豚鼠鼓阶开窗修复后内耳变化的初步观察

目的　为豚鼠耳蜗微窥镜检查选择最佳径路。方法　对 2 0只豚鼠的 2 0耳在开窗术前、术后及开窗修复术后 2周 ,分别作听性脑干反应检查 ,并制作术后 2周耳蜗的光镜和扫描电镜标本。结果　发现术前、术后及修复术后 2周听性脑干反应Ⅰ～Ⅲ波间期无显著差异 ,术后 2周Corti器及毛细胞形态正常。结论　鼓阶开窗及修复并未引起内耳的器质性损伤。     

热休克蛋白70在CO2激光照射豚鼠耳蜗中表达的实验学研究

目的 探讨CO2激光照射豚鼠耳蜗后热休克蛋白70(Hsp70)表达的改变、耳蜗超微结构改变与听功能的变化三者之间的关系.方法 36只红目豚鼠分3组,分别以功率为1、2和3W的CO2激光在豚鼠左耳耳蜗底周打孔,听性脑干诱发电检查听功能变化,扫描电镜技术观察耳蜗形态学变化,SABC免疫组化技术及图像分析技术,观察耳蜗Hsp70表达的情况.结果 术后即刻3组听阈较术前明显升高,照射后3周1W组听阈基本恢复,2W和3W组听阈有所下降但仍高于术前;术后3周,扫描电镜观察1W组外毛细胞静纤毛个别紊乱,2W组出现散在的外毛细胞静纤毛的倒伏,排列紊乱,3W组出现外毛细胞静纤毛严重缺失、破坏和融合呈球状;术后即刻3组耳蜗中Corti器和螺旋神经节Hsp70表达较对照组明显增强,术后3周1W组Hsp70表达与对照组无明显差异,2W和3W组Hsp70表达较对照组有所增强,且A和B组术后即刻和术后3周、C组术后即刻ABR阈值的变化和Hsp70阳性反应平均灰度值的变化密切相关,而C组术后3周ABR阈值的变化和Hsp70阳性反应平均灰度值的变化无明显相关.结论 CO2激光照射豚鼠耳蜗后能诱发耳蜗热休克反应,使HSP70表达增强,其表达程度与听功能的变化、耳蜗超微结构损伤密切有关.     

腺病毒携带GFP在豚鼠耳蜗基因转导的形态结构与功能改变

目的 带有绿色荧光蛋白（GFP）基因的腺病毒注入豚鼠耳蜗后，观察不同时间段GFP基因的表达和分布情况及手术操作对听力的影响，为内耳基因治疗提供理论依据。方法 15只杂色豚鼠术前及术后行听性脑干反应（ABR）和畸变耳声发射（DPOAE）检查，空白对照组经圆窗或底回钻孔注入人工外淋巴液。实验组注入带有GFP基因的腺病毒。分别于3、5、7和10d后取材，耳蜗标本经硝酸银染色后铺片。结果 腺病毒注入耳蜗后对听阈影响不大。术前术后的DP值有差异。荧光显微镜下可见3d组表达产物最高。7d后逐渐减弱，10d后更弱，表达产物主要分布于支持细胞、螺旋神经节细胞和基底膜下的间皮细胞。对照组均无绿色荧光。结论 通过圆窗或底回注入腺病毒对听阈没有影响。单一位点的接种就能使神经营养因子通过耳蜗液扩散到整个耳蜗。有效的基因转移在耳蜗是可行的，但表达相对短暂。     

顺铂对豚鼠耳蜗损害作用实验研究

目的观察顺铂对耳廓反射正常的健康豚鼠耳蜗功能的损害作用，以探讨顺铂对豚鼠耳蜗毒性作用及其损伤机制，为防治顺铂耳毒性作用提供理论依据。方法将60只耳廓反射灵敏的健康豚鼠随机分成两组，顺铂组腹腔注射顺铂4mg／（k·d），1次／d，连续注射5d。正常对照组腹腔注射同等剂量的生理盐水。实验前和实验5d后分别行耳廓反射和听性脑干反应测听。测定麻醉状态下豚鼠听觉脑干诱发电位，比较实验前后两组听觉诱发电位阈值及各波潜伏期、波幅变化。结果顺铂组豚鼠听性脑干反应测试听闽明显提高，各波潜伏期延长，波幅降低，甚至出现波形变异不易辨认，两组比较差异有显著性。结论顺铂可导致豚鼠耳蜗功能损害，表现为豚鼠耳蜗听性脑干反应阂值显著提高，各波潜伏期延长。波幅降低。     

