儿童重症肌无力患者胸腺细胞异常增生相关因素分析

目的探讨儿童重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者胸腺细胞异常增生的机制。方法取单纯胸腺增生型MG患者胸腺组织,经病理组织切片、苏木精-伊红(HE)染色和免疫组化染色,观察患者胸腺组织的结构和分子表达特点;通过提取胸腺组织RNA和基因芯片检查,分析与胸腺异常增生相关的细胞因子、膜分子及信号通路表达。结果 MG患者胸腺细胞显著增生,CD3分子呈强阳性表达,HLA-DR分子在髓质表达更明显。多种细胞因子、膜分子和信号分子表达存在异常,其中BCL2、CCL22、CCL25、CCL3、CCR7、CCR9在儿童MG患者胸腺显著增高;而CCL2、CSF3、CSF3R、CX3CL1、CXCL9、IL-1R、IFNGR2则显著降低。结论儿童MG患者胸腺细胞异常增生与IL-1R、IL-6、IFNGR2、CCL25、CCR9等细胞因子及其受体的异常表达及信号分子BCL2的异常表达有关。     

胸腺基质淋巴细胞生成素在重症肌无力患者胸腺组织中的表达

目的:探讨重症肌无力(MG)患者胸腺组织中胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)的表达水平及其与MG的关系。方法:免疫组织化学染色法检测手术切除的21例MG患者胸腺组织和16例先天性心脏病患者正常胸腺中TSLP的表达水平。结果:胸腺瘤和胸腺增生MG患者胸腺髓质Hassall's小体的数量和TSLP表达水平均明显低于正常胸腺组织,皮质仅有极少量TSLP表达。结论:MG患者胸腺组织TSLP表达水平异常可能与MG发生有密切关系。     

重症肌无力合并胸腺瘤的临床特点及细胞核增殖相关抗原的表达

目的 探讨重症肌无力(MG)合并胸腺瘤的临床特点和细胞核增殖相关抗原(PCNA)的表达.方法 选择25例伴有MG的胸腺瘤患者(MG组)和25例不伴有MG的胸腺瘤患者(非MG组),采用免疫组化法检测患者胸腺瘤组织中PCNA的表达,阳性为棕黄色颗粒;记录在放大100倍的油镜下随机计数1000个肿瘤细胞中的阳性细胞率.结果 MG组中5例发生肌无力危象,其中1例死亡.伴重症肌无力的瘤性细胞群主要含有PCNA低表达的细胞.结论 伴重症肌无力的胸腺瘤组织恶性程度相对较低,淋巴细胞型的胸腺瘤患者易伴发重症肌无力.     

胸腺瘤组织Cat V表达与合并重症肌无力的临床病理生理特征的关系研究

目的研究胸腺瘤组织中Cat V表达与患者合并重症肌无力（myasthenia gravis，MG）及临床病理生理特征之间的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测78例胸腺瘤患者胸腺瘤组织和瘤旁胸腺组织中的Cat V表达水平，分析其与胸腺瘤患者合并发生MG及其临床病理生理特征之间的关系。结果Cat V在胸腺瘤组织及瘤旁胸腺组织中均有阳性表达；在瘤旁胸腺组织中，Cat V主要在皮质细胞中表达。合并MG胸腺瘤患者的胸腺瘤组织（82．50％）及瘤旁胸腺组织（77．50％）中Cat V阳性表达率均高于不合并MG组（分别为26．33％、31．58％）（P均〈0．01）；在MG组中，Ⅱ型（92．00%）、Ⅲ型（83．33％）患者的Cat V阳性表达率显著高于Ⅰ型（55．56％）患者（P〈0．05）；而术后发生肌无力危象组与未发生危象组，病程在1年以内患者与超过1年患者的Cat V阳性表达率差异无统计学意义。上皮细胞型（75．00％）和混合细胞型（85．00％）胸腺瘤中Cat V阳性表达率显著高于淋巴细胞型（21．21%）（P〈0．01），而上皮细胞型与混合细胞型之间差异无统计学意义；良性与恶性胸腺瘤中Cat V阳性表达率差异无统计学意义；男性患者与女性患者之间、35岁以上患者与以下患者之间胸腺瘤中Cat V阳性表达率差异均无统计学意义。结论胸腺瘤中Cat V表达可能与合并发生MG有关。     

