TPGS修饰的地榆皂苷I长循环脂质体的制备及质量评价

目的 制备聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯（D-α-tocopherol polyethylene glycol 1000 succinate,TPGS）修饰的地榆皂苷I长循环脂质体,并对其进行质量评价。方法 采用薄膜分散法制备TPGS包衣脂质体,在单因素实验基础上,通过Box-Behnken响应面分析法对处方进行优化,采用超滤离心法测定药物包封率,透射电镜（TEM）观察脂质体微观形态,激光粒度仪测定脂质体的粒径、多分散性和Zeta电位,并对其稳定性和体外释放情况进行考察。结果 所制得的TPGS包衣脂质体微观形态呈球形或类球形双层结构、外观带淡蓝色乳光,粒径为（95.79±0.81）nm,多分散系数（PDI）为0.048±0.007,Zeta电位为（-38.60±0.97）mV,包封率为79.89%,载药量为10.48%。体外释放研究表明,与游离地榆皂苷I溶液相比,TPGS包衣脂质体具有明显的缓释效果。结论 通过优化后的处方和制备工艺,制备了外观均一稳定、包封率较高的TPGS修饰的地榆皂苷I长循环脂质体,可用于进一步的研究。     

N-三甲基壳聚糖包衣多柔比星脂质体的体外血管内皮细胞靶向性研究

 目的 以脐静脉内皮细胞（HUVECs）为模型,考察其对N-三甲基壳聚糖（TMC）包衣的盐酸多柔比星脂质体的摄取情况, 以评价TMC包衣盐酸多柔比星脂质体的体外血管内皮细胞靶向性。方法 采用pH梯度法制备盐酸多柔比星脂质体,以不同取代度的TMC进行包衣,用DAPI定位细胞核,采用激光扫描共聚焦荧光显微镜观察不同TMC包衣盐酸多柔比星脂质体在HUVECs胞浆及胞核的转运及摄取情况。结果 盐酸多柔比星脂质体性质稳定,包封率均在80%以上,粒径在100～200 nm, 随着TMC季铵化程度的增大,TMC包衣盐酸多柔比星脂质体的Zeta电位显著增大(P<0.05),同时HUVECs对其摄取能力增强,多柔比星能较快释放到胞浆并转运至胞核。结论 TMC包衣盐酸多柔比星脂质体具有较强的体外内皮细胞靶向作用,且与TMC的季铵化程度有关,为进一步研究其体内靶向作用奠定了基础。     

TPGS修饰的地榆皂苷Ⅰ长循环脂质体的制备及质量评价

目的制备聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(D-α-tocopherol polyethylene glycol 1000 succinate,TPGS)修饰的地榆皂苷Ⅰ长循环脂质体,并对其进行质量评价。方法采用薄膜分散法制备TPGS包衣脂质体,在单因素实验基础上,通过Box-Behnken响应面分析法对处方进行优化,采用超滤离心法测定药物包封率,透射电镜(TEM)观察脂质体微观形态,激光粒度仪测定脂质体的粒径、多分散性和Zeta电位,并对其稳定性和体外释放情况进行考察。结果所制得的TPGS包衣脂质体微观形态呈球形或类球形双层结构、外观带淡蓝色乳光,粒径为(95.79±0.81)nm,多分散系数(PDI)为0.048±0.007,Zeta电位为(-38.60±0.97)mV,包封率为79.89%,载药量为10.48%。体外释放研究表明,与游离地榆皂苷Ⅰ溶液相比,TPGS包衣脂质体具有明显的缓释效果。结论通过优化后的处方和制备工艺,制备了外观均一稳定、包封率较高的TPGS修饰的地榆皂苷Ⅰ长循环脂质体,可用于进一步的研究。     

曲马多PEG2000修饰多囊泡脂质体的制备及形态学观察

 目的 制备包封率高和缓释作用好的曲马多PEG2000修饰多囊泡脂质体,并与逆相蒸发法制备的曲马多普通脂质体比较其体外释药性能。方法 用复乳法制备曲马多PEG2000修饰多囊泡脂质体;L₉(34 )正交实验设计进行处方筛选和优化,测定包封率和粒径,以pH 6.8 PBS为释放介质考察体外释放特性。结果 未修饰和PEG2000修饰的多囊泡脂质体平均粒径分别为22.5和32.2 μm;PEG2000修饰和未经过PEG2000修饰的MVLs包封率分别为（85.1±11.2）%和（80.7±9.4）%;2种脂质体体外释放符合一级释药规律,半衰期t1/2分别为5.8和19.9 h,增加了3.4倍。结论 PEG2000修饰多囊泡脂质体包封率高,并具有良好的缓释作用。     

