胃癌组织中增殖诱导配体及其受体蛋白的表达

目的:观察人胃癌组织中增殖诱导配体(APRIL)及其受体B细胞成熟抗原(BCMA)和穿膜蛋白活化物(TACI)蛋白的表达,探讨其临床意义.方法:采用H-E染色及间接免疫荧光法检测30例人胃癌组织及相应10例癌旁正常组织APRIL及其受体蛋白的表达,分析不同临床病理特征下相关蛋白的表达水平.结果:胃癌组织中APRIL阳性率为86.7%,癌旁正常组织未见表达(P<0.05);而其受体BCMA和TACI蛋白表达水平在两者间无统计学差异.胃癌组织不同临床病理指标下(肿瘤大小、分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移和TNM临床分期),APRIL及其受体蛋白表达无统计学差异.结论:胃癌组织中APRIL蛋白高表达,检测其表达水平可能有助于胃癌的早期诊断.     

胃癌PRL-3与Bmi-1 mRNA联合表达的定量分析及其意义

目的研究胃癌及对应癌旁组织中PRL-3(phosphatase of regenerating liver-3)及Bmi-1(B-cell-specific moloney murine leukemia virus insertion site 1)基因mRNA的表达水平及差异,分析其表达与临床病理特征的关系,探讨其临床意义。方法应用实时荧光定量PCR检测116例胃癌手术切除标本及相应癌旁组织中的PRL-3及Bmi-1 mRNA表达水平,分析其表达的差异;研究其表达水平与性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、组织分化程度、淋巴结转移、浸润深度等临床病理特征的关系及两者的相关性。结果 PRL-3、Bmi-1 mRNA在胃癌及癌旁组织中均可检出,胃癌组织中相对表达水平高于癌旁组织(P<0.01)。PRL-3及Bmi-1 mRNA在肿瘤患者中的相对表达水平均与肿瘤大小、TNM分期、有无淋巴结转移、浸润深度有关,与患者年龄、性别无关;PRL-3mRNA相对表达水平还与肿瘤组织分化程度有关,Bmi-1 mRNA与肿瘤组织分化程度无关。结论 PRL-3及Bmi-1 mRNA的高表达与胃癌的侵袭和发展相关,其联合检测结果可作为早期诊断胃癌、评估胃癌发展、了解胃癌转移及预后的分子水平参考指标。     

CD44、SOX-2在胃癌组织中的表达及意义

目的:探讨归巢细胞黏附分子(CD44)和性别决定相关基因簇-2(SOX-2)在胃癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系.方法:采用免疫组织化学SP法检测60例胃癌组织及30例距癌组织边缘2.5 cm以上的癌旁正常胃组织中CD44及SOX-2的表达,统计分析二者相关性及与临床病理参数关系.结果:CD44和SOX-2在胃癌中的表达均显著高于癌旁组织(P<0.01).CD44与SOX-2的表达呈正相关(r=0.316,P=0.008).CD44的表达与胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移相关(P<0.05),而与性别、年龄无关(P>0.05);SOX-2的表达与胃癌的浸润深度、淋巴结转移相关(P<0.05),而与性别、年龄、分化程度无关(P>0.05).结论:CD44和SOX-2在胃癌发生、发展过程中发挥一定作用,有望成为判断胃癌预后的生物学指标和治疗靶点.     

半定量RT-PCR法检测VCP mRNA与PCNA mRNA在胃癌中的表达

目的 通过研究癌旁正常胃组织、淋巴结转移癌组织及胃癌组织中VCP mRNA的表达及其与增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA表达的相关性,探讨VCP mRNA在胃癌发生发展过程中的可能作用,为胃癌的诊断及预后判断提供分子生物学指标.方法 运用半定量RT-PCR技术检测42例胃癌患者胃癌组织、淋巴结转移癌组织、相应癌旁正常胃组织中VCP mRNA、PCNA mRNA的表达水平.结果 (1)VCP mRNA、PCNA mRNA在胃癌组织、淋巴结转移癌组织较相应癌旁正常组织表达显著升高(P<0.01),两者在胃癌组织中的表达丰度与肿瘤的分化、浸润深度、淋巴结转移个数及病理TNM分期有相关性(P<0.05);(2)VCP mRNA、PCNA mRNA在胃癌组织中表达存在正相关关系(r=0.631,P<0.01).结论 胃癌组织中VCP mRNA高表达可能是上调PCNA mRNA表达的一个因素,对于肿瘤的发生发展具有重要影响,联合检测两分子指标的表达对预测胃癌患者预后、指导治疗有一定临床辅助意义.     

