哮喘大鼠血清、支气管肺泡灌洗液及肺组织中转化生长因子-β1与哮喘气道重塑

目的 观察哮喘大鼠模型血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)中转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量及肺组织中TGF-β1的表达,分析其相关性及与哮喘气道重塑的关系,为临床哮喘的诊断和治疗提供理论依据.方法 Wistar大鼠随机分为2组,正常对照组和哮喘模型组,每组20只.用卵蛋白(OVA)致敏和激发制成哮喘大鼠模型,用Elisa法测定血清及BALF中TGF-β1的含量,免疫组化法测定肺组织中TGF-β1的表达,Masson染色观察胶原沉积的情况,计算机图像分析系统评价呼吸性细支气管平滑肌厚度及上皮损伤程度评分等气道重塑指标.结果 造模后,与对照组相比模型组血清中TGF-β1的含量明显减低(P<0.05);BALF中TGF-β1的含量增加(P<0.01);肺组织中TGF-β1的表达增多(P<0.01).哮喘大鼠气道黏膜上皮损害、气道平滑肌厚度、气道胶原蛋白的沉积较对照组明显增加.结论 BALF中TGF-β1的含量增加、肺组织中TGF-β1的表达增加,加重了哮喘气道重塑;血清中TGF-β1含量减少,提示可以通过检测血清中TGF-β1为哮喘的诊断提供依据、间接了解气道重塑.     

金水宝对哮喘大鼠气道重塑、气道炎症及氧化应激水平影响的研究

目的探讨金水宝对支气管哮喘大鼠气道重塑、气道炎症及氧化应激水平的影响。方法以卵蛋白为过敏原致敏和激发,建立大鼠慢性哮喘气道重塑的模型。将40只实验大鼠随机分为5组：对照组（A组）、哮喘组（B组）、布地奈德组（C组）、金水宝正常剂量组[D组,310mg/（kg.d）]、金水宝高剂量组[E组,620mg/（kg.d）],每组8只。造模5周后行药物干预。造模12周时观察指标：肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）的细胞计数与分类,②肺组织转化生长因子-β1（TGF-β1）含量、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力测定,③肺组织病理观察：进行支气管周围炎细胞浸润及杯状细胞增殖评分,测定支气管壁的平滑肌面积、胶原沉积面积,及肺组织TGF-β1的积分光密度值（IOD值）。结果A、C、D、E组的气道重塑指标与B组比较差异均有显著性（均P〈0.01或P〈0.05）,以E组改善最明显,且E组降低氧化应激水平、气道炎症指标亦最明显。相关性分析表明：SOD活性与MDA含量呈负相关（r=-0.869,P〈0.01）,支气管壁的胶原沉积面积与MDA含量、BALF的中性粒细胞计数均呈正相关（r=0.594,P〈0.01或r=0.414,P〈0.01）。结论氧化应激是哮喘气道重塑产生的机制之一。金水宝可能通过清除氧自由基,减少气道炎症（特别是中性粒细胞）及氧化应激水平,而改善或延缓气道重塑的发生。金水宝高剂量比布地奈德能更好地延缓哮喘气道重塑的发生。     

核心蛋白聚糖对哮喘小鼠气道重塑的影响

目的研究核心蛋白聚糖(decorin)对哮喘小鼠气道重塑的影响,探讨decorin在哮喘治疗中的价值。方法将30只雌性昆明系小鼠随机分为对照组(A组)、哮喘气道重塑组(B组)及decorin干预组(C组),每组10只。B组和C组小鼠用卵蛋白致敏并反复激发哮喘,C组给予decorin干预。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定小鼠血清、肺泡灌洗液(BALF)中转化生长因子β1(TGF-β1)水平;苏木精-伊红染色观察肺组织切片病理改变;Masson染色测定气道胶原沉积程度;图像分析软件测定气道重塑指标;免疫组化法观察肺组织TGF-β1的表达。结果 B组小鼠血清及BALF中TGF-β1水平、气道管壁总厚度、气道内壁厚度、气道平滑肌厚度和胶原沉积以及肺组织TGF-β1表达均较A组显著增高(F=32.36～785.57,t=-18.01～-7.86,P<0.01),而C组较B组显著降低(t=5.58～9.57,P<0.01)。结论 decorin可减轻哮喘小鼠气道重塑。     

