艾灸对AD大鼠学习记忆、GSK-3β和磷酸化tau蛋白的影响

目的:探讨艾灸防治阿尔茨海默病(Alzheimer Disease,AD)的作用及其机制。方法:大鼠双侧脑室微量注射STZ造模,术后第10天艾灸组灸"关元""长强""命门""百会",同时西药对照组灌胃盐酸多奈哌齐,治疗30 d后用Morris水迷宫测各组大鼠学习记忆能力,再取材用ELISA法、免疫组织化学、Western blot等检测海马区GSK-3β活性及tau蛋白磷酸化位点(Ser396/Thr231)的含量和表达水平。结果:艾灸组与西药对照组较模型组平均游泳距离百分比上升;与假手术组比较,模型组大鼠海马CA1区椎体细胞形态结构异常,阳性染色深,而艾灸组与西药对照组较模型组形态结构完整,阳性染色浅;除假手术组外,GSK-3β活性及磷酸化tau蛋白Ser396、thr231位点相对表达量均升高,且西药对照组和艾灸组低于模型组。结论:艾灸可部分改善AD大鼠学习记忆,其可能通过抑制海马GSK-3β活性,降低p-tau S396、T231的磷酸化水平起到防治AD的作用,且作用效果与西药盐酸多奈哌齐相同。     

基于PP2A与GSK-3β探讨丹栀逍遥散对阿尔茨海默病模型大鼠tau蛋白磷酸化水平的作用机制

目的：研究丹栀逍遥散对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马中tau蛋白磷酸化水平与糖原合成激酶-3β(GSK-3β)、磷酸丝氨酰/磷酸苏安酰蛋白磷酸酶2A(PP2A)不同位点的影响及作用机制。方法：选用90只SPF级Wistar雄性大鼠,用双侧海马区注射冈田酸的方式建立AD大鼠模型。筛选出造模成功的大鼠,随机分为模型组,安理申组(0.5 mg·kg^-1),丹栀逍遥散高、中、低剂量组(17.55、8.77、4.38 g·kg^-1),连续灌胃42 d,1次/d。Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,尼氏染色观察海马区神经元形态结构,实时荧光定量聚合链式反应(Real-time PCR)检测tau蛋白、GSK-3β、PP2A mRNA表达情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测tau蛋白、GSK-3β、PP2A及相关蛋白的表达。结果：与空白组比较,模型组大鼠学习记忆能力显著降低(P<0.01),海马CA3区细胞结构异常,排列杂乱,数量减少,GSK-3β mRNA、GSK-3β、p-GSK-3β-Tyr216、p-PP2A、p-tau表达...     

益智聪明汤对Aβ_(25-35)致阿尔茨海默病小鼠tau蛋白磷酸化的影响

目的观察益智聪明汤(人参、茯苓、制首乌,等)对β-淀粉样蛋白Aβ_(25-35)致阿尔茨海默病模型小鼠磷酸化tau蛋白表达的影响及其作用机制。方法选用SPF级ICR小鼠60只,随机分为6组,每组10只,假手术组左侧海马单次注射生理盐水3μL,模型组、盐酸多奈哌齐组及益智聪明汤各组分别左侧海马注射Aβ_(25-35)3μL(3 nmol/L),除假手术组及模型组外,其余各组分别灌胃给予盐酸多奈哌齐和益智聪明汤。给药15 d后,免疫组化测定tau蛋白磷酸化位点的表达;Western blot检测海马区PI3K/AKT/GSK3β(磷脂酰肌醇-3-羟激酶/蛋白激酶B/糖原合成酶激酶3β)的蛋白表达。结果益智聪明汤可减少tau(Thr231)及tau(Ser404)磷酸化表达水平,增加PI3K、AKT及GSK3β磷酸化表达。结论益智聪明汤可抑制Aβ_(25-35)致阿尔茨海默病小鼠tau蛋白磷酸化位点的表达,其机制可能是通过PI3K/Akt/GSK3β信号途径。     

