人红细胞膜Na~+-K~+-ATP酶的研究——Ⅰ.活力测定及某些生化特性

采用低渗溶血,高速旋离沉淀方法制得人红细胞膜制剂。测得Na~++K~+-ATP酶活力为6.15nmo P/min/mg蛋白质。测活反应系统中加入专一抑制剂乌本苷,一般可以用测活反应系统中缺K~+,Na~+来代替。在27～37℃范围内,Na~+-K~+-ATP酶对ATP的km值随温度上升而有增加。反应活化能为1.8×10~(-4)Cal/mol(卡/克分子)。 测活系统中加入Co~(2+),Ni~(2+),Zn~(2+),Cd~(2+),或Pb~(2+),对Na~+-K~+-ATP酶没有明显的影响,Sn~(2+)在10~(-4)M时有抑制Na~+-K~+-ATP酶的现象。Mn~(2+)能提高总ATP酶及Mg~(2+)-ATP酶活力,影响Na~+-K~+-ATP酶活力的测定。实验表明Ma~(2+)对乌本苷抑制Na~+-K~+-ATP酶的效应有拮抗作用。 没有发现胆汁酸盐对Na~+-K~+-ATP酶有明显的激活或抑制效应。     

五项衰老生化指标的探讨

本文观察了2月、10月和24月龄大鼠红细胞膜Na~ -K~ -ATP酶、全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX),红细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性及红细胞膜和血浆脂质过氧化物(LP0)水平,结果显示10月龄与2月龄组相比,Na~ -K~ -ATP酶活性增高24.16%.GSH-PX活性增高4o.07%.红细胞膜LPO增高44.44%,血浆LPO增高了102.72%;24月龄与10月龄组相比,Na~ -K~ -ATP酶活性下降45.16%,GSH-PX活性下降了22.3%,SOD活性下降12.32%,而红细胞膜LPO升高30.0%.由此认为上述5项指标可用于评估机体衰老情况     

脂氧素A_4及其受体对急性肺损伤Na~+-K~+-ATP酶的影响

目的研究脂氧素A_4及其受体对大鼠急性肺损伤Na~+-K~+-ATP酶的影响及机制。方法将大鼠随机分为7组:1对照组;2油酸(OA)组;3油酸+脂氧素A4(OA+LX)组;4OA+Alcohol组;5油酸+BML-111组(OA+BML-111组);6油酸+脂氧素A_4+BOC-2(OA+LX+BOC-2)组;7OA+DMSO组。机械通气1 h后处死,取肺组织测定Na~+-K~+-ATP酶α_1、β_1亚基蛋白表达和Na~+-K~+-ATP酶活性。结果与OA组比较,OA+LX组和OA+BML-111组肺组织Na~+-K~+-ATP酶β_1亚基蛋白表达明显增高(P0.05),Na~+-K~+-ATP酶活性明显增强(P0.05);与OA+LX组比较,BOC-2抑制Na~+-K~+-ATP酶的活性(P0.01)。结论脂氧素通过上调Na~+-K~+-ATP酶蛋白表达及活性减轻油酸诱导的大鼠急性肺损伤,其作用机制与脂氧素受体(ALX)相关。     

NIDDM患者红细胞膜Na~ -K~ -ATP酶、Ca~(2 )-Mg~(2 )-ATP酶活性与全血粘度等关系的研究

Na~ -K~ -ATP酶和Ca~(2 )-Mg~(2 )-ATP酶广泛存在于机体内多种细胞的细胞膜上,其中红细胞因其标本易于采集,准确性高,代表性强,可以作为研究其它多种组织细胞膜Na~ -K~ -ATP酶、Ca~(2 )-Mg~(2 )-ATP酶的生化代表,因而被广泛应用。近年来的研究发现,糖尿病患者红细胞膜Na~ -K~ -ATP酶、Ca~(2 )-Mg~(2 )-ATP酶活性发生变化,且这一变化可能在其慢性并发症的形成中起一定作用。     

流行性出血热患者红细胞膜Na~+、K~+-ATP酶活性及胞内Na~+、K~+含量变化

本文测定30例健康人和76例流行性出血热(EHF)患者红细胞膜Na~+·K~+-ATP酶活性及胞内Na~+、K~+含量。结果表明EHF患者各期红细胞膜Na~+·K~+-ATP酶活性均低于健康对照,低血压少尿期最为明显。同时还发现Na~+·K~+-ATP酶活性降低与病情程度有关,病情越重,其活性越低。与Na~+·K~+-ATP酶活性降低的同时,胞内Na~+含量增高,K~+浓度降低,Na~+·K~+-ATP酶活性与胞内Na~+呈负相关,与胞内K~+呈正相关。研究EHFNa~+·K~+-ATP酶有助于进一步阐明其发病机理并为临床治疗提供参考依据。     