羟基喜树碱pH敏感阳离子纳米脂质体的制备

 目的 以羟基喜树碱作为模型药物研究pH敏感阳离子纳米脂质体用于包载抗癌药物的制备工艺。方法 采用薄膜分散法制备羟基喜树碱阳离子脂质体;用羧甲基壳聚糖物理修饰阳离子脂质体;用葡聚糖凝胶柱色谱法分离游离药物;用紫外分光光度法测定包封率;用单一因素考察法优选处方;经高压乳匀得到纳米脂质体(粒径小于100 nm);用激光粒度分析仪测定Zeta电位、粒径大小。结果 最佳处方制备的药物平均包封率为(78.5±0.9)％(n=3);包衣纳米脂质体的Zeta电位为-31.3 mV,平均粒径为96 nm。结论 使用本方法制备pH敏感阳离子纳米脂质体工艺简单,有望获得高靶向性的抗癌药物传递系统。     

肺靶向羟基喜树碱脂质体的制备及体外释药性质研究

 目的研究肺靶向羟基喜树碱阳离子脂质体的制备方法并考察其体外释药性质。方法采用薄膜-冻融法制备羟基喜树碱脂质体;用D-甘露糖修饰脂质体并添加适量十八胺调节脂质体表面电荷;用葡聚糖凝胶柱-高效液相色谱法测定包封率;用正交实验优选处方;用透析法考察药物体外释放性质。结果制得的脂质体平均粒径为2.286μm,表面电荷为+21.5 mV,包封率大于65%,稳定性好。药物体外释药符合Higuchi方程。结论采用薄膜-冻融法,用D-甘露糖修饰并添加十八胺可制得具有较高包封率及稳定性的羟基喜树碱脂质体,有助于提高羟基喜树碱的肺靶向性。     

两种掩味剂对苦参水煎液的掩味作用考察

目的：优选多烯紫杉醇长循环脂质体（DPL）的处方与制备工艺并考察其体外释药性能。方法：以蛋黄卵磷脂（EPC）、胆固醇（CH）和聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺（PEG 2000-DSPE）为膜材,采用薄膜分散-高压均质法制备DPL。通过单因素试验确定均质压力和均质循环次数,正交试验筛选处方工艺;利用透析法测定脂质体包封率,透射电镜观察脂质体形态,动态光散射粒度分析仪测定脂质体粒径分布与Zeta电位,考察DPL的体外释放规律。结果：最佳处方为药物-类脂（1：5）,EPC-CH（4：1）,PEG 2000-DSPE加入量4%;高压均质条件为50 MPa,循环数3次;DPL包封率（97.44±1.33）%,平均粒径（162.17±2.63）nm,平均Zeta电位（-14.54±1.82）mV;DPL在48 h内仅释放65%,体外药物释放符合Weibull方程。结论：采用PEG 2000-DSPE作为长循环材料可增大脂质体的粒径,DPL具有一定缓释作用。     

乙二醇壳聚糖-胆固醇接枝物载多柔比星自聚集纳米粒的制备及其大鼠体内药动学研究

 目的 制备乙二醇壳聚糖-胆固醇接枝物（CHGC）载多柔比星（DOX）自聚集纳米粒,并考察其在大鼠体内的药动学行为。方法 采用透析法制备乙二醇壳聚糖-胆固醇接枝物载多柔比星纳米粒（DCN）;应用动态光散射粒度仪和原子力显微镜测定载药纳米粒的Zeta电位、粒径与形态,考察DCN的稳定性;以pH（5.5,6.5,7.4）磷酸盐缓冲溶液（PBS）作为释放介质,考察DCN的体外释放行为;采用HPLC测定多柔比星在大鼠血浆中的药物浓度。结果 随着投药量的增加,DCN的载药量、Zeta电位和粒径增大;粒子形态呈球形;体外释放实验结果表明,释放介质的pH值越低,药物释放越快,且释放速率随着纳米粒载药量的增大而降低;大鼠体内药动学实验结果表明,DCN-10组的AUC_(0-∞)是游离DOX组的5.84倍（P<0.01）;DCN-10组的MRT_0-∞是DOX组的21.90倍（P<0.01）。结论 CHGC作为高分子药物载体材料,载多柔比星纳米粒的体外释放行为具有缓释和pH依赖特征;DCN能够在血液中长时间滞留,明显提高DOX 的生物利用度,结果表明,以CHGC纳米粒作为抗肿瘤药物载体具有较好的应用前景。     

