虎杖对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜PPARγ/ NF-κB信号途径的影响

目的通过观察虎杖对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠踝关节病理及滑膜组织、血清中过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPARγ)、p65、白细胞介素17(IL-17)表达的影响,探讨虎杖抑制类风湿关节炎(RA)滑膜免疫炎性损伤的作用机制。方法采用大鼠尾根部注射牛CⅡ方法制备CIA模型,将成模大鼠按随机数字表法分为模型组、阳性对照组、虎杖2倍剂量组、虎杖常量组,另设正常对照组,每组6只。正常对照组与模型组每天予去离子水10 mL/kg灌胃,阳性对照组每天予来氟米特1.87 mg/kg灌胃,虎杖2倍剂量组、常量组每天分别以8、4 g/kg灌胃,连续干预12周。采用光镜观察各组大鼠踝关节病理改变。运用RT-PCR、Western Blot及ELISA检测技术,观察各组大鼠滑膜组织、血清中PPARγ、p65、IL-17 mRNA及蛋白表达情况。结果与正常对照组比较,模型组大鼠踝关节关节周围纤维组织增生,炎性细胞浸润;与模型组比较,虎杖常量组大鼠关节软骨、关节腔未见明显病变。与正常对照组比较,模型组PPARγ、p65、IL-17 mRNA及蛋白表达上调(P0.01)。与模型组比较,虎杖2倍剂量组及常量组p65、IL-17 mRNA及蛋白表达均下调(P0.01);PPARγmRNA蛋白表达水平上调(P0.01)。结论虎杖改善CIA模型大鼠关节滑膜免疫炎性损伤的机制,可能与调节PPARγ/NF-κB信号途径相关。     

基于数据挖掘探讨孟凤仙教授治疗类风湿关节炎用药规律

目的:采用数据挖掘技术分析孟凤仙教授治疗类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)用药规律。方法:收集近6年孟凤仙教授治疗RA的门诊处方,借助Epidata 3.1、SPSS 20.0、SPSS Clementine 12.0计算机软件建立数据库并进行证型及用药频数分析、高频用药关联规则分析、聚类分析。结果:证型及用药频数分析结果显示,1129诊次病例中,湿热痹阻、痰瘀痹阻、瘀血阻络、肝肾不足是排名前四的证型,使用频次20%以上的中药共30味。高频用药关联规则分析显示,乳香、没药是关联规则最强的药物组合,另挖掘出多组常用药对。聚类分析挖掘出5类针对不同证型的常用组方。结论:通过数据挖掘方式,比较客观的总结了孟教授治疗RA的用药规律。     

糖肾清2号有效成分对糖尿病肾病小鼠PPARγ信号通路的影响

目的观察糖肾清2号有效成分对糖尿病肾病小鼠肾脏及血清中PPARγ、RANTES、IL-1β、MCP-1水平的影响,探讨该方减轻DN小鼠肾脏损伤的作用。方法将KK-Ay小鼠30只予高脂饲料喂养3周制备糖尿病肾病模型。造模成功的小鼠随机分为模型组,阳性药组(缬沙坦13. 33 mg/kg),糖肾清2号高、中、低剂量组(糖肾清2号方有效成分13. 33 mg/kg,6. 67 mg/kg,3. 33 mg/kg),另设6只C57BL/6J小鼠为正常组,各组小鼠灌胃1次/d,连续干预12周后取血清及肾脏。采用RT-PCR技术检测肾脏组织PPARγ,RANTES,IL-1β,MCP-1mRNA转录水平,Western blot技术测定肾脏组织PPARγ、RANTES蛋白表达水平。ELISA法检测血清IL-1β、MCP-1蛋白表达水平。结果与正常组相比,模型组PPARγ mRNA水平下调,蛋白表达水平上调(P 0. 01),RANTES、IL-1β、MCP-1 mRNA水平及蛋白表达水平上调(P 0. 01)。与模型组比较,TSQ高、中、低剂量组PPARγ mRNA水平下调,蛋白水平上调(P 0. 05,P 0. 01),RANTES、IL-1β、MCP-1 mRNA及蛋白表达均下调(P 0. 05,P 0. 01)。结论糖肾清2号方可以上调DN小鼠PPARγ水平,抑制炎性损伤,对DN有一定保护作用。     

