠肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、总超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量。结果:随着CYP染毒剂量的升高,CYP 5 mg/kg和10 mg/kg组小鼠肝脏脏器系数均高于阴性对照组(P<0.01和P<0.05);CYP 10 mg/kg和20 mg/kg染毒组小鼠肝脏组织中谷胱甘肽过氧化物酶与CYP 20 mg/kg组过氧化氢酶活性均低于阴性对照组(P<0.01),CYP 5 mg/kg和10 mg/kg组总超氧化物歧化酶活性均高于阴性对照组(P<0.01),CYP 20 mg/kg组小鼠丙二醛含量亦显著高于阴性对照组(P<0.01)。结论:CYP可以引起雄性小鼠肝脏组织的氧化损伤,且损伤程度与CYP剂量有关。