胸腺瘤伴重症肌无力患者胸腺微环境研究

对10例胸腺瘤伴重症肌无力(MG)患者胸腺微环境行前瞻性对比观察。结果显示光镜下组织学分类均为皮质型胸腺瘤伴不同程度的浸润。超微结构改变以Ⅰ,Ⅱ型上皮细胞校增大、胞浆分泌颗粒增多为主。免疫组化 S-100标记阳性为髓质内散在的指突状细胞(IDC),皮、髓质上皮 CK 强阳性,髓质胸腺小体周围上皮EMA 阳性,珠心阴性,包膜下-血管旁上皮胸腺小体 CEA 强阳性。提示胸腺瘤本质是异质性上皮细胞性肿瘤。     

重症肌无力胸腺Foxp3基因转录表达水平及其临床意义

目的 探讨抑制性转录调节因子Foxp3在重症肌无力(myasthenia gravis, MG)胸腺内表达及其临床意义.方法 收集本科2003年1月至2006年6月手术切除的MG胸腺组织50例,采用免疫组织化学、Western blot以及RT-PCR技术,检测Foxp3在胸腺内组织定位,蛋白及mRNA转录表达水平以及与MG胸腺病理、临床特征间关系.结果 Foxp3阳性细胞主要位于胸腺内髓质及血管周围间质,少量见于皮质区;MG胸腺组织中Foxp3显著低于对照胸腺组织;其中胸腺瘤组织中仅有少量表达,与增生胸腺差异显著;Foxp3表达水平与MG临床分型负相关.结论 MG胸腺Foxp3基因转录与表达异常,可能参与MG自身免疫的发生.     

重症肌无力患者胸腺组织中胆碱乙酰转移酶和烟碱型乙酰胆碱受体的表达

目的:探讨重症肌无力(MG)患者胸腺组织中胆碱乙酰转移酶(CHAT)和烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)的表达。方法:采用免疫组化方法检测胸腺增生(20例)、胸腺瘤(10例)、胸腺萎缩(10例)及10例正常胸腺组织中CHAT和nAChR蛋白的表达情况。结果:不同胸腺组织中CHAT和nAChR蛋白的表达差异有统计学意义(F=16.271,15.083,P<0.001)。与正常胸腺和胸腺萎缩组织相比,胸腺瘤和胸腺增生组织中CHAT蛋白的表达增高(P<0.05);胸腺瘤组织中nAChR蛋白表达低于胸腺增生组织(P<0.05);胸腺萎缩组织中nAChR蛋白的表达也低于正常对照组(P<0.05)。结论:胸腺组织中CHAT和nAChR蛋白表达水平的改变可能是MG的发病机制之一。     

68例胸腺瘤组织学分类的临床分析

目的 探讨世界卫生组织(WHO)胸腺瘤分类法与胸腺瘤临床分期的关系及其临床意义. 方法 采用WHO胸腺瘤分类方法 对68例胸腺瘤进行分类,比较胸腺瘤类型与伴发重症肌无力(MG)、肿瘤浸润性及肿瘤大小之间的关系. 结果 各型胸腺瘤中A型、AB型、B1型、B2型、B3型和C型胸腺瘤伴发MG者比率分别为0、40%、15%、50%、46.2%、25%,各组间无统计学差异(P=0.165> 0.05);发生浸润或转移者分别为33.3%、20%、40%、16.7%、57.7%、100%.各组间良恶性胸腺瘤构成比具有显著差异(P=0. 006<0.01);合并MG与未合并MG胸腺瘤组肿瘤大小分别为4.73±2.05cm、7.20±2.52cm,两者差异有统计学意义(P<0.01). 结论 按WHO分类,各组之间良恶性胸腺瘤构成比有统计学意义,未发现胸腺瘤WHO分类与伴发MG之间有相关性;伴MG胸腺瘤组肿瘤直径普遍小于不伴发MG组胸腺瘤.胸腺瘤WHO分类法优于传统分类标准.     

