胎盘小叶胎儿血管系统CRH及其受体CRH-R1的表达

目的 了解足月胎盘小叶胎儿血管系统促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）及其受体（CRH-R1）的表达。方法 分别采用免疫组织化学技术LsAB法和原位杂交技术，观察先兆临产前人足月正常胎盘小叶血管CRH及其受体CRH-R1的表达。结果 胎盘小叶血管内皮细胞、血管平滑肌细胞的细胞浆内均有CRH／CRH-R1阳性表达，同时也有CRH mRNA／CRH-R1 mRNA阳性表达。结论 胎盘小叶脐血管系统血管内皮细胞甚至平滑肌细胞能合成CRH及CRH-R1，其CRH可能是胎儿血CRH的主要来源之一。     

栉孔扇贝糖胺聚糖对bFGF诱导的血管平滑肌细胞增殖及原癌基因c-myc mRNA表达的影响

目的 观察栉孔扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用及原癌基因(c-myc)mRNA表达的影响,并探讨SS-GAG抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制.方法 建立碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的VSMC增殖模型,用MTT法观察bFGF、SS-GAG对VSMC增殖活性的影响;用原位杂交方法观察SS-GAG对bFGF诱导增殖的VSMC内c-myc RNA表达的影响.结果 bFGF模型组细胞活性最高,与正常对照组比较,差异有统计学意义,不同浓度的SS-GAG组细胞增殖活性均低于模型组细胞,差别有统计学意义;bFGF诱导增殖的VSMC内c-myc mRNA基因表达强度明显高于对照组;与模型组比较,SS-GAG作用后,增殖的VSMC内c-myc mRNA表达强度和阳性细胞数量均减少,差别有统计学意义.结论 bFGF对VSMC有明显的促增殖作用,SS-GAG能显著抑制VSMC增殖,且对bFGF诱导增殖的VSMC的c-myc mRNA的阳性表达有抑制作用.     

三七花总皂苷对内皮素诱导的人主动脉血管平滑肌细胞c-myc、c-fos表达的影响

目的:观察三七花总皂苷(PNFS)对内皮素(ET-1)诱导的人主动脉血管平滑肌细胞(HASMC)癌基因c-myc、c-fos表达的影响。方法:采用ET-1诱导HASMC异常增殖,应用RT-PCR方法检测PNFS对c-myc、c-fos mRNA表达的影响。结果:PNFS能明显抑制HASMC原癌基因c-myc mRNA表达(P<0.05),而对c-fos mRNA表达影响不明显。结论:PNFS可影响癌基因c-myc mRNA表达以抑制HASMC异常增殖。     

紫杉醇对血管平滑肌细胞原癌基因转录和表达的影响

目的观察紫杉醇（paclitaxel）对血管平滑肌细胞原癌基因c-jun、c-fos转录和表达的影响及其量效、时效关系。方法提取大鼠主动脉原代平滑肌细胞，将第4-9代细胞用于实验。分别运用逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学技术检测血管紧张素及不同浓度（O．1、1．0和10．0tanol／L）紫杉醇对平滑肌细胞c-iun、c-fos mRNA转录及其蛋白质产物合成的影响。结果高、中、低剂量紫杉醇对血管紧张素诱导原癌基因的转录和表达没有明显作用。结论血管紧张素通过促进c-fos、c-jun的转录和表达引起血管平滑肌细胞的增殖。紫杉醇抗血管平滑肌细胞增殖作用并非通过抑制原癌基因c-fos、c-jun转录和表达来实现。     

中药对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用的研究*

[目的]研究中药抑制血管平滑肌细胞(VSMC)生长增殖的作用和机制.[方法]采用3H-TdR(氚胸腺苷)掺入和外源性c-jun cDNA在血管平滑肌细胞中表达的方法,观察血管平滑肌细胞(VSMC)生长增殖变化.[结果]与对照血清+内皮素组(cpm 2 534.54±54.2/105细胞)相比,中药血清+内皮素组(cpm 1 104.33±37.31/105细胞)血管平滑肌细胞3H-TdR掺入量有显著下降(P＜0.01),而且血管平滑肌细胞原癌基因的c-jun mRNA表达也较弱.[结论]本实验表明复方丹参对血管平滑肌细胞增殖及其原癌基因c-jun mRNA的表达有明显的抑制作用.     

尾吊大鼠肺组织原癌基因C-fos的表达及川芎嗪对其影响

目的:研究模拟失重大鼠肺组织内原癌基因C-fos的表达变化及川芎嗪对其影响.方法:尾部-30(悬吊(TS)大鼠模拟失重生理效应.健康30只Wistar大鼠随机分为对照组(CON)、尾吊7 d组(TS7研d)和尾吊 川芎嗪7 d组(Treated).采用免疫组织化学法和原位杂交法观察大鼠肺组织内C-fos表达水平的变化.结果:尾吊7 d组肺组织、肺腺泡血管和微血管内血管内皮细胞、血管平滑肌细胞的细胞内原癌基因C-fos蛋白及其mRNA明显高于对照组(P<0.01),经川芎嗪干预(treated组)大鼠肺组织蛋白的平均光密度值和阳性面积百分比与尾吊7 d组比较均降低(P<0.01,P<0.05).结论:尾吊模拟失重引起大鼠肺组织C-fos蛋白及其mRNA表达水平增加,川芎嗪可下调肺组织C-fos蛋白及其mRNA表达水平.     

