鳖甲肽脂质体药代动力学及肝靶向分析

目的:制备含DiR碘化物荧光染料的长循环脂质体(DiR-SSL),采用SD大鼠和BALB/c裸鼠进行荧光成像的体内靶向性研究,利用空白SSL包封含5-羧基荧光素(5-FAM)的鳖甲肽(HGRFG-5-FAM,HF)制备HGRFG-5-FAM-SSL(HFL),研究HF及HFL分别给药于大鼠的药代动力学。方法:采用薄膜分散法制备DiR-SSL及HFL,取2组SD大鼠分别尾静脉注射HF及HFL,其HF质量浓度及剂量一致,于不同时间点采血,利用多功能微孔板检测仪分析HF血药浓度,计算药代动力学参数;将DiR-SSL尾静脉注射于BALB/c裸鼠,分别于1,2,5,7,24 h活体成像,读取荧光强度值;取正常SD大鼠尾静脉注射DiR-SSL,24 h后解剖心、肝、脾、肺、肾于荧光成像系统成像并读取荧光强度值,将肝组织冷冻切片进行激光共聚焦扫描。结果:HF注射到SD大鼠体内,其半衰期(T_(1/2))仅0.826 h,而HFL在相同剂量下,T1/2和药时曲线下面积(AUC_(0-∞))分别为HF的16.253,11.899倍;在BALB/c裸鼠活体成像中,荧光主要集中于肝脏位置,随着时间增加荧光强度逐渐减弱;SD大鼠各脏器中的DiR-SSL荧光在肝脏中最强,注射24 h后DiR-SSL仍能在肝脏储留。结论:SSL递药系统能显著延长HF在SD大鼠体内的T_(1/2)。SSL递药系统具有肝靶向作用,提示该系统可作为药物载体进行肝靶向递药。     

盐酸青藤碱传递体的制备及其对大鼠类风湿性关节炎的药效评价

目的制备盐酸青藤碱传递体并对其处方工艺进行优化,验证其对大鼠类风湿性关节炎(RA)的治疗作用。方法采用乙醇注入法制备盐酸青藤碱传递体,以传递体的弹性为指标,通过正交试验优化其处方工艺;以恒定压力挤出法测定其弹性,HPLC法结合离心超滤法测定其包封率;于大鼠尾根部sc牛II型胶原建立Wistar大鼠RA模型,以大鼠踝关节评分、关节肿胀度、血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的水平以及炎细胞浸润、血管翳形成、软骨破坏和骨侵蚀等组织病理形态学的变化来评价传递体对RA的治疗作用。结果盐酸青藤碱传递体最佳处方为蛋黄磷脂300 mg、胆固醇30 mg、盐酸青藤碱100 mg、脱氧胆酸钠60 mg、维生素E 5 mg、磷酸盐缓冲溶液(pH 8.0)23 mL、无水乙醇2 mL。以最佳处方制得的传递体的平均粒径为(83.31±0.08)nm,Zeta电位为(-32.57±3.27)mV,弹性指数为38.69±1.66,药物质量浓度为(2.96±0.27)mg/mL,包封率为(39.82±0.97)%。药效实验结果显示,盐酸青藤碱传递体可显著减轻由RA引起的关节肿胀(P0.01),显著减少血清中TNF-α和IL-1β的水平(P0.01),明显减轻炎症反应并有效改善踝关节部位的病理组织形态。结论所得的盐酸青藤碱传递体制备工艺可行,质量可控,疗效确切。     

