阿托伐他汀对THP-1源性巨噬细胞CD40及MMP-9的抑制作用

目的 观察他汀类药物对人单核／巨噬细胞（THP-1细胞）基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达是否存在抑制作用及其作用是否与CD40—CD40L信号通路有关，探讨他汀类药物可能的非调脂抗动脉粥样硬化机制。方法 先加入不同浓度的阿托伐他汀（1．25μmol／L、2．50μmol／L、5．00μmol／L）作用1h，再向培养的THP-1细胞中加入氧化型低密度脂蛋白（80mg／L）共同孵育24h，分别运用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测CD40及MMP-9mRNA，酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定培养基的MMP-9浓度。结果 阿托伐他汀抑制THP-1细胞CD40和MMP-9mRNA的表达，同时抑制MMP-9蛋白的表达（P〈0．05），并呈浓度依赖性。结论 阿托伐他汀能抑制THP-1细胞CD40的表达以及MMP-9的表达和分泌，这种作用可能是他汀类药物减轻动脉粥样斑块炎症，防止斑块破裂的机制之一。     

瑞舒伐他汀联合氨氯地平对ox-LDL诱导的人单核巨噬细胞MMP-9mRNA和蛋白表达的影响

目的瑞舒伐他汀联合氨氯地平降低对氧化修饰的低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的健康人单核巨噬细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）mRNA及蛋白的表达进而促进粥样斑块的稳定。方法体外密度梯度离心法分离并培养单核巨噬细胞并传至2代～4代用于实验,根据实验要求分为空白对照组（单核巨噬细胞培养24h）、ox-LDL对照组（ox-LDL 100μg/mL诱导后单独培养24h）、瑞舒伐他汀组（单独加入瑞舒伐他汀0.01μmol/L、0.1μmol/L、1.0μmol/L培养24h）、瑞舒伐他汀联合氨氯地平组（加入不同剂量瑞舒伐他汀联合氨氯地平0.01μmol/L、0.1μmol/L、1.0μmol/L共同作用24h）;分别提取各组细胞RNA,用半定量逆转录聚合酶链式反应法（RT-PCR）测定MMP-9mRNA表达;用ELISA法测定MMP-9的蛋白含量。结果单核巨噬细胞经100μg/mLox-LDL诱导后,与空白对照组比较MMP-9mRNA和蛋白表达显著增加;ox-LDL诱导后不同剂量瑞舒伐他汀联合氨氯地平组,与ox-LDL对照组及瑞舒伐他汀组比较可加强抑制MMP-9mRNA和蛋白表达作用。并呈剂量-效应关系,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论外周血单核巨噬细胞在ox-LDL诱导后,MMP-9mRNA和蛋白含量明显增加,瑞舒伐他汀与氨氯地平联合后,可以加强抑制单核巨噬细胞MMP-9mRNA和蛋白表达的作用,进而增强急性冠脉综合征（ACS）患者粥样斑块的稳定性。     

