定心方Ⅲ号方调控JAK2/STAT3通路对肥胖小鼠脂肪炎症的影响

目的?探讨定心方Ⅲ号方（DXR Ⅲ）调控蛋白质酪氨酸激酶2（JAK2）/信号转导和转录激活因子3（STAT3）信号通路对肥胖小鼠脂肪组织慢性炎症的影响。 方法?32只8周龄雄性ApoE-/-小鼠按随机数字表法分为模型组，DXR Ⅲ低、中、高剂量组，每组8只，另取8只同龄C57BL/6J雄性小鼠作为正常组。ApoE-/-小鼠连续喂食西方饮食饲料12周建立肥胖模型后，DXRⅢ低、中、高剂量组分别予6.5、13、26 g/kg DXR Ⅲ中药煎剂灌胃，正常组和模型组以等量生理盐水灌胃。各组均每天给药1次，连续给药12周。每周测量小鼠体重。干预结束后，取小鼠内脏脂肪组织称重并计算内脏脂肪指数；采用生化法检测小鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平；HE染色观察小鼠内脏脂肪组织病理学变化；IL-1β免疫组化染色分析内脏脂肪组织炎症浸润程度；RT-PCR检测脂肪组织炎症因子IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）mRNA表达，巨噬细胞极化标志物诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和精氨酸酶-1（Arg-1）mRNA表达；Western Blot检测小鼠脂肪组织JAK2、磷酸化JAK2（p-JAK2）、STAT3、磷酸化STAT3（p-STAT3）、iNOS、Arg-1蛋白表达。结果?与正常组比较，模型组小鼠体重、体重增加值、内脏脂肪重量、内脏脂肪指数与血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C水平均升高（P<0.05，P<0.01），HE染色显示脂肪细胞肥大，免疫组化染色显示IL-1β水平上调，脂肪组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1、iNOS mRNA表达增加，iNOS蛋白、JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平亦增加（P<0.05，P<0.01）， Arg-1 mRNA及蛋白表达降低（P<0.05）；与模型组比较，DXR Ⅲ各剂量组小鼠体重增加值、内脏脂肪重量、内脏脂肪指数与血清中TC、LDL-C水平均下降（P<0.05，P<0.01），HE染色显示脂肪细胞变小，免疫组化染色显示IL-1β水平下调；DXR Ⅲ低、中剂量组小鼠血清TG水平下降（P<0.05），脂肪组织IL-1β、IL-6、iNOS mRNA表达下降，iNOS蛋白、JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平亦下降（P<0.05，P<0.01），Arg-1 mRNA及蛋白表达增加（P<0.05，P<0.01）；DXR Ⅲ高剂量组小鼠血清HDL-C水平上升（P<0.01），脂肪组织MCP-1 mRNA表达及JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平均下降（P<0.05，P<0.01）。结论?DXR Ⅲ可减轻内脏脂肪组织慢性炎症，作用机制可能与其抑制JAK2 /STAT3信号通路，改善巨噬细胞极化失衡相关。     

针刺对高脂饮食诱导的肥胖小鼠白色脂肪组织巨噬细胞极化的影响

目的:观察穴位与非穴位针刺对高脂饮食诱导的肥胖小鼠白色脂肪组织巨噬细胞极化的影响。方法:将50只雄性C 57 BL/6小鼠随机抽取10只作为正常组,其余40只给予持续高脂饮食造模16周,将30只造模成功的小鼠随机分为模型组、非穴位组、穴位组,每组10只,继续给予高脂饮食喂养8周。正常组继续给予普通饲料喂养8周。自造模成功后第2天开始,穴位组小鼠针刺"关元""足三里""胃脘下俞",非穴位组针刺尾部2个非穴位,每日1次,每次针刺15 min,连续治疗8周。于造模成功后及末次治疗后第2天记录各组小鼠体质量;眼眶采血,检测小鼠血清三酰甘油(triglyceride,TG)、血清总胆固醇(total cholesterol,TC)水平;HE染色观察各组小鼠附睾白色脂肪组织形态,real-time quantitative PCR(RT-q PCR)检测小鼠附睾白色脂肪中白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthesis,i NOS)和CD 206 m RNA表达情况,免疫组化(IHC)检测附睾白色脂肪组织中i NOS和CD 206的蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组、非穴位组、穴位组小鼠在喂养第16周和第24周时体质量均明显上升(均P0.05);与模型组比较,穴位组小鼠在第24周时体质量明显降低(P0.05)。与正常组比较,模型组TG、TC明显上升(均P0.05);与模型组比较,非穴位组TC明显降低(P0.05),穴位组TG、TC明显降低(均P0.05)。与正常组比较,模型组和非穴位组小鼠脂肪组织中MCP-1、TNF-α、IL-6、i NOS m RNA的表达明显升高(均P0.05),IL-10、CD 206 m RNA的表达明显降低(均P0.05);与模型组比较,穴位组脂肪组织中MCP-1、TNF-α、IL-6、i NOS m RNA的表达明显降低(均P0.05),IL-10、CD 206 m RNA的表达明显升高(均P0.05)。HE染色可见:正常组脂肪组织呈蜂窝状结构,由大量单泡脂肪细胞构成,脂肪细胞呈多边形或圆形,呈空泡状;模型组脂肪细胞明显增大且脂肪细胞大小不规则,细胞间隙变大;穴位组脂肪细胞变小,细胞间隙变小。与正常组比较,模型组和非穴位组小鼠脂肪组织中i NOS蛋白表达明显升高(均P0.05),CD206蛋白表达明显降低(均P0.05);与模型组比较,穴位组脂肪组织中i NOS蛋白表达明显降低(P0.05),CD206蛋白表达明显升高(P0.05)。结论:针刺"关元""足三里""胃脘下俞"穴可通过影响白色脂肪组织巨噬细胞极化改善肥胖小鼠脂肪炎性反应。     