姜黄素对支气管哮喘大鼠气道重塑和核因子-κB的影响

目的:探讨姜黄素对支气管哮喘大鼠气道重塑及核因子-κB(NF-κB)的影响。方法:将Wistar大鼠随机分为对照组、哮喘组、姜黄素组,各10只;采用卵蛋白(OVA)致敏复制大鼠哮喘模型。观察3组大鼠气道炎症、气道壁厚度、胶原沉积及NF-κB和转化生长因子(TGF-β1)表达情况。结果:哮喘组大鼠炎性细胞浸润、胶原沉积、气道壁厚度、NF-κB、TGF-β1表达与对照组比较有显著性差异(P<0.01),而姜黄素组较哮喘组明显减轻(P<0.01);NF-κB与TGF-β1表达、气道炎症、气道壁厚度、胶原沉积变化成正相关(P<0.01)。结论:姜黄素可抑制哮喘大鼠NF-κB活性以干预其气道重塑。     

咳喘方对支气管哮喘模型大鼠气道重塑的干预作用

目的:探讨咳喘方对支气管哮喘模型大鼠气道重塑的干预作用。方法:将30只SD雄性大鼠分为对照组、模型组、中药组,每组10只。除对照组外均行支气管哮喘造模;中药组予咳喘方灌胃,其余两组予0.9%Na Cl注射液灌胃,疗程3周。采用免疫组化法检测各组大鼠肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达;并取肺组织经HE染色进行病理观察,图像分析测定其气道壁总面积(Wat)、管壁平滑肌面积(Wam)、支气管底膜周径(Pbm)、支气管周围胶原纤维组织面积(Wac)的数值。结果:模型组TGF-β1表达较对照组明显升高(P0.01);中药组TGF-β1计数较模型组明显降低(P0.01)。模型组Wat、Wam、Wac水平较对照组明显升高(P0.01);中药组Wat、Wam、Wac水平较模型组明显降低(P0.01)。结论:咳喘方可抑制支气管哮喘大鼠肺组织TGF-β1表达和气管壁增厚。     

阿奇霉素对哮喘大鼠气道重塑的影响

目的探讨阿奇霉素对哮喘大鼠气道重塑的影响及其作用机制。方法将32只Sprauge-Dawley大鼠随机分为空白对照组(C组)、哮喘模型组(M组)、阿奇霉素组(A组)、地塞米松组(D组),每组8只,各组动物于末次雾化激发后24 h内处死,留取右肺组织制成病理切片,行组织病理学检查观察肺组织病理学改变;医学图像分析系统测量气道重塑参数;免疫组织化学技术检测肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)在肺组织中的表达情况。结果与C组相比,M组支气管、血管周围见大量炎性细胞浸润,气道壁增厚,胶原沉积增加,黏液分泌增多,A组和D组上述改变明显减轻;A组、D组总管壁厚度、平滑肌厚度较C组增高(P<0.01),较M组明显降低(P<0.01);A组、D组大鼠肺组织TGF-β1、MMP-9、VEGF表达水平较C组升高(P<0.01),较M组降低(P<0.01);大鼠气道平滑肌厚度与肺组织中TGF-β1、MMP-9、VEGF的表达水平呈正相关(P<0.01),肺组织中TGF-β1、MMP-9、VEGF表达水平两两相关(P<0.01)。结论阿奇霉素可改善哮喘大鼠气道重塑程度,其机制可能与下调TGF-β1、MMP-9、VEGF表达有关。     

哮喘小鼠肺组织TGF-β1,MMP-9和TIMP-1在气道重塑的表达

目的 观测小鼠哮喘激发后TGF-β1,MMP-9和TIMP-1在气道重塑的表达,探讨TGF-β1,MMP-9和TIMP-1在哮喘气道重塑中的的机制。方法 哮喘组：40 只健康小鼠,分为4组,用卵蛋白超声雾化激发哮喘,分为激发前组、激发2周、激发4周和激发8 周,观察4组气道形态学参数、哮喘小鼠肺组织TGF-β1,MMP-9和TIMP-1有无统计学差异及相关性。 结果 哮喘小鼠肺组织TGF-β1,MMP-9和TIMP-1比较,差异有显著性( P&amp;amp;amp;amp;lt;0.01);气道形态学参数比较,差异有显著性(P&amp;amp;amp;amp;lt;0.05)。哮喘小鼠肺组织TGF-β1,MMP-9和TIMP-1含量与气道形态学参数呈正相关,哮喘小鼠肺组织TGF-β1,MMP-9和TIMP-1含量亦呈正相关。 结论 哮喘小鼠肺组织TGF-β1,MMP-9和TIMP-1可能参与了哮喘的病理生理过程,并参与了哮喘气道重塑。     