肾康灵对氧化低密度脂蛋白诱导系膜细胞增殖后 MAPK 信号通路的影响

目的探讨肾康灵干预小儿原发性肾病综合征(PPNS)的作用机制。方法将诱导系膜细胞(MCs)随机分为正常对照组、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)组、ox-LDL+CXCR6(CXCL16受体CXCR6)组、肾康灵低浓度组(1.5g/ml)、肾康灵高浓度组(3.0g/ml)、阿托伐他汀低浓度组(50μmol/L)、阿托伐他汀高浓度组(100μmol/L),观察各组MCs的CXCL16、CD36蛋白含量、MAPK信号通路相关蛋白(p38、ERK1/2、SAPK/JNK)及核因子-κB p65(NF-κB p65)的磷酸化水平。结果 ox-LDL+CXCR6组较正常对照组CXCL16、CD36蛋白含量、MAPK信号通路相关蛋白(p38、ERK1/2、SAPK/JNK)及NF-κB p65的磷酸化水平显著升高(P0.01);与ox-LDL组及ox-LDL+CXCR6组比较,肾康灵低、高浓度组及阿托伐他汀低、高浓度组的CXCL16、CD36蛋白含量、p38、SAPK/JNK、NF-κB p65的磷酸化水平显著降低(P0.01),肾康灵低、高浓度组及阿托伐他汀高浓度组的ERK1/2的磷酸化水平显著降低(P0.05或P0.01);肾康灵高浓度组CXCL16、CD13蛋白含量、SAPK/JNK、NF-κB p65的磷酸化水平明显低于阿托伐他汀低浓度组(P0.05)。结论肾康灵可能通过抑制MAPK信号通路相关蛋白(p38、ERK1/2、SAPK/JNK)、NF-κB p65及CXCL16、CD36,有效抑制MCs的增殖,从而实现减轻或延缓肾小球纤维化的作用。     

清热、活血类中药有效成分对THP-1巨噬泡沫细胞形成及分泌IL-1β、TNF-α的影响

目的探讨清热、活血类中药有效成分抑制巨噬细胞泡沫化的作用及机制。方法以氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)和细菌脂多糖(LPS)诱导THP-1细胞成为巨噬泡沫细胞,采用油红O染色脂质半定量分析法和ELISA法检测中药有效成分对THP-1巨噬泡沫细胞形成及培养上清中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的影响。结果20μmol/L的黄连素、黄芩苷、大黄素、丹参酮ⅡA和100 mg/L的三七总皂苷可显著降低THP-1巨噬泡沫细胞油红O染色阳性率;20μmol/L的大黄素、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA可显著降低THP-1巨噬细胞的IL-1β分泌量;20μmol/L的黄连素可显著降低THP-1巨噬细胞的TNF-α分泌量。结论清热、活血类中药有效成分可抑制巨噬细胞泡沫化及其炎症因子IL-1β和/或TNF-α的分泌,抑制炎症因子的释放可能是其抗泡沫细胞形成的机制之一。     

羟基红花黄色素A联合阿托伐他汀对抗大鼠缺血再灌注心肌炎症反应和凋亡

目的观察羟基红花黄色素A联合阿托伐他汀预处理对大鼠心肌缺血-再灌注损伤(MIRI)肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)和白介素-l(inter leukin-1,IL-1)、心肌细胞内Caspases-3和NF-κB表达的影响,探讨其心肌保护作用机制。方法将40只雄性SD大鼠随机等分为4组,假手术组(生理盐水5 m L/d)、缺血再灌注组(生理盐水5 m L/d)、阿托伐他汀预处理组[阿托伐他汀20 mg/(kg·d)]和羟基红花黄色素A联合阿托伐他汀预处理组[羟基红花黄色素A 10 mg/(kg·d)+阿托伐他汀20 mg/(kg·d)]。灌胃7 d后,第8天制作大鼠在体心肌I/R模型,结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min后,各组术后分别应用心脏超声检测心功能指标,HE染色观察心肌组织病理学变化,用ELISA法检测心肌中TNF-α和IL-1β浓度,Western blot检测活化Caspase-3和NF-κB的表达。结果与缺血再灌注组比较,阿托伐他汀预处理组心功能指标、组织病理改变明显改善(P0.05),羟基红花黄色素A联合阿托伐他汀预处理组改善更显著;与缺血再灌注组比较,阿托伐他汀预处理组TNF-α和IL-1β浓度明显减少(P0.05),Caspases-3和NF-κB表达明显减少(P0.05);与阿托伐他汀预处理组比较,羟基红花黄色素A联合阿托伐他汀预处理组TNF-α、IL-1β、Caspases-3及NF-κB表达减少更为明显(P0.05)。结论羟基红花黄色素A联合阿托伐他汀预处理明显抑制炎症反应,减少细胞凋亡,减轻MIRI损伤,呈现加强的心肌保护作用,其机制可能与抑制心肌NF-KB表达有关。     

