温补肾阳中药对虚证模型小鼠肾上腺皮质激素合成的调节作用

  目的：研究温补肾阳中药及其配伍对虚证模型小鼠肾上腺皮质激素合成的影响。  方法：120只雄性ICR小鼠随机分成10组,即对照组、模型组、淫羊藿(5.3 mg·kg-1·d-1)组、仙茅(4.3 mg·kg-1·d-1)组、巴戟天(4.3 mg·kg-1·d-1)组、杜仲(5.3 mg·kg-1·d-1)组、补骨脂(5.3 mg·kg-1·d-1)组、菟丝子(6.0 mg·kg-1·d-1)组、肉苁蓉(5.3 mg·kg-1·d-1)组以及配伍(各单味中药等比例混合,4.7 mg·kg-1·d-1)组,每组12只。除对照组外,其他各组小鼠灌胃给予0.66 mg·kg-1·d-1氢化可的松溶液,连续14 d,以复制药源性虚证模型。造模同时,各中药干预组及配伍组小鼠灌胃给予相应药液,连续14 d。末次给药后,称量小鼠体质量；采集血清和双侧肾上腺组织。ELISA检测血清皮质酮含量；PCR检测肾上腺相关基因的表达,包括类固醇激素合成酶(Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp11b1、Hsd3b1)、胆固醇转运分子(Star、StarD3、Npc1、Npc2)、胆固醇摄取分子(Ldlr、Scarb1)、胆固醇合成限速酶(Hmgcr)、胆固醇储存分子(Lipe、Acat1)、胆固醇流出分子(Abca1、Abcg1)、胆固醇稳态分子(Srebf2、Nr1h3)；Western blot检测肾上腺CYP11A1、CYP21A2、HSD11B1、StAR、NPC1、NPC2、LDLR、SRBI、HSL、ACAT1的蛋白表达。  结果：①与模型组相比,各中药干预组及配伍组小鼠的体质量和血清皮质酮含量无明显变化(P>0.05)。②与对照组相比,模型组小鼠肾上腺Cyp21a1 mRNA表达和CYP11A1蛋白表达显著降低(P＜0.01)；与模型组相比,淫羊藿组和仙茅组Cyp21a1 mRNA表达明显上调(P<0.05),各中药组及配伍组CYP11A1蛋白表达呈上调趋势。③与对照组相比,模型组小鼠肾上腺Star和Npc1的mRNA表达及StAR和NPC1蛋白表达显著降低(P<0.05,P＜0.01),NPC2蛋白表达显著升高(P＜0.01)；与模型组相比,淫羊藿组、仙茅组、杜仲组、菟丝子组及配伍组StAR蛋白表达明显升高(P<0.05,P＜0.01),各中药组NPC1蛋白表达量增多,以补骨脂作用最为显著(P<0.05),除杜仲组外其他中药干预组及配伍组NPC2蛋白表达明显下调(P＜0.01)。④与对照组相比,模型组小鼠肾上腺Ldlr、Scarb1的mRNA表达以及LDLR、SRBI的蛋白表达均显著降低(P<0.05,P＜0.01)；与模型组相比,仙茅组、补骨脂组、菟丝子组、肉苁蓉组及配伍组Ldlr mRNA表达明显下调(P＜0.01),杜仲组、菟丝子组及配伍组SRBI蛋白表达显著升高(P<0.05,P＜0.01)。⑤模型组小鼠肾上腺Hmgcr mRNA表达及HSL蛋白表达较对照组显著降低(P＜0.01)；与模型组相比,仙茅组、巴戟天组、杜仲组、补骨脂组、肉苁蓉组Hmgcr mRNA表达明显降低(P<0.05,P＜0.01),淫羊藿组、补骨脂组、菟丝子组、肉苁蓉组及配伍组HSL蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。⑥模型组小鼠肾上腺Abcg1 mRNA表达较对照组显著升高(P＜0.01)；与模型组比较,除肉苁蓉组外,其他各中药干预组及配伍组的Abcg1 mRNA表达均显著降低(P<0.05,P＜0.01)。⑦模型组小鼠肾上腺Srebf2 mRNA表达较对照组显著降低(P＜0.01)；与模型组相比,补骨脂组、肉苁蓉组及配伍组Srebf2 mRNA表达显著降低(P<0.05,P＜0.01),且补骨脂组、菟丝子组、肉苁蓉组及配伍组Nr1h3 mRNA表达显著降低(P<0.05)。  结论：温补肾阳中药可调节氢化可的松诱导的虚证模型小鼠肾上腺皮质激素的合成能力,其中以淫羊藿、仙茅、杜仲、菟丝子的作用较为显著。