胆固醇-PEG修饰的酒石酸长春瑞滨脂质体研究

 目的 采用胆固醇-PEG制备酒石酸长春瑞滨长循环脂质体,并对其理化性质、体内药动学和药效学进行研究。方法 用主动载药技术制备胆固醇-PEG修饰的酒石酸长春瑞滨脂质体,用动态光散射法测定粒径,采用柱色谱法测定包封率,KM鼠进行药动学实验,S180/ KM小鼠为模型进行药效学实验。结果 脂质体平均粒径在（100±10）nm;胆固醇-PEG修饰的脂质体能高效包载酒石酸长春瑞滨,药脂摩尔比在1∶5～3∶5内包封率均大于95%;药动学实验表明,胆固醇-PEG2000的加入能够显著延长脂质体的体内循环时间;药效学实验表明,与空白组和游离药组相比,脂质体有明显抑瘤作用。结论 胆固醇-PEG修饰的酒石酸长春瑞滨脂质体具有较高包封率,能显著延长体内循环时间,并可提高酒石酸长春瑞滨的抗肿瘤活性。     

重酒石酸长春瑞滨热敏脂质体的制备及其包封率测定方法研究

 目的 制备重酒石酸长春瑞滨（vinorelbine tartrate, VRT）热敏脂质体,建立脂质体中VRT含量和包封率的测定方法。方法 pH梯度法制备VRT热敏脂质体,HPLC测定脂质体中VRT的含量。微柱离心法分离脂质体与游离药,考察葡聚糖凝胶类型、洗脱溶剂、柱高、洗脱体积等因素对VRT游离药洗脱的影响。结果 VRT热敏脂质体的平均粒径为（94.6±1.6）nm,含量为（1.83±0.03）mg·mL-1。选择葡聚糖凝胶G-25制备微柱,最佳柱高4 cm,以PBS缓冲液为洗脱溶剂,梯度洗脱体积法分离脂质体与游离药,测得3批VRT热敏脂质体的包封率分别为（95.75±1.42）%、（91.12±1.21）%、（94.10±2.03）%,洗脱回收率分别为（98.3±2.42）%、（93.5±1.83）%、（96.6±1.65）%。结论 VRT脂质体的制备工艺稳定,载药量大,包封率高。含量及其包封率测定方法简单、快速、准确。本实验可为VRT静脉注射用热敏脂质体新制剂的开发提供研究基础。     

多西紫杉醇脂质体制备工艺及处方优化研究

 目的优化制备多西紫杉醇脂质体的工艺和处方。方法采用正交设计法,以磷脂和胆固醇的比例、药物与脂类比例和高压匀质次数为主要考察因素,以包封率、粒径分布及稳定性为综合考察指标,优化多西紫杉醇脂质体的制备工艺和处方。结果最佳处方和工艺条件为:药物∶(磷脂+胆固醇)为1∶20;磷脂∶胆固醇为6∶1,水合介质为磷酸盐缓冲液(pH=7.4),制备浓度为0.5 g·L^-1,采用薄膜-超声分散工艺制备,高压乳匀次数为6次。按该工艺制备3批含药脂质体,包封率最高可达(84.4±1.6)%,平均粒径为(147.1±41.1)nm,Zeta电位为(+2.25±0.2)mV;在室温条件下放置14 d和在4℃下放置180d,各项指标变化不显著;体外释放实验显示,含药脂质体具有明显缓释特性。结论按优化处方和工艺制得的多西紫杉醇脂质体的包封率较高,粒径大小可符合靶向制剂要求,且质量稳定。     

紫杉醇磁性长循环脂质体的研究

 目的制备紫杉醇磁性长循环脂质体，以提高紫杉醇的疗效并降低其不良反应。方法用逆相蒸发法制备紫杉醇磁性长循环脂质体，高效液相色谱法测定药物的含量。大耳白兔药动学考察BALB/C，小鼠体内分布实验，建立了小鼠EMT6乳腺癌模型，静注或腹腔注射给药，并计算抑瘤率。结果紫杉醇磁性长循环脂质体的粒径是640nm，包封率是96.64%，兔体中药动学符合三室模型。体内分布研究表明：紫杉醇磁性长循环脂质体对小鼠EMT-6肿瘤生长均有较明显的抑制作用，抑瘤作用较紫杉醇注射液提高；同时，可降低药物对心、肺、肾等器官的毒性。结论紫杉醇磁性长循环脂质体不同给药途径均有一定的肿瘤靶向性和缓释长效作用。     

