蟾毒它灵通过线粒体途径诱导急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的实验研究

目的 研究蟾毒它灵对急性髓系白血病HL-60细胞的作用及其机制，为急性髓细胞白血病的治疗提供新的思路。 方法 用终浓度为0、40、80、160 μg/mL的蟾毒它灵作用于对数生长期的HL-60细胞24 h后，用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况，通过透射电子显微镜观察细胞内线粒体形态，蛋白免疫印迹法检测Bax、Bcl-2、Cleaved-Caspase-9基因表达情况，并用正常的外周血B淋巴细胞作为对照组观察该化合物对正常细胞的毒性作用。实验结果用SPSS 22.0统计学软件录入数据并进行检验，P＜0.05为差异有统计学意义。 结果 蟾毒它灵能够抑制HL-60细胞增殖并诱导其凋亡，且对正常细胞毒性作用相较于癌细胞小，差异有统计学意义(P＜0.05)；随着药物浓度增加，细胞核异形，出现核膜分离，异染色质明显增多，线粒体伴有水肿扩张，部分线粒体脊消失模糊、空泡化，而对照组线粒体形态较好；随着药物浓度增加，Bax/Bcl-2比例增加，Cleaved-Caspase-9基因表达逐渐增加，差异有统计学意义(均P<0.01)。 结论 本实验结果表明蟾毒它灵对急性髓系白血病HL-60细胞这种非实体肿瘤细胞也有抑制作用，并且对正常细胞影响较小，其作用机制主要是通过线粒体途径诱导肿瘤细胞凋亡。      

巢式PCR与ELISA筛查HCMV病原感染的比较研究

目的:评估巢氏-PCR和ELISA在巨细胞病毒(HCMV)感染筛查诊断中的价值。方法:以巢式PCR检测新生儿HCMV-DNA为标准,评估ELISA方法检测HCMV-IgG和IgM的诊断价值。结果:采用巢氏PCR方法,患病新生儿HC-MV-DNA检出率为63.900%。以巢式PCR为标准,ELISA-IgM法检测HCMV的灵敏度为3.030%,特异度为100.000%,阳性预测值为100.000%,阴性预测值为29.670%;ELISA-IgG法检测HCMV的灵敏度为36.620%,特异度为42.110%,阳性预测值为70.270%,阴性预测值为15.090%。结论:巢式PCR是筛检HCMV感染的灵敏方法,目前市场上ELISA试剂盒的灵敏度有待提高。     

别欧前胡内酯对HL-60细胞凋亡的影响

目的探讨别欧前胡内酯对人急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞凋亡的影响及可能的机制。方法对数生长期人急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞随机分为对照组和4、16、32、64、128mg/L别欧前胡内酯组。别欧前胡内酯作用24h,应用透射电子显微镜观察HL-60细胞形态学改变,MTT法检测别欧前胡内酯对HL-60细胞增殖的影响,根据细胞生长抑制率计算别欧前胡内酯对HL-60细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50),流式细胞仪检测HL-60细胞凋亡率及线粒体膜电位改变。结果别欧前胡内酯作用24h,对照组HL-60细胞表面光滑,形态正常,大小均匀;64、128mg/L别欧前胡内酯组HL-60细胞数目明显减少,且体积变小,呈凋亡形态改变;MTT检测结果显示,别欧前胡内酯对HL-60细胞增殖具有明显的抑制作用,IC50值为(75±13)mg/L;流式细胞仪检测结果显示,对照组HL-60细胞凋亡率为(11.6±5.2)%,4、16、32、64、128 mg/L别欧前胡内酯组HL-60细胞凋亡率分别为(17.2±6.1)%、(24.2±8.6)%、(36.1±4.5)%、(46.0±7.3)%和(69.9±10.2)%,随别欧前胡内酯浓度增加,HL-60细胞凋亡率逐渐增高,线粒体膜电位逐渐降低(P0.05)。结论别欧前胡内酯可明显促进人急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞凋亡,其机制可能与改变HL-60细胞线粒体膜电位有关。     

TLR7基因单核苷酸多态性与食管癌易感性的相关性研究

目的本研究旨在探讨toll样受体7基因(TLR7)3'端非编码序列microRNA-1265(miR-1265)结合位点单核苷酸多态性rs72552316与食管癌易感性的关系。方法采用单中心为基础的病例对照研究。在这项研究中,聚合酶链反应(PCR)和直接测序被用于204食管癌病例和200例健康对照TLR7基因分型。rs72552316影响miR-1265对TLR7蛋白表达的调控由免疫组化法检测。结果与携带野生型纯合子AA基因型比较,携带rs72552316的GG基因型个体患食管癌的风险增加(OR=2.180,95%CI=1.152-4.127,P=0.019)。此外,在食管癌组织中检测TLR7的表达,这表明TLR7蛋白水平可能与SNP rs72552316相关。结论 Toll样受体7基因3?端非编码序列miR-1265结合位点单核苷酸多态性rs72552316与食管癌易感性相关。miR-1265/TLR7轴可能在食管癌的发生发展中起重要作用。     