银杏叶提取物对哮喘大鼠气道重塑及转化生长因子-β_1表达的影响

目的探讨银杏叶提取物对支气管哮喘大鼠气道重塑的影响。方法 30只雌性SD大鼠,随机分为三组（每组10只）：对照组、哮喘组和治疗组。采用卵蛋白腹腔注射和雾化吸入激发法复制哮喘大鼠模型。在末次激发24h后取动物肺组织行HE染色和Mas-son观察病理学改变;免疫组化测定转化生长因子β1（TGF-β1）表达。结果与对照组比较,哮喘组大鼠气道纤维化明显,TGF-β1表达增高（P〈0.05）;与哮喘组比较,银杏叶提取物治疗组中大鼠气道纤维化程度及TGF-β1表达减轻（P〈0.05）。结论银杏叶提取物可抑制哮喘大鼠气道重塑的发生,其机制有可能是通过抑制TGF-β1的表达而实现的。     

神经生长因子及其受体在哮喘大鼠肺组织的变化以及对气道炎症的影响

目的：探讨神经生长因子（NGF）和其受体酪氨酸激酶受体A (trkA)和总神经营养因子受体( p75)变化对哮喘大鼠气道炎症的影响。方法：通过鸡卵蛋白致敏激发建立哮喘模型,并将32只SD大鼠随机分为4组：正常对照组、哮喘组、外源性NGF干预组（NGF组）及抗NGF抗体干预组（抗NGF组）。各组测定支气管肺泡灌洗液(BALF)总细胞及细胞分类计数,并行支气管肺组织切片HE染色观察病理改变;通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）半定量检测哮喘组和对照组肺组织NGF mRNA,4组肺组织trkA和p75 mRNA表达变化。结果：哮喘组与对照组比较,BALF总细胞计数、嗜酸性粒细胞（Eos）计数及淋巴细胞（Lym）计数显著增多（均P<0.001）,支气管肺组织炎症表现显著;肺组织NGF mRNA及trkA和p75 mRNA表达明显增强（均P<0.01）;哮喘组NGF mRNA与BALF细胞总数、Lym数呈正相关（均P<0.001）。NGF组与哮喘组比较,BALF总细胞、Eos及Lym计数均显著增多（均P<0.01）,支气管肺组织炎症表现更为显著,p75和trkA mRNA表达明显增强（均P<0.05）。抗NGF组与哮喘组比较,BALF总细胞、Eos及Lym计数显著减少（均P<0.001）,支气管肺组织炎症表现显著减轻,p75和trkA mRNA表达明显减弱（均P<0.01）。结论：致敏哮喘大鼠肺组织内NGF mRNA表达水平显著增高,并与气道炎症密切相关;NGF上调trkA和p75 mRNA表达,从而增强NGF的功能效应,共同参与哮喘的气道神经源性炎症。     

哮喘大鼠模型肺组织、肺泡灌洗液及血清中TGF-β1水平比较

目的:观察哮喘大鼠肺组织、肺泡灌洗液及血清中转化生长因子(TGF-β1)水平探讨其与气道重塑的关系,了解血清、肺泡灌洗液中两者的水平及诊断价值。方法:20只Wistar大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组,每组10只,采用卵蛋白(OVA)等致敏大鼠哮喘模型;第14天后,哮喘模型组1%卵蛋白溶液雾化吸入,共6周,对照组用生理盐水雾化吸入。观察两组大鼠哮喘发作症状、气道壁的厚度、平滑肌的厚度、胶原沉积情况、TGF-β1表达,肺泡灌洗液及血清ELISA检测血清、肺泡灌洗液中TGF-β1的水平。结果:哮喘大鼠肺组织、肺泡灌洗液及血清中TGF-β1与气道壁的厚度,平滑肌的厚度以及胶原面积呈正相关。结论:TGF-β1参与了气道重塑的过程,血清中的水平较肺泡中的水平稳定,检测其对临床诊断具有指导意义。     

地塞米松对支气管哮喘大鼠气道重塑及IL-8的影响

目的探讨支气管哮喘大鼠气道重塑与其血清白介素-8（IL-8）表达的关系以及地塞米松的干预作用。方法以卯白蛋白（OVA）致敏并吸入激发制备大鼠哮喘模型。采用计算机图像分析系统及免疫组化技术结合．测定对照组（C）、模型组（N）、地塞米松早期干预组（E）、地塞米松晚期干预组（L）大鼠气道形态学参数及血清IL-8含量。结果E组、L组、N组大鼠出现气道重塑。其中E组气道重塑程度及IL-8含量较轻、N组较重、L组居中,各组问差异有统计学意义（P〈0．05）。结论IL-8与支气管哮喘大鼠气道重塑程度呈正相关;地塞米松可抑制气道重塑。并且可能通过下调IL-8的表达干预气道重塑。     