糖肾清2号对糖尿病肾病模型小鼠免疫炎性分子的调节作用

目的探讨糖肾清2号抑制糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)小鼠免疫炎性损伤的分子机制。方法将30只健康雄性KK-Ay小鼠,予高脂饲料诱导3周制备DN模型,随机分为模型组、缬沙坦组、糖肾清2号大、中、小剂量组,每组6只,另设6只C57BL/6J小鼠为正常组,正常组及模型组予去离子水0.1mL/(10g·d)灌胃;缬沙坦组给予缬沙坦13.33mg/(kg·d)灌胃;糖肾清2号大、中、小剂量组分别按含生药量40.66,20.33,10.17g/(kg·d)剂量灌胃。各组小鼠1次/d灌胃,连续干预12周。采用RT-PCR技术检测肾脏组织IL-1β、iNOS、MCP-1mRNA转录水平。Western blot技术、免疫组化测定肾脏组织iNOS蛋白表达水平。ELISA法检测血清IL-1β、MCP-1蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组IL-1β、MCP-1、iNOS mRNA转录及蛋白表达水平显著上调(P0.01,P0.05)。与模型组比较,缬沙坦组、中药各组IL-1β、MCP-1mRNA转录及蛋白表达水平显著下调(P0.01,P0.05);缬沙坦组、中药大剂量组iNOS mRNA转录水平及蛋白表达水平显著下调(P0.01,P0.05),中药中剂量组iNOS mRNA转录水平显著下调(P0.01)。与中药小剂量组比较,中药大剂量组iNOS mRNA转录水平及蛋白表达水平显著下调(P0.01,P0.05),中药中剂量组iNOS mRNA转录水平显著下调(P0.01)。结论糖肾清2号改善DN肾组织免疫炎性损伤的分子机制可能与抑制IL-1β、iNOS、MCP-1的生物活性有关。     

黄芪桂枝五物汤对肥胖小鼠棕色脂肪组织产热的优化作用

目的：研究黄芪桂枝五物汤对肥胖小鼠棕色脂肪组织（BAT）产热的干预作用。方法：采用高脂饮食诱导肥胖小鼠模型。40只小鼠随机分为空白组、模型组、β3激动剂组和β3激动剂+中药组,每组10只。HE染色及透射电镜观察小鼠BAT形态变化;RT-qPCR检测BAT中解耦连蛋白1(UCP-1)、PR结构域蛋白16(PRDM16)、精氨酸酶1(Arg-1)及诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达;ELISA法检测BAT中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素（IL）-1β、IL-10水平。结果：第18周,两药物干预组体质量均较模型组显著减轻（P<0.05）。与模型组比较,BAT中脂滴缩小,线粒体数量增加,UCP-1、PRDM16 mRNA表达均显著增加（P<0.05,P<0.01）,β3激动剂组iNOS mRNA及TNF-α、IL-1β水平显著升高（P<0.01）,β3激动剂+中药组iNOS mRNA及TNF-α、IL-1β水平显著降低（P<0.05,P<0.01）,Arg-1 mRNA及IL-10、TGF-β水平显著升高（P&...     