低氧对肺血管周细胞转化生长因子TGF-β1 mRNA及蛋白表达的影响

应用细胞培养、核酸分子原位杂交、免疫细胞化学、图像分析技术研究低氧对肺血管周细胞转化生长因子TGF－β1mRNA及蛋白表达的影响,探讨低氧条件下肺血管周细胞增殖、向平滑肌样细胞分化的机制。结果发现低氧（H）组周细胞内TGF－β1mRNA及蛋白表达量分别是常氧（N）组的1．35倍和1．23倍,差异均有显著意义（均为P＜0．01）。研究表明,低氧可促进脉血管周细胞TGF－β1mRNA及蛋白表达增高。TGF－β1表达增高可能是低氧诱导肺血管周细胞增殖、向平滑肌样细胞分化的机制之一。     

c-myc基因研究进展

c-myc是原癌基因家族中重要的一员.它在不同组织,分化发育的正常细胞中具有不同程度的表达.在肿瘤细胞中,c-myc原癌基因的异常,导致癌蛋白c-myc的改变,对肿瘤细胞恶性表型具有细胞内调控作用.c-myc作为转录因子,在细胞周期、细胞增殖及肿瘤发生中发挥重要的作用.     

在小鼠着床前胚胎中c-myc的表达

目的: 观察小鼠着床前胚胎细胞中c-myc基因的表达, 了解其对早期胚胎发育可能影响的作用. 方法: 采用原位杂交及免疫组织化学ABC法,分别检测小鼠着床前胚胎细胞中c-myc mRNA及c-myc蛋白. 结果: 在小鼠2细胞、4细胞、6细胞、8细胞和囊胚期胚细胞中均检测到原癌基因c-myc转录产物的表达,c-myc mRNA分布于胚细胞的胞质和胞核. 免疫组织化学方法也发现,2细胞至囊胚期胚胎细胞的 c-myc蛋白均呈免疫反应阳性, 阳性物质分布于胞质和胞核中, 胚胎透明带则呈阴性反应. 结论: 小鼠早期胚胎有c-myc基因表达,c-myc基因对小鼠着床前胚胎发育可能起重要调节作用.     

转染PDGF-B mRNA的反义寡肽核酸抑制狗冠状动脉搭桥术吻合口再狭窄

目的探讨PDGF-B mRNA反义寡肽核酸对冠状动脉搭桥术吻合口再狭窄的影响。方法建立狗冠状动脉搭桥吻合口再狭窄模型;用合成的反义寡PNA以外科涤纶线携带并辅助治疗性超声波转导吻合口局部血管平滑肌细胞;分别用原位分子杂交和LSAB免疫组织化学法检测PDGF-B mRNA和PCNA表达;用形态测量法检测吻合口局部冠状动脉内膜厚度和面积。结果PNA显著抑制术后第4周吻合口局部冠状动脉内膜vSMCs表达PCNA和PDGF-B mRNA,与对照组相比抑制率分别为75.37%和71.64%;显著减少血管内膜厚度和面积。结论合成的反义寡PNA可部分抑制狗冠状动脉搭桥术吻合口再狭窄。     

人睾丸发生过程中表皮生长因子受体表达的研究

目的 :研究表皮生长因子受体 (EGFR)在人胚胎睾丸发生过程中的表达。方法 :收集 30例 12～ 32周龄胎儿睾丸标本 ,免疫组织化学 ABC法染色检测 EGFR,以正常羊血清代替一抗为阴性对照 ,光镜观察。结果 :EGFR在人胚胎睾丸间质细胞、支持细胞、管周肌样细胞呈阳性表达 ,曲细精管内精原细胞未见表达 ;EGFR在 12周龄睾丸组织未见表达 ,16周时是表达的高峰 ,此后呈逐渐下降趋势 (P<0 .0 5 )。结论 :EGF可能通过与其受体结合在人睾丸发生过程中起重要作用。     

人胎海马含胆囊收缩素神经元的发育

用免疫细胞化学方法,研究了16周至新生儿人脑海马含胆囊收缩素(CCK)神经元的发育。含CCK神经元最早出现于19周,小群聚集在海马板两端,以后呈向海马板中间区域发育趋势,28周后,含CCK神经元分布在海马各区的锥体层和多形层。含CCK神经元的胞体平均截面积随发育过程逐渐增大,但不匀速。低胎龄,突起数少而短,双极神经元占比例较大,随胎龄增大,突起效增加,多极神经元比例增高,突起延长。含CCK神经元的树突野分布在锥体层,大部分伸向分子层。     