基于脑肠肽Ghrelin水平探讨远志散对AD大鼠学习记忆能力及进食量的影响

目的:通过制备阿尔茨海默病(AD)大鼠模型,观察远志散对模型大鼠胃促生长素(Ghrelin)表达水平的调控,探讨其防治AD的可能作用机制。方法:采用随机数字表法将120只SD大鼠分为6组,分别为假手术组,模型组,多奈哌齐组(1.02 mg·kg~(-1)),远志散高、中、低剂量组(12,6,3 g·kg~(-1)),每组20只,雌雄各半。除假手术组注射同等剂量生理盐水,其余各组大鼠双侧海马立体定向注射β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)诱导AD大鼠模型。连续灌胃治疗10周,观察并记录各组大鼠进食量。灌胃结束后通过Morris水迷宫法检测大鼠学习记忆能力,留取全脑和胃体胃窦,苏木素-伊红(HE)染色观察海马CA1区病理改变,免疫组化法检测Ghrelin表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期显著延长(P0.01),穿越站台次数、有效区域停留时间及运动路程均显著减少(P0.01),海马CA1区细胞排列紊乱、数量减少、胞核固缩,雌雄大鼠进食量明显下降(P0.05,P0.01),海马CA1区、胃黏膜组织中Ghrelin蛋白表达显著降低(P0.01)。与模型组比较,远志散各剂量组大鼠逃避潜伏期均有不同程度的缩短(P0.05,P0.01),穿越站台次数、有效区域停留时间及运动路程均增加(P0.05,P0.01),海马CA1区细胞数目与形态有明显改善,远志散高、中剂量组雌雄大鼠每日进食量显著增加(P0.05,P0.01);远志散各剂量组大鼠海马CA1区、胃黏膜组织Ghrelin蛋白表达明显增加(P0.05,P0.01)。结论:远志散能够有效改善AD大鼠学习记忆能力,增加每日进食量,其机制可能与其上调海马CA1区及胃黏膜组织Ghrelin含量有关。     

温郁金挥发油通过PI3K/Akt信号途径对阿尔茨海默模型小鼠tau蛋白磷酸化表达的影响

目的观察温郁金挥发油对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠tau蛋白磷酸化的影响,探讨其相关作用机制。方法 60只昆明种小鼠随机分为假手术组、模型组、温郁金挥发油低剂量组、温郁金挥发油高剂量组、盐酸多奈哌齐组和参枝苓组,海马组织注射Aβ25-35制作AD小鼠模型,各给药组给予相应药物灌胃,连续15 d。末次给药后,免疫组化检测小鼠tau蛋白磷酸化位点(Ser 404和Thr 231)的蛋白表达,Western blot检测tau蛋白磷酸化位点及磷脂酰肌醇-3-激酶信号/蛋白激酶B(PI3K/Akt)的蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组tau蛋白磷酸化位点蛋白表达增加(P0.05),PI3K及Akt磷酸化水平明显降低(P0.05);与模型组比较,温郁金挥发油高剂量组tau蛋白(Thr231和Ser404)磷酸化水平明显降低(P0.05),PI3K及Akt磷酸化水平明显增加(P0.05,P0.01)。结论温郁金挥发油可降低模型小鼠tau蛋白磷酸化水平,其作用机制可能与PI3K/Akt信号途径有关。     

逍遥散对CUMS大鼠海马CA1区PI3K/AKT信号通路的调节作用研究

目的：本研究旨在探讨逍遥散通过调节PI3K/AKT信号通路进而改善由谷氨酸引起的兴奋性损伤的机制。 方法：100只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、逍遥散组和氟西汀组,利用CUMS方法造模成为抑郁模型大鼠,上述组别分别予以双蒸水、双蒸水、逍遥散药液、氟西汀溶液连续灌胃3周,后进行行为学观察及相关指标检测。采用旷场试验(OFT)和蔗糖偏好试验(SPT)评价逍遥散的抗抑郁作用;ELISA法测定海马组织中5-HT、NE水平;比色法检测各组大鼠海马CA1区谷氨酸水平; RT-qPCR检测海马CA1区NR2B、PI3K的mRNA水平;western blot检测海马CA1区NR2B、PI3K、P-AKT、Akt的蛋白表达。 结果：逍遥散的体内干预可显著提高抑郁大鼠海马组织中的5-HT、NE水平、降低海马CA1区谷氨酸水平、增加了海马CA1区NR2B、PI3K及P-AKT/AKT比值,显著改善了大鼠的抑郁症状。 结论:逍遥散可显著改善经慢性应激刺激后大鼠的抑郁样行为,其机制可能与降低谷氨酸兴奋性毒性,从而提高PI3K/Akt信号通路活性有关。     

