口服抗原对巨噬细胞共刺激分子CD80/CD86表达的影响

目的 探讨口服抗原对巨噬细胞(Mφ)共刺激分子CD80/CD86表达的影响及其在诱导妊娠免疫耐受中的作用.方法 自然流产小鼠(CBA/J×DBA/2)分为免疫组和未免疫组, 免疫组分别口服滋养细胞膜抗原(TMA2)和卵清蛋白(OVA),以正常妊娠小鼠(CBA/J×BALB/c)作为对照组.采用双标记流式细胞分析技术,分别检测各组小鼠脾脏及肠系膜淋巴结 (MLN) CD80 Mφ和CD86 Mφ的表达.结果 MLN内,未免疫组CD80 Mф表达明显高于对照组(P＜0.05),而CD86 Mφ含量明显低于对照组(P＜0.001);TMA2免疫组CD80 Mφ含量明显低于未免疫组(P＜0.05);OVA 免疫组CD86 Mφ含量明显高于未免疫组(P＜0.001).脾脏内,CD80 Mφ表达在各组间比较无显著差异;CD86Mφ表达, 未免疫组明显低于对照组(P＜0.05),TMA2免疫组显著低于未免疫组(P＜0.05),OVA免疫组则显著高于未免疫组(P＜0.001).结论 流产的发生与Mφ表面共刺激信号CD80/CD86异常有关;口服适当抗原可改变CD80/CD86 Mφ表达模式,诱导妊娠免疫耐受的形成.     

口服抗原对巨噬细胞共刺激分子CD80/CD86表达的影响

目的探讨口服抗原对巨噬细胞(M)共刺激分子CD80/CD86表达的影响及其在诱导妊娠免疫耐受中的作用。方法自然流产小鼠(CBA/J×DBA/2)分为免疫组和未免疫组,免疫组分别口服滋养细胞膜抗原(TMA2)和卵清蛋白(OVA),以正常妊娠小鼠(CBA/J×BALB/c)作为对照组。采用双标记流式细胞分析技术,分别检测各组小鼠脾脏及肠系膜淋巴结(MLN)CD80 M和CD86 M的表达。结果MLN内,未免疫组CD80 M表达明显高于对照组(P<0.05),而CD86 M含量明显低于对照组(P<0.001);TMA2免疫组CD80 M含量明显低于未免疫组(P<0.05);OVA免疫组CD86 M含量明显高于未免疫组(P<0.001)。脾脏内,CD80 M表达在各组间比较无显著差异;CD86M表达,未免疫组明显低于对照组(P<0.05),TMA2免疫组显著低于未免疫组(P<0.05),OVA免疫组则显著高于未免疫组(P<0.001)。结论流产的发生与M表面共刺激信号CD80/CD86异常有关;口服适当抗原可改变CD80/CD86 M表达模式,诱导妊娠免疫耐受的形成。     

小鼠念珠菌性阴道炎模型中树突状细胞表面共刺激分子的表达

目的研究小鼠念珠菌性阴道炎模型中树突状细胞（DC）表面共刺激分子的表达及作用。方法取8～10周龄ICR系雌性小鼠，设激素依赖型小鼠念珠菌性阴道炎模型组25只，生理盐水对照组25只及健康对照组5只，于感染后2、4、7、14、21d取材，进行阴道灌洗液真菌载量分析及阴道黏膜组织病理观察，流式细胞仪（FACS）分析念珠菌性阴道炎模型小鼠引流淋巴结及脾脏DC表面CD80、CD86表达的变化。结果模型组小鼠阴道灌洗液真菌载量分析显示自接种后第2天起即有高水平的菌落形成单位（CFU）计数，且持续到观察期末；阴道组织病理学检查可见大量菌丝附着黏膜表面和黏膜组织内，并有炎性细胞浸润。与健康对照组比较，模型组小鼠引流淋巴结DC表面CD86表达迅速上调，CD80表达则缓慢上调，脾脏DC表面CD80、CD86无明显变化。将各组阴道灌洗液中真菌载量与局部引流淋巴结中DC表面CD80、CD86表达百分比作相关性分析，结果显示与CD86表达呈明显正相关（r=0．946，P=0．004）；而与CD80表达无相关性（r=0．807，P=0．052）。结论DC可能通过上调CD86在阴道局部抗念珠菌感染免疫中发挥重要作用。     

