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1.
2.
目的 基于核酸试纸条技术,建立一种快速检测蜡样芽胞杆菌entFM毒素基因的方法。 方法 煮沸法提取蜡样芽胞杆菌DNA,以蜡样芽胞杆菌entFM毒素基因作为靶基因,采用NCBI primer-BLAST 5.0软件设计特异性引物并通过克隆转化鉴定PCR产物,建立并组装核酸试纸条,评价核酸试纸条的特异性、灵敏度和稳定性。 结果 蜡样芽胞杆菌DNA浓度为300 mg?L-1,纯度约为1.60。PCR产物阳性条带经切胶回收、克隆转化和测序比对,与GenBank数据库中已登记的entFM相似性为100%。在pH值7.0条件下,每100 μL 胶体金溶液加入3.3 μg链霉亲和素浓度标记,质控线浓度为1.8 g?L-1,检测线浓度为1 g?L-1时,硝酸纤维素膜上质控线与检测线均可与PCR产物反应出现清晰的红色条带。按照最适条件组装成核酸试纸条,PCR产物6 μL,样品展开液100 μL,检测10 min后可观察结果。核酸试纸条特异性与电泳结果一致,仅蜡样芽胞杆菌为阳性结果,与金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞杆菌、大肠埃希菌和沙门氏菌皆无交叉反应,为阴性结果;灵敏度检测,核酸试纸条DNA质量浓度同时降至10-3 mg?L-1仍可准确检测,普通PCR电泳结果显示DNA质量浓度同时降至10-1 mg?L-1出现目的条带,核酸试纸条比普通PCR灵敏度提高100倍;稳定性检测,核酸试纸条在第6、9和12个月进行检测稳定性一致。 结论 建立的核酸试纸条检测蜡样芽胞杆菌entFM毒素基因灵敏度高、特异性强且具有良好稳定性,适用于快速鉴别蜡样芽胞杆菌entFM毒素基因。  相似文献   
3.
4.
目目的的:观察电针耳迷走神经对断奶前母本隔离(PMS)小鼠焦虑、抑郁样行为的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:选择3只成年C57BL/6雄鼠与9只成年C57BL/6雌鼠按1雄3雌随机合笼,待雌鼠受孕后采用随机数字表法分为对照组和母本隔离组。在造模成功后,母本隔离组子代采用随机数字表法分为模型组和电针组,每组10只。电针组麻醉后进行电针干预,穴位选择双侧耳甲区,连续波,频率为2 Hz,强度为1 mA,1次/d,10 min/次,6 d/疗程,共干预2个疗程。对照组、模型组参照电针组进行麻醉束缚,但不进行电针干预。干预完成后,分别采用旷场测试、高架十字迷宫测试和悬尾测试对3组小鼠进行行为学检测;采用免疫荧光方法检测小鼠前额叶皮层(PFC)、中缝背核(DRN)脑区原癌基因蛋白(c-fos)表达水平和DRN脑区5-羟色胺(5-HT)神经元数量。结果:(1)行为学指标:与对照组比较,模型组总移动距离、中心区域时间百分比、开臂花费时间、开臂总移动距离、进入开臂次数均明显降低,悬尾静止时间明显增加,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,电针组总移动距离、中心区域时间百分比、开臂花费时间、开臂总移动距离、进入开臂次数均明显增加,悬尾静止时间明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。(2)c-fos表达水平和5-HT神经元数量:与对照组比较,模型组DRN、PFC脑区c-fos神经元数量均明显降低,模型组DRN脑区5-HT神经元数量明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,电针组DRN、PFC脑区c-fos神经元数量均明显更高,电针组DRN脑区5-HT神经元数量明显更高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:电针耳迷走神经可改善PMS小鼠焦虑、抑郁样行为,其具体机制可能与调节DRN、PFC脑区c-fos表达和DRN脑区5-HT神经元数量有关。  相似文献   
5.
6.