新型抗癌药依托泊苷脂质体的制备

 目的 制备依托泊苷脂质体，测定其含药量及包封率，对其体外释放及原料药的体外释放进行比较，并对脂质体灭菌后的稳定性进行考察。方法 采用薄膜-超声分散法制备依托泊苷脂质体，通过均匀设计优化处方，利用透析法测定其含药量及包封率，进行热压灭菌及⁶⁰Co灭菌两种灭菌方式，以粒径和包封率为指标考证灭菌后的稳定性。结果 按均匀设计的最优组合制备脂质体的含药量为（574.3±30.7）μg·mL^-1,平均包封率为（61.58±0.83）%，依托泊苷脂质体50 h累积释药（96.13±1.11）%,而其原料药3 h累积释药（97.10±1.84）%，热压灭菌的渗漏率比60Co灭菌的渗漏率高。结论 用薄膜-超声分散法制备的依托泊苷脂质体外观圆整，粒径小而均匀，体外释药达到了长效缓释的作用，⁶⁰Co灭菌后脂质体较稳定。     

马钱子总生物碱复合磷脂脂质体的抗肿瘤作用研究

目的: 通过比较马钱子总生物碱溶液和3种不同磷脂组成的马钱子总生物碱脂质体对H22荷瘤小鼠的抑瘤率,评价马钱子总生物碱复合磷脂脂质体的抗肿瘤作用。方法: 采用硫酸铵梯度法和隐形脂质体技术制备了3种不同磷脂组成的马钱子总生物碱脂质体。ICR小鼠接种H22肝癌瘤株造成移植性肝癌H22小鼠模型,测定马钱子总生物碱溶液、马钱子总生物碱大豆磷脂(SPC)脂质体、氢化大豆磷脂(HSPC)脂质体和复合磷脂脂质体各ip 1 mg ·kg^-1,连续10 d,观察对H22肝癌小鼠的抑瘤效果,比较给药后各组H22荷瘤小鼠的体重、免疫器官(脾和胸腺)指数和生命延长率。结果: 1 mg ·kg^-1剂量下的马钱子总生物碱溶液、SPC脂质体、HSPC脂质体和复合磷脂脂质体的抑瘤率分别为29.05%,29.29%,45.11%,37.23%;3种马钱子总生物碱脂质体未发现对免疫器官有明显的抑制作用;与对照组相比体重也无明显变化。结论: 复合磷脂脂质体是抗肿瘤中药有效部位马钱子总生物碱具有开发前景的新型载体。     

5-氟尿苷棕榈酸酯脂质体的制备及其细胞毒性研究

 目的制备前药5-氟尿苷棕榈酸酯(5-FURP)脂质体,并进行体外细胞毒性实验。方法通过正交实验设计筛选5-FURP脂质体的最佳处方,采用逆向蒸发法制备5-FURP脂质体,测定其包封率及理化性质;以人乳腺癌细胞系MCF-7、人鼻咽癌细胞系CNE-1、人喉癌细胞系HEP-2为模型细胞,考察5-FUR前药脂质体的细胞毒性。结果制备的脂质体平均包封率为94.35%,将脂质体分别在4和25℃下密闭放置1个月,以包封率、脂质体中磷脂含量变化为指标考察其稳定性。结果显示,脂质体于4℃贮存时,上述指标无显著变化,脂质体比较稳定;细胞实验表明,5-FURP经脂质体包裹后,细胞毒性较游离药物增高,对人乳腺癌细胞系MCF-7、人鼻咽癌细胞系CNE-1、人喉癌细胞系HEP-2的IC₅₀分别是游离药物的5.0,3.4,2.6倍。结论实验室制备的5-FURP经脂质体包裹后能增强细胞摄取,具有提高药物疗效的效果。     