胃癌组织中肝素酶mRNA的表达意义

目的:探讨肝素酶mRNA在胃癌及其癌旁组织中的表达及其与胃癌临床病理特征的关系. 方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肝素酶mRNA在47例手术切除的胃癌组织及癌旁组织中的表达. 结果:胃癌组织中肝素酶表达阳性率明显高于相应的癌旁组织(74.5% vs 19.1%, P<0.01). 肝素酶阳性表达率与胃癌患者的肿瘤直径、有无淋巴结转移、浸润深度以及TNM分期有关,而与胃癌患者的年龄、性别、分化程度及有无远处转移无关. 结论:肝素酶的高水平表达促进了胃癌的生长、浸润及转移,与胃癌预后不良有关系.     

VEGF、PCNA和MRP在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨VEGF、PCNA和MRP在胃癌组织中的表达与预后以及相关性。方法采用S-P免疫组化法检测64例胃癌组织和34例癌旁组织中VEGF、PCNA和MRP的表达水平。结果64例胃癌组织中VEGF表达与癌旁组织相比差异有统计学意义（P〈0.05）,与临床分期、淋巴结转移、肿瘤大小、浸润深度及生存、年龄明显相关（P〈0.05）。PCNA在胃癌组织中表达与癌旁组织比较差异有统计学意义（P〈0.05）,与性别、年龄、肿瘤部位、大小、病理分化程度、浸润深度、淋巴结转移、临床分期和生存无关（P〉0.05）。MRP在胃癌组织中表达与癌旁组织相比差异有统计学意义（P〈0.05）,与性别、年龄、肿瘤部位、大小、淋巴结转移、浸润深度、病理分化程度、临床分期和生存无关（P〉0.05）。VEGF、PCNA和MRP在胃癌中表达无相关性。结论VEGF、PCNA、MRP在胃癌组织中呈高表达;VEGF表达与胃癌侵袭转移能力和预后密切相关。     

青海地区胃癌组织中PTEN和Her-2的表达及临床意义

目的 探讨青海地区胃癌及胃良性病变中PTEN、Her-2的表达及临床意义.方法 应用免疫组织化学法检测81例胃癌标本及30例癌旁组织PTEN、Her-2表达情况,并观察两者与临床病理指标因素之间的联系,分析PTEN和Her-2表达的相关性.结果 胃癌患者癌组织PTEN、Her-2的阳性表达率分别为40.7％、23.5％,癌旁组织两者的阳性表达率分别为90.0％、6.7％,二者差异有统计学意义(P＜0.05).PTEN与胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结是否转移、病理类型以及分期相关,而与患者的年龄、性别无关.Her-2与胃癌的分化程度、淋巴结是否转移以及分期相关,与患者的年龄、性别、病理类型、浸润深度无关.经Spearman等级相关分析证明,PTEN与Her-2呈显著负相关关系.结论 PTEN、Her-2的表达与胃癌的生物学行为相关.     

Stathmin在胃癌组织中的表达及临床意义

目的通过检测Stathmin在胃癌及癌旁组织中的表达,分析其表达与胃癌临床病理特征的相关性。方法联合应用免疫组化SP法和RT-PCR技术检测34例胃癌及癌旁组织中Stathmin蛋白和mRNA表达情况,并对Stathmin的表达情况与胃癌临床病理特征的关系进行研究。结果胃癌组织中Stathmin的表达较癌旁组织明显升高(P<0.05);Stathmin与胃癌组织分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移以及临床分期均相关(P<0.05),而与患者的年龄、性别无关。结论 Stathmin表达与胃癌的恶性生物学行为有关。     

胃癌组织整合素α2β1的表达和意义

目的：：探讨整合素α2β1在胃癌组织中的表达和意义。方法：采用免疫组化SP法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测85例胃癌组织和50例癌旁正常胃组织整合素α2β1蛋白和mRNA的表达情况。结果：胃癌组织整合素α2β1蛋白和mRNA的表达均明显高于癌旁正常胃组织(P＜0.05)。胃癌组织整合素α2β1蛋白和mRNA的表达与患者年龄、性别无关(P＞0.05）;与胃癌的分化程度、TNM分期、淋巴结转移和浸润深度有关(P＜0.05)。结论：整合素α2β1与胃癌的浸润、转移密切相关,有望成为胃癌检测、评估恶性程度及预后的重要指标。     