可得力口服液治疗非小细胞肺癌化疗后白细胞减少症的临床观察

目的:观察可得力口服液治疗非小细胞肺癌患者化疗后白细胞减少症临床疗效。方法:采用随机对照研究,将非小细胞肺癌化疗后确诊为白细胞减少症的81例患者,随机分为治疗组(41例)和对照组(40例),对照组予常规治疗,治疗组在常规治疗的基础上加服可得力口服液28d;观察两组患者的治疗效果。结果:在升高白细胞方面及主要临床症状的改善方面,治疗组明显高于对照组,差异具有显著性。治疗组白细胞恢复时间较对照组明显缩短,且感染率明显低于对照组。结论:可得力口服液可有效促进非小细胞肺癌化疗后白细胞升高,改善临床症状、降低患者化疗后感染率,延长患者的生存时间。     

中西医结合治疗再生障碍性贫血不同骨髓免疫分型的临床观察

目的观察中西医结合治疗再生障碍性贫血三种免疫分型的临床疗效。方法将79例再障患者按骨髓免疫分型分为三组,即T淋巴细胞增多型、B淋巴细胞增多型和造血干细胞衰竭型,在西医治疗基础上,加用"补肾健脾"中药联合治疗,观察治疗效果。结果造血干细胞衰竭型总有效率为84.62%,优于T淋巴细胞增多型的40.74%和B淋巴细胞增多型的42.31%(P<0.05)。结论 "补肾健脾"中西医结合治疗造血干细胞衰竭型再障有显著疗效。     

表皮干细胞培养及中药诱导分化研究进展

表皮干细胞在表皮组织的形成中起着至关重要的作用,具有自我更新和诱导分化的能力,可借助其生物学特性研究组织工程皮肤,用于组织的创伤修复等方面。体外分离和培养表皮干细胞具有诸多方面的影响因素,近年来,随着众多相关研究的不断深入,     

乙酰紫草素诱导急性髓系白血病HL-60细胞发生铁死亡的作用及分子机制

目的:探究乙酰紫草素诱导急性髓系白血病HL-60细胞发生铁死亡的作用及分子机制。方法:采用1 μg/mL、2 μg/mL、4 μg/mL和8 μg/mL的乙酰紫草素干预HL-60细胞24 h和48 h,CCK-8实验检测乙酰紫草素对HL-60细胞增殖活力的影响;Western blot检测铁死亡相关蛋白［转录调节因子p53、胱氨酸/谷氨酸反向转运体(XCT）、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）、膜蛋白转铁蛋白受体1(TFR1/CD71)、铁蛋白重链1(FTH1)］的表达水平;采用GSH/GSSG检测试剂盒检测不同浓度乙酰紫草素干预HL-60细胞24 h后细胞内GSH、GSSG的含量变化;采用4 μg/mL的乙酰紫草素和0.1 μmol/L细胞铁死亡抑制剂（Ferrostatin-1,Fer-1）共同干预HL-60细胞24 h,Western blot检测铁死亡相关蛋白p53、XCT、GPX4、CD71、FTH1的表达水平。结果:与对照组和DMSO组相比,不同浓度的乙酰紫草素对HL-60细胞的增殖均具有较强的抑制作用;乙酰紫草素显著升高p53和CD71的表达水平,显著降低XCT、GPX4和FTH1的表达水平,其中4 μg/mL乙酰紫草素干预HL-60细胞24 h,各蛋白表达水平变化最明显;乙酰紫草素显著减少GSH的含量（P＜0.000 1）,显著提高GSSG/GSH的比值（P＜0.000 1）;Fer-1将显著升高的p53和CD71以及显著降低的XCT、GPX4和FTH1的表达水平逆转。结论:乙酰紫草素一方面可能通过上调p53的表达,抑制XCT的表达,减少GSH含量,进而抑制GPX4的表达,促进HL-60细胞发生铁死亡;另一方面通过上调CD71（TFR1）的表达,下调FTH1的表达,从而影响HL-60细胞内铁稳态促进铁死亡的发生。     

兰州市早产儿常见病原体的筛检研究

目的:探讨早产儿巨细胞病毒(HCMV)、单纯疱疹病毒Ⅰ(HSV1)、单纯疱疹病毒Ⅱ(HSV2)、弓形虫(TOX)以及乙肝病毒(HBV)的感染状况。方法:采用巢式PCR对72例早产儿和46例足月小样儿进行5种病原体基因的检测。结果:早产儿和足月小样儿HCMV与HSV1、HSV2、TOX、HBV感染差异均有显著意义(P<0.05)。结论:在早产儿和足月小样儿的血清标本中检测到5种病原体的存在,为从分子水平进一步进行疾病与病原体感染的关系研究奠定了基础。