松果菊苷对帕金森病模型大鼠海马区神经元GSK-3β蛋白的影响

目的研究松果菊苷对PD模型大鼠海马区神经元GSK-3β蛋白表达的影响。方法取雄性SD大鼠48只,随机分为正常组、假手术组、PD模型组、松果菊苷治疗组,用6-OHDA立体定向微量注射于大鼠右侧内侧前脑束制备帕金森病(PD)大鼠模型,用Western Blot检测4组大鼠海马区神经元GSK-3β蛋白的表达。结果在相同条件下,PD模型组的大鼠海马区GSK-3β蛋白的表达量高于正常组,用松果菊苷治疗后,GSK-3β蛋白的表达量降低(P0.01)。结论松果菊苷可影响大鼠海马区患侧Wnt/β-catenin通路GSK-3β蛋白的表达,对帕金森病有一定的治疗作用。     

逆灸对阿尔茨海默病大鼠海马CA3区Tau蛋白磷酸化及相关蛋白激酶的影响

目的:观察逆灸“百会”“肾俞”“足三里”对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马CA3区Tau蛋白及相关蛋白激酶糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、细胞周期蛋白依赖性激酶-5(CDK5)的影响，探讨逆灸防治AD认知障碍的可能作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和逆灸组，每组9只。逆灸组取“百会”“肾俞”“足三里”予逆灸疗法，15 min/次，1次/d, 6 d为1个疗程，共干预3个疗程。逆灸完成后，采用双侧海马注射1μLβ-淀粉样蛋白25-35聚集液复制AD大鼠模型。Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力，电镜观察海马神经细胞超微结构，苏木精-伊红染色法观察大鼠海马组织病理学变化，Western blot法检测大鼠海马CA3区GSK-3β、CDK5、SynapsinⅠ蛋白表达，免疫组织化学法观察大鼠海马CA3区GSK-3β、CDK5、p-Tau阳性表达。结果:与正常组、假手术组比较，模型组大鼠逃避潜伏期显著延长、平台停留时间显著缩短、穿越原平台次数显著减少(P<0.01);海马超微结构观察显示神经元呈不同程度的水肿，可见突触，突触前囊内突触小泡减少，高尔基体水肿扩...     

ZPSJ复方对ICV-STZ模型大鼠海马总tau蛋白及Ser422位点磷酸化的影响

目的：观察燥湿解毒、助脾散精中药ZPSJ方对ICV-STZ模型大鼠海马CA1区总tau蛋白表达及Ser422位点磷酸化的影响。方法：SPF级健康雄性sprague-dawley（SD）大鼠28只,通过双侧侧脑室注射STZ复制SAD模型,分为假手术组、模型组、多奈哌齐组和ZPSJ治疗组。结果：各组大鼠海马CA1区总tau（tau-5）的阳性表达均无显著性差异（P〉0.05）;模型组大鼠海马CA1区P-tau-Ser422阳性表达的神经元明显增多,与假手术组相比有显著性差异（P〈0.01）;经过ZPSJ复方治疗后,P-tau-Ser422的阳性表达明显减少,与模型组比较有显著性差异（P〈0.05）,多奈哌齐组与模型组比较,无显著性差异（P〉0.05）。结论：ZPSJ复方能够减少tau蛋白在Ser422位点的过度磷酸化,从而可能起到防止SAD病理改变形成的作用。     