EZH2基因在胃癌中的表达及意义

目的 检测胃癌组织中EZH2 mRNA及蛋白的表达,探讨EZH2蛋白的表达与临床病理指标的关系.方法 选取30例术前胃镜和术后病理确诊的胃癌组织及相应癌旁胃组织,应用RT-PCR方法对EZH2 mRNA的表达水平进行半定量检测;采用免疫组织化学 SP 法检测76例胃癌组织和45例癌旁正常胃组织中 EZH2蛋白的表达水平.结果 30例胃癌组织中EZH2 mRNA的表达量为0.994±0.129,高于癌旁胃组织中EZH2 mRNA的表达(0.332±0.080),差异有统计学意义(P=0.000).76例胃癌组织中,EZH2 蛋白的阳性表达率为 51.3%,45 例癌旁正常胃组织中未发现 EZH2的阳性表达.EZH2蛋白的表达与胃癌肿瘤的大小、浸润深度、淋巴结转移和 TNM 分期显著相关(P<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤部位及分化情况等临床因素无关(P>0.05).结论 EZH2基因在胃癌组织中表达增强,检测胃癌组织中 EZH2蛋白的表达可能对判断胃癌的恶性程度及病情进展有一定的价值.     

儿童急性B淋巴细胞白血病APRIL及其受体mRNA水平的定量测定

目的:采用实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)技术分析儿童急性B淋巴细胞白血病患儿外周血APRIL及其受体mRNA准确含量,并以靶基因和内参β2MmRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标。方法:在APRIL及其受体基因的高保守区设计相应引物和荧光探针,实时检测PCR产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本中靶基因中APRIL和BCMA的水平。结果:18例急性B淋巴细胞白血病样本的APRIL及其受体BCMA和TACImRNA水平的表达水平均显著高于正常儿童(P<0.05)。结论:发现APRIL在儿童急性B淋巴细胞白血病的发病过程中可能起了重要作用,并通过受体BCMA和TACI发挥作用。     

增殖诱导配体mRNA在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞的表达

目的 检测增殖诱导配体（APRIL）mRNA在系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMC）的表达水平，探讨APRIL在SLE发病中的意义。方法 采用半定量RT-PCR法检测36例SLE患者及17例正常人PBMC的APRILmRNA表达，并与SLE疾病活动指数（SLEDAI）进行相关性分析。结果 SLE患者活动期组和非活动期组APRIL mRNA表达水平均明显高于正常对照组（P〈0．05或P〈0．01），活动期组较非活动期组增高更明显（P〈0．01）；SLE患者APRILmRNA表达水平与SLEDAI评分呈正相关（r=0．6725，P〈0．01）。结论 SLE患者APRILmRNA表达水平的增高，可能在SLE的发病机制中具有重要作用。     

人贲门癌组织中增殖诱导配体及其受体mRNA水平的定量测定

目的采用实时荧光定量聚合酶链反应（RFQ-PCR）技术分析贲门癌组织中增殖诱导配体（APRIL）及其受体mRNA的表达水平。方法在APRIL及其受体基因的高保守区设计相应引物和荧光探针,实时检测PCR产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本中靶基因mRNA的准确含量,并以靶基因和内参β2MmRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标。结果RFQ-PCR检测靶基因mRNA含量的线性范围为109～101pg/ml,批内和批间重复性测定的变异系数分别为3.87%～10.12%和6.86%～12.29%。40例贲门癌组织样本的检测结果显示,贲门癌及癌旁组织中APRIL和B细胞成熟抗原（BCMA）的水平均显著高于远端正常组织（P〈0.01）,而穿膜蛋白活化物（TACI）的表达水平在3组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论成功建立RFQ-PCR检测APRIL及其受体mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性;而且发现APRIL在贲门癌发生、发展过程中可能起了重要作用,有可能还参与了肿瘤细胞的转移,并主要是通过受体BCMA而不是TACI发挥作用。     

增殖诱导配体在多发性骨髓瘤中的表达及临床意义

目的定量分析多发性骨髓瘤患者化疗前后外周血单个核细胞和血浆中增殖诱导配体(APRIL)mRNA及蛋白的表达水平。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)及实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)技术测定靶基因及靶蛋白的准确含量。结果 MM患者化疗前APRIL mRNA及蛋白表达水平均显著高于正常对照(P<0.05);化疗前Ⅲ期APRIL mRNA及蛋白表达水平显著高于Ⅰ期及Ⅱ期(P<0.05);化疗后PD组显著高于CR及PR组(P<0.05)。结论 APRIL可能参与MM的发生与发展并与肿瘤负荷量及疗效密切相关,其mRNA与蛋白表达水平相一致,且可能成为有效治疗MM的新靶点。     