穴位埋线对单纯性肥胖小鼠减脂作用及脂肪组织炎症相关因子的影响

目的观察穴位埋线"足三里"对单纯性肥胖小鼠的减肥效应和脂肪组织中IL-6、TNF-α与MCP-1基因表达变化的影响。方法选用30只刚断乳的健康清洁级C57BL/6J雄性小鼠,随机挑选6只普通饲料喂养组为正常组,另一组24只高脂饲料喂养,将造模成功的12只随机分为模型组和埋线组。比较各组小鼠体重、体脂、血脂、血糖等相关指标的差异,用HE染色观察比较各组小鼠脂肪的形态学差异,用实时荧光定量PCR检测小鼠脂肪IL-6、TNF-α与MCP-1表达变化。结果治疗后,埋线组小鼠体重下降明显,内脏脂肪量与模型组相比,差异明显。血脂方面,埋线组与模型组相比,胆固醇、低密度脂蛋白、甘油三酯和葡萄糖含量含量均显著降低。埋线组小鼠脂肪组织IL-6、TNF-α、MCP-1的mRNA表达水平较模型组显著降低。结论穴位埋线"足三里"可以降低肥胖小鼠的体重,降低小鼠内脏脂肪含量和血脂、血糖水平,抑制肥胖小鼠脂肪组织炎症因子IL-6-mRNA、TNF-α-mRNA与MCP-1-mRNA的表达,减轻炎症反应,从而达到减脂的目的。     

虎杖苷对糖尿病肾病小鼠AMPKα1/TLR4信号通路的影响

目的观察虎杖苷（PD）对糖尿病肾病（DN）模型小鼠腺苷酸活化蛋白激酶α1/Toll样受体4（AMPKα1/TLR4）信号通路的影响。方法采用SPF级雄性KK-Ay小鼠，经高脂饲料诱导3周建立DN模型，将30只模型成功KK-Ay小鼠随机分为模型组，阳性药组，PD高、中、低剂量组，每组6只，将6只雄性 C57BL/6J小鼠设为正常组。正常组及模型组予去离子水10 mL/（kg·d），阳性药组予缬沙坦13.33 mg/（kg·d），PD各组分别予PD 13.33、6.67、3.33 mg/（kg·d）剂量灌胃。各组小鼠每日灌胃1次，连续干预治疗12周后留取血清及肾组织标本。以RT-PCR技术检测肾组织AMPKα1、TLR4、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、IL-18 mRNA转录水平；Western Blot技术、免疫组化技术检测肾组织AMPKα1蛋白表达水平；ELISA技术检测血清MCP-1、IL-18蛋白表达水平。结果与正常组比较，模型组小鼠AMPKα1 mRNA转录及蛋白表达水平上调（P<0.01），TLR4 mRNA转录上调（P<0.01），IL-18、MCP-1 mRNA转录及蛋白表达水平下调（P<0.01）。与模型组比较，各治疗组AMPKα1 mRNA转录及蛋白表达水平上调（P<0.01， P<0.05），各治疗组TLR4、IL-18 mRNA转录下调（P<0.01），阳性药及PD高剂量组IL-18蛋白表达水平下调（P<0.01， P<0.05），各治疗组MCP-1 mRNA转录及蛋白表达水平均下调 （P<0.01）。与PD高剂量组比较，PD中剂量组IL-18 mRNA转录水平上调（P<0.01），PD低剂量组IL-18、MCP-1 mRNA转录表达水平上调（P<0.01），PD中剂量组AMPKα1蛋白表达下调（P<0.05），PD低剂量组AMPKα1、IL-18蛋白表达下调（P<0.01， P<0.05）。与PD中剂量组比较，PD低剂量组IL-18、MCP-1 mRNA转录水平上调（P<0.05， P<0.01），PD低剂量组AMPKα1蛋白表达下调（P<0.01）。结论PD下调IL-18、MCP-1等促炎因子过表达，减轻DN免疫炎性损伤，可能与调节AMPKα1/TLR4信号通路相关。     