目的探讨分选蛋白(SNX)17通过激活表皮生长因子受体(EGFR)影响胰腺癌细胞侵袭、增殖和迁移能力。方法采集3例人胰腺癌组织及癌旁组织样本,自2021年1月至2021年3月收集于贵州医科大学附属医院肝胆外科,用免疫组织化学(IHC)染色检测癌组织与癌旁组织中SNX17的表达量。用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测胰腺癌细胞系中SNX17的相对表达量;用空siRNA以及两种敲低SNX17的小干扰RNA(siRNA)分别转染上述细胞,分组为NC组、SNX17-si1组和SNX17-si2组。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、平板克隆实验检测胰腺癌细胞的增殖能力,Transwell及划痕实验检测胰腺癌细胞迁移能力。蛋白质印迹法(Western blot)检测在SNX17敲低的癌细胞中EGFR以及细胞外调节激酶(ERK)的相对表达量差异。最后在胰腺癌细胞中共转染siRNA以及EGFR的过表达质粒进行功能回复实验(分组为NC组、SNX17-si1组、EFGR-overexpression+SNX17-si1组),组间比较采用t检验,组内两两比较采用LSD-t检验。结果免疫组织化学检测结果显示癌组织中SNX17相对表达量高于癌旁组织(5.750±1.323,t=4.345,P<0.05),差异有统计学意义。RT-qPCR发现在胰腺癌细胞系中,人胰腺癌细胞-2(MIA PaCa-2,19.240±2.048、t=8.844,P<0.05)和人胰腺癌细胞-1(PANC-1,5.796±1.256,t=3.712,P<0.05)细胞中SNX17相对表达量显著高于其他胰腺癌细胞系,差异有统计学意义。CCK-8实验技术结果显示,SNX17-si1组、SNX17-si2组低于NC组吸光度值(0.707±0.059比0.346±0.075比1.109±0.052比0.602±0.047,t=12.060、4.642、21.440、12.750,P<0.01),差异有统计学意义。平板克隆结果显示转染组细胞集落数减少。划痕实验结果显示敲低SNX17降低细胞的侵袭能力。Transwell迁移实验结果显示,SNX17-si1组、SNX17-si2组单位视野穿过的细胞数低于NC组[(666.300±14.400)个比(574.300±10.800)个比(129.300±4.300)个比(93.700±3.100)个,t=46.260、53.220、29.850、15.450,P<0.01],差异有统计学意义。而侵袭实验结果表示,SNX17-si1组、SNX17-si2组单位视野穿过的细胞数低于NC组[(137.5±20.1)个比(100.8±17.4)个比(324.5±7.9)个比(289.8±10.2)个,t=6.836、5.807、41.020、28.430,P<0.01],差异有统计学意义。Western blot检测结果显示,SNX17-si1组与SNX17-si2组EGFR的相对表达量低于NC组(0.477±0.032比0.278±0.042比0.853±0.053比0.826±0.050,t=14.920、6.640、16.130、16.430,P<0.01),差异有统计学意义。在回复实验中,CCK-8、Transwell实验及划痕实验证明共转染EGFR-overexpression+SNX17-si1逆转敲低SNX17所导致的胰腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的降低。最后用Western blot结果表明,共转染组比较单独转染SNX17-si1的组别,EGFR的相对表达量分别增高(0.712±0.010、t=70.220,P<0.05;1.002±0.027、t=37.580,P<0.05),差异均有统计学意义。结论SNX17通过影响EGFR促进胰腺癌细胞MIA PaCa-2和PANC-1的增殖、侵袭、迁移能力。  相似文献   
7.
目的对来源于西沙群岛的海绵(Agelas sp.)共附生微生物Aspergillus alabamensis(18-xs-01-zp-3)进行菌种鉴定及次级代谢产物的研究。方法通过分子生物学方法鉴定菌株种属;综合运用硅胶柱层析、薄层色谱和半制备高效液相色谱(HPLC)等色谱学方法对次级代谢产物进行分离纯化,通过核磁共振(NMR)、质谱(MS)等现代波谱学方法并结合文献对所得化合物进行结构鉴定。结果从中分离得到7个单体化合物,分别是ardeemin型生物碱3个:5-N-acetyl-15bβ-hydroxyardeemin(1)、5-N-acetylardeemin(2)、5-N-acetyl-15b-didehydroardeemin(3);二酮哌嗪生物碱2个:3-benzylidene-3,4-dihydro-4-methyl-lH-l,4-benzodiazepine-2,5-dione(4)、benzodiazepinedione(5);吲哚类生物碱2个:luteoride E(6)、14-hydroxyterezine D(7)。结论从该菌株共分离得到7个生物碱类化合物,化合物1对H69AR具有抗肿瘤活性,化合物4为首次从曲霉属真菌中分离得到。  相似文献   
8.