远志皂苷元调控tau蛋白磷酸化的实验研究

目的观察远志皂苷元对阿尔茨海默（AD）大鼠模型海马tau蛋白磷酸化相关酶类表达的影响,并探讨其机理。方法清洁级SD雄性大鼠60只,随机分为对照组、模型组、多奈哌齐组及远志皂苷元低、中、高剂量组,每组10只。侧脑室注射寡聚体形式的β淀粉样蛋白（Aβ）1-42制备AD大鼠模型,术后给药组给予不同剂量远志皂苷元和多奈哌齐灌胃,对照组和AD模型组给予等量生理盐水灌胃。应用免疫组织化学方法和蛋白印迹法检测海马tau蛋白激酶（GSK-3β、CDK-5）和磷酸酯酶（PP-1、PP-2A）的表达水平。结果与对照组比较,模型组tau蛋白激酶表达明显升高,磷酸酯酶表达明显降低（P〈0.01）;与模型组比较,远志皂苷元各剂量组蛋白激酶表达明显降低,磷酸酯酶表达明显升高（P〈0.01）。结论远志皂苷元能调节AD大鼠模型蛋白激酶和磷酸酯酶之间的平衡失调。     

生慧颗粒通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路改善阿尔茨海默病小鼠学习记忆能力

目的 基于磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路探讨生慧颗粒对阿尔茨海默病（AD）小鼠学习记忆能力的影响。方法 将30只6月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、生慧颗粒组（7.02 g/kg）、多奈哌齐组（0.65 mg/kg）,每组10只;C57BL/6J小鼠10只,设为对照组,对照组和模型组均给予等体积生理盐水,每日1次,连续给药4周。采用Morris水迷宫检测学习记忆能力,HE染色观察海马CA1区病理形态变化,免疫组化检测海马CA1区Aβ1-42和P-Tau416的表达水平,Western Blot检测海马区PI3K/Akt/mTOR通路蛋白及其磷酸化蛋白和Beclin 1、p62、LC3蛋白表达水平。结果 与对照组比较,模型组小鼠平台潜伏期、游泳总路程增加（P<0.01）,穿越平台次数和目标象限停留时间减少（P<0.01）;海马CA1区细胞数量减少、排列疏松,细胞层次减少;Aβ1-42和P-Tau416蛋白表达增多（P<0.01）;PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-m...     

远志皂苷通过UPP通路清除AD大鼠脑神经细胞代谢废物积聚的作用机制研究

目的探讨远志皂苷（tenuigenin, TEN）对AD大鼠脑内β淀粉样蛋白（amyloid β protein, Aβ）沉积、异常磷酸化Tau浓度积聚的清除作用及其作用机制。方法大鼠右侧海马CA1区注射Aβ1-40建立AD模型,透模成功的大鼠分为模型组、TEN低、中、高剂量组,并用远志皂苷（18.5、37.0、74.0 mg/kg）对大鼠进行灌胃治疗,另设假手术组;免疫组织化学法观察大鼠脑海马神经元中Aβ1-40、Tau p-Ser262 蛋白的表达;Western blot检测大脑神经元中泛素蛋白（ubiquitin,Ub）和泛素连接酶E3（ubiquitin-protein ligase E3）的表达水平。ELISA法检测大脑神经元中26S蛋白酶体的含量。结果免疫组化显示,与假手术组比较,模型组大鼠海马神经元中Aβ、Tau p-Ser262 蛋白阳性反应的神经元数量显著增多（P<0.01）;Western blot 检测显示,与假手术组比较,模型组大鼠脑组织中Ub表达水平上调,而E3表达下调（P<0.01）。ELISA检测显示,AD大鼠脑内的26S蛋白酶体含量显著减少（P<0.01）。与模型组比较,TEN各组大鼠海马神经元中Aβ1-40、Tau p-Ser262和Ub表达水平下降明显,泛素连接酶E3表达水平和26S蛋白酶体含量也明显升高,以37.0 mg/kg和74.0 mg/kg剂量组效果最佳（P<0.05, P<0.01）。结论UPP通路参与了AD的发生过程,远志皂苷能明显降低AD大鼠脑内Aβ1-40沉积和tau异常磷酸化水平。     