艳山姜挥发油调控PPAR γ/ABCA1信号抑制巨噬细胞源性泡沫细胞形成的作用机制

目的:探讨艳山姜挥发油(EOFAZ)调控PPARγ/ABCA1抑制氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞源性泡沫细胞形成的作用机制.方法:将THP-1细胞用佛波酯(PMA,100 μg/L)诱导分化为巨噬细胞,噻唑蓝(MTT)法检测EOFAZ对巨噬细胞活力的影响.油红0染色法检测脂滴的含量;酶法检测总胆固醇(T...     

他汀类药物治疗急性脑梗死对患者颈动脉粥样硬化斑块及炎症反应的影响

目的探讨瑞舒伐他汀或阿托伐他汀治疗急性脑梗死的疗效及对患者颈动脉粥样硬化斑块和炎症反应的影响。方法选择急性脑梗死患者129例,采用随机数字表法分为瑞舒伐他汀组、阿托伐他汀组和对照组,每组43例;对照组给予常规治疗,不服用他汀类药物;瑞舒伐他汀组在常规治疗基础上给予瑞舒伐他汀10 mg/次,1次/d;阿托伐他汀组在常规治疗基础上给予阿托伐他汀20 mg/次,1次/d;评价各组临床疗效、IMT值、炎症反应指标及不良反应发生情况。结果治疗2周后,瑞舒伐他汀组、阿托伐他汀组临床疗效、IMT值、血清hs-CRP水平、血清IL-10水平、血清IL-17水平均优于对照组,瑞舒伐他汀组优于阿托伐他汀组,组间比较差异有统计学意义(P均0.05);治疗2周后瑞舒伐他汀组、阿托伐他汀组患者ALT水平升高,与治疗前和对照组比较有统计学意义(P均0.05),ALT升高3倍以上时停药后逐渐恢复;3组治疗前CK、BUN、Cr组间比较差异均无统计学意义(P均0.05),3组患者均未出现横纹肌溶解、肝功能衰竭等严重不良反应。结论瑞舒伐他汀治疗急性脑梗死的疗效理想,安全性好,可显著改善患者IMT值和炎症反应。     

中药脑心通对血管内皮细胞一氧化氮和内皮素-1的影响

目的 观察脑心通对氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)分泌量的影响.方法 以培养HUVEC作为靶细胞,在内皮细胞培养基中加入Ox-LDL(50 mg/L)制备细胞损伤模型,并以不同浓度脑心通含药血清预先进行干预,分别采用硝酸还原酶法和放免法检测细胞上清液中的NO及ET-1的含量.结果 Ox-LDL作用HUVEC 24h后,HUVEC上清液中NO含量明显降低,而ET-1的含量明显升高,均明显高于正常对照组(P＜0.05);而预先加入脑心通含药血清或阿托伐他汀药液组NO含量明显升高,且在加入步长脑心通含药血清组,这种作用在一定剂量范围内随药物剂量的增加而增强(P＜0.05).结论 步长脑心通能够通过促进内皮细胞NO的合成与释放从而发挥对血管内皮细胞的保护作用,有利于减轻或抑制动脉粥样硬化的形成与发展.     