针刺对肥胖大鼠脂肪组织M1型巨噬细胞及IL-6表达的影响研究

目的：观察针刺对肥胖大鼠脂肪组织M1型巨噬细胞及IL-6表达的影响,探讨针刺治疗肥胖慢性炎症的分子作用机制。方法：将24只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、针刺组,每组8只。予“双侧足三里、阴陵泉、丰隆、天枢,及中脘、关元”等穴位针刺,30 min/次/天,每5天暂停1次,共30天,并记录每周体质量。治疗结束后,分离各组大鼠的肾周脂肪、肠周脂肪及附睾脂肪等内脏脂肪,并记录其湿重。采用蛋白质免疫印迹（Western Blot)技术检测各组大鼠脂肪组织中M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)及IL-6蛋白的表达;HE染色观察各组大鼠附睾脂肪组织形态。结果:与正常组比较,模型组大鼠的体质量、内脏脂肪湿重、iNOS及IL-6蛋白的表达均显著升高,脂肪细胞平均面积增大( P ＜ 0. 05)。与模型组比较,针刺组大鼠的体质量、内脏脂肪湿重、iNOS及IL-6蛋白的表达均显著降低,脂肪细胞平均面积减小( P ＜ 0. 05)。结论：针刺能降低肥胖大鼠脂肪组织M1型巨噬细胞标志物iNOS及IL-6的表达,改善机体的慢性炎症状态,以达到降脂减肥的目的。     

不同强度电针对肥胖大鼠血脂、脂肪组织巨噬细胞趋化蛋白-1及肿瘤坏死因子-α的影响

目的:观察电针对单纯性肥胖大鼠脂肪组织炎性细胞因子的影响,探讨电针治疗肥胖的作用机制及不同强度电针的效应差异。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、强电针(5 V)组、弱电针(2.5 V)组,每组10只。除正常组外其余各组大鼠均用高脂饲料喂养。电针组取"足三里"三阴交"穴,采用不同强度电针,每日1次,每次15 min,连续治疗14 d。观察大鼠体质量、Lee’s指数、血脂和血糖的变化,用反转录-聚合酶链反应法检测大鼠附睾脂肪组织巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达。结果:模型组大鼠体质量、Lee’s指数、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、血糖(Glu)及MCP-1 mRNA、TNF-αmRNA的表达均显著高于正常组,高密度脂蛋白(HDL-C)显著低于正常组(均P<0.01);强电针组和弱电针组肥胖大鼠电针治疗后体质量、Lee’s指数、TG、TC、LDL-C、Glu及MCP-1 mRNA、TNF-αmRNA表达均明显降低(P<0.01,P<0.05),HDL-C明显升高(P<0.01,P<0.05),且强电针组优于弱电针组(P<0.05,P<0.01)。Glu含量两电针组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:电针"足三里"三阴交"穴对单纯性肥胖大鼠有一定的良性调节作用,强电针组比弱电针组效果好,其作用机制与对脂肪组织中炎性细胞因子的影响有关。     

指压法对肥胖模型大鼠脂肪组织巨噬细胞极化状态的影响

目的 观察指压法对肥胖大鼠脂肪组织巨噬细胞极化状态的影响,探讨指压法对肥胖模型大鼠脂肪组织免疫炎症反应的作用。方法 将35只SD雄性大鼠造模后,随机分为正常组、模型组、指压组,每组10只。予指压法进行推拿干预,10 min/次,共6周,并记录每周体质量。治疗结束后,检测肥胖指标(体质量、Lee′s指数),脂代谢指标(TC、TG、HDL-C、LDL-C);免疫组化法检测脂肪组织中的M1、M2型巨噬细胞特异性抗体CD11c、CD206;采用蛋白质免疫印迹(Western Blot)技术检测各组大鼠脂肪组织中M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶(inducible NOS,iNOS)及IL-6蛋白的表达。结果 与正常组相比,模型组体质量、Lee′s指数、血清TC、TG、LDL-C含量均显著升高、M1型巨噬细胞CD11c浸润升高、M2型巨噬细胞CD206浸润减少、M1与M2比值明显增大、iNOS及IL-6蛋白的表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组相比,指压组大鼠体质量、Lee′s指数、血清TC、TG、LDL-C含量均显著下降、M1型巨噬细胞CD11c浸润表达量...     