TPGS修饰青蒿琥酯脂质体的制备及其体外抗肿瘤活性

目的制备聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(TPGS)修饰青蒿琥酯脂质体,并考察其体外抗肿瘤活性。方法薄膜分散法制备脂质体,透射电镜和粒径仪进行表征,超滤离心法测定包封率。MTT法评价其对人肝癌HepG2细胞的毒活性。结果所得脂质体平均粒径126.7 nm,PDI 0.182,Zeta电位-10.1 mV,包封率78.8%,载药量18.38%。其对HepG2细胞具有明显抑制作用,IC_(50)为0.034μmol/mL。结论与TPGS未修饰青蒿琥酯脂质体相比,该方法制备的TPGS修饰青蒿琥酯脂质体粒径更小,稳定性更好,包封率更高,而且具有更强的体外抗肿瘤活性。     

淫羊藿苷元脂质体的制备及其对大鼠骨髓基质细胞增殖分化影响的研究

 目的 研制淫羊藿苷元（icaritin,IT）脂质体,并对其进行理化性质考察和初步药效学评价。方法 采用改进的乙醇注入法制备IT脂质体,考察其形态、粒径及分布、Zeta电位等理化性质;分别采用葡聚糖凝胶柱色谱法、微柱离心法及离心超滤法分离游离药物和脂质体,HPLC测定IT的包封率;以反相透析法考察IT脂质体的体外释放;以包封率为指标,采用正交设计优化制备工艺;采用大鼠骨髓基质细胞模型,初步评价了IT脂质体体外抗骨质疏松作用。结果 优化条件下制备的IT脂质体均匀圆整,平均粒径（71.6±6.9）nm,Zeta电位为-(77.3±5.1) mV,采用微柱离心法测得包封率为(91.49±1.15)% ,载药量为(9.15±0.22)% ,IT脂质体在体外具有一定的缓释性,72 h累积释放量大于90%;初步药效学实验表明,IT脂质体能促进骨髓基质细胞向成骨细胞分化,增强成骨细胞活性,抑制骨髓基质细胞向脂肪细胞分化。结论 本法制备的IT脂质体粒径小、包封率高,体外细胞实验显示了较好的抗骨质疏松活性,制备方法简单可行,IT脂质体有望开发为抗骨质疏松临床用药剂型。
     

粉防己碱阿霉素脂质体的制备与体外释放度的研究

目的 以阿霉素和粉防己碱为模型药物制备脂质体并进行工艺研究,同时对该脂质体进行体外释放度的研究.方法 采用3种不同脂质体制备方法,并以包封率为指标采用正交设计法进行处方筛选和工艺优化.结果 确定了硫酸铵梯度法结合pH梯度法制备脂质体的最佳制备处方为:药脂比为1:20,磷脂与胆固醇质量的比例为3:1、外水相pH值为7.6,孵育温度50℃、硫酸铵浓度为250 mmol/L.释放度试验显示脂质体中阿霉素和粉防己碱分别在24 h和16 h内完全释放.结论 制备的粉防己碱阿霉素脂质体包封率及外观良好,具有一定的缓释效果.     

阿霉素隐形脂质体的研制及其在小鼠体内的组织分布

 目的:研制出包封率高,逃避体内网状内皮系统捕获的“隐形"(stealth)脂质体并考察其在生物体内的组织分布?方法:以化学梯度法包封脂质体,用两亲性聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)对脂质体膜进行修饰以制备隐形脂质体;用HPLC-UV法测定给药后小鼠体内组织中的药物浓度?结果:制备的阿霉素隐形脂质体包封率达97%以上;与普通脂质体及游离的阿霉素相对照,隐形脂质体在血液中循环时间显著地延长,血药浓度-时间曲线下面积(AUC)显著增加,三种制剂在小鼠的心、肝、脾、肺、肾组织中的分布特性有不同程度的改变?结论:这种化学梯度法可以较大地提高包封率?隐形脂质体血液AUC增加,可延长药物在体内循环时间;心脏组织分布浓度低,可降低心脏毒性?     