柴胡疏肝散联合BMSCs移植对AMI大鼠心肌细胞PI3K/Akt、GSK-3β信号通路的影响

目的:探讨柴胡疏肝散联合BMSCs移植对AMI大鼠心肌细胞PI3K/Akt、GSK-3β信号通路的影响。方法:采用全骨髓贴壁法培养BMSCs;经结扎冠状动脉制备大鼠心肌梗死模型。将SD大鼠随机分为假手术组(SH组),急性心肌梗死模型组(AMI组),BMSCs移植组(BMSCs组),柴胡疏肝散+BMSCs移植组(MCB组);BMSCs移植+LY294002组(MBL组);BMSCs移植+柴胡疏肝散+LY294002组(MBCL组)。MBC组和MBCL组予柴胡疏肝散灌胃。7 d后,TUNEL法测定心肌细胞凋亡情况,计算凋亡指数;Western blot检测p-Akt、t-Akt、p-GSK-3β、t-GSK-3β蛋白表达。结果:AMI组心肌细胞凋亡指数增加,Akt与GSK-3β磷酸化水平均降低;BMSCs组和MBC组心肌细胞凋亡指数降低,Akt与GSK-3β磷酸化水平均升高;当使用PI3K阻断剂LY294002后,保护作用消失。结论:BMSCs移植联合柴胡疏肝散治疗心肌梗死大鼠,可降低大鼠心肌细胞凋亡指数,其机制可能与启动PI3K、Akt/GSK-3β信号途径相关。     

参芪益智颗粒对Aβ1-42双侧海马注射阿尔茨海默病模型大鼠PI3K/AKT信号通路的影响

目的：探讨参芪益智颗粒对Aβ1-42双侧海马注射AD模型大鼠PI3K/AKT信号通路的影响。方法：采用双侧海马注射Aβ1-42建立AD大鼠模型,参芪益智颗粒干预60天,Morris水迷宫检测大鼠学习记忆功能,HE 染色观察大鼠海马CA3 区病理形态变化,免疫组化检测海马PI3K,AKT 蛋白表达,RT-PCR 检测PI3KmRNA、AKT mRNA的相对表达。结果：与空白组相比,模型组动物逃避潜伏期明显延长、进入平台次数、穿越平台象限时间及百分比明显减少（P < 0.05）;同时海马CA3区椎体细胞排列紊乱,神经元出现明显病变;海马PI3K/AKT在蛋白及基因水平上均呈明显抑制状态（P < 0.05）。经参芪益智颗粒干预后,该模型大鼠逃避潜伏期明显缩短、进入平台次数、穿越平台象限时间明显增加（P < 0.05）。结论：参芪益智颗粒可改善Aβ1-42双侧海马注射AD模型大鼠学习认知功能,其机制可能与激活脑内PI3K/AKT信号通路有关。     

柴胡加龙骨牡蛎汤对抑郁大鼠海马组织PI3K/Akt/GSK3β/β-catenin信号通路的影响

目的:探讨柴胡加龙骨牡蛎汤对抑郁大鼠海马组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成酶激酶3β(GSK3β)/β-链环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。方法:健康SD大鼠120只,随机取20只作为正常组,另100只大鼠用于制备慢性不可预见性温和应激(CUMS)抑郁模型。再将CUMS抑郁大鼠随机分为模型组,柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组,氟西汀组,每组20只。柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组分别灌胃3.25,6.5,13 g·kg~(-1);氟西汀组灌胃盐酸氟西汀10 mg·kg~(-1);正常组和模型组灌胃等量生理盐水;1次/d,共干预21 d。应用糖水偏好和强迫游泳实验评估抑郁行为,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠大脑海马组织中PI3K,Akt,GSK3β以及β-catenin蛋白水平及其磷酸化水平。结果:给药21 d后,与正常组比较,模型组糖水偏好显著下降(P0.01);强迫游泳不动时间显著延长(P0.01);PI3K,p-PI3K p110,p-PI3K p85蛋白水平均显著降低(P0.01);Akt,p-Akt Thr308,p-Akt Ser473,p-GSK3βSer9,β-catenin水平均显著降低(P0.01);GSK3β,p-GSK3β Tyr216水平明显升高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,柴胡加龙骨牡蛎汤中、高组大鼠糖水偏好显著增加(P0.01);强迫游泳不动时间显著缩短(P0.01);PI3K总蛋白,PI3K p110和PI3K p85亚基蛋白磷酸化水平均显著增高(P0.01);p-Akt Thr308和p-Akt Ser473水平均显著升高(P0.01);p-GSK3β Ser9,β-catenin水平显著增高(P0.01),而GSK3β,p-GSK3β Tyr216水平却明显降低(P0.05)。结论:柴胡加龙骨牡蛎汤通过提高大鼠海马组织PI3K蛋白水平及活性,激活Akt,抑制GSK3β活性,阻止β-catenin降解,即提高大鼠海马组织PI3K/Akt信号通路活性,保护海马神经元。     