藤莓汤改善CIA模型大鼠关节滑膜免疫炎性损伤的机制研究＊

目的 通过观察藤莓汤(Tengmei Decoction,TMD)对胶原诱导性(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠滑膜中突变型P53(Mutant P53,mt-p53)、增殖诱导配体(a proliferation-inducing ligand,APRIL)，白细胞介素2(Lnterleukin 2,IL-2)表达的影响，探讨藤莓汤抑制类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜免疫炎性损伤的分子机制。方法 建立CIA大鼠模型，中药给药组分为TMD高剂量组、TMD低剂量组，分别以TMD生药量31.8、15.9 g/(kg·d^-1)灌胃；模型组、阳性对照组分别予去离子水10 mL/(kg·d^-1)、来氟米特1.87 mg/(kg^-1·d^-1)灌胃；另设正常对照组，予去离子水10 mL/(kg·d^-1)，各组连续干预12周。干预结束后检测mt-P53、APRIL、IL-2蛋白及mRNA表达。结果 与正常组比较，模型组APRIL、mt-P53、IL-2 mRNA转录水平上调(P < 0.01)；mt-P53、IL-2蛋白表达上调(P < 0.01，P < 0.05)。与模型组比较，各治疗组APRIL mRNA转录水平，mt-P53、IL-2mRNA转录水平及蛋白表达水平下调，(P < 0.01，P < 0.05)；结论 TMD能够降低大鼠关节滑膜、血清中mt-P53、IL-2、APRIL表达水平，改善关节炎模型大鼠关节滑膜免疫炎性损伤，可能与TMD抑制关节滑膜过度增殖，降低炎症因子的表达有关。     

糖肾清1号对糖尿病肾病模型大鼠肾组织MCP-1,RANTES表达的影响

目的:观察中药糖肾清1号高、中、低剂量对糖尿病肾病肾组织局部CC族细胞趋化因子表达的影响。方法:建立糖尿病肾病大鼠模型,设正常组、模型组、卡托普利组、糖肾清1号高、中、低剂量组,正常组和模型组每日予去离子水10 m L·kg~(-1)灌胃;卡托普利组每日予卡托普利2.33 mg·kg~(-1)灌胃,糖肾清1号高、中、低剂量组每日分别予糖肾清1号颗粒187,93.5,46.75 mg·kg~(-1)灌胃,连续给药12周后取材。采用时实荧光定量PCR(Real-time PCR)检测肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和调节正常T细胞表达和分泌的细胞因子(RANTES)mRNA转录,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测MCP-1蛋白表达水平,酶联免疫吸附法(ELISA)测定RANTES蛋白表达水平。结果:糖肾清1号可以下调肾组织的MCP-1,RANTES mRNA转录和蛋白表达(P0.05,P0.01),并且呈量效依赖性,肾组织MCP-1和RANTES的表达量为糖肾清1号高剂量组中剂量组低剂量组,中药各组以糖肾清1号高剂量组疗效明显。结论:糖肾清1号可通过抑制肾组织MCP-1,RANTES mRNA转录和蛋白表达,延缓糖尿病肾病的发生发展。     

