阜阳市手足口病病例巢式RT—PCR诊断与结果分析

目的明确阜阳市手足151病暴发的病原体,并对RT,PCR结果进行分析。方法利用巢式RT—PCR方法,分别采用肠道通用引物、EV71特异引物和CoxA16特异引物对这起暴发中156例病人的176份病例标本进行检测。结果156例病例的176份标本中,肠道通用引物、EV71特异引物和CoxA16特异引物检测阳性率分别为73．30％、63．07％、0％。咽拭子、气管吸痰液、肛拭子肠道通用引物检测阳性率分别为75．71％、54．54％、78．57％,χ^2=4．57,P〉0．05;EV71特异引物检测阳性率分别为65．00％、45．45％、71．43％,χ^2=3．57,P〉0．05,两种引物检测的三类标本阳性率比较均无统计学意义。156例病例中,有22人采集了双份或多份标本共计50份,其中标本阳性率和病例阳性率比较,肠道通用引物检测分别为56．00％、81．82％,χ^2=4．41,P〈0．05;EV71特异引物检测分别为54．00％、81．82％,χ^2=5．04,P〈0．05,两种引物检测结果均有统计学意义。结论巢式RT—PCR技术是肠道病毒快速诊断的重要手段,阜阳市手足口病暴发的病原体为肠道病毒EV71型。多次多样本采样能够提高病例阳性诊断率。     

2009年山东省手足口病病例的病原学检测分析

目的了解2009年引起山东省手足口病（HFMD）的病原体型别及分布特征。方法采集HFMD临床诊断病例的粪便、咽拭子、疱疹液等标本,应用肠道通用引物和EV71、CoxA16特异性引物对其进行RT-PCR鉴定;使用RD、Hep-2细胞对部分肠道通用引物阳性的粪便标本进行病毒分离。结果共收集1604份HFMD临床诊断病例标本,实验室检测阳性标本990份,其中EV71阳性标本589份,CoxA16阳性标本29份,EV71和CoxA16同为阳性标本2份,EV71和CoxA16的检出率分别为36.72%和1.81%。从80份肠道通用引物阳性的粪便标本中分离出肠道病毒32株,其中EV71型病毒23株,CoxA16型病毒4株。结论引起山东省HFMD的病原体主要为EV71型肠道病毒,EV71感染占EV阳性标本数的59.50%。全省17个地市均有EV71感染的HFMD病例检出。     

咽拭子标本对手足口病疫情监测的应用研究

[目的]明确致手足口病肠道病毒的主要型别,并对咽拭子标本的核酸检测结果进行评价.[方法]2007年收集青岛市5家医院手足口病患者的咽拭子152份,提取病毒RNA. 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对病毒RNA进行肠道通用引物及肠道病毒71(EV71)型和柯萨奇病毒16型(CoxA16)特异性引物的检测.[结果]152份咽拭子标本中,83份标本肠道通用引物扩增阳性,阳性率为54.61%.其中,EV71阳性10份,占肠道病毒的12.05%(10/83);CoxA16阳性者42份,占肠道病毒的50.60%(42/83).[结论]手足口病疫情的病原主要以EV71和CoxA16为主,咽拭子标本在手足口病疫情的监测中具有方便、快捷的优点,而且检出率较高.     

手足口病患儿EV71的检测与其临床分析

目的了解仙居县2008年6月-2009年6月儿童手足口病病例不同标本中肠道病毒EV71和CoxA16的感染情况,为手足口病的治疗和预防控制提供依据。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及实时荧光RT-PCR方法,对145例疑似手足口病的咽拭子、疱疹液及脑脊液标本进行手足口致病病毒进行检测,全部取咽拭子145份,49份同时取疱疹液,47份同时取脑脊液,进行EV、EV7I和CoxA16的检测,最后对重症病例的病毒核酸测序,并进行基因分型。结果 145份疑似样品中,39份为肠道通用病毒阳性,其中21份样品EV71阳性,6份样品CoxA16阳性;咽拭子、疱疹液、脑脊液的检出率分别为28.6%、28.6%、12.8%;3例重症病例均只检出肠道病毒EV71,阳性率为100.0%。结论采用咽拭子及其疱疹液标本检出率比较,差异无统计学意义,且阳性检出率高于脑脊液标本,仙居县肠道病毒夏季高发,感染以EV71和CoxA16为主,手足口病重症感染病毒为EV71的C4亚型。     