基于PI3K/Akt/Bad信号通路探讨益髓解毒方对血管性痴呆大鼠海马神经元凋亡的影响

目的:探讨益髓解毒方对血管性痴呆(VD)大鼠海马神经元损伤及调控细胞凋亡信号通路磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)关联死亡启动子重组蛋白(Bad)的作用机制。方法:40只SD大鼠分为假手术组、模型组、盐酸多奈哌齐组、益髓解毒方组,每组10只。双侧颈总动脉永久结扎(2-VO)法制备VD动物模型,假手术组和模型组灌胃生理盐水;盐酸多奈哌齐组灌胃盐酸多奈哌齐原药0.52 mg·kg~(-1);益髓解毒方组灌胃益髓解毒方颗粒(11.11 g·kg~(-1));1次/d。30 d后,以Morris水迷宫测试大鼠学习、记忆能力;苏木素-伊红(HE)染色观察海马CA1区组织形态结构;透射电镜(TEM)观察大鼠海马CA1区神经元超微结构;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测Akt,Bad mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织Akt,磷酸化(p)-Akt,Bad蛋白表达情况。结果:与假手术组比较,模型组大鼠学习、记忆能力下降明显(P0.05),海马组织病理结构及神经元超微结构病变明显,海马组织Akt mRNA和Akt,p-Akt蛋白表达水平明显下降(P0.05),Bad mRNA和Bad蛋白表达水平明显升高(P0.05);与模型组比较,益髓解毒方组可明显提高大鼠的学习记忆能力,改善海马CA1区神经元细胞及超微结构变化,上调海马组织Akt mRNA和Akt,p-Akt蛋白表达水平,降低Bad mRNA和Bad蛋白表达水平(P0.05)。结论:益髓解毒方可明显提高VD大鼠学习、记忆能力,改善海马组织及神经元超微结构病理变化,修复神经元受损细胞,这可能与促进Akt磷酸化,激活PI3K/Akt/Bad信号通路,发挥抗细胞凋亡保护神经元有关。     

阿魏酸钠对AD模型大鼠学习记忆能力及GSK-3β表达的影响

目的:研究阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所致的大鼠学习记忆障碍的改善作用及机制。方法:大鼠每天ig给予SF(50,100 mg/kg),对照组和LPS模型组分别ig给予生理盐水,3w后,侧脑室注射5μl LPS(1.0mmol/L),对照组注射等量生理盐水。脑室注射后第2 d进行Morris水迷宫实验,第7 d,快速取海马CA1区,Western蛋白印迹方法观察磷酸化PDK1、Akt、GSK-3β蛋白表达。结果:脑室内注射LPS大鼠出现明显的空间学习记忆障碍,表现为逃避潜伏期和游泳路程较生理盐水对照组明显延长,在原平台象限游泳时间占总时间的百分比明显降低,同时伴有海马磷酸化PDK1、Akt和GSK-3β蛋白表达降低,SF(50,100 mg/kg)能对抗大鼠的这一行为学及蛋白表达改变。结论:SF通过上调磷酸化GSK-3β表达改善LPS所致大鼠学习记忆障碍。     