重度烫伤小鼠脾脏树突状细胞的变化及意义

目的 探讨30％烫伤小鼠脾脏树突状细胞(DC)含量、活性变化及意义.方法 复制C57BL/6小鼠30％烫伤实验模型,分为正常对照组和实验组,实验组又分为4h、12h、24 h、48h及72 h组,每组10只小鼠.免疫荧光标记观察CD11c和共刺激分子CD86在脾脏DC中的表达,流式细胞术检测各组脾脏CD11c+DC含量变化.结果 正常对照组小鼠脾脏中见少量CD11c+DC；实验4h和12h组,脾脏CD11c+DC与CD86+DC含量均较正常对照组明显增加(P＜0.05)；自实验24h组,DC含量开始减少,其中反映DC活性的CD86+DC含量较正常对照组明显下降(P＜0.05).结论 脾脏DC在烧伤后短时间内一过性数量增多、活性增强,而后DC活性明显减弱且数量减少,提示烧伤后脾脏DC的变化与细胞免疫功能密切相关.     

可溶性和膜结合性CD14在类风湿关节炎患者外周血中的表达及临床意义

目的:探讨类风湿关节炎(RA)患者血清中可溶性CD14(sCD14)的水平及血浆单核细胞膜结合性CD14(mCD14)的表达与RA的关系。方法:收集78例RA患者和50名健康对照者(对照组)的外周血,酶联免疫吸附试验法检测血清中sCD14的表达,同时分离RA患者和对照组外周血单个核细胞,通过流式细胞术检测mCD14的表达水平,分析CD14的表达水平与RA的关系。结果:RA患者血清中的sCD14与mCD14表达水平均明显高于对照组(P<0.01),RA活动期患者sCD14与mCD14表达水平亦均明显高于RA缓解期患者(P<0.01)。结论:sCD14与mCD14在RA外周血中表达水平异常增高,它们可能参与了RA的发病或病情进展。     

产单核细胞李斯特菌感染小鼠脾脏树突状细胞亚群和表型的变化

目的:利用产单核细胞李斯特菌(LM)感染BALB/c小鼠模型,研究LM感染对小鼠脾脏树突状细胞(DC)亚群及表型变化的影响。方法:LM尾静脉感染BALB/c小鼠,感染后第3、5、7天取小鼠脾脏,平板稀释法进行脾脏细菌载量分析;流式细胞术检测脾脏DC亚群及DC相关表面分子CD80、CD86的表达情况。结果:感染小鼠脾脏细菌载量感染后第3天有高水平的菌落形成单位计数,随着时间的推移细菌的数量迅速降低,直到第7天基本被清除;CD11c+DC的数量在感染第5天高于对照组(P<0.05),CD4+DC的数量在感染后第5天和第7天均高于对照组(P<0.05),CD8α+DC的数量在感染后第3、5和7天及CD4-CD8α-DC的数量在感染后的第3和第5天亦均高于对照组(P<0.05～P<0.01);LM感染后,DC表面CD80和CD86的表达增加,均于感染后第3天和第5天显著高于对照组(P<0.01)。结论:LM感染早期,小鼠脾脏DC亚群出现的增殖和成熟表型特征性分子表达上调,决定了其在细胞免疫应答活化中的作用地位。     

