儿童再生障碍性贫血缓解期前后骨髓显像半定量分析

目的 探讨再生障碍性贫血缓解期前后<'99m>T<,c>硫胶体骨髓显像与半定量分析的临床应用价值.方法 选择骨髓活检穿刺证实的 20 例再生障碍性贫血病儿,于治疗缓解期前后分别行<'99m>T<,c>一硫胶体骨髓显像,并分别选取颅骨、胸骨、颈椎、胸椎、腰椎、骨盆、骶髂关节、双侧肱骨上段、双侧股骨上段共 13 个部位显像...     

贫血患者瘦素水平的测定

目的　通过对贫血患者体内瘦素水平的测定 ,了解在贫血状态下是否存在瘦素分泌的异常。方法　分别抽取正常人、再生障碍性贫血 (再障 )、营养不良性贫血、溶血性贫血患者骨髓液及外周血 ,用放射免疫分析法分别测定其瘦素含量。结果　营养不良性贫血、溶血性贫血患者骨髓瘦素含量和外周血瘦素含量比 (BM/PB)与正常人接近 (P >0 0 5 ) ,而再障患者两者的比值比正常人明显升高 (P <0 0 1 ) ,而贫血程度与瘦素含量无明显相关性 (P >0 0 5 ) ,但骨髓与外周血瘦素含量则高度相关 (P <0 0 1 )。结论　再障患者瘦素水平明显高于正常人及其他类型贫血患者 ,可能与再障骨髓脂肪细胞明显增多、脂肪细胞分泌瘦素明显增多有关。瘦素受体的不完整及造血干 /祖细胞对干细胞因子 (SCF)的反应性降低、破坏了瘦素与SCF协同刺激原始造血祖细胞增殖的作用 ,可能是造成再障瘦素水平高 ,但造血干 /祖细胞数量减少的一个原因     

再生障碍性贫血骨髓病理分型研究

目的:研究再生障碍性贫血骨髓病理分型与临床诊疗间的关系。方法:用不脱钙的塑料包埋法,制成2μm厚的骨髓病理切片,用网形测微器计点法测定切片内造血主质与脂肪组织所占容量的百分比率,确定骨髓增生度;以骨髓增生度、局限性造血细胞灶或岛、巨核细胞数等为再生障碍性贫血的骨髓病理分型依据。结果:在380例/次再生障碍性贫血骨髓病理检查患者中,依据此方法分型,其中:再生不良型83例(21.84%),再生障碍型II196例(51.58%),再生障碍型I101例(26.58%);提出再生障碍性贫血骨髓病理与低增生骨髓象、低增生骨髓增生异常综合征的鉴别特征。结论:对再生障碍性贫血患者,用不脱钙的塑料包埋法进行骨髓活检以及骨髓病理分型,可有效的指导患者的临床诊断和治疗。     

再生障碍性贫血患者血液及骨髓中淋巴细胞亚群测定

我们采用 OKT 系列抗人淋巴细胞单克隆抗体,通过间接免疫荧光法,观察了30例再生障碍性贫血(以下简称再障)患者外周血及骨髓单个核细胞中淋巴细胞亚群的分布特点。在30例患者中25例外周血 OKT_4细胞减少,OKT_8细胞增加,OKT_4/OKT_6减低,其中21例 OKT_4/OKT_8倒置。25例患者骨髓单个核细胞中 OKT_4/OKT_8低于正常对照组。结果表明,部分再障病人存在免疫异常,而且再障的发病机制是复杂的。测定再障患者骨髓中 OKT_4/OKT_8不如外周血意义大。     

应用单克隆抗体-免疫磁珠分离系统分离纯化再生障碍性贫血骨髓CD_(34)~+细胞

目的　分离、纯化再生障碍性贫血 (简称AA)患者骨髓CD3 4+ 细胞 ,探讨其发病机制。方法　对4 2例AA患者 ,以常规方法进行骨髓液采集和有核细胞分离 ,用单克隆抗体 免疫磁珠分离系统 (MACS)分离、纯化骨髓CD3 4+ 细胞 ,用碱性磷酸酶 抗碱性磷酸酶 (APAAP)法作CD3 4+ 细胞的纯度检测。结果　骨髓CD3 4+ 细胞纯度达 95 %～ 99% ,AA患者骨髓CD3 4+ 细胞多呈单个、散在分布 ,着色较淡 ;而对照组骨髓CD3 4+ 细胞多呈均匀或丛簇状分布 ,着色较深。结论　应用MACS分离AA骨髓CD3 4+ 细胞 ,特异性强、纯度高 ,是研究AA骨髓CD3 4+ 细胞功能、形态的最直接、客观、准确的方法     