复方金思维对老年性痴呆模型大鼠海马神经元微管和Tau蛋白磷酸化相关酶类表达的影响

[目的]观察中药复方金思维对老年性痴呆(AD)模型大鼠海马CA1区神经元微管结构和Tau蛋白磷酸化相关酶类表达的影响.[方法]48只SD大鼠随机等分为假手术组、模型组、盐酸多奈哌齐组和金思维大、中、小剂量组.采用双侧脑室注射微量链脲佐菌素(STZ 3mg/kg)建立拟AD大鼠模型,模型成功后,治疗组分别予盐酸多奈哌齐和金思维(分为3个不同剂量)进行3个月的治疗,模型组和假手术组给予等体积的双蒸水.行灌注固定,冰冻切片,取各组大鼠海马CA1区组织进行光镜和电镜观察,并进行糖原合成激酶3β(GSK-3β)、蛋白磷酸酶-1(PP-1)、蛋白磷酸酶-2A(PP-2A)的免疫组化染色.[结果]1)AD大鼠海马神经元微管结构出现明显的断裂或溶解现象,而用金思维治疗后这种现象得到明显改善.2)AD大鼠海马内的蛋白激酶GSK-3β明显增多、PP-1、PP-2A明显减少,金思维各剂量组上述酶类表达均接近至正常水平,与盐酸多奈哌齐组比较无差异.[结论]AD大鼠模型脑组织微管结构和Tau蛋白磷酸化相关酶类的表达发生异常,金思维可修复断裂或溶解的微管,使蛋白激酶和磷酸酶的表达接近至正常水平.     

远志皂苷+β-细辛醚对阿尔茨海默病细胞模型Akt/GSK-3β信号途径的影响

目的:通过观察远志汤有效成分即远志皂苷+β-细辛醚对Aβ_(25-35)诱导的海马神经元损伤的影响,探讨远志汤对阿尔茨海默病(AD)氧化应激损伤的保护作用和可能机制。方法:通过Aβ_(25-35)诱导原代培养的C57BL/6J小鼠海马神经元建立Aβ毒性损伤细胞模型,把神经元分为正常对照组,Aβ_(25-35)诱导组,Aβ_(25-35)与远志皂苷+β-细辛醚共同孵育3个剂量组(5、10、20μmol·L~(-1)),采用WST-1比色法、流式细胞术、荧光显微镜和Western blot方法检测远志皂苷协同β-细辛醚对原代培养的海马神经元细胞活性、细胞凋亡率和ROS含量,以及AKt、GSK-3β和磷酸化蛋白表达的影响。结果:成功复制了Aβ_(25-35)致海马神经元氧化应激损伤模型;远志皂苷协同β-细辛醚可以提高Aβ_(25-35)损伤的海马神经元细胞活力,降低Aβ_(25-35)所致的细胞凋亡率,同时降低ROS含量,诱导Akt表达,抑制GSK-3β活化。结论:远志皂苷+β-细辛醚对Aβ_(25-35)诱导的海马神经元氧化应激损伤发挥保护作用,可能是通过调控Akt/GSK-3β信号途径。     

养血清脑颗粒对血管性痴呆大鼠海马CA1区GSK-3β及β-catenin蛋白表达的影响

目的：观察养血清脑颗粒对血管性痴呆（VD）大鼠海马CA1 区糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）蛋白及β-连环蛋白（β-catenin）表达的影响。方法：72只实验SD大鼠随机分为假手术组、VD模型组（模型组）和养血清脑颗粒治疗组（治疗组）,采用改良的Pulsinelli四血管阻断法制作VD大鼠模型,分别在术后1、2、4和8周采用免疫组化法和Western blotting法检测海马CA1区GSK-3β及β-catenin表达水平。结果：模型组各时间点GSK-3β蛋白表达增多,1周时即有多量表达,2周时大量表达,4周时达高峰,8周时开始下降但仍较高。与假手术组相比,模型组各时间点GSK-3β蛋白表达增多,有统计学意义（P<0.01）。各时间点β-catenin蛋白表达增多,但与假手术组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。治疗组各时间点GSK-3β及β-catenin蛋白表达明显增多,与模型组相比,有统计学意义（P<0.01）。结论：养血清脑颗粒可通过上调GSK-3β及β-catenin蛋白的表达,发挥对VD的治疗作用。