佳木斯地区2009年1—8月手足口病病原体检测分析

目的对2009年1—8月佳木斯地区手足口病病例进行病原体检测。方法临床诊断为手足口病病例的咽拭子标本357份,分别使用PE通用、CA16和EV71型的特异引物进行RT-PCR检测。结果总肠道病毒阳性率为18.50%,CA16阳性率为4.80%,EV71阳性率为5.30%。阳性率较高的年龄为2～5岁,男性略多于女性。结论分子生物学方法可用于手足口病的病原体检测、EV71和CAl6分型,对手足口病的监测及防控具有重要作用。     

抚州市2010-2014年手足口病病原学监测结果

目的了解抚州市手足口病的病原学监测结果和流行情况,为手足口病的防治提供依据。方法对2010-2014年抚州市疾控中心收集的临床诊断为手足口病病例部分咽拭子或疱疹液标本,进行实时荧光RT-PCR肠道病毒通用型(PE)、肠道病毒EV71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CoxA16)核酸检测。结果 2010-2014年共收集手足口病病例标本1 397份,检出阳性865份,总阳性率为61.92%。EV71、CoxA16和未分型肠道病毒阳性率分别为16.53%、16.75%、29.54%,差异有统计学意义(χ~2=81.76,P<0.05)。阳性样本主要集中在<5岁儿童(占96.07%),特别是<3岁儿童(占77.57%)。2010-2012年主要病原体为EV71,2013-2014年为未分型肠道病毒。结论抚州市手足口病病例中EV71感染逐年减少,未分型肠道病毒是近两年流行的主要病原体。     

泉州市2008年手足口病实验室检测结果分析

[目的]了解泉州市2008年5~10月儿童肠道病毒EV71和CoxA16的感染情况,为防控提供依据。[方法]用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及实时荧光RT-PCR法,对252例患者（36例重症病例）的咽拭子154份、疱疹液136份及重症患儿脑脊液36份共326份标本进行EV71和CoxA16检测。[结果]252例中129例检出肠道病毒EV71或CoxA16（51.2%）,其中EV71阳性率43.3%,CoxA16阳性率7.9%。咽拭子、疱疹液,脑脊液的检出率分别为49.3%、60.3%和2.8%,咽拭子和疱疹液检出率类似。重症病例均为EV71感染,1例脑脊液检出EV71。患儿男女比例分别为52.3%和48.7%。[结论]RT-PCR是手足口病快速、敏感、特异的检测方法。5~7月是EV71和CoxA16的高发期,3岁以下儿童是高危人群（80.6%）。     

2018-2019年抚州市手足口病病原谱分析

目的手足口病(hand-foot and mouth disease,HFMD)是由肠道病毒感染引起的一种儿童常见传染病,其病原复杂,以EV71和CoxA16最为常见。本研究分析抚州市手足口病优势病原,为手足口病防控提供科学依据。方法选取2018-07-01-2019-06-30抚州市11县区送检手足口病病例标本,采用实时荧光定量PCR方法进行核酸检测。结果共检测标本576份,阳性338份,阳性率为58.68%,构成比以CoxA16(36.09%)最高,其次为CoxA6(32.54%),CoxA10(1.18%)最低;优势病原CoxA16和CoxA6交替出现。不同地区的EV71(χ~2=45.98,P<0.05)、CoxA6(χ~2=37.14,P<0.05)、CoxA16(χ~2=61.22,P<0.05)和其他EV(χ~2=19.65,P<0.05)构成比差异有统计学意义。<5岁儿童占总阳性病例的98.22%,不同年龄的EV71构成比差异有统计学意义,χ~2=17.05,P<0.05。结论抚州市手足口病优势病原随季节和地区变化,<5岁儿童为高危人群,CoxA6已成为第2位病原,仅次于CoxA16,各地针对不同优势病原采取不同防控策略,加快其他EV分型研究。     