不同剂量阿托伐他汀对对比剂致肾功能损伤短期改善的观察

目的观察不同剂量阿托伐他汀（立普妥40 mg和10 mg）对对比剂导致肾功能损伤的短期影响。方法选择80例行冠状动脉造影及诊断治疗的患者,随机分为A组和B组,每组40例。入院后A组予阿托伐他汀40 mg顿服,B组予阿托伐他汀10 mg口服,术前根据患者的一般状况给予充分水化疗法。观察术前、术后血肌酐（Scr）、血β2-微球蛋白（β2-MG）、血清胱抑素C（Cys-c）、高敏C反应蛋白（hs-CRP）及尿α1-微球蛋白（α1-MG）的变化情况。结果术后两组Scr 24 h,72 h较术前升高,但差异无统计学意义。A组术后24 h、72 h血β2-MG明显低于B组[（2.28±0.43）mg/L比（2.66±0.48）mg/L,P〈0.01]、[（2.46±0.35）mg/L比（2.71±0.43）mg/L,P〈0.01];A组术后24 h、72 h血清Cys-c显著低于B组[（0.90±0.21）mg/L比（1.04±0.32）mg/L,P〈0.01]、[（0.84±0.15）mg/L比（0.93±0.20）mg/L,P〈0.01]。A组术后24h、72hhs-CRP明显低于B组[（4.33±1.61）mg、L比（6.98±2.55）mg/L,P〈0.01]、[（4.27±1.44）mg/L比（5.76±2.02）mg/L,P〈0.01];A组术后24h、72h尿α1-MG显著低于B组[（10.60±3.67）mg/L比（9.74±3.04）mg/L,P〈0.01]、[（9.74±3.04）mg/L比（12.39±3.96）mg/L,P〈0.01]。结论行冠脉造影诊断及治疗患者术前服用40 mg阿托伐他汀较10 mg能减少对比剂对肾功能的损伤。     

梓醇对NF-κB活化减轻ox-LDL诱导的内皮细胞损伤的影响

目的:观察梓醇对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导EA.hy926细胞炎症因子的影响,并从核因子-κB(NF-κB)的活化角度探讨其可能的作用机制。方法:将常规培养的EA.hy926细胞随机分为空白组,梓醇组(0.5 mmol·L-1),ox-LDL组(100 mg·L-1),梓醇高、低剂量组(0.5,0.05 mmol·L-1),各药物组先孵育24 h,空白组与ox-LDL组给予空白配养基孵育24 h,孵育后加入100 mg·L-1ox-LDL继续培养24 h。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)mRNA和蛋白的表达;噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;Hoechst细胞核染色检测细胞凋亡比率;Western blot和酶联免疫吸附测定(ELISA)检测NF-κB的活化。结果:与空白组比较,梓醇保护组细胞损伤明显减轻,TNF-α,VCAM-1 mRNA及蛋白表达均显著降低,NF-κB活化明显受抑制,且呈剂量依赖性(P0.05)。结论:梓醇能够有效减轻ox-LDL诱导EA.hy926细胞炎症反应,保护EA.hy926细胞,其机制可能与其抑制NF-κB活化有关。     

化瘀祛痰方药对巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1、CD36表达的影响

目的:观察化瘀祛痰方药及其拆方对THP-1源性泡沫细胞腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)、CD36表达的影响,探讨该方药的作用机制,并比较方药全方及各拆方的疗效及调控作用。方法:体外培养THP-1细胞,佛波酯(PMA)使之巨噬化,氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)使巨噬细胞泡沫化。细胞随机分为空白对照组、模型组、补气组、化瘀组、祛痰组和全方组。油红O染色观察细胞浆脂滴变化,酶法测定细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)、胆固醇酯(CE)的含量,并计算CE/TC值。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量分析ABCA1、CD36 mRNA水平。结果:模型组细胞TC、FC、CE含量及CE/TC值均显著高于对照组(P<0.01);与模型组相比,全方组和祛痰组细胞TC、FC、CE含量及CE/TC值均显著降低。RT-PCR结果提示模型组细胞ABCA1、CD36 mRNA水平显著升高;而化瘀祛痰方药及祛痰拆方含药血清可显著升高ABCA1 mRNA,显著降低CD36 mRNA水平。结论:化瘀祛痰方药及祛痰方可抑制ox-LDL诱导的THP-1细胞泡沫化,该作用可能与其上调ABCA1基因、下调CD36基因表达,从而减弱THP-1细胞对ox-LDL摄取有关。     