促红细胞生成素对慢性肾衰腹透患者红细胞质量的影响

为了探讨重组促红细胞生成素(rHuEPO)治疗慢性肾功能衰竭贫血患者的红细胞质量改变,选择38例CRF腹透贫血患者,20例应用rHuEPO治疗,18例应用输血治疗,分别观察两组治疗前、后血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct)、脂质过氧化物(LPO)、超氧化物岐化酶(SOD)和Na~+,K~+-ATP酶活性变化以及分析Na~+,K~+-ATP酶活性与LPO、SOD之间相关性。结果显示,治疗后两组Hb、Hct均显著升高,rHuEPO组LPO显著下降(P<0.05),SOD和Na~+,K~+-ATP酶活性差异不显著,并且Na~+,K~+-ATP酶与LPO水平呈显著负相关(P<0.05),与SOD活性呈正相关(P<0.05)。提示rHuEPO、输血均能纠正CRF患者贫血,增加红细胞数量,前者并能改善红细胞质量,但后者不能。     

促红细胞生成素对维持性血液透析患者炎症反应及氧化应激状态的影响

目的 探讨慢性肾功能衰竭(chronic renal failure,CRF)维持性血透患者应用人类重组促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,r-HuEPO)对体内炎症反应及氧化应激状态的影响.方法选择35例慢性肾衰维持性血透患者(肾衰组),35例健康成人作对照(对照组).肾衰组应用r-HuEPO治疗3个月及6个月后,检测患者血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct)、血浆超敏C反应蛋白(hs-CRP)及晚期氧化蛋白产物(AOPP)、丙二醛(MDA),红细胞膜Na~(+-)K~+-ATP酶活性的变化.结果 治疗前肾衰组患者血浆中hs-CRP、MDA、AOPP含量明显高于对照组患者,而红细胞膜Na~+-K~+-ATP酶活性明显低于对照组(P<0.01),且呈显著负相关(r=-0.57、r=-0.67、r=-0.78.P<0.05).r-HEPO治疗3个月后,血Hb、Hct明显上升,而hs-CRP、MDA、AOPP含量和Na~+-K~+-ATP酶活性变化不显著,在治疗6个月后,Na~+-K~+-ATP活性显著升高(P<0.05),hs-CRP、MDA、AOPP含苗则显著下降(P<0.05).结论 r-HuEPO长程治疗在改善慢性肾衰维持性血透患者贫血状态的同时,可有效缓解患者体内炎症及氧化应激状态.     

棉酚——人类红细胞外向(Na~+,K~+)联合转运的抑制剂(简报)

棉酚是我国首创的男性避孕药,效果肯定。但部分服棉酚的受试者出现低钾血症,影响临床的应用.为探讨其机制,我们用PCMB(p-chloromercuribenzoic acid)处理的红细胞Na~+、K~+跨膜流动模型,研究了醋酸棉酚对人类红细胞(Na~+-K~+)-ATP酶及(Na~+,K~+)联合转运的影响。 首先我们注意到,在一定浓度范围内棉酚可使PCMB处理的红细胞的Na~+、K~+外流速率减慢,当棉酚浓度为2μmol/L时,其流动介质中Na~+、K~+浓度与对照组比较分别降低14％和4％。用以往的棉酚抑制     

体外培养肿瘤细胞Na~+,K~+-ATP酶活性的观察

采用细胞融破酶底物法测定小鼠淋巴细胞白血病(P_(388))细胞、人粒细胞白血病(K_(562))细胞和相应的正常组织细胞—小鼠脾脏单个核细胞(MSMN)和成人末梢静脉血多形核细胞(ABPN)的Na~+,K~+-ATP酶活性,结果表明P_(388)和K_(562)细胞的Na~+,K~+-ATP酶活性明显高于MSMN和ABPN。采用~(86)Rb示踪法测定4种体外培养的肿瘤细胞—人肝癌细胞(SMMC-7721)、人胃腺癌细胞(SGC-7901)、人宫颈癌细胞(HeLa cells)和K_(582)细胞的 Na~+,K~+-ATP酶活性,并同它们的生长速度进行比较,发现肿瘤细胞生长速度较快者(SMMC-7721),Na~+,K~+-ATP酶的活性也较高。本文结果表明,肿瘤细胞具有高Na~+,K~+-ATP酶的特征,且同生长速度有关。     