豚鼠耳蜗微渗透压泵慢性灌注技术的改进

目的：介绍应用改进的微渗透压泵进行豚鼠耳蜗慢性灌注的方法。方法：将微渗透压泵埋置于8只豚鼠背部,经固定于耳蜗底回鼓阶内的改良微导管将人工外淋巴液缓漫注入内耳,观察豚鼠耳蜗对微渗透压泵慢性灌注人工外淋巴液的反应。结果：动物术后14d脑干诱发电反应阈值（ABR）无明显的变化,耳蜗螺旋神经节细胞及毛细胞未见损伤。结论：改进后的微渗透压泵耳蜗灌流技术完善了内耳慢性给药的实验方法。     

鼓阶开窗微孔技术注入胰岛素样生长因子-1对庆大霉素致聋豚鼠的治疗作用

目的 探讨通过鼓阶开窗,微孔技术注胰岛素样生长因子-1(IGF-1)入内耳鼓阶,研究IGF-1对感音神经性聋动物模型(庆大霉索致耳聋豚鼠)的治疗作用.方法 豚鼠20只,施用庆大霉素致耳聋后均分为IGF-1组和对照组,行鼓阶开窗术,微孔技术注入试剂(IGF-1组注入鼠重组IGF-1,对照组注入人工生理外淋巴液)10μl,分别在术前和术后7、14 d行ABR测试;测试完后每组3只断头取听泡,在扫描电镜下观察耳蜗毛细胞改变.结果 IGF-1组ABR反应阈(RT)术后7、14 d均比术前有显著降低;IGF-1组比对照组RT在术后14 d有显著降低.扫描电镜发现对照组较IGF-1组毛细胞受损严重;同时,IGF-1组受损毛细胞表面有指状微绒毛生长.结论 微孔技术注入IGF-1可以改善豚鼠受损听力,减轻庆大霉素耳毒性的继续损伤,其机制可能为减轻耳蜗毛细胞的损伤并修复部分毛细胞,同时保护传人神经.     

镫骨切除术对豚鼠听力的影响

目的 研究镫骨切除术对豚鼠听功能及形态学的影响,探讨镫骨切除术对听功能改变的影响因素.方法 24只(48耳)豚鼠随机分为两组,每组12只.选定左耳为手术耳,分别进行暴露砧镫关节手术(手术对照、1组),镫骨切除、人工镫骨植入术(镫骨切除术组、2组);行听性脑干反应(ABR)测试并分别于术后1 h、术后1 d各组随机抽出4只豚鼠进行耳蜗中轴切片及扫描电镜检查.结果 手术对照组除波?潜伏期较术前延长外,其余各波潜伏期及波间期、反应阈均无明显改变;镫骨切除术后1 h反应阈明显提高(23.75±3.77 dBSPL);Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ波和Ⅰ～Ⅲ波间期较术前延长.镫骨切除术后Ⅰ、Ⅲ波潜伏期较手术对照组延长,而各波间期无明显差异;各组术后1 d与术后1 h各听力指标无显著性差异.两组耳蜗结构完整,各转螺旋神经节细胞数无显著性差异.镫骨切除术组仅第3排外毛细胞静纤毛部分略有紊乱(术后1 d恢复正常),手术对照组毛细胞形态正常.结论 镫骨切除术可引起豚鼠听力轻度损失,对耳蜗功能的影响小.     

短音刺激脑干诱发电位在豚鼠中的实验研究

本文通过16只豚鼠500。1,000、2,000、4,000和8,000Hz 短音刺激脑干诱发电位的分析,提示听力正常豚鼠的低频短音脑干诱发反应可能系耳蜗高频区听单位的兴奋所产生,低频短音并未比短声表现较好的频率特性。然而耳蜗高频区外毛细胞有严重损害的豚鼠,其相应的高频短音脑干诱发电位反应阚有所提高,低频短音脑干诱发电位反应阈仍正常,故短音具有频率特性。从耳蜗损害豚鼠的短声和短音脑干诱发电位反应阈的差别可以看出,短声和短音结合使用将有利于迅速而全面地反映耳蜗的功能.     

