静脉血栓患者和正常人凝血因子V Leiden和凝血酶原基因G2021 …

目的 了解静脉血栓虱和正常人中凝血因子Ｖ Ｌｅｉｄｅｎ和凝血酶原基因Ｇ２０２１０Ａ变异的发生率。方法 用多聚酶链反应（ＰＣＲ）及限制性内切酶分析一步法,对９７例静脉血栓患者和１００名正常人的凝血因子Ｖ Ｌｅｉｄｅｎ９ＦＶ Ａｒｇ５０６Ｇｌｎ）和凝血酶原基因Ｇ２０２１０Ａ变异进行分析。结果 凝血因子Ｖ Ｌｅｉｄｅｎ基因和凝血酶原基因ＰＣＲ产物经ＴａｑⅠ酶切消化后电泳显示为１５７ｂｐ和９８ｂｐ片段,静     

β_2肾上腺素受体遗传多态性与夜间哮喘的相关性研究

人类β2 肾上腺素受体 (β2 ＡＲ)基因位于染色体 5ｑ31。目前已检测出该基因编码区存在着 9个突变位点 (遗传多态性 ) ,其中 4个可导致氨基酸序列的改变 ,从而使编码的第46、79、10 0、491位氨基酸分别发生Ａｒｇ16→Ｇｌｙ、Ｇｌｎ2 7→Ｇｌｕ、Ｖａｌ34→Ｍｅｔ、Ｔｈｒ16 4→Ｉｌｅ的改变[1] 。夜间哮喘是哮喘的一种特殊类型 ,其夜间症状及气道阻塞加重 ,对其发生机制尚不清楚。但已了解到夜间哮喘其夜间 β2 ＡＲ下调 ,而非夜间哮喘者患者和正常人无此下调[2 ] 。而在定位诱变和重组表达研究中已发现 ,β2 ＡＲ16位点上的Ａｒｇ突变为…     

肝癌中VEGF及其受体的研究进展

血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)是目前已知的最重要、最直接的血管生成因子 ,它与肿瘤包括肝癌的关系是近几年的研究热点。本文将以近来对肝癌中ＶＥＧＦ及其受体ＶＥＧＦＲ的研究和相关的肿瘤治疗为重点综述如下。1　肝癌中的ＶＥＧＦ及ＶＥＧＦＲ的主要形式ＶＥＧＦ有 4种剪接变异体 ,即ＶＥＧＦ12 1、ＶＥＧＦ16 5、ＶＥＧＦ189、ＶＥＧＦ2 0 6 ,分别含 12 1、16 5、189、2 0 6个氨基酸。ＶＥＧＦＲ有 3种 ,ＶＥＧＦＲ 1(ｆｌｔ 1)、ＶＥＧＦＲ 2 (ＫＤＲ/ｆｌｋ 1)、ＶＥＧＦＲ 3(ｆｌｔ 4 )。Ｙａｍａｇｕｃｈｉ等[1] 通过对不同分级和大…     

三例艾滋病患者的人类免疫缺陷病毒易感基因型分析

近年来的研究表明 ,人类免疫缺陷病毒 (ＨＩＶ)易感基因ＣＣＲ5、ＣＣＲ2和ＳＤＦ1等基因位点的突变可干扰艾滋病的发病进程[1,2 ] 。其中ＣＣＲ5 △ 32基因突变似乎是最重要的因素 ,它的纯合子突变可降低ＨＩＶ传播的危险性 ,杂合子突变可以延缓艾滋病的发病进程 ,ＣＣＲ2 6 4Ｉ和ＳＤＦ1 3′Ａ基因突变也可延缓艾滋病的发病 ;而甘露糖结合蛋白 (ｍａｎｎｏｓｅ ｂｉｎｄｉｎｇｌｅｃｔｉｎ ,ＭＢＬ)的纯合子突变则增加个体对ＨＩＶ的易感性。因此 ,有关ＨＩＶ易感基因的研究成为艾滋病领域中的热点课题。我们在以往研究[3 ,4 ] 的基础上…     

生长激素治疗软骨发育不全

多种原因可导致某些儿童不能达到预期的成年人高度。软骨发育不全 (ａｃｈｏｎｄｒｏｐｌａｓｉａ ,ＡＣＨ)是常见身材不成比例的侏儒 ,其病因是由于遗传性软骨发育不全导致的骨生长性疾病。成纤维细胞生长因子受体 3(ＦＧＦＲ3)基因编码序列的遗传或突变己被确认为绝大多数ＡＣＨ的病因[1 6] 。1　流行病学ＡＣＨ可发生在所有人种 ,男女两性发病。发病率为1/ 2 0 0 0 0～ 2 6 0 0 0 ,80 %以上为散发性 ,为新生突变。 2 0 %以下为家族性。遗传方式为 :如果父母一方患ＡＣＨ ,其子女遗传机会为 2 5 % ;如果父母双方均患ＡＣＨ ,其子女遗传机…     