环胞菌素A治疗再生障碍性贫血对骨髓细胞凋亡的影响

目的探讨环胞菌素A(CsA)治疗对再生障碍性贫血(再障)患者骨髓单个核细胞Fas(CD95)抗原表达及调亡的影响作用.方法应用流式细胞仪测定24例再障患者CsA治疗前后骨髓单个核细胞(MNC)Fas表达率及凋亡率,其中急性再障7例,慢性再障17例;同时以20例正常人作对照.结果应用CsA治疗再障3个月时的总有效率58.3%.再障患者Fas表达率及凋亡率均高于正常对照(P＜0.05);急性再障Fas表达率及凋亡率高于慢性再障,但差异无显著性(P＜0.05).用CsA治疗后,再障患者骨髓单个核细胞凋亡率明显低于治疗前(P＜0.05).结论CsA治疗可降低再障患者骨髓MNC的凋亡率,骨髓MNC的Fas表达率和凋亡率增高与再障发病有关.     

骨质颗粒分离培养间充质细胞的实验研究

目的:为探索间充质干细胞更广泛的来源。方法:选择了正常人骨髓,急性粒细胞性白血病缓解期患者骨髓、再生障碍性贫血患者骨髓、脐带血和骨质颗粒等5种标本来源。采用贴壁法和特殊的干细胞培养基/间充质干细胞刺激因子分离、纯化MSCs,观察比较不同来源MSCs的体外生长特性,流式细胞术检测培养细胞的CD105。结果:正常人骨髓、急性粒细胞性白血病缓解期患者骨髓和骨质颗粒标本均能培养出MSCs,从骨质颗粒得到的MSCs数量较多。脐带血和再生障碍性贫血患者骨髓标本没有培养出MSCs。培养的MSCs均一地表达CD105。结论:在体外培养人类正常骨髓和急性粒细胞性白血病缓解期的骨髓均可以得到MSCs,两种样本分离培养得到的MSCs在形态学、表面标志、增殖特性等方面没有显著差异。从人类骨质颗粒得到的MSCs的生长从数量上优于从骨髓中获得的MSCs。     

COLONY GROWTH AND GRANULOPOIETIC EFFECTS OF HUMAN BONE MARROW FIBR.OBL.AST COLONY-FORMING CELLS IN VITRO

Human bone marrow derived fibroblast colony- ;forming cells (F-CFU) and granulocytemacrophage colony-forming cells (GM-CFU) were simultaneously studied by liquid and semi-solid agar culture in 26 normal individuals and 33 hematological disorders iii 13 patients with aplastic anemia, 9 acute non lymphocytic leukemia, 6 acute Iymphocytic leukemia and 5 malignant lymphoma. After 2 weeks of liquid culture, the growth rates and morphological charac teristics of F-CFU from aplastic and leukemic mar rows did not differ markedly from the normal, except that patient groups show a wider range of colony number. The F-CFU incidence in patients with malignant lymphoma was lower than normal. Growth of GM-CFU from patients with aplastic anemia and Ieukemia was very poor. GM-CFU stimulation was not detected iii any supernatants of F-CFU cultures. Confluent mono layers of fibroblast cells grown from normal and aplastic marrow could directly stimulate the growth cf GM-CFU of normal marrow cells and little GM- CFU was observed in areas lacking fibroblast cells. Fibroblast monolayers derived from acute leukemic marrows were poor stimulators of GM-CFU, this abnormality in interactions between stromal cells and hematopoietic progenitors may be important in the pathogenesis and clinical manifestation of leukemia. This study suggests that bone marrow fibroblast cells may directly affect hematopoietic stem cell proliferation and differentiation and supports the hypothesis that marrow fibrosis observed in patients with leukemia is of non-ncoplastic origin and may be a reactive phenomenon. Analysis of the pathoge- nesis of aplastic patients with defective hematopoie tic microenvironments may be possible.     

AA病人血浆和骨髓瘦素及其受体表达与意义

目的探讨瘦素及其受体在再生障碍性贫血（AA）病人血浆和骨髓中的表达及其意义。方法应用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测38例AA病人（其中重型者8例、非重型者30例）及22例健康体检者血浆中瘦素及可溶性瘦素受体（sLR）的水平;应用PV-6000二步法检测32例AA病人（其中重型者14例、非重型者18例）及17例对照组骨髓组织中瘦素及其受体的表达。结果 AA病人血浆瘦素水平为（14.16±4.50）μg/L,显著高于对照组的（10.87±3.21）μg/L（t=3.008,P〈0.01）;AA病人血浆sLR水平为（16.85±4.89）μg/L,显著低于对照组的（20.67±6.18）μg（t=2.641,P〈0.05）。AA病人骨髓组织中瘦素表达水平为0.192±0.030,显著高于对照组的0.168±0.024（t=2.808,P〈0.01）;AA病人骨髓组织中瘦素受体表达水平为0.198±0.041,显著低于对照组的0.235±0.054（t=2.704,P〈0.05）。重型AA病人血浆及骨髓中瘦素水平高于非重型者,瘦素受体水平低于非重型者,但差异无显著性（P〉0.05）。结论 AA病人血浆及骨髓中瘦素水平升高,而受体水平下降;瘦素在AA的发生发展中有失利用现象存在。     