胸腺瘤WHO分类与重症肌无力临床诊治的关系

目的:研究世界卫生组织(WHO)胸腺瘤分类法与重症肌无力(myasthenia gravis,MG)的关系及其临床意义。方法:采用WHO胸腺瘤分类法对95例胸腺瘤进行病理分类,比较胸腺瘤类型与伴发MG、肿瘤浸润性和患者预后的关系。结果:各型胸腺瘤中A型、AB型、B1型、B2型、B3型和C型胸腺瘤中伴发MG分别为16.7％、50.0％、71.4％、91.7％、66.7％和0;A型、AB型、B1型、B2型、B3型和C型胸腺瘤中发生浸润或转移者分别为16.7％、31.3％、31.4％、70.8％、100％和100％;A和AB型5年生存率为91.7％,B1型、B2型和B3型分别为84.6％、62.5％和60.0％,C型为33.3％,A型和AB型胸腺瘤患者5年生存率较B型和C型高(P<0.05,P<0.01)。结论:胸腺瘤WHO分类中B类胸腺瘤易伴发MG、浸润性强,预后差;A型胸腺瘤伴发MG少,预后好。胸腺瘤WHO分类与伴发MG密切相关,能够反映胸腺瘤的临床特征和肿瘤上皮细胞的浸润功能。     

重症肌无力伴胸腺瘤124例临床分析

目的:研究重症肌无力(myasthenia gravis,MG)伴胸腺瘤患者的临床特点、早期诊断和治疗与预后。方法:回顾分析124例经手术病理证实的伴胸腺瘤MG患者的病理和临床特征,评价胸部CT检查和骨骼肌柠檬酸提取物抗体(CAE-Ab)检测的诊断价值,分析MG治疗方法及远期疗效和预后。结果:124例MG按改良Osserman分型Ⅰ型有25例(20.2％),为最多;CEA-Ab阳性率为75.0％(66/88);胸部CT扫描显示纵隔占位性病变为88.7％(86/97)。胸腺瘤以淋巴细胞为主型最多,为55例(44.4％)。浸润程度按Masaoka分期标准分为Ⅰ期63例,Ⅱ期29例,Ⅲ期27例,Ⅳ期5例。92例Masaoka分期Ⅰ、Ⅱ期和22例Ⅲ期患者的肿瘤完全切除,并清除胸腺和周围脂肪组织,3例Ⅲ期和5例Ⅳ期部分切除,2例Ⅲ期仅做活检。79例患者给予皮质类固醇激素治疗,59例采用胸腺区放射治疗,5例难治性MG危象采用环磷酰胺治疗,4例转移性或复发性胸腺瘤采用联合化疗。随访1-16年,总有效率为72.6％。Masaoka分期Ⅰ期的5年和10年生存率分别为91.2％和76.9％,Ⅱ期的5年和10年生存率分别为86.7％和71.4％,明显高于Ⅲ期和Ⅳ期的35.7％和0(P<0.01)。结论:伴胸腺瘤MG以全身型为主,病理类型以淋巴细胞为主型常见,胸部CT扫描结合血清CAE-Ab检查有助于早期发现胸腺瘤。手术并不能消除MG症状,治疗应根     

Familial autoimmune myasthenia gravis

Familial Autoimmune Myasthenia Gravis (FAMG) is rarely reported. We present a mother and son with late-onset mild to moderate ocular disease, low acetylcholine receptor antibody titre and the absence of a thymoma. Both responded well to low doses of anticholinesterase. HLA typing revealed that they did not share the usual HLA antigens or haplotypes with that previously reported in Caucasian and Chinese sporadic Myasthenia Gravis. Chinese FAMG may be associated with HLA antigens different from that of sporadic MG.     