肝细胞癌患者中p53基因的突变研究

为了解肝细胞癌（ＨＣＣ）中ｐ５３基因的突变情况，收集８６例ＨＣＣ手术切除标本，采用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ／ＳＳＣＰ）、聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ／ＲＦＬＰ）和ＤＮＡ序列分析，研究了ｐ５３基因的突变情况。８６例ＨＣＣ中，ｐ５３基因的突变率为３６％，其中，密码子２４９的突变率为３３．７％，１例ＳＳＣＰ和ＲＦＬＰ均提示密码子２４９存在突变者经ＤＮＡ序列分析显示密码子２４９的第三个碱基发生了ＡＧＧ／ＡｒｇＡＧＴ／Ｓｅｒ突变。以上结果提示，ＨＣＣ中，ｐ５３基因的突变主要以点突变为主，主要发生在密码子２４９，其突变率、突变谱和突变方式与启东等ＨＣＣ高度流行区相似     

血管内皮生长因子家族及其受体的结构、功能分析及应用研究进展

血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)是目前所知唯一特异作用于血管内皮细胞的一种生长因子 ,最早在培养的肿瘤细胞系中发现。ＶＥＧＦ强烈诱导血管形成 ,近来发现也对维持内皮细胞的存活发挥作用[1 ] 。ＶＥＧＦ及其受体 (ＶＥＧＦＲ)有多种类型 ,近年的研究显示了不同因子及受体类型在基因及蛋白质结构上的差异 ,并进一步拓展了它们的应用。1　ＶＥＧＦ的基因及蛋白质结构比较除了最常见的原型ＶＥＧＦ(ｐｒｏｔｏｔｙｐｅｖｅｇｆ)外 ,近年还相继发现了ＰＩＧＦ(胎盘生长因子 )、ＶＥＧＦＢ、ＶＥＧＦＣ、ＶＥＧＦＤ和羊痘疮病毒ＶＥＧＦ ,即Ｖ…     

上海地区汉人瘦素受体基因Gln223Arg变异的研究

目的 探讨瘦素受体基因Ｇｌｎ２２３Ａｒｇ变异与肥胖的关系。方法 ３５９例无亲缘关系的上海地区汉人及６６例白种人运用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法（ＭｓｐＩ限制性内切酶（检测瘦素受体基因Ｇｌｎ２２３Ａｒｇ变异的基因型。结果 中国人中ＧＧ,ＧＡ及ＡＡ基因型频率分别为０．７８９,０．２００及０．０１１,Ｇ及Ａ等位基因频率分别为０．８８９及０．１１１,与本研究组中白种人的基因型及等位基因频率分布有显著差异（Ｐ＝２。     

血管内皮生长因子在肾细胞癌的表达及临床意义

肾细胞癌 (ＲＣＣ)是最常见的恶性肾肿瘤 ,目前诊断主要依据影像学检查 ,术前确诊常常发生困难 ,早期发现和术后随访监测也缺乏理想的方法。有研究表明 ,血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)在肿瘤血管生成过程中起着十分重要的作用[1] 。并在相当一部分肿瘤患者的血清或尿液中检测到ＶＥＧＦ的升高[2 ] 。肾细胞癌是典型的血管生成活跃的实体肿瘤 ,研究表明ＶＥＧＦ在肾细胞癌组织中过度表达[3] ,ＶＥＧＦ在肾细胞癌患者血清或尿液中亦升高[4 ] 。我们用ＥＬＩＳＡ方法研究了ＲＣＣ患者血清和尿液中ＶＥＧＦ的水平及其来源 ,对ＶＥＧＦ作为ＲＣＣ…     

医药简讯

●有作者研究了凝血因子Ｖ和凝血酶原因子基因突变(ｆａｃｔｏｒＶＬｅｉｄｅｎ和Ｇ20210Ａｐｒｏｔｈｒｏｍｂｉｎ)与深静脉血栓复发危险性的关系。患者是否携带ＦａｃｔｏｒＶＬｅｉｄｅｎ突变基因对,复发深静脉血栓的危险并无差别;同时携带两种突变基因的患者发生第一?..     