颈椎病的耳蜗电图和听觉脑干反应改变的初步探讨

对２０例颈椎病患者进行耳蜗电图描记和听性脑干反应测试，得出如下结果：（１）耳蜗电图、听性脑干反应的阈值升高，某些病例的－ＳＰ／ＡＰ大于０．４；（２）予以重复速率为２０次／秒的短声刺激时，患侧波Ⅰ～Ⅴ间期可疑延长，（３）增加重复刺激的速率，予以５０次／ｓ的短声刺激时，波Ⅰ～Ⅴ间期明显延长。这些结果提示颈椎病对耳蜗和听觉脑干结构存在影响，综合耳蜗电图和脑干反应诸参数对临床辅助诊断颈椎病有一定的意义。     

内皮依赖性舒张因子对豚鼠耳蜗微血管自律运动的影响

目的：探讨豚鼠耳蜗微血管运动的基本特征及内皮依赖性舒张因子对豚鼠耳蜗微血管自律运动的影响。方法：豚鼠７只，行耳蜗开窗术后静脉注射Ｌ－精氨酸，利用微循环数字图像测量系统录像，观察耳蜗微血管自律运动的频率特性。结果：在正常状态下，及鼠耳蜗微动脉存在运动幅度较小的自律运动，应用Ｌ－精氨酸后平均动脉压、血压、心率与用药前相比差异无显著性（Ｐ〉０．０５），血流量、血管收缩指民用药前相比差异有显著性（Ｐ〈０．     

耳后进路大鼠耳蜗中阶侧壁显微注射携带EGFP慢病毒的实验研究

目的 探讨经大鼠耳后进路耳蜗中阶侧壁导入携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)慢病毒的实验可行性,为后续携带目的 基因慢病毒治疗大鼠感音神经性聋的实验打下基础.方法 大鼠经耳后进路,耳蜗中阶侧壁开孔,显微注射携带EGFP慢病毒液或人工内淋巴液.术后3周,处死动物取耳蜗,行耳蜗冰冻切片,荧光显微镜下观察携带EGFP慢病毒的表达情况.术前和术后3周动物处死前,行听性脑干反应(ABR)检测其听功能改变.结果 术中、术后动物一般情况好.EGFP可见在耳蜗中阶血管纹边缘细胞、Corti器、螺旋神经和螺旋神经节细胞内表达.术后实验组大鼠手术耳ABR阈值提高(55.8±4.9)dB SPL.结论 大鼠经耳后进路,耳蜗中阶侧壁开窗,可将慢病毒携带的EGFP基因导入,并在耳蜗中阶Corti器表达.     

内皮依赖性舒张因子对豚鼠耳蜗微血管自律运动的影响

目的探讨豚鼠耳蜗微血管运动的基本特征及内皮依赖性舒张因子对豚鼠耳蜗微血管自律运动的影响。方法豚鼠7只,行耳蜗开窗术后静脉注射L-精氨酸,利用微循环数字图像测量系统录像,观察耳蜗微血管自律运动的频率特性。结果在正常状态下,豚鼠耳蜗微动脉存在运动幅度较小的自律运动,应用L-精氨酸后平均动脉压、血压、心率与用药前相比差异无显著性(P＞0.05),血流量、血管收缩指数与用药前相比差异有显著性(P＜0.05)。结论内皮依赖性舒张因子能显著增加豚鼠耳蜗微动脉自律运动的频率及振幅,使豚鼠耳蜗血流量增加,增强豚鼠耳蜗微循环的功能。     