七叶皂苷钠对ox-LDL诱导的U937细胞表达炎症因子的影响

 目的 研究七叶皂苷钠对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人单核细胞系U937细胞所产生的一氧化氮(NO) 以及对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-6（IL-6）表达的影响。方法 将培养的U937细胞分为正常细胞对照组、ox-LDL组和七叶皂苷钠（20、10、5 μg·mL-1）药物干预组。ox-LDL组是将U937细胞与40 mg·L-1的ox-LDL共同孵育24 h;药物干预组是将不同质量浓度的七叶皂苷钠与40 mg·L-1的ox-LDL同时加入培养的U937细胞,共同孵育24 h。应用硝酸还原酶法测定NO的分泌量,酶联免疫吸附法测定TNF-α和IL-6的蛋白表达。结果 ox-LDL可刺激U937细胞分泌NO,并促使TNF-α和IL-6的表达增加;20、10 μg·mL-1的七叶皂苷钠能够降低ox-LDL诱导的上述炎症因子的升高。结论 七叶皂苷钠能抑制ox-LDL诱导的U937细胞表达NO、TNF-α和IL-6。     

芎芍胶囊含药血清对RAW264.7源性泡沫细胞胆固醇流出的影响

目的观察芎芍胶囊大鼠含药血清中脂质对RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出的影响。方法采用80 mg/L氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导巨噬细胞24 h,建立RAW264.7源性泡沫细胞模型,添加大鼠含药血清,将细胞分为对照组(正常巨噬细胞)、模型组(80 mg/L ox-LDL)、正常血清组(10%正常大鼠血清)及正常血清对照组(80 mg/L ox-LDL+10%正常大鼠血清)、辛伐他汀组(80 mg/L ox-LDL+10%辛伐他汀血清)、芎芍胶囊血清组(80 mg/L ox-LDL+10%芎芍胶囊血清)。通过油红O染色观察细胞内胆固醇分布;以胆固醇检测试剂盒检测正常血清组、辛伐他汀血清组、芎芍胶囊血清组血清总胆固醇(TC)及游离胆固醇(FC)含量,检测各组细胞内TC及FC含量。结果模型组细胞形态及染色结果符合泡沫细胞标准;正常血清组、正常血清对照组、辛伐他汀血清组、芎芍胶囊血清组细胞内均含有大量脂滴,且各组细胞内脂质着色无明显差异。与正常血清组比较,辛伐他汀血清、芎芍胶囊血清组TC差异均无统计学意义(P>0.05),辛伐他汀血清组FC含量升高(P<0.01),芎芍胶囊血清组FC含量降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组、正常血清组、正常血清对照组、辛伐他汀血清组细胞内TC、FC含量均增加(P<0.01),芎芍胶囊血清组细胞内TC含量无明显增加(P=0.09),FC含量明显增加(P<0.05)。与模型组比较,芎芍胶囊血清组细胞内TC含量有所降低(P=0.034),FC含量浓度差异无统计学意义(P=0.478);与正常血清对照组比较,芎芍胶囊血清组TC含量降低(P=0.026),FC含量差异无统计学意义(P=0.354)。结论大鼠源性血清本身含有大量脂质,可造成RAW264.7细胞出现胆固醇蓄积,甚至泡沫化,掩盖了芎芍胶囊可能促进泡沫细胞胆固醇流出的作用,不适用于探索RAW264.7源性泡沫细胞胆固醇流出的药物研究。     