2007-2010年上海市静安区儿童手足口发病情况分析和病原学研究

目的分析上海市静安区2007-2009年手足口病发病情况,并分析2009-2010年静安区监测点儿童手足口病病原型别及肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）VP1区基因特征。方法分析上海市静安区2007-2009年手足口病流行概况;收集2009年4月～2010年12月辖区内儿童医院、幼托机构手足口病患儿咽拭标本,并进行实时荧光RT-PCR检测,确定手足口病病原型别。选择2010年不同月份共19份（含1份重症病例）EV71 PCR阳性标本,接种Vero细胞进行病毒分离培养,并设计特异引物对EV71 VP1全序列进行核苷酸序列测定、比对,构建系统发生树。结果 2008年静安区手足口病发病率明显增高,2009年发病数稳中略降,病例以发生在幼托机构为主。2009年病例咽拭标本实时荧光RT-PCR检测结果显示,柯萨奇病毒A组16型（coxsackievirus A16,CoxA16）阳性率为51.0%（52/102）,EV71阳性率为15.7%（16/102）,其他肠道病毒属阳性率2.9%（3/102）;2010年CoxA16和EV71阳性率均为31.3%（36/115）,其他...     

2010-2012年龙岗区手足口病标本病原学检测结果分析

目的了解不同情况下手足口病标本的病毒核酸检出情况,从而为手足口病疫情监测中标本的采集提供科学依据。方法利用SPSS13.0及Excel软件,通过描述性分析和χ2检验对龙岗区疾病预防控制中心实验室检测系统的手足口病检测信息进行统计分析。结果 2010年1月-2012年9月,共检测手足口病相关标本839份,共检出EV71和CoxA16病毒核酸342份(检出率为40.76%),其中EV71和CoxA16检出率分别为27.53%和13.23%;无标本检出EV71和CoxA16混合感染;不同年度手足口病标本的EV71检出率(χ2=16.63,P=0.00)和CoxA16检出率(χ2=14.45,P=0.00)之间差异有统计学意义;流行期送检标本的EV71检出率(30.72%,300/651)显著高于非流行期(16.49%,31/188)(χ2=14.81,P=0.00);发病3 d内采样标本的CoxA16阳性检出率(χ2=7.49,P=0.01)显著高于发病3 d后采样的标本;临床病例标本EV71病毒核酸检出率(χ2=9.31,P=0.00)显著高于暴发/聚集性疫情检出率;不同部位采集标本的EV71检出率(χ2=3.30,P=0.19)及CoxA16检出率(χ2=5.13,P=0.08)差异无统计学意义。结论 2010-2012年度龙岗区EV71和CoxA16均有流行,发病3 d内的咽拭子或肛拭子标本可较好的替代粪便标本用于手足口病疫情监测。     

2010～2011年玉林市手足口病病原学检测结果分析

[目的]掌握玉林市手足口病病例的病原学特点,为有效控制疫情提供科学依据。[方法]对2010～2011年玉林市手足口病病原学检测结果进行分析。[结果]2010～2011年合计检测手足口病病例标本753份,肠道病毒核酸阳性的633份,阳性检出率为84.06%。其中,2010年336份标本的阳性率为94.35%,2011年417份标本的阳性率为75.78%。2年中,EV71核酸阳性率为44.62%,CoxA16核酸阳性率为18.46%,其他肠道病毒核酸阳性率为20.98%。2010年EV71、CoxA16、其他肠道病毒核酸阳性率分别为87.74%、4.46%、7.14%,2011年EV71、CoxA16、其他肠道病毒核酸阳性率分别为13.51%、29.74%、32.13%。[结论]2010年玉林市手足口病病原主要是EV71,2011年主要为CoxA16和其他肠道病毒。     

2008—2009年广东省手足口病病毒分离和鉴定

目的了解广东省手足口病病原特征,为科学防治手足口病提供依据。方法采集2008—2009年广东省疑似手足口病患者的粪便、肛拭子、咽拭子、疱疹液、脑脊液等标本,对其中肠道病毒通用引物阳性的标本进行病毒分离;分离株用肠道病毒通用引物、EV71引物、CoxA16引物进行RT-PCR鉴定。结果对892份肠道病毒通用引物阳性的标本进行病毒分离,共分离出毒株484株,分离率为54.26%;其中EV71型302株,占62.40%;CoxA16型143株,占29.55%。2008年和2009年不同类型标本的病毒分离率差异均有统计学意义(均P0.01),2年均以粪便标本的分离率最高,分别为70.79%(126/178)和73.89%(232/314);不同类型病例的病毒分离率之间差异无统计学意义(P0.05),2年死亡和重症病例均以EV71型为主。结论 2008—2009年广东省手足口病疫情主要由EV71和CoxA16引起,今后应加强对多种病原及其变异情况的监测。     