虎杖有效成分对DN模型小鼠肾组织病理改变的影响

[目的]探讨虎杖有效成分对糖尿病肾病小鼠肾组织病理改变的影响。[方法]采用自发性2型糖尿病模型KK-Ay小鼠予高脂饲料诱导3周制备DN模型,造模成功后随机分为模型组,阳性药组,大黄素、虎杖苷高、中、低剂量组,每组各6只。另设6只C57BL/6J小鼠为正常组。每天灌胃给药1次,连续干预12周后处死小鼠,取肾脏行HE,PAS染色。光镜下观察肾组织病变并进行评分,PAS染色下测定肾小球基质相对面积。电镜下观察肾组织超微结构形态学改变。[结果]与模型组比较,虎杖苷高剂量组小鼠肾小管病变显著减轻(P0.05);大黄素高剂量组,虎杖苷各剂量组小鼠肾小球基质相对面积显著降低(P0.01,P0.05);大黄素各剂量可改善DN模型小鼠肾小球病变,虎杖苷中剂量可明显改善DN模型小鼠肾组织超微结构病变,足细胞足突结构基本正常。[结论]大黄素、虎杖苷能不同程度的减轻DN模型小鼠肾组织病理损伤,对肾脏组织具有保护作用。     

虎杖苷对糖尿病肾病小鼠AMPKα1/TLR4信号通路的影响

目的观察虎杖苷（PD）对糖尿病肾病（DN）模型小鼠腺苷酸活化蛋白激酶α1/Toll样受体4（AMPKα1/TLR4）信号通路的影响。方法采用SPF级雄性KK-Ay小鼠，经高脂饲料诱导3周建立DN模型，将30只模型成功KK-Ay小鼠随机分为模型组，阳性药组，PD高、中、低剂量组，每组6只，将6只雄性 C57BL/6J小鼠设为正常组。正常组及模型组予去离子水10 mL/（kg·d），阳性药组予缬沙坦13.33 mg/（kg·d），PD各组分别予PD 13.33、6.67、3.33 mg/（kg·d）剂量灌胃。各组小鼠每日灌胃1次，连续干预治疗12周后留取血清及肾组织标本。以RT-PCR技术检测肾组织AMPKα1、TLR4、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、IL-18 mRNA转录水平；Western Blot技术、免疫组化技术检测肾组织AMPKα1蛋白表达水平；ELISA技术检测血清MCP-1、IL-18蛋白表达水平。结果与正常组比较，模型组小鼠AMPKα1 mRNA转录及蛋白表达水平上调（P<0.01），TLR4 mRNA转录上调（P<0.01），IL-18、MCP-1 mRNA转录及蛋白表达水平下调（P<0.01）。与模型组比较，各治疗组AMPKα1 mRNA转录及蛋白表达水平上调（P<0.01， P<0.05），各治疗组TLR4、IL-18 mRNA转录下调（P<0.01），阳性药及PD高剂量组IL-18蛋白表达水平下调（P<0.01， P<0.05），各治疗组MCP-1 mRNA转录及蛋白表达水平均下调 （P<0.01）。与PD高剂量组比较，PD中剂量组IL-18 mRNA转录水平上调（P<0.01），PD低剂量组IL-18、MCP-1 mRNA转录表达水平上调（P<0.01），PD中剂量组AMPKα1蛋白表达下调（P<0.05），PD低剂量组AMPKα1、IL-18蛋白表达下调（P<0.01， P<0.05）。与PD中剂量组比较，PD低剂量组IL-18、MCP-1 mRNA转录水平上调（P<0.05， P<0.01），PD低剂量组AMPKα1蛋白表达下调（P<0.01）。结论PD下调IL-18、MCP-1等促炎因子过表达，减轻DN免疫炎性损伤，可能与调节AMPKα1/TLR4信号通路相关。     

类风湿关节炎的中医药研究进展

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是临床常见自身免疫疾病,可导致患者关节畸形,功能丧失,严重影响患者生活质量。传统中医对本病认识历史悠久,近现代医家认为,RA病机特点为本虚标实,肝肾亏虚、脾胃气血亏虚、阳气亏虚、营卫不和等正气不足为RA发病之本,风寒湿热、痰浊、瘀血痹阻等内外之邪阻滞经络为RA发病之标,治疗方面提出了"从五脏论治""从毒邪论治""从络论治"以及以现代中药药理为用药指导的论治思想。实验研究证实了中药复方治疗RA的有效性,并从缓解RA滑膜炎症,抑制滑膜增生和骨破坏等现代医学理论方面揭示了中药复方的作用机制。