肝细胞癌相关蛋白1(HCRP-1)被认为是一种抑癌基因,是人ESCRT-I复合体中的一个重要组成亚基,又被称作为hVps37A。ESCRT 1复合体主要参与人体内很多受体的降解过程。HCRP-1在ESCRT-I复合体的受体胞吞、下调作用以及调节增殖过程中起重要作用,从分子水平参与和调控了肿瘤细胞的发生发展。多项临床研究表明,HCRP-1在多种癌组织标本中低表达或者缺失表达。HCRP-1的存在与否和放疗、化疗、免疫治疗的疗效有明显关系。HCRP-1的表达量与多种肿瘤患者的预后显著相关。HCRP-1在泌尿系常见肿瘤(肾癌、前列腺癌)的发生发展中也起到重要作用。本文就HCRP-1在泌尿系肿瘤中的研究进展作一综述。  相似文献   
9.
目的应用原位缝合及原位缝合联合单束重建技术治疗前交叉韧带(ACL)损伤,并研究短期随访的临床结果。 方法选择2016年1月至2018年6月福建医科大学附属第一医院ACL损伤患者作为观察组。纳入标准:确诊为前交叉韧带股骨端损伤的男性患者;排除标准:多发韧带损伤或受伤时间大于3月的患者。根据Sherman分型分为两个亚组并选择不同手术方式,Sherman-Ⅰ型亚组选择原位缝合(原位缝合组),Sherman-Ⅱ/Ⅲ型选择原位缝合联合单束重建(联合重建组)。选择2015年1月至12月在同单位行ACL重建手术(单束重建)的患者数据作为对照组,同样根据Sherman分型分为Sherman-Ⅰ型亚组和Sherman-Ⅱ/Ⅲ型亚组。原位缝合及原位缝合联合单束重建患者进行1年临床随访。观测指标包括:膝关节评分(IKDC);信噪比(SNQ);Opti Knee三维膝关节运动测试;Lachman试验,前抽屉试验及轴移试验,GNRB膝关节稳定度测量仪检测关节稳定度。结果进行亚组间比较。连续性变量使用t检验,计数变量使用卡方检验。 结果原位缝合及原位缝合联合单束重建17例患者获得随访,韧带重建对照组回顾性资料共获得28例完整数据。其中Sherman-Ⅰ型共19例,8例行原位缝合,11例为ACL重建(对照); Sherman-Ⅱ/Ⅲ型共26例,9例为联合重建组,17例为ACL重建(对照)。在IKDC评分,GNRB膝关节稳定度测试,Lachman试验,前抽屉试验及轴移试验等方面,各组间差异均无统计学意义(均为P>0.05)。术后MRI提示原位缝合组的SNQ值(9.8±3.2)高于联合重建组(6.4±1.9)(t=2.6,P<0.05)。Opti Knee三维运动测试显示原位缝合组无论步行还是慢跑状态下,外旋角度均较健侧减小[步行状态健侧(22.3±1.2)°,患侧(15.0°±2.0)°,(t=3.2,P<0.05);慢跑状态健侧(23.0±1.3)°,患侧(14.1±1.8)°,(t=4.0,P<0.05)]。股骨近端位移均较健侧减少[步行状态健侧(1.2±0.2) mm,患侧(0.5±0.1)mm,(t=2.9,P<0.05);慢跑状态健侧(1.1±0.3)mm,患侧(0.5±0.2)mm,(t=3.1,P<0.05)]。而联合重建组无论是步行还是慢跑状态下健侧与术侧在各个方向的位移无明显差异。 结论Sherman-Ⅰ型急性ACL损伤进行单纯原位缝合可以获得相当于韧带重建的临床疗效,针对Sherman-Ⅱ、Ⅲ型损伤,原位缝合联合单束重建术后1年的运动学评估可以完全恢复到健侧相同水平。  相似文献   
10.
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