宿州市295例手足口病病原学监测结果分析

目的：了解宿州市2013年手足口病的病原型别和分布特征,为制订手足口病的防治策略提供依据。方法：采集295例临床诊断手足口病例的生物标本,采用Real-time RT-PCR方法检测肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒A组16型（CoxA16）及柯萨奇病毒A组6型CoxA6）的特异性核酸。结果：295例手足口病患者标本,肠道病毒核酸总阳性数94例,总阳性率31.9%,EV71阳性67份,阳性率22.7%,CoxA16阳性数0份,阳性率0%,CoxA6阳性数13份,阳性率4.4%,其他肠道病毒13份,阳性率4.4%。男女比为1.5∶1,男女阳性率分别为32.4%和31.1%,差异无统计学意义（χ^2=0.055,P〉0.05）。结论：2013年宿州市手足口病流行的病原体优势株为EV71,同时伴有CoxA6和其他肠道病毒感染。发病以5岁以下婴幼儿为主（97.9%）,无性别差异,分布无地域差别。全年均可发病。     

邵阳市2010年手足口病病原学检测结果分析

目的监测邵阳市手足口病病原情况,为制定预防和控制肠道病毒感染提供依据。比较评价检测方法、标本类型及采样时间对病原学诊断的意义。方法采用实时荧光定量PCR方法和RT-PCR方法,进行EV71、CoxA16和其他肠道病毒的核酸检测。结果肠道病毒阳性率为63.38%,其中EV71阳性率为40.61%,CoxA16阳性率为7.97%,其他肠道病毒阳性率为14.80%。男女阳性率分别为65.07%和59.88%。阳性病例0~岁到5~岁组构成比为97.60%。咽拭子肠道病毒阳性率61.60%,疱疹液肠道病毒阳性率80.0%,粪便或肛拭子肠道病毒阳性率75.0%。重症病例肠道病毒阳性检出率为67.43%,轻症病例标本阳性检出率60.71%。109份标本实时荧光定量PCR和RT-PCR比较结果差异有统计学意义。结论 EV71是引起邵阳市儿童手足口病的主要病原体,男性EV71阳性检出率高于女性,5岁以下儿童是高危人群,春夏季高发,不同类型标本的阳性检出率差异有统计学意义,实时荧光定量PCR阳性检出率高于RT-PCR,重症病例EV71检出率高于轻症病例,要加强对EV71和CoxA16的鉴别诊断,有利于提出更好的预防和控制措施。     

克拉玛依市153例手足口病病例病原学分析

[目的]了解克拉玛依市手足口病病原类型及流行规律,为防治工作提供科学依据。[方法]对克拉玛依市2008～2010年报告的部分手足口病(HFMD)病例采集粪便标本进行病原学检测,医疗机构和基层疾控机构负责病例标本的采集和送检,克拉玛依市疾病预防控制中心实验室将送检标本处理后,用RT-PCR方法对粪便标本进行肠道病毒核酸检测。[结果]2008～2010年合计检测手足口病病例粪便标本153份,肠道病毒通用阳性率为52.29%,CoxA16阳性率为27.45%,EV71阳性率为20.92%,其他肠道病毒阳性率为3.92%。不同年份肠道病毒阳性率的差异有统计学意义(P<0.05)。不同单位采集标本阳性率的差异有统计学意义(P<0.01)。2008～2009年以EV71毒株(63.89%)占优,2010年以CoxA16毒株(77.27%)占优;医疗机构采集标本的阳性检出率(67.35%)高于疾控机构(45.19%)。[结论]引起克拉玛依市手足口病的病原体主要是CoxA16和EV71,流行模式为2种毒株在不同年份同时存在、交替流行。     