再生障碍性贫血红细胞膜(Na~+·K~+)-ATP酶活性变化

用酶学比色法测定10例再生障碍性贫血慢性期患者红细胞膜(Na~+·K~+)-ATP酶活性,结果为每小时2.577±0.86微克分子磷/毫克蛋白(均值±标准差),明显高于正常组。红细胞膜(Na~+·K~+)-ATP酶活性与糖酵解相偶联。再障慢性期(Na~+·K~+)-ATP酶活性升高,可作为病情变化的辅助指标。     

Changes of Na＋－K＋－ATPase activity and neuronal ultrastructure in cerebral cortex of rats exposed to a 5000m simulated high al

ＣｈａｎｇｅｓｏｆＮａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄｎｅｕｒｏｎａｌｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅｉｎｃｅｒｅｂｒａｌｃｏｒｔｅｘｏｆｒａｔｓｅｘｐｏｓｅｄｔｏａ５０００ｍｓｉｍｕｌａｔｅｄｈｉｇｈａｌｔｉｔｕｄｅＷａｎｇＱｉｎｇｈｕａ１...     

出血性脑梗死大鼠脑组织含水量及Na+-K+-ATP酶活性变化

目的研究比较大鼠脑梗死(MCAO)、出血性脑梗死(HI)模型脑组织含水量及Na -K -ATP酶活性的变化。方法54只SD大鼠随机分为3组:假手术组、MCAO组和HI组。采用干-湿重法测定脑组织含水量,无机磷法测定Na -K -ATP酶活性。结果HI组脑组织含水量在缺血6h、MCAO组缺血12h后较假手术组间差异均有统计学意义(P<0.01),缺血6h和12h时MCAO组较HI组差异有统计学意义(P<0.05)。MCAO组和HI组Na -K -ATP酶活性较假手术组间差异有统计学意义(P<0.01),缺血3～24h时MCAO组较HI组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论Na ,K -ATP酶活性降低及其引发的脑水肿可加重原有的脑梗死。     

糖尿病红细胞膜Na~＋－K~＋—ATP酶和Mg~（2＋）—ATP酶活性改变与脂

本文探讨了ＮＩＤＤＭ患者红细胞膜Ｎａ￣＋—Ｋ￣＋—ＡＴＰ酶及Ｍｇ￣（２＋）—ＡＴＰ酶活性改变与脂质过氧化的关系，以及这两者在糖尿病微血管并发症发生中所起的作用。结查显示，ＮＩＤＤＭ患者红细胞膜Ｎａ￣＋—Ｋ￣＋—ＡＴＰ酶与Ｍｇ￣（２＋）—ＡＴＰ酶活性显著降低。而红细胞膜ＬＰＯ则显著增高。红细胞ＳＯＤ及ＧＳＨｐｘ活性显著降低，伴有糖尿病视网膜病变者以上变化更为显著。红细胞膜Ｎａ￣＋—Ｋ￣＋—ＡＴＰ酶和Ｍｇ￣（２＋）—ＡＴＰ酶活性与红细胞膜ＬＰＯ、红细胞ＩＦ呈显著负相关，红细胞膜ＬＰＯ与红细胞ＩＦ呈显著正相关，表明红细胞膜脂质过化增强是导致膜Ｎａ￣＋—Ｋ￣＋—ＡＴＰ酶和Ｍｇ￣（２＋）—ＡＴＰ酶活性降低的重要因素，并且它们都参与糖尿病视网膜病变的发生。     