瘤细胞转移能力分析的体外研究

ＲＡＢ5Ａ过表达与人肺腺癌转移相关[1] 。构建重组ＲＡＢ5Ａ正义真核表达载体和反义ＲＮＡ[1-5] 、转染ＡＧＺＹ83-9及Ａｎｉｐ973细胞 ,发现ＲＡＢ5Ａ高表达在人肺腺癌细胞的转移表型和转移特性形成中有重要生物学作用。1　材料和方法1.1　细胞系标本　ＡＧＺＹ83-9、Ａｎｉｐ973、ＲＡＢ5Ａ -ＡＧＺＹ8-3、Ａｎｉｐ9731.2　主要仪器和试剂　 (1)Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室 (ＵＳＡ) ;(2 ) 12孔培养板 (ＵＳＡ) ;(3)ＰＶＰＦ孔径 12 μｍ ;(4 )ＦＮ。1.3　方　法(1)涂趋化剂ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ 10 μｇ于ＰＶＰＦ膜的下室面。 (2 )将膜用…     

L-精氨酸及其在盐敏感性高血压中的作用

早在一个世纪以前 ,德国科学家就已经发现、鉴定、分离、并命名了作为蛋白质成分之一的精氨酸 (Ａｒｇ) ,但直到 1 980年 ,Ｆｕｒｃｈｇｏｔｔ和Ｚａｗａｄｚｋｉ提出了内皮依赖性舒张因子 (ＥＤＲＦ)的概念及其在血管舒张中的作用 ,才为精氨酸的研究打开了一扇新的大门 ,最终引导我们逐渐了解了Ｌ -精氨酸 (Ｌ -Ａｒｇ)的主要代谢过程—ＮＯ (一氧化氮 )合成的途径及生理效应[1 ] 。近 2 0年来Ｌ -Ａｒｇ/ＮＯ代谢通路已成为国内外研究的热点 ,1 987年Ｐａｌｍｅｒ和Ｌｇａｒｒｏ提出ＥＤＲＦ为ＮＯ样物质 ,并发现Ｌ -Ａｒｇ为ＮＯ前体 ;1 …     

胃蛋白酶原C基因多态与胃癌遗传易感性的相关性研究

为了探讨遗传因素与胃癌的关系 ,我们选择胃蛋白酶原Ｃ(ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎＣ ,ＰＧＣ)基因作为研究的标志基因。有研究发现 ,在ＰＧＣ基因的 7～ 8内含子内存在 10 0ｂｐ的插入 缺失ＲＦＬＰ片段 ,并在 7～ 8内含子内存在 4种分子量不同的多态片段[1] 。在以前的研究中[2 ] ,我们也发现ＰＧＣ基因多态与胃癌发生之间存在某种联系。在本研究中我们通过聚合酶链反应 (ＰＣＲ)方法 ,检测了ＰＧＣ基因的多态 ,并进一步分析ＰＧＣ基因多态与胃癌发生之间的关系。一、资料与方法1 标本来源 :42例健康人外周血来自中国医科大学第一临床学院血库…     

错配PCR—RFLP检测乙型肝炎病毒X基因／C基因启动子变异

设计错配ＰＣＲ－限制性片段长度多态性分析（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）检测中国ＨＢＶ毒株Ｃ基因启动子（ＢＣＰ）区第２个ＡＴ丰富区的一对点突变；核苷酸（ｎｔ）１７６２的碱基由Ａ→Ｔ和１７６４的碱基由Ｇ→Ａ变异。结果发现在３２例慢性ＨＢＶ感染者中ＢＣＰ变异者有１０例总检出率为３１．２％。提示在我国ＨＢＶ毒株ＢＣＰ区这一联合估变较常见。ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术与序列分析结合，对于研究这一新发现的热点变异与临床的关系具     

人体结直肠癌Ki－ras基因点突变检测

采用ＰＣＲ和寡核苷酸探针杂交技术检测了３５例结直肠癌和５例息肉活检组织ｋｉ—ｒａｓ基因第１２位密码子的点突变。发现１０例结直肠癌具有点突变，其中ＧＧＴ→ＧＴＴ（Ｇｌｙ→Ｖａｌ）突变３例，ＧＧＴ→ＧＡＴ（Ｇｌｙ→Ａｓｐ）突变７例；１例息肉有突变（ＧＧＴ→ＧＴＴ）。     