增殖诱导配体在喉鳞状细胞癌中的表达

目的观察增殖诱导配体（APRIL）在喉鳞癌（LSCC）中的表达。方法采用免疫组织化学SABC法检测150例喉鳞癌患者中癌旁喉黏膜组织、癌组织中是否有APRIL的表达及APRIL的表达量与临床指标之间的关系。结果APRIL在癌旁喉黏膜组织及癌组织中的阳性表达率分别为6．7％（10／150）、89．3％（134／150）,在喉鳞癌不同的TNM分期中随着分期的增进APRIL的表达量逐渐增加且差异有统计学意义（P〈0．05）,APRIL的表达量与TNM分期相关（P〈0．05）。结论APRIL蛋白在喉鳞癌中高表达,且在不同TNM分期之间差异有统计学意义。     

人胃腺癌细胞株AGS、SGC-7901增殖诱导配体mRNA的表达

目的:比较人AGS、SGC-7901两种胃癌细胞株中增殖诱导配体(APRIL)mRNA的表达水平。方法:通过半定量RT-PCR检测APRIL mRNA,筛选出APRIL mRNA高表达细胞株。结果:以GAPDH为内参,通过计算机图像扫描系统分析各株细胞APRIL mRNA的表达量,获得人胃腺癌细胞株APRIL mRNA表达量的相对值,AGS0.09,SGC-79010.61。结论:SGC-7901为APRIL mRNA高表达细胞株。     

胃腺癌组织中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体-4的表达

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体-4(TRAIL-R4)在诱导胃癌细胞凋亡过程中的作用.方法:应用Western blot、RT-PCR、原位杂交和免疫组织化学技术,检测31例正常胃黏膜和胃腺癌组织中TRAIL-附蛋白和mRNA的表达.结果:Western blot结果显示,正常胃黏膜组织中TRAIL-R4蛋白的阳性表达率80.65%,高于其在胃腺癌组织中的阳性表达率6.45%(P＜0.05);免疫组织化学结果显示,正常胃黏膜组织中TRAIL-R4蛋白均有强染色,在胃腺癌组织中染色均为阴性(P＜0.05);RT-PCR结果显示,正常胃黏膜组织中TRAIL-R4 mRNA表达高于胃腺癌组织中的表达(P＜0.05);原位杂交结果显示,正常胃黏膜组织中TRAIL-R4 mRNA染色均为阳性,而在胃腺癌组织中阳性表达率为3.23%(P＜0.05).结论:TRAIL-R4在胃癌组织中的表达缺失是TRAIL特异性诱导肿瘤细胞凋亡的原因之一.     

标记TRAILR地高辛探针及原位杂交检测喉癌组织mRNA

目的:标记肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体(TRAILR)地高辛(DIG)探针,检测喉癌组织中TRAILR mRNA,并探讨其意义.方法:采用RT-PCR原位杂交法检测喉癌组织TRAILR mRNA. 结果:TRAILR地高辛探针标记成功;喉癌和正常对照中死亡受体4、5(DR4,DR5)mRNA呈强阳性,阳性率均为100%(34/34,5/5);正常对照中诱捕受体2(DcR2)mRNA呈强阳性,阳性率100%(5/5);喉癌中DcR2 mRNA可检出,阳性率14.71%(5/34);DcR2 mRNA主要分布在癌巢组织边缘,强度由癌巢中央到癌巢边缘逐渐加强.结论:TRAIL受体基因可能在喉鳞状细胞癌凋亡调控机制中发挥重要作用.     

原发性肝癌APRIL表达与临床病理生理特点

目的探讨增殖诱导配体（a proliferation-inducing ligand,APRIL）在原发性肝癌组织中的表达及其与临床病理生理特点的关系。方法采用实时荧光定量PCR检测原发性肝癌患者癌组织、癌旁组织和远端相对正常组织APRIL mRNA的表达,并研究其与肝癌的病理生理特点的关系。结果原发性肝癌癌组织APRIL mRNA的表达水平为0.58±0.10。远高于癌旁组织的0.22±0.09（P〈0.01）,多个肿瘤病灶的肝癌组织APRIL mRNA的水平为0.64±0.09,高于单个肿瘤病灶的肝癌组织APRIL mRNA的水平0.53±0.11（P〈0.05）。结论APRIL在原发性肝癌的进展过程中可能起到一定程度的促进作用,对抗APRIL功能在抗癌治疗中可能具有潜在的作用。