豨莶草醇提物调控TLRs/NF-κB通路及NLRP3炎症小体干预痛风性关节炎的机制研究

目的探讨豨莶草醇提物通过Toll样受体(TLRs)/核因子κB(NF-κB)信号通路及NOD样受体蛋白3(NLRP3)干预痛风性关节炎(GA)的作用机制。方法采用脂多糖(LPS)联合尿酸钠结晶(MSU)刺激急性单核细胞白血病细胞(THP-1)源性巨噬细胞,建立GA炎症细胞模型;以豨莶草醇提物300、200、100μg·mL^-1不同浓度进行干预。采用CCK-8法检测细胞活力;ELISA法检测细胞上清中白细胞介素-1β(IL-1β)的水平;qRT-PCR法检测TLRs/NF-κB信号通路相关基因(TLR2、TLR4、MYD88、IRAK-1、TRAF-6、TAK-1、NF-κB、IL-1β)及NLRP3 m RNA的表达;Western Blot法检测NF-κB、NLRP3、IL-1β蛋白的表达。结果与对照组比较,豨莶草醇提物300、200、100μg·mL^-1浓度对THP-1巨噬细胞活力均无明显影响(P>0.05);模型组的IL-1β水平明显升高(P<0.05),TLRs/NF-κB信号通路相关基因及NLRP3 mRNA表达水平均明显上调(P<0.05),NF-κB、NLRP3、IL-1β蛋白表达水平明显上调(P<0.05)。与模型组比较,豨莶草醇提物300、200、100μg·mL^-1浓度组的细胞IL-1β水平明显降低(P<0.05),TLRs/NF-κB信号通路相关基因及NLRP3 mRNA表达水平均不同程度下调(P<0.05),NF-κB、NLRP3及IL-1β蛋白表达水平亦不同程度下调(P<0.05)。结论豨莶草醇提物可能通过调控TLRs/NF-κB信号通路及抑制NLRP3炎症小体活化,减少炎症因子的产生与释放,进而减轻痛风性炎症反应。     

人参皂苷对Aβ诱导单核细胞培养上清液致神经细胞损伤的影响

 目的研究人参皂苷对β-淀粉样肽(Aβ)诱导THP-1单核细胞培养上清液致SK-N-SH神经细胞损伤模型的影响及其作用机制。方法用乳酸脱氢酶(LDH)漏出率观察SK-N-SH细胞的损伤程度。用放射免疫法测定THP-1单核细胞培养上清液中炎性细胞因子IL-1β,IL-8和TNFα的浓度。结果人参皂苷与THP-1单核细胞预孵育30 min,再用Aβ1-40(125 nmol·L^-1)与THP-1细胞孵育2 h,离心取上清液加入到SK-N-SH神经细胞培养中孵育24 h。结果显示,GS(100和200 mg·L^-1)可明显减少LDH从神经细胞漏出,减轻细胞膜损伤;人参皂苷(50,100和200 mg·L^-1)显著减少THP-1单核细胞培养上清液中细胞炎性细胞因子IL-1β,IL-8和TNFα的含量。结论人参皂苷可以通过抑制炎性细胞因子的表达而减少对神经元的损伤,因此对于AD的防治具有潜在的应用价值。     

三七总皂苷对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞的细胞间黏附分子-1的影响

目的 研究三七总皂苷对氧化型低密度脂蛋白(ox LDL )损伤血管内皮细胞的保护作用,以探讨其治疗动脉硬化闭塞症 (ASO)的机制。方法 以培养原代人脐静脉内皮细胞（HUVEC）作为靶细胞, 用ox LDL造成HUVEC损伤模型，以三七总皂苷进行干预。光镜下观察细胞形态变化,MTT法检测细胞活性；采用蛋白定量法检测HUVEC与单核细胞的黏附率；用流式细胞仪测定HUVEC的细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的蛋白表达。结果 ox-LDL作用HUVEC后12、24 h时，HUVEC损伤明显，细胞活性显著降低，人单核细胞与HUVEC的黏附率显著升高, HUVEC的ICAM 1的蛋白表达水平也明显升高, 均明显高于正常对照组(P＜0.05，P＜0.01),而三七总皂苷能使ox-LDL损伤的HUVEC形态趋于正常,活性增强，并明显降低人单核细胞与HUVEC的黏附率，显著降低ICAM-1蛋白的表达水平，与ox-LDL组比较差异有统计学意义(P＜0.05，P＜0.01)，这种作用随着剂量的增加而增强。结论 三七总皂苷能通过下调内皮细胞表面黏附分子的表达抑制单核－血管内皮细胞黏附,从而发挥对血管内皮细胞的保护作用，这可能是其治疗ASO的机制之一。     