丹参注射液对腹腔感染状态下胃粘膜Na+-K+-ATPase活性和电位差的影响

目的 :探讨丹参注射液对严重腹腔感染状态下大鼠胃粘膜Na+ -K+ -ATPase活性变化和电位差的影响。方法 :利用大鼠盲肠结扎穿孔造成腹腔严重感染动物模型 ,应用生化法检测穿孔前和穿孔后 3h、6h、12h、2 4h、4 8h各时相大鼠胃粘膜Na+ -K+ -ATPase活性。应用电生理记录仪检测穿孔前和穿孔后 3h、6h、12h、2 4h、4 8hGTPD变化。结果 :盲肠穿孔后 3hNa+ -K+ -ATPase活性显著降低 (P <0 .0 5 ) ,12h降至最低 (P <0 .0 1) ,仅为对照组的 4 8.5 % ,4 8h仍末恢复正常 ;丹参组12h、2 4hNa+ -K+ -ATP酶活性比感染组显著升高 (P <0 .0 5 )。GTPD穿孔后 3h即有下降 ,6h下降显著 (P <0 .0 5 ) ,12h下降至最低 (P <0 .0 1) ,2 4h和 4 8h仍然显著低于对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 5 ) ;丹参组 12h、2 4h比感染组明显升高 (P <0 .0 5 )。结论 :严重腹腔感染状态下胃粘膜Na+ -K+ -ATPase活性降低可能是引起胃粘膜屏障功能受损的原因之一。早期应用丹参对有效地预防应激性溃疡的发生有重要的临床意义。     

严重腹腔感染时胃粘膜Na+-K+-ATPase活性与电位差的相关性研究

目的：探讨严重腹腔感染状态下大鼠胃粘膜Na^ -K^ -ATPase活性变化对胃粘膜电位差(GTPD)的影响。方法：利用大鼠盲肠结扎穿孔造成腹腔严重感染动物模型，应用电生理记录仅检测穿孔前和穿孔后3h、6h、12h、24h、48hGTPD变化；应用生化法到定了各时相大鼠胃粘膜Na^ -K^ -ATPase活性。结果：盲肠穿孔后Na^ -K^ -ATPase活性显著降低(P＜0．05)，12h降至最低(P＜0．01)，仅为对照组的48．5％，48h仍未恢复正常。GTPD伤后6h显著下降(P＜0．05)，12h降至最低(P＜0.01)，24h和48h仍显著低于对照组(P＜0.05，P＜0．05)。结论：严重腹腔感染状态下胃粘膜Na^ -K^ -ATPase活性降低可能是引起胃粘膜屏障功能受损的主要原因。     

高压氧对肺毛细血管Na~+-K~+-ATPase影响的图象分析

采用Na~+-K~+-ATPase电镜细胞化学方法,观察在高压氧(0.25MPa)和高压氧中毒情况下(0.52MPa)小鼠肺毛细血管Na~+-K~+-ATPase活性的分布、活性强度与超微结构改变之间的联系,并用计算机图象定量分析方法对酶活性进行了14个参数的定量分析,这些定量参数表明,高压氧(0.25MPa)条件下,肺毛细血管Na~+-K~+-ATPase活性升高,在高压氧中毒(0.52MPa)条件下,肺毛细血管Na~+K~+-ATPase活性减弱.     

灵芝保护鼠脑缺血性损害的作用机制

为探讨灵芝水溶性提取物（EGL）对鼠脑缺血性损害的预防性保护机制,检测了大鼠脑梗塞区rCBF、SOD、Na －K －ATP酶活性。结果显示预防性使用EGL组较梗塞后使用组的SOD、Na －K -ATP酶活性更高,rCBF改善仅出现于梗塞后第五天,且与梗塞体积缩小和组织学恢复无关。提示保护SOD、Na －K －ATP酶可能是EGL发挥其预防性保护作用的机制之一。     

黄连素对L-甲状腺素诱发大鼠心肌肥厚的保护作用

目的　研究黄连素对 L-甲状腺素 (L- Thy)诱发大鼠发生心肌肥厚的保护作用。方法　 SD大鼠腹腔注射 (ip) L-甲状腺素 0 .5 mg/(kg· d)× 10 d,造成心肌肥厚模型 ,同时用黄连素 30 mg/(kg· d)× 10 d灌胃 ,观察大鼠的心肌肥厚指数 ,心肌细胞膜 Na+ - K+ - ATP酶和肌浆网 Ca2 + - ATP酶活力 ,心肌 NO含量 ,心肌钙调神经磷酸酶 (Ca N)活力的变化。结果　与正常对照组相比 ,心肌肥厚组心肌肥厚指数、Ca N活力明显升高 (P<0 .0 1) ,而心肌NO含量、Na+ - K+ - ATP酶活力和 Ca2 + - ATP酶活力均显著降低 (P<0 .0 1)。黄连素治疗组心肌肥厚指数 ,Ca N活力显著低于肥厚组 (P<0 .0 1) ,心肌 NO含量、Na+ - K+ - ATP酶活力和 Ca2 + - ATP酶活力则显著高于肥厚组 (P<0 .0 1)。结论　黄连素对 L-甲状腺素诱导的大鼠心肌肥厚具有保护作用。