人类胎儿骨髓间充质干细胞的白细胞抗原表达特征

目的:对体外培养不同代数流产胎儿骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,MSCs)的人类白细胞抗原Ⅰ类(human leukocyte antigen,HLA-Ⅰ)和HLA-Ⅱ类抗原表达情况以及经过不同浓度干扰素γ(IFN-γ)作用后HLA-Ⅰ类和HLA-Ⅱ类抗原的表达变化进行观察,为建立干细胞库进行细胞移植提供体外实验证据.本研究经北京大学医学部伦理委员会批准.方法:胎儿MSCs取自23～24周流产胎儿,体外培养后取第5和第12代的细胞,流式细胞仪分析HLA-Ⅰ类和HLA-Ⅱ类抗原的表达水平.经过终质量浓度为5 μg/L或50 μg/L的IFN-γ处理后,于24,48,72,96,120 h 检测HLA-Ⅰ类和HLA-Ⅱ类抗原的表达;并用RT-PCR方法定性分析第13代细胞HLA-E和HLA-G的mRNA表达.结果:胎儿骨髓MSC表达HLA-Ⅰ类抗原,几乎不表达HLA-Ⅱ类抗原.IFN-γ可以上调MSCs的HLA-Ⅰ类和HLA-Ⅱ类抗原.流式细胞分析显示HLA-Ⅰ类抗原阳性细胞占总细胞的比例超过50%,但HLA-Ⅱ类抗原阳性细胞不到10%.经过50 μg/L的IFN-γ处理后,第5代细胞HLA-Ⅰ类抗原阳性细胞百分率及荧光强度与未经处理的细胞相比明显增加,且荧光强度随时间延长呈现递增趋势.第12代细胞HLA-Ⅰ类抗原阳性细胞百分率及荧光强度的上调幅度明显低于第5代细胞.相同浓度IFN-γ(50 μg/L)作用于第5代和第12代细胞均可上调HLA-Ⅱ类抗原,第5代细胞于48 h开始上调(59.9%),第12代细胞于72 h开始上调(48.1%).第12代细胞HLA-Ⅱ类抗原上调幅度低于第5代细胞.不同浓度IFN-γ(5 μg/L和50 μg/L)处理后,HLA-Ⅰ类抗原和HLA-Ⅱ类抗原阳性细胞百分率均明显增加.RT-PCR结果显示,胎儿骨髓MSCs有HLA-E和HLA-G抗原的mRNA水平表达.结论:胎儿骨髓MSCs可以被IFN-γ诱导上调HLA-Ⅰ类和HLA-Ⅱ类抗原表达.体外培养传代能减低IFN-γ作用后的抗原上调幅度.胎儿骨髓MSCs具有HLA-E和HLA-G抗原的mRNA的表达.     

骨桥蛋白在胸腺瘤组织中的表达及临床意义

目的检测骨桥蛋白（osteopontin,OPN）在胸腺瘤组织中的表达情况并探讨其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测OPN在53例胸腺瘤和20例非肿瘤胸腺（non-neoplastic thymus,NNT）组织中的表达情况,结合胸腺瘤与NNT组织、胸腺瘤Masaoka分期、胸腺瘤WHO分型、胸腺瘤是否合并重症肌无力（myasthenia gravis MG）,比较OPN在胸腺瘤与正常胸腺组织、胸腺瘤分期、胸腺瘤分型、胸腺瘤是否合并MG中的表达差异。结果 OPN在胸腺瘤组中的阳性表达率显著高于NNT组（75.5%vs 15.0%,P〈0.001）;OPN在胸腺瘤Masaoka分期的Ⅱ~Ⅳ期组中的阳性表达率显著高于Ⅰ期组（90.9%vs 64.5%,P=0.028）;OPN在胸腺瘤WHO分型的B/C型组中的阳性表达率显著高于A/AB型组（90.5%vs 65.6%,P=0.040）;OPN在合并MG的胸腺瘤组的阳性表达率与不合并MG的胸腺瘤组差异无统计学意义（81.5%vs 69.2%,P=0.300）。结论 OPN与胸腺瘤的形成、胸腺瘤的恶性程度、侵袭性有关,与是否合并MG无关。OPN的表达可作为胸腺瘤临床诊断和患者预后判断的一个重要参考指标。     