两种中药对哮喘大鼠气道壁重构的影响与机制

目的 观察黄芩苷、川芎嗪对哮喘大鼠气道壁重构和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响.方法 24只Wistar大鼠分为4组:正常对照组,哮喘模型组,黄芩苷组和川芎嗪组.用卵蛋白(OVA)致敏制备大鼠哮喘模型.HE染色测气道壁及平滑肌层厚度,免疫组化染色测定气道壁MMP-9、TIMP-1、Ⅳ型胶原含量.结果 哮喘模型组大鼠气道壁及平滑肌增厚,MMP-9、TIMP-1表达增多,与正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);黄芩苷组和川芎嗪组大鼠气道壁及平滑肌变薄,MMP-9、TIMP-1表达减少,与哮喘模型组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 黄芩苷、川芎嗪可以通过调节MMP-9/TIMP1比例,减少气道壁胶原沉积和平滑肌增生而降低气道壁厚度.     

白三烯受体拮抗剂对哮喘小鼠气道重构及基质金属蛋白酶-2表达水平的干预作用

目的　探讨哮喘小鼠模型中基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )与气道重构的关系及白三烯受体拮抗剂和激素干预对气道重构的影响。方法　重复雾化吸入卵蛋白 76天建立小鼠哮喘气道重构模型。实验分为对照组、哮喘组、孟鲁司特 (MK)干预组及地塞米松 (DXM)干预组。图像分析肺内支气管平滑肌厚度。阿尔新兰染色 ,观察黏液分泌情况。免疫组化方法检测MMP 2表达。半定量PCR检测MMP 2mRNA水平。结果　 (1)哮喘组动物出现管壁增厚、平滑肌增生、黏液分泌增加等气道重构的特征性改变 ,MMP 2mRNA水平和蛋白表达均明显增高 ;(2 )MK组、DXM组与哮喘组比较 ,炎症反应轻微 ,平滑肌增生、黏液分泌不明显 ,MMP 2mRNA水平和蛋白表达均降低 ,与对照组差异无显著性。结论　少量、多次变应原吸入可导致气道重构 ,MMP 2在气道重构中发挥作用 ,MK和DXM干预可延缓气道重构的发生。     

地塞米松对大鼠支气管哮喘气道重塑及PDGF-BB表达的影响

目的观察大鼠支气管哮喘气道重塑模型中血小板源生长因子-BB（Platelet-derived growth factor-BB PDGF-BB）的表达变化,探讨了PDGF-BB与气道重塑的关系及早晚期使用地塞米松对支气管哮喘气道重塑和PDGF-BB表达变化的影响。方法将40只Wistar大鼠随机分为对照组（C组）、模型组（N组）、早期干预组（E组）和晚期干预组（L组）,每组10只。N组、E组、L组每只大鼠于实验1、8天腹腔注射10%卵白蛋白抗原混悬液致敏,第15天始超声雾化1%卵白蛋白吸入8周20min/d激发哮喘,制备哮喘气道重塑模型。其中,E组、L组每只大鼠分别于雾化的第1、15天始,在每次雾化前1h腹腔注射地塞米松0.5mg/kg。C组以等量的生理盐水代替。肺组织切片HE染色,计算机图像分析气道形态学参数,衡量气道重塑的程度;免疫组化法测定PDGF-BB的表达。数据用SPSS16.0统计学软件进行处理。结果 E组、L组、N组均有不同程度的气道重塑,E组气道重塑程度明显较C组高且低于N组、L组（P〈0.05）。PDGF-BB的表达E组较C组高且低于N组、L组（P〈0.05）。PDGF-BB的含量与气道重塑程度相关（P〈0.001）。结论 PDGF-BB与支气管哮喘气道重塑程度相关,在气道重塑中起重要作用。早期使用地塞米松可延缓但不能逆转气道重塑。     

大鼠哮喘模型气道重塑中细胞增殖和凋亡的变化

目的探讨大鼠哮喘气道重塑中细胞增殖和凋亡的变化,以及地塞米松对其影响.方法将39只大鼠随机等分为正常对照组、哮喘模型组和地塞米松干预组,以卵蛋白致敏制作大鼠哮喘模型,病理观察3组气道壁形态学改变;采用免疫组化方法观察细胞增殖核抗原(PCNA)和Caspase-3在气道壁和肺组织中的表达.结果哮喘模型组气道壁、气道周围及肺泡区细胞PCNA阳性表达(13.00±1.87,20.46±4.16)明显高于正常对照组的(10.00±2.20)及(15.00±4.83)(P＜0.05),且与气道上皮层、黏膜层厚度及胶原沉积面积呈正相关(r=0.67,0.66,0.57;P＜0.05).地塞米松干预组PCNA表达(9.54±2.15,13.08±3.40)明显低于哮喘模型组,Caspase-3表达(5.38±1.45,3.82±1.70)高于哮喘模型组(4.92±1,85,5.62±1.56)(P＜0.05).结论细胞增殖过度和凋亡异常是哮喘气道炎症和重塑反应的重要机制之一,地塞米松可通过调控细胞增殖和凋亡阻止气道重塑发生.     