古糖酯脂质体的制备及其包封率测定方法的研究

 目的研究古糖酯脂质体的制备方法,并建立其包封率的测定方法。方法采用反相蒸发法制备古糖酯脂质体,运用正交实验确定最适的制备条件;采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测定古糖酯脂质体的包封率。结果采用反相蒸发法制备古糖酯脂质体的最适条件是:磷脂与胆固醇的摩尔比为4∶1,古糖酯药物的加入量为1%,脂水相体积比为3∶1,在此条件下制备的脂质体包封率可达39.13%。经负染色法观察古糖酯脂质体的形态为圆形或椭圆形,平均粒径为200 nm。采用HPG-PC法可有效地分离古糖酯脂质体与游离药物,方法测定的线性范围为0.2～10.0 g·L^-1,平均回收率为95.12%,RSD为1.83%(n=5)。结论反相蒸发法制备的古糖酯脂质体包封率高,粒径小,形态稳定。HPGPC方法简便、快捷,重现性好,适合于古糖酯脂质体包封率的测定。     

盐酸青藤碱脂质体的制备工艺研究

目的 提高盐酸青藤碱（sinomenine hydrochloride,SIN-HCl）脂质体的药物包封率,并阐明处方药量与脂质体粒径等因素对包封率的影响规律。方法 以离心沉淀-离心超滤法测定SIN-HCl脂质体的包封率;以包封率与成型性为主要指标筛选薄膜分散法（TFH）、逆相蒸发法（REV）与乙醚注入法（EI）3种制备方法;考察水化液的种类、pH值、离子浓度以及pH梯度载药、磷脂-胆固醇比例、药脂比对包封率的影响;以全面设计试验考察处方药量与粒径两因素对包封率的影响规律;考察代表性脂质体样品在4 ℃下的稳定性。结果 最适的制备工艺为薄膜分散法;最佳水化液为柠檬酸缓冲液（CBS）;随着水化液pH值的升高,包封率增加;当水化液的pH值相同时,脂质体包封率随着水化液离子浓度的降低而增加;pH梯度载药可提高脂质体的包封率,pH梯度载药脂质体的最适水化液为pH值2.5的CBS,最适大豆磷脂-胆固醇比例为6∶1,SIN-HCl与大豆磷脂的比例由1∶6增至6∶6,未经探针式超声处理的脂质体包封率略有下降;建立了药物包封率与处方药量和粒径之间的定量关系,一定粒径与处方药量的脂质体包封率大于80%;成品脂质体的稳定性良好。结论 pH梯度主动载药技术可以制备高包封率的SIN-HCl脂质体。     

唾液酸修饰绿原酸脂质体制备及其体外抗肿瘤活性研究

目的 响应面设计制备唾液酸（sialic acid，SA）修饰的绿原酸（chlorogenic acid，CA）脂质体（CA-SAL），考察其体外细胞毒性和摄取。方法 采用改良逆相乙醇注入法制备CA-SAL，以葡聚糖凝胶G-50柱离心法分离脂质体和游离药物，并通过HPLC法测定药物质量浓度，计算包封率。以包封率和载药量为考察指标，通过Box-Behnken响应面设计实验优化CA-SAL的处方和工艺，MTT法评价其对人肺癌A549细胞的细胞毒性，倒置荧光显微镜观察A549细胞对CA-SAL的摄取情况。结果 优化后的CA-SAL制备条件：氢化大豆磷脂与绿原酸的质量比为15∶1，水化温度60℃，超声功率400 W。CA-SAL平均粒径为（90.13±0.51）nm，多分散指数（PDI）为0.16±0.01，Zeta电位为（-25.3±0.5）mV；包封率为57.8%，RSD为0.1%。MTT实验结果显示，CA-SAL对A549细胞的增殖抑制作用显著强于绿原酸脂质体（CA-CL），细胞摄取实验表明A549细胞对唾液酸修饰脂质体的摄取更高。结论 通过响应面优化制备的CA-SAL粒径小、性质稳定。经唾液酸修饰后的脂质体可以增强人肺癌A549细胞的细胞摄取及体外细胞毒性。     