VEGF可能与脑膜炎血脑屏障受损有关

荷兰学者Ｆｌｉｅｒ等的一项研究表明 ,细菌性脑膜炎时炎性细胞分泌血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ) ,而且该因子可能与血脑屏障的受损有关。ＶＥＧＦ是一种强有力的血管通透性因子和脑水肿的介导物。为评估在细菌性脑膜炎时ＶＥＧＦ的作用 ,研究者测定了 3 7例细菌性脑膜炎和 51例对照病例 (包括 1 6例病毒性脑膜炎病人 )的脑脊液和血液中的ＶＥＧＦ。细菌性脑膜炎和对照病例血ＶＥＧＦ的水平相似。在 3 7例细菌性脑膜炎病人中 ,有 1 1例 ( 3 0 % )病人的脑脊液中检测到了ＶＥＧＦ(范围为 <2 5～ 63 3ｐｇ ｍｌ) ;但在对照组未检测到ＶＥＧＦ…     

胰岛素样生长因子1与糖尿病肾病

自从确定生长激素和胰岛素样生长因子 (ＧＨ ＩＧＦｓ)的特征至今仅仅 2 0多年 ,由于现代分子生物学技术的发展 ,使开发ＩＧＦ 1的临床应用及其与糖尿病肾病 (ＤＮ)方面的研究迅速展开 ,本文旨在综述ＩＧＦ 1的生理及其与肾脏和ＤＮ发生发展方面的研究进展。1　ＩＧＦ 1的生理ＩＧＦｓ是一组分子量约为 75 0 0的多肽 ,目前发现ＩＧＦ 1和ＩＧＦ 2两种 ,ＩＧＦ 1是由 70个氨基酸组成的单链多肽 ,Ａ区和Ｂ区近 70 %与ＩＧＦ 2等同 ,近 5 0 %与胰岛素同源。ＩＧＦ 1基因核苷酸序列含 6个外显子〔1〕,外显子 1和 2包含 5′端非翻译区 (ＵＴＲ)和…     

TTV及其相关病毒

1997年末 ,Ｎｉｓｈｉｚａｗａ等[1] 应用ＲＤＡ (ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎａｌｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓ)技术从 1例输血后非甲～庚型肝炎患者血清中克隆到一个 5 0 0ｂｐ长的ＤＮＡ片段 ,命名为Ｎ2 2克隆 ,经检索发现其与ＧｅｎＢａｎｋ中收录的人、动物、真菌、细菌等基因组均缺乏同源性 ,而类似于病毒的基因结构。因此 ,依照该病人姓氏缩写命名为ＴＴ病毒 (ＴＴＶ) [1] 。随后的研究表明ＴＴＶ为无包膜的单股环状负链ＤＮＡ病毒[2 ,3 ] 。在ＴＴＶ发现后的几年中 ,有关的研究取得了很大进展。除以原始株ＴＡ2 78为代表…     

KAI1基因的肿瘤转移抑制作用

ＫＡＩ1(ＫａｎｇＡｉ 1)基因是最近发现的一个新的肿瘤转移抑制基因 ,1995年Ｄｏｎｇ等[1] 首先发现并分离了该基因。ＫＡＩ1基因位于人染色体 11ｐ11 2 ,编码一个由 2 6 7个氨基酸组成的蛋白质 ,研究发现ＫＡＩ1蛋白与ＣＤ82结构相同。ＣＤ82为一种白细胞膜糖蛋白[2 ] ,在不同的实验室 ,又称为Ｒ2 [3] 、Ｃ33[4 ] 、ＩＡ4 [5]和 4Ｆ9[6 ] 。ＫＡＩ1蛋白属于一个结构特殊的家族———ＴＭ4ＳＦ (ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ 4ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙｏｒｔｅｔｒａｓｐａｎｓｕｐｅｒ ｆａｍｉｌｙ) ,ＴＭ4ＳＦ蛋白具有 4个高度保守的疏水…     

血管内皮生长因子基因在成人肝组织中的表达

血管内皮生长因子 (ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ)是一类具有高度特异性的促血管内皮细胞分裂原 ,通过促进新生血管的形成 ,参与胚胎发育、创伤组织的修复、缺血、炎症及肿瘤的发生等多种病理生理过程[1] 。但在正常组织中 ＶＥＧＦ 基因的表达 ,文献报道较少。为此 ,本研究通过了解其在正常成人肝脏组织中的表达 ,探讨ＶＥＧＦ的基因表达调控及其生物学意义。1　材料与方法1 1　材料　正常成人肝ｃＤＮＡ文库 (美国Ｃｌｏｎｔｅｃｈ公司产品 ) ;ＴａｑＤＮＡ聚合酶 ,10×ＰＣＲＢｕｆｆｅｒ,2 5ｍＭＭｇＣｌ2 ,10ｍＭｄＮＴＰ(Ｔａｋａｒａ公司产品 )