电针对肥胖大鼠脂肪组织SIRT1/NF-κB信号通路的影响

目的:探讨电针对肥胖大鼠胰岛素敏感性、脂肪组织炎性反应以及沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:将100只SPF级Wistar雄性大鼠随机挑选13只作为正常组给予普通饲料喂养,其余给予高脂饲料喂养。8周后将达到肥胖标准的大鼠39只随机分为模型组、电针组、假电针组,每组13只。每组随机选3只行高胰岛素-正葡萄糖钳夹术,记录术中葡萄糖输注速率(glucose infusion rate,GIR)以评定胰岛素敏感性。随后电针组针刺"足三里""丰隆""中脘""关元",连接电针,连续波,频率2 Hz,电流强度1 mA,刺激15 min,隔日1次,每周3次,共治疗8周。假电针组取电针组穴位旁开约5 mm处浅刺并夹持电极,不予通电,其余同电针组。于干预前后测定大鼠的体质量及胰岛素敏感性。干预结束后取肾周白色脂肪组织,采用免疫印迹法检测SIRT1、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、乙酰化NF-κB(Ac-NFκB)的蛋白相对表达量,采用实时荧光定量PCR法检测SIRT1、IL-6、TNF-α的mRNA相对表达量。采用免疫荧光双标法检测SIRT1和Ac-NFκB在脂肪组织中的共表达情况。结果:经过8周高脂饲料喂养后,模型组大鼠较正常组体质量显著增高、GIR下降(P<0.01),提示肥胖大鼠造模成功且伴有胰岛素抵抗。干预8周后,与模型组比较,电针组大鼠体质量下降、GIR升高(P<0.01),而假电针组与模型组之间差异无统计学意义(P>0.05)。与正常组相比,模型组大鼠脂肪组织中SIRT1的蛋白表达和mRNA表达降低,Ac-NFκB蛋白表达升高,IL-6、TNF-α的蛋白表达和mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组相比,电针组脂肪组织中SIRT1的蛋白表达和mRNA表达显著升高,Ac-NFκB蛋白表达降低,IL-6、TNF-α的蛋白表达和mRNA表达均显著降低(P<0.05,P<0.01)。假电针组各指标与模型组之间差异无统计学意义(P>0.05)。荧光双标结果显示,SIRT1和Ac-NFκB在脂肪组织中存在共表达。结论:电针刺激能够显著降低肥胖大鼠的体质量、脂肪组织炎性反应状态,提高胰岛素敏感性,其机制可能与电针激活SIRT1/NF-κB通路,下调其下游炎性因子的表达相关。     

电针对肥胖胰岛素抵抗大鼠下丘脑TLR4/IκBα/NF-κB信号通路的影响

目的:观察电针对肥胖胰岛素抵抗(OIR)大鼠下丘脑Toll样受体4(TLR4)/核因子κB抑制剂α(IκBα)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨电针治疗OIR的机制。方法:从42只Wistar雄性大鼠中随机挑选8只作为正常组,剩余大鼠给予高脂饲料喂养8周,建立OIR大鼠模型。将造模成功的16只大鼠随机分为模型组与电针组,每组8只。电针组大鼠给予"关元""中脘""足三里"及"丰隆"电针治疗,每周治疗3次,共治疗8周。分别在干预前及干预2、4、6、8周测量各组大鼠的体质量、空腹血糖和餐后血糖;在干预前及干预结束后行钳夹术检测葡萄糖输注率(GIR);在干预6周后,检测各组大鼠的腹腔注射糖耐量(IPGTT);分别采用荧光定量PCR及Western blot法检测下丘脑TLR4、NF-κB p65、磷酸化(p)-IκBα、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)mRNA和蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量和餐后血糖显著升高(P<0.01),GIR显著降低(P<0.01);在IPGTT实验中,模型组大鼠注射葡萄糖90、120 min时血糖上升幅度显著大于正常组(P<0.01);下丘脑TLR4、p-IκBα、NF-κB p65、TNF-α、IL-1βmRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组大鼠体质量、餐后血糖分别于干预6周、2周后显著下降(P<0.05,P<0.01);干预8周后电针组大鼠GIR显著上升(P<0.05);在IPGTT实验中,电针组大鼠注射葡萄糖60 min时血糖上升幅度显著小于模型组(P<0.05);下丘脑TLR4、p-IκBα、NF-κB p65、TNF-α、IL-1βmRNA及蛋白表达均显著降低(P<0.01)。结论:电针能降低OIR大鼠体质量,改善IR,其机制可能与电针下调下丘脑TLR4/IκBα/NF-κB信号通路,减少炎性因子TNF-α、IL-1β的产生有关。     