Proto-oncogenes expression in the process of asthma airway remodeling

Objective: To observe the expression of proto-oncogenes in the process of airway remodeling in asthma. Methods: Guinea pig was used as an asthma model challenged by ovoglobulin. Dot-blot, Northern-blot molecular hybridization and immunohistochemistry techniques were used to detect the expression of c-fos, c-myc, c-jun and c-sis. Results: Expression of c-fos and c-myc mRNA could not be detected or detected at very low level in the control group. There were greatly increased expression of c-fos and c-myc mRNA after guinea pigs were challenged by ovoglobulin. Thirty minutes after the challenge, the expression of c-fos and c-myc mRNA reached to the peak and returned to normal level 4 h after the challenge. Immunohistochemistry studies showed that Fos, Myc, Jun and Sis expressed at low level in control group and increased after ovoglobulin stimulation. Immunohistochemically positive cells laid in the plasma of airway epithelium, in cell nucleus of bronchial epithelium and in the inflammatory cells. Pathologic     

Ⅰ、Ⅲ 型前胶原 mRNA 在风心病心肌中表达及其与 c-myc 基因表达相关性的研究

目的：了解风湿性心脏病心肌中Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ和ｃ ｍｙｃ基因的表达定位情况及意义。方法：用人Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｃＤＮＡ探针和ｃ ｍｙｃ基因探针，对３２例风湿性二尖瓣乳头肌进行分子原位杂交并进行图像分析。结果：①病变心肌间质中Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ阳性表达明显增强，Ⅰ型较正常成年心肌中增高１６７倍，Ⅲ型增高４３６倍；②病变心肌细胞核内出现Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ和ｃ ｍｙｃ基因阳性表达，胎儿心肌亦有类似表达；③Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ阳性表达量与ｃ ｍｙｃ基因阳性表达呈正相关关系。结论：①发现在病理情况下心肌细胞参与了胶原的生成与代谢，对胶原的合成和分泌具有重要作用。②ｃ ｍｙｃ基因对风湿性病变心肌的胶原代谢过程起调控作用。③风心病心肌胶原增生和调控发生在转录和转录后水平，心肌细胞重现了胎儿期合成胶原的表型。     

人眼视网膜神经节细胞胚胎发育的观察

①目的 观察人眼视网膜神经节细胞（ＲＧＣ）胚胎发育的状况,为研究ＲＧＣ提供形态学依据。②方法 对胎龄６～３８周５７３眼的ＲＧＣ进行光镜及电镜观察。利用计算机自动图像分析系统对２０～３８周的ＲＧＣ进行定量分析;用Ｉ（ＳＥＬ法定性标记凋亡细胞。③结果 电镜下胚胎６周ＲＧＣ的轴突与树突已可分辨;１５周时ＲＧＣ层及内丛状层在视网膜周边部已形成,后极部ＲＧＣ层小细胞多,周边部ＲＧＣ层大细胞多;胎龄１８～２２     

人参皂苷Rg1对大鼠血管球囊损伤后原癌基因c-myc表达的影响

目的 观察人参皂苷Rg1( Rg1)对大鼠颈动脉球囊损伤后原癌基因c-myc表达的影响,补充说明Rg1对球囊损伤所致血管狭窄形成的防治机制.方法 建立大鼠颈总动脉球囊损伤模型,制模后随机分为假手术组、模型组、Rg1低剂量(4 mg/kg)组和Rg1高剂量(16 mg/kg)组.制模次日腹腔注射给药,模型组及假手术组给予等体积生理盐水,连续给药14d后取损伤侧颈总动脉,行H.E.染色并测量管腔面积(Lumen area,LA)以判定血管腔狭窄程度;采用实时荧光定量RT-PCR (real-time RT-PCR)法检测管壁c-myc mRNA的表达.结果 颈总动脉球囊损伤模型组大鼠血管腔面积较假手术组明显狭窄(P＜0.01).Rg1低剂量及高剂量均明显改善球囊损伤所致的颈动脉狭窄,使球囊损伤后狭窄的血管腔面积增大(P＜0.05);Rg1高剂量显著下调损伤血管壁的c-myc mRNA表达(P＜0.01).结论 Rg1能减轻球囊损伤所致大鼠颈动脉狭窄,可能与其下调c-myc基因的表达有关.     

Inhibitory effects of selenium on telomerase activity and hTERT expression in cadmium-transformed 16HBE cells

Objective To investigate the effects of sodium selenite on telomerase activity and expression of hTERT mRNA in cadmium-transformed 16HBE cells.Methods Telomerase activity and expression of genes were measured after cultured cadmium-transformed 16HBE cells were exposed to sodium selenite at different doses(0.625,1.25,2.50,5.00 μmol/L)for 24 hours.Results Selenium decreased telomerase activity in cadmium-transformed 16HBE cells.There existed an obvious dose-effect relationship between the selenium concentration and these changes.The expression of hTERT and c-myc mRNA also decreased but the expression of mad1 mRNA increased after exposure to selenium for 24 hours.No difference was found in expression of hTRF1 and hTRF2 mRNA after incubated with sodium selenite for 24 hours,compared with control group.Conclusion Selenium inhibits telomerase activity by decreasing hTERT and c-myc mRNA expression and increasing mad1 mRNA expression in cadmium-transformed 16HBE cells and selenium concentration is significantly correlated with these changes.