ｃ-ｋｉｔ磷酸化与哮喘气道重塑的关系及布地奈德对其的影响

目的:研究干细胞因子(stem cell factor,SCF)/c-kit通路在气道重塑中的作用及糖皮质激素影响气道重塑的可能机制.方法:将30只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘气道重塑组、布地奈德干预组,每组10只;鸡卵清蛋白致敏和激发建立哮喘小鼠气道重塑模型;HE染色观察各组气道炎症发生及气道结构改变情况;免疫沉淀/蛋白质印记(IP/WN)法测定各组小鼠肺组织中c-kit受体磷酸化程度的变化.结果:HE染色提示哮喘组与对照组相比出现黏膜下层和平滑肌增厚,气道管腔狭窄,大量炎细胞浸润的表现,布地奈德组上述改变较哮喘组为轻;IP/Wb检测发现磷酸化的c-kit受体在哮喘组表达较对照组为高(P<0.01),而布地奈德组表达量低于哮喘组(P<0.01).结论:c-kit受体磷酸化可能在哮喘气道重塑过程中表达上调;布地奈德抑制c-Kit受体磷酸化可能是其减轻气道炎症和气道重塑的机制之一.     

止喘汤对哮喘大鼠气道炎症和气道重塑的影响

[目的]观察早期应用中药复方对哮喘气道炎症和气道重塑的治疗作用。[方法]40只SD大鼠随机分为4组:正常组、哮喘组、布地奈德(BUD)组及止喘汤组,采用卵蛋白(OVA)致敏加激发法复制慢性哮喘模型,观察各组大鼠外周血(PB)、支气管肺泡灌洗液(BAL)中嗜酸性粒细胞(EOS)计数的变化情况,同时对肺组织切片行苏木精-伊红(HE)染色测定支气管壁周围EOS个数及气道壁厚度。[结果]哮喘组与正常组比较:PB、BAL和气道壁周围EOS的计数水平明显升高,气道壁明显增厚(P<0.01)。药物干预后,干预组与哮喘组比较:PB、BAL和气道壁周围EOS的计数水平明显降低,气道壁明显变薄(P<0.01);且药物干预组之间相比较无统计学差异(P>0.05)。[结论]止喘汤不但能抑制哮喘气道炎症,而且还具有干预气道重塑的作用。     

哮喘大鼠气道上皮CTGF表达及其与气道重构关系的研究

目的　通过观察结缔组织生长因子 (Connectivetissuegrowthfactor,CTGF)在哮喘大鼠肺内的表达变化 ,揭示CTGF在哮喘气道重构中的作用。方法　以卵白蛋白 (Ovalbumin ,OVA)致敏并持续激发大鼠哮喘 ,天狼猩红染色法检测胶原分布及分类 ,酸水解法测定肺组织羟脯氨酸含量 ,SABC免疫组化法检测CTGF在肺组织的表达。结果　大鼠持续激发哮喘 2 1d后气道壁胶原增生 ,气道上皮细胞CTGF表达阳性 ,CTGF表达与肺羟脯氨酸含量密切相关 (r =0 63 ,P <0 0 1)。结论　大鼠长期持续激发哮喘可导致气道上皮下纤维化及气道重构 ,其机制可能与CTGF表达上调有关。     

维生素D缺乏对大鼠哮喘模型气道炎症的影响

目的:研究维生素D(vitamin D,Vit D)缺乏对哮喘模型大鼠气道炎症的影响?方法:雄性SD大鼠16只(体重150 g左右),随机分为正常对照组?Vit D缺乏模型组,每组8只,对照组予正常光照及普通饲料喂养;模型组予以避光?不含Vit D的饲料喂养,4周后同时用卵清蛋白致敏和激发,建立哮喘动物模型?收集支气管肺泡灌洗液(bronchial alveolar lavage fluid,BALF)进行细胞计数;取肺组织石蜡包埋切片,观察气道炎症情况?结果:Vit D缺乏组的BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞百分比均明显高于对照组(P < 0.05);Vit D缺乏组的肺部病理改变程度较对照组更为严重?结论:Vit D缺乏加重哮喘大鼠气道炎症病变程度?