阿霉素隐形脂质体与普通脂质体的抗肿瘤活性比较

 目的 比较阿霉素隐形脂质体与普通脂质体的抗肿瘤活性。方法 将聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺（PEG-DSPE）同磷脂酰胆碱和胆固醇材料加在一起,用硫酸铵梯度法制备阿霉素隐形脂质体,参照同法制备阿霉素普通脂质体（但脂膜中不含PEG-DSPE）;采用动物移植性肿瘤实验法,用H₂₂小鼠肝癌细胞接种于小鼠右侧腋皮下形成实体瘤,考察阿霉素隐形脂质体和普通脂质体给药后对实体瘤的瘤重抑制率。结果 按 5 mg·kg^-1剂量治疗,第2天给药和第7天给药治疗方案,阿霉素隐形脂质体给药组的瘤重抑制率均显著高于普通脂质体给药组的瘤重抑制率;按 10 mg·kg^-1剂量治疗,隐形脂质体给药组的瘤重抑制率比普通脂质体给药组的瘤重抑制率稍高。结论 同普通脂质体给药组相比,阿霉素隐形脂质体给药组的抗肿瘤活性显著地提高。     

�������-��ζ�����ع���֬����˷�������ҩ��ҩ���о�

??OBJECTIVE To investigate the synergetic effect of schisandrin B and liposomes on overcoming multidrug resistance(MDR). METHODS Co-delivery of doxorubicin and schisandrin B by liposome(DS-L) were prepared, and doxorubicin solution(F-DOX), schisandrin B and doxorubicin mixture(Sch B+DOX), doxorubicin liposomes(D-L), doxorubicin liposomes and schisandrin B mixture(D-L+Sch B), verapamil and doxorubicin mixture(Ver+DOX) were also prepared as the control. The MTT test were measured, and the amount of doxorubicin in the K562/DOX cells at different time were determined, and time course of uptake and efflux were drawn. RESULTS The MTT test shows that the resistance factor(RF) of group DS-L were 1.68, 14.52 and 1.42 times of group Sch B+DOX, group D-L and group D-L+Sch B respectively. The uptake test shows that amount of doxorubicin of K562/DOX cells in group DS-L was 1.30 and 1.21 times of that in group D-L and group Sch B+DOX respectively. And the efflux test shows DS-L could delay doxorubicin efflux from K562/DOX cells. CONCLUSION The co-delivery of chemotherapeutics and P-gp inhibitors schisandrin B by liposome is a promising approach to overcome MDR. And there is a synergistic effect between liposome and schisandrin B to overcome MDR.     

自组装法制备新型结构磁性脂质体

 目的 设计新型结构磁性脂质体,并通过自组装法制备。方法 采用共沉淀法制备Fe₃O₄磁性纳米粒子,采用薄膜分散法制备多柔比星脂质体,测定Fe₃O₄粒子和多柔比星脂质体的Zeta电位,根据电荷性质选择适当的聚电解质,依次将聚电解质和Fe₃O₄粒子组装到多柔比星脂质体表面,得到磁性脂质体,并采用透射电镜（TEM）观察其形貌。 结果 Fe₃O₄粒子和多柔比星脂质体的Zeta电位分别为-22.0、-22.6 mV,自组装过程中选择阳离子聚电解质PDADMAC作为中间层,磁性脂质体的TEM照片显示,其具有较规则的球形轮廓,表面均匀吸附有大量的Fe₃O₄磁性粒子使得脂质体表面略显粗糙,证实了新型结构磁性脂质体的成功构建。 结论 采用静电自组装法可以制备新型结构磁性脂质体。
     