生殖器疱疹患者外周血淋巴细胞B7-CD28/CTLA-4的检测分析

目的研究外周血B7-CD28/CTLA-4（CD152）T淋巴细胞活化协同刺激分子在生殖器疱疹（Genital herpes,GH）患者发病机制中的作用。方法用流式细胞仪检测51例GH患者和15例健康体检者外周血淋巴细胞CD80/86及CD4＋/CD8＋T淋巴细胞中B7-CD28/CTLA-4的表达。结果GH患者恢复组与对照组比较,CD80、CD86的阳性表达较对照组明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。其余各组间CD80、CD86比较差异无统计学意义。恢复组CD8＋/CD28阳性表达显著高于非复发组（P〈0.05）;非复发组显著高于对照组（P〈0.05）;复发组的CD4＋/CD152、CD8＋/CD152的阳性表达显著高于非复发组（P〈0.05）。其余各组间CD4＋/CD152、CD8＋/CD152及CD4＋/CD28、CD8＋/CD28表达差异无统计学意义。结论单纯疱疹病毒感染可诱导CD80、CD86、CD28和CD152活化增殖,高表达负性共刺激分子和分泌抑制性细胞因子,通过多种机制抑制机体的抗病毒免疫应答。     

甲型H1N1流感疫苗注射对小鼠CD4 +CD25 +Foxp3分子表达的影响

[目的]探讨甲型H1N1流感病毒疫苗对小鼠CD4+CD25+ Foxp3分子表达的影响。[方法]SPF级BALB/c小鼠72只,雌雄各半,用甲型H1N1流感病毒灭活疫苗免疫小鼠,按疫苗注射剂量随机分为高(0.3 mL)、中(0.2mL)、低(0.1 mL)3组及对照组,注射后4、8、12、19、26、34天处死动物,用FACS分析小鼠脾脏Foxp3、CD4+CD25+和CD4+CD25+ Foxp3三种分子表达变化。[结果]不同疫苗注射剂量对三种分子表达平均值影响不同。Foxp3和CD4+CD25+平均值,0.1 mL组明显低于对照组、而0.3 mL组明显高于对照组(P<0.01);CD4+CD25+ Foxp3平均值,0.1 mL组明显高于对照组(P<0.01)。随着造模时间的延长,各时间点分子表达平均值也不相同:Foxp3各时间点无明显差别;CD4+CD25+第34天明显低于第4天(P<0.05);CD4+CD25+ Foxp3第19、26天明显高于第4天(P<0.05)。[结论]应用甲流疫苗免疫可使小鼠CD4+CD25+ Foxp3 T细胞免疫功能增强。     

血管活性肠肽对裸鼠移植瘤CD80和CD86表达的影响

目的研究血管活性肠肽（VIP）对裸鼠移植瘤CD80、CD86表达的影响。方法建立裸鼠皮下实体瘤模型,当接种了MKN45实体瘤的裸鼠的肿瘤体积约为30 mm3时随机分为VIP组、VIP受体拮抗剂组、对照组3组,每组6只。皮下注射VIP或VIP受体拮抗剂10μg.100 ml-1.d-1,对照组PBS 100μl/d。4周后处死裸鼠,取出移植瘤,用免疫组织化学方法检测移植瘤组织中CD80、CD86蛋白表达的变化。结果 CD80、CD86在VIP处理组、VIP受体拮抗剂处理组、对照组瘤块组织中均有表达。VIP组CD80的表达明显低于VIP受体拮抗剂组（P〈0.05）;VIP组CD86蛋白的表达显明低于对照组（P〈0.05）;而其他各组间两者的表达差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论血管活性肠肽抑制裸鼠移植瘤中CD80、CD86的表达。     

CD28、CD80、CD86在银屑病皮损中的表达

目的研究共同刺激分子CD28、CD80、CD86在银屑病患者皮损中的表达及其在银屑病发生、发展中的作用.方法采用免疫组织化学ABC法检测22例银屑病患者皮损和15例正常对照皮肤中CD28、CD80、CD86的表达水平.结果银屑病皮损中CD28在真皮乳头、表皮基底层及棘层有较强的表达,与正常皮肤相比有显著性差异(P＜0.01);CD80、CD86在表皮颗粒层、棘层的表达相对正常皮肤均有明显的增强(P＜0.01).结论CD28、CD80、CD86在银屑病发病中起重要作用.     