不同间隔时间穴位埋线干预代谢综合征的对比研究

目的:观察不同时间间隔穴位埋线对代谢综合征(MS)的疗效,以期寻找最佳治疗间隔时间。方法:将MS患者随机分为治疗1组35例(脱落4例)和治疗2组35例(脱落3例)。两组均于中脘、梁门(双)、滑肉门(双)、天枢(双)、带脉(双)、关元、大肠俞(双)、脾俞(双)、足三里(双)、阴陵泉(双)、丰隆(双)穴进行埋线治疗,治疗1组间隔时间为7d,治疗2组间隔时间为14d,两组均以42d为1个疗程,共治疗2个疗程。分别于治疗前后测量腰围(WC)、臀围(HC)、腰臀比(WHR)、体质量指数(BMI),血中甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、空腹血糖(FPG)及糖化血红蛋白(Hb1Ac)含量,记录不良反应出现情况。结果:与本组治疗前比较,两组WC、HC、WHR、BMI及血液TG、LDL-C、FPG、Hb1Ac含量均显著降低(P<0.05),两组HDL-C显著升高(P<0.05)。治疗后,与治疗1组比较,治疗2组WC、WHR、BMI、TG、LDL-C、FPG、Hb1Ac显著升高(P<0.05),HDL-C显著降低(P<0.05)。两组不良反应率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在保证疗效及安全性的前提下,临床采用穴位埋线干预代谢综合征的优势治疗间隔时间为7d。     

电针“肠病方”腧穴对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织核因子-κB p65及血清白介素-4的影响

目的:探讨电针"肠病方"腧穴治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为空白组、模型组、肠病方组,每组10只。采用冰乙酸灌肠法复制溃疡性结肠炎模型。肠病方组电针"中脘"天枢"和"上巨虚"15min,分别在造模后即刻、24h和48h进行治疗。采用酶联免疫吸附法检测血清白介素-4(IL-4)含量,免疫组化、蛋白质印迹法检测肠组织核因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白表达。结果:模型组NF-κBp65蛋白表达明显高于空白组(P<0.01,P<0.05),肠病方组低于模型组(P<0.01,P<0.05);模型组血清IL-4含量较空白组升高(P<0.05),经电针"肠病方"治疗后,IL-4含量进一步升高(P<0.01)。结论:腧穴"肠病方"对乙酸所致肠黏膜损伤可通过调节炎性反应因子起到修复作用。     

电针对非酒精性脂肪肝大鼠血清及肝组织白介素-18的影响

目的:探讨电针对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠白介素-18(IL-18)的影响及治疗NAFLD的机制。方法:将44只SD大鼠随机分为造模组33只,空白组11只。造模大鼠喂养高糖高脂饲料5周制备NAFLD模型,造模成功后,随机分为模型组、电针组和非穴组。电针组针刺"足三里""丰隆""三阴交""太冲"穴(连续波,频率2Hz,强度1.5V),非穴组针刺大鼠尾巴中1/3段随机4处,每日治疗1次,连续4周。采用全自动化学分析仪检测大鼠空腹血糖(FBS),放射免疫法检测空腹胰岛素(FINS),计算空腹胰岛素抵抗指数(FIRI),采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测血清及肝组织匀浆IL-18含量变化,HE染色观察肝组织病理学改变。结果:针刺4周后,模型组FBS、FINS、FIRI、肝组织和血清IL-18与空白组比较都显著升高(P<0.01),模型组肝组织出现不同程度的脂肪变性;电针组FBS、FINS、FIRI、肝组织匀浆IL-18和血清IL-18与模型组比较都显著下降(P<0.05),电针组肝组织内脂肪性变减轻;非穴组FBS、FINS、FIRI、肝组织匀浆IL-18和血清IL-18与模型组比较变化都不明显(P>0.05),非穴组肝组织内脂肪性变无明显改善。结论:电针可能通过降低肝组织及血清IL-18,阻断多糖攻击肝脏所致的损伤作用,改善肝脏功能,而实现对NAFLD大鼠的治疗作用。     

电针“丰隆”穴对高脂血症大鼠的调控及其作用机制

目的:探讨电针“丰隆”穴治疗高脂血症的作用机制.方法:将40只健康SD大鼠随机分为正常对照组、高脂饲料组、高脂饲料治疗组、高脂+普通饲料组及高脂+普通饲料治疗组,每组8只.两治疗组电针“丰隆”穴,每日1次.治疗30 d后,检测各组大鼠血脂水平,即总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹法(Western Blotting)检测各组大鼠肝脏组织中ATP结合盒转运子A1 (ABCA1)、过氧化体增殖物激活型受体α(PPARα)、肝X受体α(LXR-α)和视黄酸X受体α(RXR-α)基因表达的变化.结果:高脂饲料组大鼠血浆TC、LDL-C较正常对照组明显上升(均P＜0.01);高脂+普通饲料组大鼠血浆TC、LDL-C与高脂饲料组比较明显下降(均P＜0.01),较正常对照组仍升高明显(均P＜0.01);电针“丰隆”穴治疗后,大鼠血浆TC、LDL-C明显下降(均P＜0.01);TG、HDL-C变化不明显(均P＞0.05).与正常对照组比较,高脂饲料组大鼠肝脏ABCA1、PPARα、LXR-α及RXR-α的mRNA和蛋白含量均显著降低(均P＜0.01);高脂+普通饲料组大鼠肝脏ABCA1、PPARα、LXR-α及RXR-α的mRNA和蛋白含量与高脂饲料组比较有所上升,较正常对照组仍降低明显(均P＜0.01);电针治疗后,大鼠肝脏组织中ABCA1、PPARα、LXR-α及RXR-α的mRNA和蛋白含量均显著升高(均P＜0.05).结论:电针“丰隆”穴能够明显下调高脂血症大鼠血脂中TC、LDL-C水平,上调肝脏ABCA1、PPARα、LXR-α、RXR-α的基因表达,从而促进由其介导的胆固醇逆转运,对高脂血症具有一定的治疗作用.     