噪声暴露对豚鼠耳蜗c-fos基因表达的影响

目的:观察噪声暴露后豚鼠耳蜗c-fos基因表达的变化.方法:选用健康雄性白色豚鼠32只,随机分为4组,1组为正常对照组,另3组为实验组.实验组在120 dB spL的4kHz窄带噪声中暴露4 h,分别测试噪声暴露后2,48,168 h及对照组豚鼠听性脑干反应(ABR).用免疫组织化学染色分析c-fos 基因在耳蜗的表达情况,用计算机图像分析系统测量耳蜗c-fos蛋白的平均吸光度值.结果:噪声暴露后豚鼠ABR阈值及耳蜗中c-fbs蛋白的平均吸光度值较正常组均增大;随着时间的延长ABR阈值及c-fos蛋白的平均吸光度值均逐渐恢复,168 h组的ABR阈值及c-fos蛋白的平均吸光度值均低于2 h组和48 h组.结论:噪声暴露后耳蜗c-fos基因表达增高,可能与噪声暴露后耳蜗毛细胞、螺旋神经节等结构的损伤修复有关.     

侧脑室穿刺对豚鼠听觉脑干诱发电位及内耳病理形态的影响

目的：观察侧脑室穿刺对豚鼠听觉脑干诱发电位（ABR）及内耳病理形态的影响。方法：健康成年豚鼠随机分为手术对照组（只暴露硬脑膜）、侧脑室穿刺Ⅰ组（暴露硬脑膜,右侧脑室穿刺,收集流出的脑脊液约0．1ml）、穿刺Ⅱ组（将穿刺流出的脑脊液即刻缓慢注入侧脑室）、穿刺Ⅲ组（向侧脑室中缓慢注入0．1ml生理盐水）,每组10只动物。分别于术前、术后1h、24h行ABR测试,记录各组豚鼠双耳听力阈值及70dB时各波潜伏期和Ⅰ～Ⅲ波间期,取耳蜗组织做病理检查。以不施加任何处理因素的6只豚鼠为正常对照。结果：术前各组豚鼠ABR各波潜伏期、Ⅰ～Ⅲ波间期及阈值差异均无统计学意义（P〉0．05）;术后1h,侧脑室穿刺Ⅰ组ABR各波潜伏期、Ⅰ～Ⅲ波间期较术前延长,阈值升高,术后24h各指标恢复正常;其余各组动物上述各指标术前、术后1h、24h差异均无统计学意义（P〉0．05）。手术对照组动物术后1h和24h耳蜗病理切片未见异常。侧脑室穿刺组动物术后1h时,耳蜗底转鼓阶出现红细胞沉积现象;24h后各阶和前庭阶中均可有红细胞出现。结论：一定量脑脊液丧失会引起豚鼠短暂、可逆性听力下降,而脑脊液体积或压力适量增加对豚鼠ABR无明显影响。侧脑室穿刺后,脑脊液中红细胞可经耳蜗导管到达外淋巴,并随外淋巴纵行流动广泛分布到各转鼓阶和前庭阶。     

γ—射线对动物耳蜗及前庭损伤的实验研究

目的：为探讨耳蜗及前庭放射损伤的始发部位和可能机理。方法：给予１６只豚鼠耳区一次５０Ｇｙ的＾６０Ｃｏγ－射线照射，采用耳蜗动作电位（ＡＰ）、眼震电流描记术和电镜技术进行研究。结果：辐射后豚鼠ＡＰ反应阈上升呈渐进性，前庭各功能试验结果表明，辐射后豚鼠眼震次数和持续时间呈进行性减少或缩短；电镜检查发现耳蜗和前庭毛细胞纤毛倒伏或缺失，其线粒体和内质网明显受损；神经末稍明显受损；细胞损伤程度；耳蜗外毛细胞     

豚鼠脑震荡后2～4周听功能与耳蜗扫描电镜的改变

目的 观察脑震荡后2～4周听功能及耳蜗毛细胞的病理改变.方法 以豚鼠为研究对象,制成脑震荡模型.20只健康豚鼠随机分为4组,正常对照组,脑震荡后即刻组、2周组、4周组.应用听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)和畸变产物耳声发射(distortion products otoacoustic emissions,DPOAE)观察脑震荡后听功能变化;应用扫描电镜观察耳蜗毛细胞的病理改变.结果 ABR Ⅰ、Ⅴ波潜伏期和Ⅱ～Ⅲ、Ⅱ～Ⅴ波间期均有变化;DPOAE于打击后在0.7、1.0 kHz频率其幅值有明显变化(P<0.05);扫描电镜下见耳蜗毛细胞的纤毛有排列紊乱和倒伏现象.结论 豚鼠脑震荡后2～4周听功能和耳蜗毛细胞均存在一定程度的病理改变.     