CD80和CD86在食管癌组织中的表达

目的:观察食管癌组织中共刺激分子CD80(B7-1)和CD86(B7-2)的表达,以了解共刺激途径在食管癌肿瘤免疫中的作用和意义.方法:以正常食管组织和癌周组织为对照,采用免疫组织化学方法观察食管癌组织中CD80(B7-1)和CD86(B7-2)的表达.结果:CD80在食管癌组织中的表达阳性率及阳性频数均明显低于癌周组织和正常食管组织(P＜0.05、P＜0.01).CD86的表达阳性率在3组组织中无显著性差异(P＞0.05),但食管癌组织中阳性频数显著低于正常组织(P＜0.05).CD80和CD86存在细胞核,细胞质2种表达,缺乏细胞膜上的表达.结论:共刺激分子CD80与CD86在食管癌组织中呈低水平表达,并且存在着向细胞膜转运的障碍,可能与食管癌的发生、发展相关.     

CD80、CD83、CD86检测在非小细胞肺癌中的应用价值

目的 探讨CD80、CD83、CD86检测在非小细胞肺癌(NSCLC)中的临床意义。 方法 收集2012年1月-2015年12月在台州市第一人民医院治疗的NSCLC患者113例及健康对照组30例。采用流式细胞术分析NSCLC患者和健康对照者外周血CD80、CD83、CD86的表达水平。数据比较采用t检验和方差分析,患者生存时间采用Kaplan-Meier法和log-rank分析来确定是否有差异。 结果 NSCLC患者CD80、CD83、CD86水平明显低于正常对照组(t=10.026、4.963、4.870,均P<0.05),不同分期患者CD80、CD83水平差异有统计学意义(F=12.750、9.481,均P<0.05)。NSCLC患者术后CD80、CD83、CD86水平较术前明显升高(t=-3.648、-4.621、-4.257,均P<0.05)。CD80水平较高的NSCLC患者具有更好的生存率(P=0.040),而CD83、CD86水平与生存率无关(P=0.118、0.084)。 结论 检测NSCLC患者CD80、CD83、CD86水平具有一定价值,CD80、CD83与肿瘤分期密切相关,且CD80是NSCLC患者生存时间的独立预测因子。      

低剂量环磷酰胺对Lewis肺癌小鼠CD4+CD25+Treg细胞功能的影响

目的：研究低剂量环磷酰胺（CTX）单次注射对Lewis肺癌小鼠CD4⁺CD25⁺Treg细胞功能的影响,探讨CD4⁺CD25⁺Treg 细胞与肿瘤发生、发展的关系。方法：将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠右腋皮下,建立Lewis肺癌模型,随机分成3组：CTX组、肿瘤组、单纯对照组。采用CTX单次注射,观测各组肿瘤体积动态变化;采用流式细胞术检测各组小鼠脾脏CD4⁺CD25⁺Treg细胞数量变化;采用半定量RT-PCR方法检测各组小鼠脾脏Foxp3 mRNA表达水平;采用MTT法检测脾脏T淋巴细胞增殖功能;采用LDH释放法检测脾脏特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)细胞的杀伤活性。结果：与未治疗肿瘤组相比,CTX治疗可延缓荷19 d Lewis肺癌小鼠的肿瘤生长;CTX组小鼠脾脏CD4⁺CD25⁺Treg细胞数量低于肿瘤组（P< 0.05）;CTX组小鼠脾脏Foxp3 mRNA表达水平明显低于肿瘤组（P< 0.05）;CTX组小鼠脾脏T淋巴细胞功能明显高于肿瘤组（P<0. 05）;CTX组小鼠脾脏T淋巴细胞杀伤活性比肿瘤组略高,但变化不显著（P>0.05）。结论：CTX单次注射可降低Lewis肺癌小鼠脾脏CD4⁺CD25⁺Treg细胞的数量及Foxp3 mRNA表达,使T淋巴细胞增殖功能及脾细胞中CTLs杀伤功能增强。     

类风湿关节炎患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞测定及意义

目的探讨CD4+CD25high调节性T细胞(CD4+CD25highTreg)在类风湿性关节炎(RA)发病机制中的作用。方法采用流式细胞仪(FCM)检测42例RA患者及23例健康对照组外周血CD4+CD25highTreg的数量。结果 RA患者组及对照组外周血CD4+CD25highTreg的表达为(2.69±1.85)%和(3.83±0.89)%,RA患者组CD4+CD25highTreg的表达低于对照组,差异有统计学意义(<0.01)。结论 RA组患者CD4+CD25highTreg表达下降。     