针刺丰隆单穴及其配穴对高脂血症大鼠LPL HL及肝细胞脂肪变性的效应比较

目的:研究针刺丰隆单穴及其配穴对高脂血症大鼠血清脂蛋白代谢酶及肝脏组织细胞脂肪变性的影响作用及其效应差别。方法:采用高脂饮食饲料喂养造成高脂血症大鼠模型。将40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、丰隆单穴组和丰隆配穴组,每组10只。空白组每天给予基础饲料喂养,其余3组每天给予高脂饲料喂养。造模第15天给予丰隆单穴组、丰隆配穴组针刺治疗。治疗5周后,所有大鼠腹腔静脉取血检测LPL、HL。摘取肝脏进行油红"O"染色。结果:丰隆单穴组、丰隆配穴组的LPL、HL均明显高于模型组,有极显著性差异(P<0.01),丰隆单穴组与丰隆配穴组比较无显著性差异(P>0.05)。丰隆单穴组和丰隆配穴组均比模型组脂肪细胞小、数量少、染色浅。丰隆配穴组的肝组织脂肪细胞明显比丰隆单穴组染色浅,密度相对小。结论:针刺丰隆单穴或丰隆、关元、内关3穴合用均可提高高脂血症大鼠血清LPL、HL的活性,催化TG水解,二者作用的差异不显著。针刺丰隆单穴或丰隆、关元、内关3穴合用均可减轻肝细胞内脂肪的堆积,对肝脏组织细胞脂肪变性具有一定的改善作用。其中,针刺丰隆、关元、内关3穴的效果优于丰隆单穴,能更好的调控肝脏脂质代谢。     

针刺丰隆单穴及其配穴对高脂血症大鼠不同器官SOD MDA的调配规律研究

目的:观察针刺不同穴位对高脂血症大鼠不同脏器(脾、肺、肝脏)中SOD、MDA的影响效应及其差异,以验证——穴位效应的本质是对机体生命物质在相关组织器官间进行重新调配,其通道是经络。方法:采用高脂饮食饲料喂养造成高脂血症大鼠模型。将40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、丰隆单穴组和丰隆配穴组(丰隆、内关、关元),每组10只。空白组每天给予基础饲料喂养,其余3组每天给予高脂饲料喂养。喂养2周后给予丰隆单穴组、丰隆配穴组针刺治疗5周。治疗结束后,所有大鼠无菌摘取肝脏、脾脏、肺脏,制成10%的组织液,检测各脏器组织中SOD活性及MDA含量。结果:丰隆单穴组和丰隆配穴组脾、肺脏的SOD活性显著升高,与模型组比较有显著性差异(P<0.01,P<0.05)。丰隆单穴组肺脏MDA含量比模型组显著降低(P<0.01)。丰隆单穴组在脾、肺脏的SOD活性显著高于丰隆配穴组(P<0.01),肺脏MDA含量显著低于配穴组(P<0.01)。在肝脏,模型组、丰隆单穴组、丰隆配穴组3组间比较,SOD活性、MDA含量均无显著性差异(P>0.05)。结论:穴位效应的本质是对机体生命物质在相关组织器官间进行重新调配,其调配规律与脏腑经络之间的网络关系及其生克乘侮运行规律对相关脏器间物质能量流向的影响有关。     