噪声致感音神经性聋豚鼠模型听觉电生理及内耳形态学的改变

目的探讨噪声致感音神经性聋豚鼠模型听觉电生理及内耳形态学的改变。方法 2014年1月—2015年1月承德医学院选取豚鼠24只按随机数字表法分为对照组和实验组,每组12只。实验组豚鼠给予白噪声暴露1周,暴露声压级(A计权)为110 dB,每日暴露1次,每次1.5 h,连续暴露1周;对照组豚鼠安静环境中饲养,未给予噪声暴露。分别测试噪声暴露前1天,噪声暴露后1、2及4周听性脑干反应(ABR)阈值及80 dB nHL下Ⅰ波潜伏期,并通过扫描电镜及光镜观察噪声暴露后4周豚鼠耳蜗毛细胞的形态变化。结果与对照组比较,实验组在噪声暴露后1、2、4周体质量下降(P<0.01),且ABR阈值均不同程度上升,Ⅰ波潜伏期也逐渐延长,差异具有统计学意义(P均<0.01)。扫描电镜显示,对照组豚鼠耳蜗内、外毛细胞形态正常,排列整齐,界限清楚;实验组豚鼠耳蜗内、外毛细胞均出现紊乱、融合及缺失。光镜显示:对照组耳蜗外毛细胞未见明显缺失,实验组耳蜗外毛细胞数有显著缺失,2组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论噪声致感音神经性聋后豚鼠听觉系统受到损害,毛细胞出现缺失、坏死,考虑永久性阈移(PTS)的产生可能与耳蜗外毛细胞异常及缺失有关。     

CHOP/Gadd153在强噪声诱导下豚鼠耳蜗细胞凋亡中的表达和作用

目的:探讨强噪声对豚鼠耳蜗细胞死亡的机制及CHOP/Gadd153在强噪声诱导耳蜗细胞凋亡中的作用.方法:选用健康雄性白色豚鼠32只,将实验组豚鼠暴露在4 kHz窄带噪声120 dB SPL噪声环境中4 h,噪声刺激停止后1,4,14 d组(实验组)及对照组(每组各8只)在处死前测听性脑干反应(ABR).取每组4只豚鼠...     

微泵耳蜗灌注碱性成纤维生长因子对庆大霉素致聋豚鼠的作用

目的 :应用微量渗透泵 (MOP)向豚鼠耳蜗灌注碱性成纤维生长因子 (bFGF) ,观察其对庆大霉素中毒所致耳聋的保护作用。方法 :10只豚鼠分成庆大霉素致耳聋组及正常组 ,于 2组豚鼠右耳耳蜗植入MOP灌注bFGF ,分别于灌注前 ,灌注后 1周、2周测ABR阈值 ,扫描电镜观察耳蜗组织形态。结果 :耳聋组在灌注bFGF后 1周、2周ABR阈值较灌注前降低 (P <0 .0 5 ) ,耳蜗毛细胞形态得以恢复 ;正常组ABR阈值及形态均无明显改变。结论 :MOP持续恒速耳蜗灌注bFGF对耳蜗中毒的毛细胞有修复作用 ,对正常耳蜗功能和形态无影响     

脑干诱发电位测听在豚鼠耳实验性药物中毒中的意义

本文对豚鼠耳卡那霉素中毒后记录的脑干诱发电位和耳蜗电位以及全耳蜗铺片观察结果作了综合分析。结果如下:①正常豚鼠(38耳)中,脑干诱发电位的阈值和潜伏期的个体差异很小。另10耳装电极后一个月内,三次测得的阈值和潜伏期无明显差别。②耳卡那霉素中毒后,脑干诱发电位(Ⅳ波)的阈值与耳蜗电位(CM. AP)的阈值之间呈线性关系。③脑干诱发电位与耳蜗组织学观察结果较为符合。结论认为在豚鼠耳药物中毒慢性实验中,脑干诱发电位是观察听力变化的一种非常可靠的客观方法。