益气补肾中药对自然流产模型小鼠CD28分子表达的影响

目的：观察益气补肾中药对小鼠母胎免疫的调节作用。方法：以CBA雌鼠×DBA/2雄鼠建立小鼠自然流产模型,将20只CBA孕鼠随机分成四组,每组5只。空白对照组（NS组）予生理盐水灌胃,西药组予环孢菌素A（CsA）灌胃,中药组予益气补肾中药灌胃,中西结合组予中药＋CsA灌胃。妊娠14天处死孕鼠,取脾脏与母胎界面组织,用流式细胞分析术（FCM）分析各组孕鼠CD28分子的表达情况。结果：CD28分子在脾脏表达趋势从高到低依次为：生理盐水组、西药组、中西结合组、中药组,各治疗组CD28分子表达均低于NS组（P〈0.05）;CD28分子在母胎界面上表达趋势从高到低依次为：生理盐水组、中药组、西药组、中西结合组,中西结合组CD28分子表达低于NS组、西药组和中药组（P〈0.05）;中药组、西药组CD28分子表达均低于NS组（P〈0.05）。结论：益气补肾中药对自然流产模型小鼠有下调CD28分子表达的作用趋势。     

协同刺激分子B7-1/2对日本血吸虫感染小鼠Th1/Th2细胞因子表达水平的影响

目的：观察协同刺激分子B7-1／2(CD80／CD86)对日本血吸虫感染小鼠后Th1／Th2细胞因子水平的影响，探讨B7-1／2介导Thl／Th2，免疫偏移对控制血吸虫虫卵肉芽肿的作用。方法：取小鼠感染后6、8、10和12w的脾淋巴细胞用抗CD80mAb和抗CD86mAb处理后培养。72h，用ELISA双抗体夹心法测定培养上清中IFN-γ和IL-4的表达水平的动态变化。结果：抗CD80mAb和抗CD86mAb对IFN-γ的抑制作用不明显，但二者均能显著抑制IL-4的表达水平，尤其是抗CD86mAb对IL-4抑制作用非常显著。结论：通过干预B7：CD28协同刺激途径可以调节Thl／Th2细胞因子的表达水平，而且B7-2分子对Th2反应的影响作用大于B7—1分子。B7：CD28协同刺激途径可以调节Th1／Th2免疫偏移，为控制日本血吸虫肉芽肿病变提供了一种新途径。     

类风湿关节炎患者外周血T细胞PD1表达的分析和意义

目的 探讨程序性死亡分子1(PD1)在类风湿关节炎(RA)患者外周血CD4+T和CD8+T细胞上的表达及临床意义.方法 应用流式细胞仪检测66例RA患者和30例健康对照者外周血CD4+T和CD8+T细胞上PD1表达(平均荧光强度和百分率),比较RA组和健康对照组之间CD4+T和CD8+T细胞上PD1表达水平,分析其与RA实验室检查指标的相关性.结果 ①RA患者CD4+T、CD8+T细胞PD1表达的平均荧光强度(MFI)显著高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);RA患者CD4+ PD1+T细胞百分率显著高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).②RA患者外周血CD4+T、CD8+T细胞PD1表达的MFI与DAS28评分呈正相关性(r =0.49,P＜0.000 1;r =0.40,P=0.0008).③RA患者外周血CD4+T细胞PD1表达的MFI与血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)呈正相关性(r=0.45,P＜0.000 1;r=0.39,P=0.001);RA患者外周血CD8+T细胞PD1表达的MFI与CRP呈正相关性(rx=0.40,P=0.0009);RA患者外周血CD4+ PD1+T细胞百分率与CRP呈正相关性(r =0.24,P=0.048).④RA患者外周血CD8+T细胞PD1表达的MFI与类风湿因子(RF)呈正相关性(rs=0.32,P =0.009);RA患者外周血CD4+ PD1+T细胞百分率与RF呈正相关性(r=0.27,P=0.030).结论 RA患者外周血CD4+T和CD8+T细胞PD1表达异常,与疾病的活动性及抗体产生有关.     