再生障碍性贫血患者骨髓CFU-GM及血清细胞毒试验18例临床分析

目的 :探讨再生障碍性贫血 (简称再障 )的体液免疫抑制发病机理。方法 :对 18例再障患者 (急性再障 6例、慢性再障 12例 )进行骨髓CFU GM培养及血清细胞毒试验。结果 :16例骨髓CFU GM培养集落数明显低于正常对照组(P <0 0 1) ,15例存在有造血干细胞缺陷、细胞和体液免疫异常及微环境异常 ,病人血清经 5 6℃ 30min水浴灭活前后对正常骨髓CFU GM的刺激作用明显不一 ,而且在同属于造血干细胞缺陷的病例中急性再障与慢性再障比较也有显著性差异。结论 :骨髓CFU GM及血清细胞毒试验在对再障体液免疫抑制发病机理研究中起有协同作用。     

再生障碍性贫血骨髓组织学观察

观察４７例再生障碍性贫血（ＡＡ）骨髓活检组织病理学改变的结果，显示出再障急慢二型的病理学特征。再障造血组织面积显著减少，被脂肪组织所代替，间质发生严重病变。ＡＡＡ组骨髓病变明显于ＣＡＡ组，ＡＡＡ组间质病变广泛而显著，支持该型骨髓微环境受损更严重的观点。提示活检切片不仅能正确估计造血主质与脂肪组织的病理改变，且能准确观察骨髓间质变化。     

骨髓腔内输注复方丹参注射液治疗再生障碍性贫血的临床研究

目的 :观察骨髓腔内输注复方丹参对再生障碍性贫血 50例的疗效 .方法 :采用骨髓腔内输注复方丹参液并中医辨证的方法治疗再生障碍性贫血 ,并对其作用机制进行了探讨。结果 :治愈 2 4例 ,缓解 8例 ,明显进步 1 3例 ,无效 5例 ,总有效率 90 %。结论 :复方丹参注射液骨髓腔内输注与中医辨证结合治疗再障 ,能提高临床疗效     

再生障碍性贫血患者对环胞菌素A治疗的反应与骨髓上清TNF- α,IFN-γ水平的关系

目的了解再生障碍性贫血(再障)患者骨髓上清TNF-α,IFN-γ的水平,探讨其与免疫抑制剂环胞菌素A(CsA)治疗反应的关系.方法采用酶联免疫(ELISA法)对24例再障患者及20名正常人骨髓上清TNF-α,IFN-γ进行检测,所有再障患者给予CsA治疗至少3个月.结果再障病人骨髓上清TNF-α,IFN-γ水平与正常对照组比较均有明显统计学差异(P＜0.05～0.01),TNF-α,IFN-γ水平高者对CsA治疗的反应好.结论再障患者骨髓上清TNF-α,IFN-γ水平较正常对照组均有不同程度的增高,对CsA治疗的反应可能与骨髓上清TNF-α,IFN-γ水平有关.     

再生障碍性贫血的免疫功能观察

本文对70例再生障碍性贫血（再障）患者的15项细胞和体液免疫指标进行了观察。结果，LCAV、MC％、OKT_3、OKT_4/OKT_5、ERFC、血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）显著低于正常对照组，BLC％、OKT_8、血清C_3、CH50、CIC显著高于对照组．OKT_4、LCBT与对照组无显著差异。对这些免疫指标的异常与再障及其分型的关系进行了探讨。     

低增生型难治性贫血与慢性再生障碍性贫血的实验室鉴别

对8例低增生型难治性贫血和12例慢性再生障碍性贫血进行了实验室回顾性分析.结果表明:在慢性再生障碍性贫血时骨髓淋巴细胞、浆细胞比值、骨髓小粒中非造血细胞、中性粒细胞碱性磷酸酶阳性率和积分、细胞外铁染色阳性程度均显著高于低增生型难治性贫血,而外周血幼红和幼粒细胞数及检出率、Pelger核异常率、骨髓红系比值、巨核细胞层数及小巨核发生率又显著低于低增生型难治性贫血.     