冰片对齐多夫定棕榈酸酯脂质体在小鼠体内分布的影响

 目的制备冰片修饰齐多夫定棕榈酸酯脂质体,并考察冰片是否能促进齐多夫定棕榈酸酯透过血-脑屏障的作用。方法采用乙醇注入-超声分散法分别制备齐多夫定棕榈酸酯普通脂质体和10%冰片修饰脂质体。小鼠尾静脉注射15.85mg·kg^-1齐多夫定溶液剂、30mg·kg^-1齐多夫定棕榈酸酯(相当于15.85mg·kg^-1齐多夫定)普通脂质体和10%冰片修饰脂质体,并以齐多夫定为指标成分,HPLC测定小鼠血浆和各组织中的药物摄取量。结果齐多夫定棕榈酸酯普通脂质体和冰片修饰脂质体的平均粒径均小于120nm,Zeta电位约为-28.2mV,包封率均在96%以上。与溶液剂比,脑内齐多夫定绝对摄取量由普通脂质体组的1.43倍增加到10%冰片修饰组的1.96倍(P<0.05),冰片修饰组药物的直接入脑量是普通组的3.73倍(P<0.01);肺和肾中药物摄取量分别是溶液剂的1.69和0.7倍,具有显著性变化。结论10%冰片可促进齐多夫定棕榈酸酯脂质体中药物透血-脑屏障转运入脑,显著增加药物脑摄取量,10%冰片修饰齐多夫定棕榈酸酯脂质体可望成为一种简便易行的治疗HIV感染脑部疾病方法。     

磷脂组成对马钱子碱隐形脂质体药剂学性质与抗肿瘤作用的影响

目的:比较3种不同磷脂组成的马钱子碱隐形脂质体的药剂学性质以及抗肿瘤作用.方法:采用硫酸铵梯度法和隐形脂质体技术制备马钱子碱氢化大豆磷脂(hydrogenated soybean phoaphatidylcholine,HSPC)、大豆磷脂(soybean phosphati-dylcholine,SPC)、复合磷脂(SPC-HSPC 3:1)隐形脂质体,考察其形态学、粒径、包封率等药剂学性质.建立小鼠移植性肝癌H22模型,测定3种不同磷脂组成马钱子碱隐形脂质体的抑瘤率,并比较各组荷瘤小鼠的体重、免疫器官(脾和胸腺)指数.结果:马钱子碱复合磷脂隐形脂质体、HSPC隐形脂质体、SPC隐形脂质体的包封率分别为77.7%,64.8%,74.8%,粒径均小于100nm.同剂量的马钱子碱复合磷脂,HSPC,SPC隐形脂质体的抑瘤率分别为57.88%,49.15%,23.37%.与阴性对照组相比,3组马钱子碱隐形脂质体对荷瘤小鼠体重、胸腺指数的影响均无统计学差异,此外,SPC组和HSPC组荷瘤小鼠脾指数有所提高,而复合磷脂组无统计学差异.结论:磷脂组成是影响马钱子碱隐形脂质体抗肿瘤效果的重要因素.     

白藜芦醇固体脂质纳米粒抑制小鼠移植性肿瘤H22的研究

目的:研究白藜芦醇固体脂质纳米粒(resveratrol-solid lipid nanopartieles,Res-SLN)对H22移植性肿瘤模型小鼠的肿瘤抑制作用.方法:将昆明种小鼠接种肝癌H22瘤株造成相应的移植性荷瘤小鼠模型后,随机分为荷瘤模型组、环磷酰胺(CTX)阳性药对照组(25 mg·kg-1),Res-SLN低、中、高(35,70,105 mg·kg-1)3个剂量组、白藜芦醇(resveratrol,Res)混悬液组(105 mg·kg-1)、空白辅料组,以实体瘤模型小鼠的瘤重、抑瘤率观察Res-SLN对小鼠移植性肿瘤H22的抑制作用;以胸腺指数、脾脏指数为指标观察Res-SLN对免疫器官的影响;以小鼠平均生存时间观察Res-SLN对腹水瘤模型小鼠的生命延长作用.结果:Res-SLN能有效地抑制实体瘤模型荷瘤小鼠体内肿瘤的生长,低、中、高3个剂量组的抑瘤率分别为61.95％,72.39％,85.52％;Res-SLN给药组小鼠胸腺指数和脾脏指数与荷瘤对照组相比,无显著性差异;Res-SLN中、高剂量组对腹水瘤肿瘤模型小鼠的生存时间具有延长作用,与荷瘤对照组相比具显著性差异.结论:Res-SLN对荷瘤小鼠肿瘤生长具有一定的抑制作用,抑制作用强于Res,并有剂量依赖性.     