鼻咽癌组织中CD80、CD86表达量与鼻内镜术后复发及肿瘤凋亡、侵袭的相关性

目的:研究鼻咽癌组织中CD80、CD86表达量与鼻内镜术后复发及肿瘤凋亡、侵袭的相关性。方法:选择2013年2月~2014年3月期间在南充市中心医院手术切除的鼻咽癌患者并根据术后3年复发情况分为复发组、未复发组,选择同期活检的正常鼻黏膜组织,检测病灶中CD80、CD86以及凋亡分子、侵袭分子的表达量。结果:复发组、未复发组病灶组织中CD80、ARD1、Survivin、Shh、Ptch1、S100A4、Ezrin、N-cadherin的表达量显著高于对照组(P<0.05),复发组病灶组织中CD80、ARD1、Survivin、Shh、Ptch1、S100A4、Ezrin、N-cadherin的表达量显著高于未复发组(P<0.05);复发组、未复发组、对照组病灶组织中CD86的表达量差异无统计学意义(P>0.05)。CD80高表达的鼻咽癌病灶内ARD1、Survivin、Shh、Ptch1、S100A4、Ezrin、N-cadherin的mRNA表达量显著高于CD80低表达的鼻咽癌病灶(P<0.05)。结论:鼻咽癌组织中CD80的高表达能够通过促进细胞增殖及侵袭来参与肿瘤的复发。     

共刺激分子CD80和CD86在蠕虫保护性免疫及其Th2免疫应答中作用机制的研究

目的:探讨共刺激分子CD80和CD86在蠕虫保护性免疫及其Th2免疫应答中的作用机制。方法:采用巴西日圆线虫第3期幼虫感染BALB/c小鼠,在感染当天、感染后第3、7d分别腹腔注射大鼠抗CD80和/或抗CD86单克隆抗体,以阻断协同刺激信号。在感染当天,感染后第7、14d,计数小鼠外周血液的嗜酸性粒细胞,于感染后第14d计数小肠绒毛嗜酸性粒细胞;采用WatanabeN法测定IgE。结果:联合应用抗CD80和抗CD86两种单克隆抗体可导致成虫产卵量明显增加,成虫数量显著增多及排虫时间延迟。同时两种单克隆抗体也完全抑制了外周血液及小肠组织的嗜酸性粒细胞的增多并部分抑制了IgE水平的升高。而单独应用抗CD80或抗CD86McAb对保护性免疫及Th2型免疫应答反应均无明显影响。结论:在蠕虫保护性免疫和Th2型免疫应答反应中,T细胞的活化需要CD80和CD86两种共刺激分子的参与;而CD80或CD86单一刺激分子即可提供足够的共刺激信号。研究提示,人为调控CD80和CD86共刺激分子可能有助于对蠕虫病及Th2型免疫应答所介导的其它疾病的治疗。     

小儿传染性单核细胞增多症患者外周血CD45RO＋、CD45RA＋T淋巴细胞亚群表达的研究

目的探讨传染性单核细胞增多症（IM）患儿CD4＋T辅助淋巴细胞CD4＋CD45RO＋和CD4＋CD45RA＋T淋巴细胞亚群的变化.方法用流式细胞术检测了30例活动期IM、急性期及恢复期患者CD4＋T辅助细胞CD45RO、CD45RA的表达率,并与对照组进行了比较.结果 IM患者急性期与对照组相比CD4＋CD45RO＋明显增高（P〈0.05）,CD4＋CD45RA＋明显对低于对照组（P〈0.05）;恢复期CD4＋CD45RO＋与急性期比较明显降低（P〈0.05）,但仍高于正常对照组（P〈0.05）;CD4＋CD45RA＋与急性期相比明显升高（P〈0.05）,但仍低于对照组（P〈0.05）.结论 CD4＋CD45RO＋和CD4＋CD45RA＋T淋巴细胞在IM患者的细胞免疫中起重要作用,CD45RA＋T辅助细胞减少是导致机体免疫功能失去平衡的重要原因.