海南省2008年手足口病样本核酸检测分析

目的 了解2008年海南省手足口病(HFMD)暴发的病原及主要的病毒型别,为HFMD病例诊断和防控措施提供科学依据.方法 依据卫生部<手足口病预防控制指南>提取HFMD临床诊断病例各种样本中的病毒核酸,用肠道病毒通用引物、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CoxA16)特异性引物进行逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),检测基因片段大小.结果 274例临床诊断手足口病病例中EV71型核酸阳性、柯萨奇病毒A16核酸阳性、其他型别肠道病毒核酸阳性分别有102,12,35例;样本中疱疹液阳性检出率最高,为72.0%,肛拭子为40.0%,鼻咽拭子为34.8%,其余样本均阴性;54份直接提取病毒核酸进行RT-PCR检测,结果阴性但细胞培养出现细胞病理改变(CPE)的分离物;肠道病毒、EV71型、CoxA16型阳性分别有48,29,4份,阳性率分别为88.89%,53.70%,7.40%;其中1份样本EV71型和CoxA16型均为阳性.结论 引起海南省2008年手足口病暴发流行的主要病原是肠道病毒71型,其次为CoxA16型.     

2011年—2021年阜阳市手足口病病原学特征分析

目的 分析2011年—2021年阜阳市手足口病的病原检测结果，为今后制定防控措施提供依据。方法 用荧光定量RT-PCR方法，对2011年—2021年手足口病疑似病例样本进行肠道病毒(EV)进行核酸检测。结果 2011年—2021年阜阳市共采集手足口病标本5 226份，病原学阳性标本3 375份，阳性率为64.58%。2011年—2014年EV71为优势病原；2015年—2018年其他病毒为优势病原；从2019年开始检测CoxA6、CoxA10起，CoxA6为优势病原；2011年—2021年EV71及重症病例均成下降趋势。手足口病流行发病年龄集中在0岁～5岁幼儿，特别是1岁～2岁儿童高发；病例分布有季节性特点，主要集中分布在3月—7月，次高峰在10月—11月。结论 2011年—2021年阜阳市手足口的优势病原由EV71转变为Cox A6为主；随着EV71型病原减少，重症病例随之减少。手足口病发病存在明显的季节性和年龄差异。     

2010年池州地区手足口病病原学分析

目的分析池州地区手足口病的流行病学和病原学特征,为手足口病防控提供科学依据。方法采集2010-03/2010-12池州市各地送检的133例手足口病临床诊断患者的咽拭子,应用RT-PCR技术检测样本中肠道病毒(EV)、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)。结果 133例手足口病临床诊断病例咽拭子中,检测到肠道病毒阳性79份,EV71阳性28份,CoxA16阳性24份,EV71和CoxA16的阳性率为21.05%和18.05%。6例手足口病重症病例中,EV71病毒感染病例4例。结论 EV71和CoxA16是2010年池州地区手足口病的主要病原体,而EV71是引起手足口病重症病例的主要类型。     

连云港市2010年手足口病的病原学检测与分析

目的 对连云港市2010年手足口病例标本进行病原学检测,了解手足口病的感染情况,分析检测结果,为手足口病的预防和临床诊断提供科学依据.方法 采用Real Time RT-PCR方法对手足口病患者咽拭子、肛拭子标本进行肠道病毒(EV)、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒16型(CoxA16)特异性核酸的检测.结果 475例患者标本中EV71阳性率27.8％(132例),CoxA16阳性率20.0％(95例),其他肠道病毒阳性率7.8％(37例);全年的感染高峰是4～6月份,占全年的39.58％;发病年龄以低年龄组为主,0～3岁感染率为77.68％.结论 手足口病发病有明显的时间和年龄差异,连云港市手足口病病原以EV71和CoxA16为主,重症病例的病原以EV71为主,荧光定量RT-PCR可快速诊断手足口病病原.     

深圳市2004年肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型的监测

目的了解深圳市肠道病毒的感染情况,为制定预防和控制肠道病毒感染策略提供依据。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对深圳市96例疑似肠道病毒感染者粪便标本进行肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CoxA16)RNA的检测。结果共检出11份EV71阳性标本,阳性率为11.46%,其中8例临床表现为手足口病(HFMD);男女发病率分别为11.94%(8/67)和10.34%(3/29);18例为CoxA16阳性标本,阳性率为18.75%,其中17例临床表现为手足口病;男女发病率分别为19.40%(13/67)和17.24%(5/29)。结论CoxA16和EV71的发病率无性别差异;CoxA16在每年的5~8月份有一个发病高峰;CoxA16和EV71是引起儿童手足口病的主要病原体,要加强对CoxA16和EV71的的鉴别诊断。