三七总皂苷传递体的制备及其治疗大鼠急性软组织损伤作用研究

目的优化三七总皂苷(PNS)传递体的处方,验证其治疗大鼠急性软组织损伤的作用。方法采用薄膜分散法制备PNS传递体,以传递体弹性为指标,通过均匀设计法优化其处方工艺;分别以挤出法、离心超滤法测定传递体的弹性与包封率;通过对实验动物的损伤症候指数、血液流变学及组织形态学的观测评价传递体对大鼠急性软组织损伤的治疗作用,并与阳性对照药青鹏软膏进行比较。结果 PNS传递体最佳处方为PNS 100 mg、胆固醇15 mg、大豆磷脂120 mg、维生素E 2 mg、中药挥发油(柠檬烯-柠檬醛4∶1)80 mg、水化液[磷酸盐缓冲液(PBS),p H 5.0]10 m L;以最佳处方制得的成品弹性为(2.74±0.32)min、粒径为(123.60±0.36)nm、Zeta电位为(-36.67±2.29)m V,人参皂苷Rg1与人参皂苷Rb1的包封率分别为(82.42±0.69)%、(94.40±0.74)%;药效学实验结果显示,与模型组相比PNS传递体可显著降低实验动物的损伤证候指数(P0.01)、全血黏度及血浆黏度(P0.05),有效改善病灶部位组织形态。结论所得PNS传递体粒径适宜,弹性与药物包封率良好,疗效确切。     

RGDyC与PEG共修饰的PAMAM树状大分子载三氧化二砷脑胶质瘤靶向递药系统的制备及体外评价

三氧化二砷(ATO)是中药砒霜的有效成分,已有研究表明其对多种肿瘤具有良好的生长抑制及促凋亡作用,但由于毒性大和透血脑屏障(BBB)难等问题严重限制了其在脑胶质瘤治疗方面的应用。聚酰胺-胺树状大分子(PAMAM)作为一种人工合成的高分子化合物,具有渗透性及稳定性强且生物相容性好等优点,且第5代PAMAM的空间结构更立体,是药物载体的理想选择。该课题采用RGDyC和PEG共同修饰第5代PAMAM,并通过核磁共振氢谱图证明了该纳米载体的成功合成;纳米粒度-电位分析仪和透射电镜图分析显示其平均粒径大约集中在20 nm左右;体外释放实验表明,该递药系统不仅具有缓释效果,同时还有一定的p H敏感特性;细胞结果显示,经RGDyC和PEG共修饰后的PAMAM与未经修饰组相比,细胞毒性显著降低,且该递药系统具有更好的体外跨血脑屏障(BBB)抗肿瘤效果,同时也进一步证明了RGDyC的肿瘤靶向作用。     

离心沉淀-离心超滤法测定盐酸青藤碱脂质体的包封率

目的 建立盐酸青藤碱（sinomenine hydrochloride,SM-HCl）脂质体包封率的测定方法,并阐明药物在脂质体中的滞留特性。方法 采用薄膜分散法制备SM-HCl脂质体。以HPLC法测定脂质体药物的量,色谱柱为Kromasil ODS C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇-水-乙二胺（55∶45∶0.225）,体积流量1.0 mL/min,检测波长265 nm。以离心沉淀-离心超滤法测定SM-HCl脂质体的包封率,并与以枸橼酸缓冲液（pH 7.0）水化的脂质体样品稀释前后的包封率进行对比。结果 辅料与溶剂对青藤碱的定量测定无干扰,青藤碱在9.82～78.56 μg/mL线性关系良好（r＝0.999 7）,平均回收率在99.29%～100.8%,日内与日间精密度良好（RSD≤2.1%）。50 μL药液可使超滤膜对药物的吸附达到饱和。以枸橼酸缓冲液（pH 7.0）水化的脂质体样品的包封率为33.16%,稀释1倍后该样品的包封率降至14.75%。结论 HPLC法与离心沉淀-离心超滤法结合可用于测定SM-HCl脂质体的包封率,该方法快速、准确;离心超滤中应弃去50 μL初滤液以确保滤液与脂质体外水相药物浓度一致;青藤碱与脂质双分子层有一定的亲和力,但在脂质体中的滞留性较差。     

三七皂苷类成分防治肝纤维化的研究进展

肝纤维化是多种肝脏疾病发生发展的关键病理过程,若不及早进行干预治疗,最终会发展为肝硬化甚至肝癌,严重威胁人们的身体健康。近年来,多项研究结果显示三七皂苷类成分能通过抑制脂质过氧化、减少肝星状细胞活化与增殖、调节胶原代谢等方式有效改善肝纤维化的发生。为进一步推进三七皂苷类成分在防治肝纤维化方面的研究,本文对肝纤维化发生发展的机制进行阐述,对近年来三七中皂苷类成分防治肝纤维化的细胞、分子机制研究进行总结,并探讨今后治疗肝纤维化的药物研发方向。     