电针对胰岛素抵抗肥胖大鼠能量调控信号瘦素的影响

目的:观察"标本配穴"电针对胰岛素抵抗肥胖大鼠能量调控信号瘦素(Leptin)及瘦素受体(OB-Rb)的影响,探究电针治疗肥胖可能存在的机制。方法:24只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、电针组,每组8只。以高脂饮食建立胰岛素抵抗肥胖大鼠模型。电针组于"中脘""关元""足三里""丰隆"给予电针治疗,每次30 min,隔日1次,持续8周。比较各组大鼠体质量、进食量、腹腔糖耐量(IPGTT)、腹腔胰岛素耐量(IPITT)、血清胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量的变化,用Western blot法检测小肠和下丘脑中Leptin及OB-Rb蛋白的表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量、进食量、IPGTT、IPITT AUC及血清TC、TG含量均明显升高(P<0.01,P<0.05),小肠和下丘脑Leptin蛋白含量明显升高(P<0.05),小肠和下丘脑OB-Rb蛋白含量明显下降(P<0.05);与模型组比较,电针组大鼠体质量、进食量、IPGTT、IPITT及血清TC、TG含量均明显降低(P<0.05,P<0.01),小肠和下丘脑Leptin蛋白含量明显降低(P<0.05),小肠和下丘脑OB-Rb蛋白含量明显升高(P<0.01,P<0.05)。结论:电针可以通过上调OB-Rb的蛋白表达和增强Leptin与OB-Rb的结合力而改善Leptin抵抗,达到控制食欲、减轻体质量、降低血脂、改善胰岛素抵抗和维持能量平衡的目的。     

艾灸对亚急性衰老小鼠—氧化氮的影响

目的 :通过测定亚急性衰老小鼠血清NO浓度、红细胞中SOD活力和血浆MDA的含量 ,进一步探讨NO与衰老的关系以及艾灸的延缓衰老作用。方法 :以D 半乳糖造成的亚急性衰老小鼠为实验对象 ,艾灸“大椎”、“命门”、“足三里”穴 ,治疗结束后测定NO浓度、SOD活力和MDA含量。结果 :模型组NO浓度与空白组比较明显下降 (P <0 0 5) ;各治疗组与模型组相比 ,NO浓度、SOD活力上升 ,MDA含量下降 ,具有显著性意义 (P <0 0 1 )。结论 :NO与衰老之间有一定的相关性 ,衰老时血清NO浓度降低 ;艾灸具有延缓衰老的作用     

电针丰隆穴对高脂血症大鼠腹腔巨噬细胞MCP-1、IL-1γ表达的影响

目的 观察电针丰隆穴对高脂血症大鼠单核趋化因子（MCP-1）、白细胞介素1γ（IL-1γ）含量的影响.方法 将40只健康SD大鼠随机分为正常对照组、高脂饲料组、高脂＋普通饲料组、高脂饲料治疗组及高脂＋普通饲料治疗组,每组8只.正常组喂普通饲料,其余4组采用高脂饮食饲料饲喂法建立高脂血症大鼠模型,造模28 d后,高脂＋普通饲料组、高脂＋普通饲料治疗组改用普通饲料喂养,其余3组饲喂方法不变,同时高脂饲料治疗组及高脂＋普通饲料治疗组电针丰隆穴,疏密波,频率为2/100 Hz,电流强度2 mA,治疗30 min,每日1次,连续治疗28d.治疗结束后,检测各组大鼠血脂水平,即总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量,流式细胞术（FCM）及酶联免疫吸附法（ELASA）检测各组大鼠腹腔巨噬细胞中单核趋化因子（MCP-1）、白细胞介素1γ（IL-1γ）的表达.结果 高脂饲料组大鼠血浆TC、LDL-C与正常对照组相比明显上升（P＜0.01）;高脂＋普通饲料组大鼠血浆TC、LDL-C与高脂饲料组相比较明显下降（P＜0.01）,较正常对照组仍明显升高（P＜0.01）;电针丰隆穴治疗后,高脂饲料治疗组与高脂饲料组相比较,TC和LDL-C明显降低（P＜ 0.01）,高脂＋普通饲料治疗组大鼠血浆中TC、LDL-C与高脂＋普通饲料组相比较,明显降低（P＜0.01）.高脂饲料组大鼠腹腔巨噬细胞、MCP-1及IL-1γ的表达较正常对照组显著升高（P＜0.01）;高脂＋普通饲料组大鼠腹腔巨噬细胞、MCP-1及IL-1γ的表达较高脂饲料组明显下降（P＜0.05）,但仍较正常组明显升高（P＜ 0.05或P＜0.01）;高脂＋普通饲料治疗组大鼠腹腔巨噬细胞、MCP-1及IL-1γ的表达较高脂饲料治疗组显著下降（P＜0.01）.结论 电针丰隆穴能够明显下调高脂血症大鼠巨噬细胞、MCP-1、IL-1γ的表达,对高脂血症具有一?