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??OBJECTIVE To investigate the effect of TiO₂ nanoparticles on overcoming cancer multidrug resistance(MDR). METHODS Doxorubicin-TiO₂ nanoparticles(DTN) were prepared, the K562/DOX cells were chosen as the model cells. And doxorubicin solution(F-DOX) and doxorubicin liposomes(DOX-L) were also prepared as the control. The MTT assay were measured, and the amount of doxorubicin in the K562/DOX cells at different time were determined by HPLC. The P-gp expression were detected by flow cytometry.RESULTS The MTT assay shows that IC₅₀ of group DTN were lower than that of group F-DOX. The uptake test shows that amount of doxorubicin in K562/DOX cells of group DTN was 1.23 times of group DOX-L when in 4 h, and the efflux test shows that amount of doxorubicin in K562/DOX cells was 1.18 times of group DOX-L. The flow cytometry result revealed that the effect of TiO₂ nanoparticles on overcoming MDR maybe through down-regulating the expression of P-gp in K562/DOX cells.CONCLUSION The TiO₂ nanoparticles are a new inorganic materials-based nanoparticles which promising approach to overcome MDR.     

氢化与非氢化卵磷脂对阿霉素脂质体药动学参数的影响

 目的 研究卵磷脂(EPC)和氢化卵磷脂(HEPC)对阿霉素长循环脂质体(Dox-SSL)药动学参数的影响。方法 10只Wistar大鼠平均分成二组,分别尾静脉注射Dox·EPC-SSL和Dox-HEPC-SSL脂质体,用高效液相色谱法测定血中Dox浓度。用3P87程序拟合计算药动学参数。结果 两种制剂均符合二室模型,权重为1/C²,方差分析结果表明,二者的α与 V c无显著性差异(P＞0.05),而β,CL_s及 AUC 有显著性差异(P＜0.01),Dox-HEPC-SSL的β,CL_s较Dox-EPC-SSL小,而 AUC 较Dox-EPC-SSL大。结论 作为药物载体,HEPC-SSL较EPC-SSL优越。     

Influence of palm oil on doxorubicin induced cytotoxicity in normal and tumor cell cultures

The vitamin E of palm oil, unlike most other vegetal fats, consists largely of tocotrienols (TT), products previously reported as having antioxidant and tumor‐inhibitory properties. A tocotrienols containing palm oil, in the form of liposomes entrapping dosages of 0.5–0.05 µgTT/mL, was studied in combined treatments with doxorubicin (30 min before drug administration). The IC₅₀ values of doxorubicin, at 24 h, showed that its cytotoxic effects were decreased by palm oil, in a dose effect relationship (p < 0.01, ANOVA), in both normal (Hfl‐1, Huvec) and tumor (HepG2, Mls) cells. These results demonstrated an unselective protective activity of tocotrienols, in vitro, on some normal and tumor cultured cells treated with doxorubicin. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

酶促合成3种半乳糖-胆固醇配体及其与肝靶向性的构效关系研究

目的酶促法构建3种不同类型的半乳糖-胆固醇配体修饰的阿霉素(doxorubicin,DOX)脂质体,研究其在小鼠体内的药动学及组织分布特征。方法利用脂肪酶在非水相中合成了3种不同结构的半乳糖-胆固醇配体:CHS-C8-Gal NAc、CHS-C8-GAL、CHS-C8-LA;利用MS、NMR鉴定产物结构;采用薄膜分散-梯度载药法制备DOX脂质体并对其理化性质进行表征;以小鼠为实验对象,采用尾iv给药,通过比较3种配体修饰的DOX脂质体在小鼠体内的药动学与组织分布特征来阐明配体中半乳糖基的结构与去唾液酸糖蛋白受体之间的构效关系。结果产物经MS、NMR鉴定均为目标产物,产率均90%;采用薄膜分散-梯度载药法制备的DOX脂质体粒径90 nm,PDI0.1,包封率99%,24 h渗漏率5%,Zeta电位接近于0;3种配体分子对肝脏亲和力大小依次为CHS-C8-Gal NAcCHS-C8-LACHS-C8-Gal;肝脏对CHS-C8-Gal NAc修饰的脂质体的摄取几乎完全被预注射的asialofetuin所抑制(P0.01),而对CHS-C8-Gal及CHS-C8-LA修饰的脂质体无显著的抑制效果(P0.05)。结论含有N-乙酰半乳糖胺基(N-acetylgalactosamine,Gal NAc)为末端的配体分子能被去唾液酸糖蛋白受体高效识别,而含有D-半乳糖基(D-galactose,Gal)或乳糖醇基(lactitol,LA)为末端的配体分子易被肝枯否细胞上的半乳糖粒子受体所竞争性结合。