延胡索乙素醇质体的制备及其离体皮肤渗透特性研究

目的制备延胡索乙素(dl-THP)醇质体(ETS),并初步阐明制剂的经皮吸收特性。方法采用乙醇注入-pH梯度主动载药法制备dl-THP ETS,并对其形态、粒径、弹性与包封率等理化性质进行表征;以脂质体(LPS)与酊剂作为参比,采用Franz扩散池考察制剂的离体皮肤渗透特性。结果按优选处方[dl-THP 100 mg,维生素E 1.3 mg,大豆卵磷脂1 200mg,胆固醇120 mg,无水乙醇9 mL,柠檬酸缓冲液(pH 3.0)21 mL,0.1 mol/L NaOH溶液适量(调pH值至5.5)]制得的dl-THP ETS弹性指数为(20.1±1.1)mL,平均粒径为(85.8±0.9)nm,多分散指数为0.082±0.003,包封率为(81.7±3.2)%。dl-THP ETS 24 h的单位面积皮肤累积渗透药物量(Qn)为(2 306.4±592.3)μg/cm~2,与参比制剂LPS[(2 434.2±564.4)μg/cm~2]无显著差异,但约为酊剂[(633.1±218.0)μg/cm~2]的4倍(P0.05);ETS与LPS各时间点样品间的Qn RSD的平均值分别为(28.4±10.9)%、(62.8±44.1)%(P0.05),表明前者样品间的Qn波动比后者小;ETS与LPS的24 h渗透曲线线性拟合的相关系数平均值分别为0.968±0.033与0.882±0.078(P0.05),表明前者渗透过程更符合零级动力学。结论所得的dl-THP ETS弹性高,粒径大小适宜,包封率高,药物经皮渗透速率高且稳定,并符合零级动力学。     

犬血浆中牡荆素鼠李糖苷的测定及益心酮缓释片药动学研究

目的:建立测定犬血浆中牡荆素鼠李糖苷的HPLC法,初步研究益心酮缓释片在Beagle犬体内的药动学。方法:应用自身对照设计实验法,用反相高效液相色谱法测定单剂量口服益心酮缓释片(2片×288 mg/片)和市售普通片(4片×144 mg/片)后,Beagle犬血浆中牡荆素鼠李糖苷的浓度,应用非隔室模型统计矩方法和3p87程序对药动学参数进行分析。结果:益心酮缓释片和普通片口服后在Beagle犬体内过程可分别用单室和双室模型描述;药动学参数为:口服普通片:T_1/2=8.94 h,T_max=1 h,AUC_0-∞=5 880.4 ng.h.mL^-1,MRT=6.1 h;口服缓释片:T_1/2=5.22 h,T_max=4 h,AUC_0-∞=6 792.75 ng.h.mL^-1,MRT=8.4 h,相对生物利用度为115.5%。结论:自制缓释片在犬体内表现出了缓释特性。     

紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量的方法学考察要点

按照<药品注册管理办法>,中药、天然药物注册分类的第五类为"未在国内上市销售的从植物、动物、矿物的等物质中提取的有效部位及其制剂".其中有效部位一词有别于有效成分,它一般是指从中药材中提取的大类成分,如总黄酮、总生物碱、总蒽醌、总皂苷等.有效部位中的大类成分在化学结构上有相似性,故在药理作用上也有相似性,所以,将其用作治疗剂有一定的合理性.     

全缘千里光碱脂质体凝胶剂的HPLC测定

建立了HPLC法测定全缘千里光碱脂质体凝胶剂的含量。采用C18柱，流动相为水-乙腈（70：30，pH8．6），检测波长213nm。全缘千里光碱在20～180μg/ml范围内线性关系良好，平均回收率为96．9％，RSD为1．2％。