当归多糖干预再生障碍性贫血模型小鼠线粒体功能异常机制研究

目的:研究当归多糖(ASP)对再生障碍性贫血(AA)模型小鼠线粒体功能异常的作用机制。方法:AA小鼠随机分为对照组、再障组和治疗组,再障组与治疗组通过~(60)Coγ、腹腔注射环磷酰胺和氯霉素造模后,分别用生理盐水或ASP喂养2周。透射电子显微镜观察骨髓的线粒体超微结构。从骨髓细胞中分离出Lin~-Sca-1~+c-Kit~+(LSK)细胞,通过流式细胞仪检测线粒体膜电位(MMP),并进行活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、细胞色素氧化酶(COX)和单胺氧化酶(MAO)的相关检测。结果:与对照组比较,再障组和治疗组骨髓的单个核细胞、BFU-Es和CFU-Es、LSK细胞中的线粒体数量减少,MMP降低。应用ASP干预后,骨髓的单个核细胞、BFU-Es和CFU-Es等数值相比再障组显著增加。ASP可以纠正LSK线粒体数量下降的趋势,ASP纠正AA模型小鼠异常的MAO和COX水平,并通过降低ROS和MDA,纠正异常的膜电位而改善线粒体的功能(P0.05或P0.01)。结论:ASP可能通过上调线粒体膜电位、改善线粒体膜稳定性,纠正AA干细胞的过度凋亡。     

川芎嗪改善再生障碍性贫血骨髓微环境的研究

目的探讨川芎嗪对再生障碍性贫血（AA）骨髓微环境的影响。方法将78例AA患者随机分为两组,均应用司坦唑醇联合环孢素A作为基础治疗,一组加用川芎嗪注射液治疗,作为川芎嗪组,4周为一疗程,休息1周后再继续应用1疗程;另一组应用基础治疗作为基础治疗组。于治疗前、治疗后第4周及第9周定期测定血象、骨髓象、骨髓病理（微血管情况）,观察临床表现,进行成纤维细胞的培养并进行比较。结果川芎嗪组外周血网织红细胞、中性粒细胞、血小板、血红蛋白骨髓造血细胞比例均有明显升高,与基础治疗组相比有显著性差异（P〈0.05）;骨髓微血管的数量、造血组织容量（%）及成纤维细胞集落,较治疗前及基础治疗组有明显增多（P〈0.05）。结论川芎嗪对AA患者骨髓微环境具有改善作用。     

难治性贫血与慢性再生障碍性贫血临床特征的比较

目的 探讨难治性贫血与慢性再生障碍性贫血临床鉴别要点。方法 比较２４例骨髓异常增生综合征难治性贫血（ＭＤＳ－ＲＡ）与５９例慢性再生障碍性贫血（ＣＡＡ）的临床特点和实验室资料。结果 ＣＡＡ组出血及三系减少的发生率明显高于ＭＤＳ－ＲＡ组,网织红细胞相对值ＭＤＳ－ＲＡ组明显高于ＣＡＡ组;骨髓细胞学检查显示,ＣＡＡ组增生程度低下以及巨核细胞减少和消失的发生率明显高于ＭＤＳ０－ＲＡ组,而ＭＤＳ－ＲＡ组病态造     

补肾活血方药对慢性再生障碍性贫血患者骨髓细胞体外影响的实验研究

目的　研究补肾活血方药对慢性再生障碍性贫血 (CAA)患者骨髓细胞体外增殖的影响 ,探讨其治疗CAA的机制。方法　采用细胞培养 ,光镜下观察补肾活血中药作用于CAA患者骨髓细胞后的形态学 ;3 H TdR掺入和液体闪烁技术方法 ,检测补肾活血中药对CAA患者骨髓细胞的增殖变化。结果　加入补肾活血中药组 ,CAA患者骨髓细胞培养第 4 8小时见细胞丛明显增多 ,72h见大量集落形成 ;3 H TdR掺入法显示 ,补肾活血中药组骨髓细胞的增殖 ,以每孔 75g L最有效。在 5 0～ 10 0g L范围内 ,与对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ;2 5g L和 12 5g L组与对照组比较差异无显著性 (P <0 .0 5 )。结论　补肾活血方药在体外有促进CAA患者骨髓细胞增殖的作用 ,为补肾活血中药治疗CAA提供了实验与理论依据     

骨髓病理检查在贫血诊断中的价值

目的:通过对贫血患者的骨髓病理观察,探讨其病理改变在临床诊断中的价值.方法:用骨髓环钻法获取骨髓组织,采用常规包埋切片染色后,观察骨髓病理结构.结果:再障患者的骨髓病理为严重的骨髓脂肪变,急性白血病的骨髓病理为骨髓的正常结构消失,包括骨小梁的结构均被大量白血病细胞侵润替代.而溶血性贫血和缺铁性贫血骨髓病理为增生活跃,造血组织面积增多.结论:骨髓病理检查在贫血的诊断特别是再生障碍性贫血的诊断中具有重要意义.