姜黄素长循环脂质体的制备及评价

目的:研制姜黄素长循环脂质体。方法:采用乙醇注入法制备姜黄素长循环脂质体,应用微柱离心法测定包封率,以包封率为指标,分别考察缓冲液种类、药脂比、胆固醇用量、不同相对分子质量的PEG-胆固醇、不同pH、离子强度等对脂质体的影响,在此基础上用正交设计[L₉(4³)]对处方进行优化。结果:经乙醇注入法制得的脂质体的包封率为(88.27±2.16)%,平均粒径为(136±18)nm,粒度分布均匀,呈单峰分布,4℃放置30 d包封率无明显变化。结论:姜黄素长循环脂质体制备工艺简单可行,姜黄素长循环脂质体制剂学性质稳定。     

蜂毒多肽长循环脂质体的制备研究

 目的研制蜂毒多肽长循环脂质体。方法采用薄膜超声分散法制备蜂毒多肽长循环脂质体,以包封率为指标,分别考察药脂比、胆固醇用量、磷脂种类、不同相对分子质量PEG-胆固醇、不同pH值、离子强度等对脂质体的影响,在此基础上采用正交设计[L₉(4³)]对处方进行优化。结果制得的长循环脂质体包封率为(86.13±0.51)%,平均粒径为(74.43±5.53)nm,4℃放置10d包封率无变化。结论蜂毒多肽长循环脂质体包封率、稳定性较高,且制备工艺简单、重现性好。     

黄芩素脂质体的制备及体外释放的研究

目的:研究黄芩素脂质体的制备方法。方法:采用逆相蒸发法、薄膜-超声法制备黄芩素脂质体,利用紫外光谱测定包封率以及浆板法测定体外释放曲线。结果:逆相蒸发制备的脂质体平均粒径179nm,包封率和载药量分别为92.57%和23.24%;薄膜超声法平均粒径257nm,包封率和载药量分别为60.02%和7.70%,在PH7.4磷酸盐缓冲液中体外释药符合Higuchi方程。结论:逆相蒸发法操作简单,重现性好,制备的脂质体粒径小、包封率高,药物具有一定的缓释性。     

冬凌草甲素自微乳对小鼠移植性肿瘤H22的抑制作用

目的研究冬凌草甲素自微乳对H22移植性肿瘤模型小鼠的肿瘤抑制作用。方法采用昆明小鼠接种肝癌H22瘤株造成相应的移植性荷瘤小鼠模型,以实体瘤模型小鼠的瘤重、抑瘤率观察冬凌草甲素自微乳对小鼠移植性肿瘤H22的抑制作用;以胸腺指数、脾脏指数为指标观察冬凌草甲素自微乳对免疫器官的影响;以小鼠平均生存时间观察冬凌草甲素自微乳对腹水瘤模型小鼠的生命延长作用。结果冬凌草甲素自微乳能有效地抑制实体瘤模型荷瘤小鼠体内肿瘤的生长,低、中、高(67,100,150 mg.kg-1)3个剂量组的抑瘤率分别为:43.94%、54.65%、59.57%;冬凌草甲素自微乳给药组小鼠胸腺指数和脾脏指数与荷瘤对照组相比,无显著性差异;中剂量(100 mg.kg-1)冬凌草甲素自微乳对腹水瘤肿瘤模型小鼠的生存时间具有延长作用,与荷瘤对照组相比具显著性差异。结论冬凌草甲素自微乳对荷瘤小鼠肿瘤生长具有一定的抑制作用,抑制作用强于冬凌草甲素,并有剂量依赖性。