艳山姜挥发油通过调控巨噬细胞CD36和ABCA1表达抑制泡沫细胞的形成

目的:观察艳山姜挥发油对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导巨噬细胞转化为泡沫细胞的抑制作用,并探索其机制。方法:使用佛波酯(PMA,100μg·L^-1)诱导人白血病单核细胞(THP-1)24 h后形成巨噬细胞,实验分为4组,分别为空白组(无血清RPMI 1640),模型组(80 mg·L^-1ox-LDL),艳山姜挥发油低剂量组(80 mg·L^-1ox-LDL+4μg·L^-1艳山姜挥发油),艳山姜挥发油高剂量组(80 g·L^-1ox-LDL+20μg·L^-1艳山姜挥发油)。噻唑蓝(MTT)比色法检测艳山姜挥发油对巨噬细胞的活性的影响,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测巨噬细胞中白细胞分化抗原36(CD36)和三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测巨噬细胞内胆固醇酯含量,油红O染色法检测巨噬细胞中脂质小滴的含量。结果:艳山姜挥发油对巨噬细胞无毒性。与空白组比较,模型组的巨噬细胞内脂滴和胆固醇酯的含量显著增加(P<0.01),CD36蛋白表达显著上升(P<0.01),ABCA1蛋白表达无显著变化;与模型组比较,艳山姜挥发油显著抑制巨噬细胞中脂滴和胆固醇酯的含量(P<0.01),下调CD36的蛋白表达(P<0.01),上调ABCA1蛋白的表达(P<0.01),艳山姜挥发油可抑制巨噬细胞向泡沫细胞的转化。结论:艳山姜挥发油对ox-LDL诱导的巨噬细胞向泡沫细胞的形成具有抑制作用,该药理作用与艳山姜挥发油下调巨噬细胞CD36和上调ABCA1蛋白的表达有关。     

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??OBJECTIVE To observe the effect of chlorogenic acid on the secretion of inflammatory cytokines and regulation mechanism of P38MAPK, NF-??B signaling pathway in human hepatic stellate cells induced by TGF-??1. METHODS Different concentrations of CGA worked in normal and activated hepatic stellate cells to make sure the appropriate drug concentration.The exponential growth phase cells were randomly divided into normal HSC group, normal HSC+CGA group, after cultured 48 h, the cells were cultured with 0??50??100 mg??L^-1 CGA for 24 h; HSC(TGF-??1) group?? HSC(TGF-??1 + CGA) group: after 24 h, the cells were induced by 10 ??g??L^-1 TGF-??1 for 24 h, and then cultured with 0, 50, 100 mg??L^-1 CGA for 24 h. The expression of ??-SMA protein was detected by immunocytochemistry, the expression of p-P38, P65 protein was detected by Western-blot, the expression of TNF-??, IL-6 mRNA was detected by real time quantitative PCR, and the content of TNF-??, IL-6 in the supernatant was detected by ELISA method. RESULTS The appropriate concentrations of CGA were 50 and 100 mg??L^-1, these concentration has no effect on normal HSC(P>0.05); after stimulation by TGF-??1, the expression of ??-SMA, p-P38, P65, TNF-??, IL-6 was increased(P<0.01), when activated HSC cells were treated with 50 and 100 mg??L^-1 CGA, the expression of ??-SMA, p-P38, P65, TNF-??, IL-6 was decreased(P<0.05, P<0.01). CONCLUSION CGA can inhibit the proliferation of activated HSC, regulate the secretion of inflammatory factors such as TNF-??, IL-6 by P38MAPK and NF-??B signaling pathway, inhibit the occurrence of liver fibrosis.