乳腺癌多药耐药细胞人类白细胞抗原和B7分子表达的体外调节

OBJECTIVE: To study the modulation of the expressions of human leucocyte antigen (HLA) and co-stimulatory molecules B7 (CD80, CD86) in multidrug-resistant (MDR) breast cancer cells. METHODS: The MDR phenotype MCF-7/ADR cells were treated with recombinant human interferon (IFN)-alpha2b (rhIFN-alpha2b) at different doses for varied length of time, and the expressions of HLA and B7 were determined by flow cytometry (FCM) and compared with those of non-treated cells. Statistical analysis was performed using SPSS10.0 software. RESULTS: At the doses smaller than 1x10(3) IU/ml, rhIFN-alpha2b did not exhibit significant inhibition on MCF-7/ADR cell growth, but HLA and B7 expressions were enhanced in a dose- and time-dependent fashion and significant up-regulation occurred 24 h after 400 IU/ml rhIFN-alpha2b treatment. Treatment with rhIFN-alpha2b at the doses of 100, 400, 800 IU/ml respectively for 24 h produced significant increases in the positive cell ratios for HLA class I expression (P<0.05), HLA-DR expression (P<0.005) and B7-2 expression (P<0.05), while changes in B7-1 expression was not obvious (P>0.05). The mean relative linear fluorescence intensity (RLFI) of HLA class I was also significantly increased (P<0.001) but alterations in the mean RLFI of HLA-DR and B7 were not significant. CONCLUSIONS: rhIFN-alpha2b within the dose range from 400 to 800 IU/ml can effectively enhance the expression of HLA and B7 molecules, suggesting that it may have the potential to reverse immune tolerance of breast cancer cells. Cytokine treatment may be effective in reversing immune tolerance caused by down-expression of HLA and B7.     

Association of defective HLA-I expression with antigen processing machinery and their association with clinicopathological characteristics in Kazak patients with esophageal cancer

Background  It has been confirmed that defective expression of human leukocyte antigen class I (HLA-I) molecules can contribute to the immune evasion of cancer cells in some types of cancer. The aim of this study was to examine the expression of HLA class I antigen and the antigen-processing machinery (APM) components in esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) and their role in high risk human papillomavirus (HPV) infection, and to analyze their association with histopathological characteristics in the Kazak ethnic group.

Methods  A total of 50 formalin-fixed, paraffin-embedded ESCC lesions were collected from the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, China. The expression levels of HLA-I antigen and APM components were determined by immunohistochemistry; the HPV DNA were detected using polymerase chain reaction (PCR).

Results  A high frequency of down-regulation or loss of expression of HLA and APM components were found in esophageal cancer in Kazak people. HLA-I, TAP1, CNX, LMP7, Erp57, Tapasin and ERAP1 were down-regulated in 68%, 44%, 48%, 40%, 52%, 32% and 20% of ESCC lesions then, respectively. The loss of expression of HLA-I antigen was significantly correlated with part of the APM components and positively correlated with high risk HPV16 infection. TAP1, CNX, LMP7, Erp57 and Tapasin loss were significantly associated with tumor grading, lymph node metastasis and depth of invasion (P <0.05).

Conclusion  Our results suggest that APM component defects are a mechanism underlying HLA-I antigen down-regulation in ESCC lesions, and indicate that the loss expression of HLA-I and APM components will become an important marker of ESCC and analysis of HLA-I and APM component expression can provide useful prognostic information for patients with ESCC from the Kazak ethnic group.

     

胸腺瘤WHO组织学分型与胸腺瘤诊治的关系

目的探讨胸腺瘤WHO组织学分型（WHO histologic classification of thymoma）在胸腺瘤诊治中的临床意义。方法采用胸腺瘤WHO组织学分型对79例胸腺瘤病例进行病理分类,比较不同病理类型与伴发重症肌无力（Myasthe-niagravis,MG）、Masaoka分期及临床预后的关系。结果在各型胸腺瘤中,A、AB、B1、B2、B3和C型伴发MG分别为37.5%（3/8）、53.8%（7/13）、70%（14/20）、88.5%（23/26）、33.3%（3/9）、0%（0/3）。B型胸腺瘤伴发MG为72.7%（40/55）,明显高于A型和AB型胸腺瘤的47.6%（10/21,P〈0.05）。B2胸腺瘤伴发MG明显高于B1、B3型（P〈0.01）。在各型胸腺瘤中,A、AB、B1、B2、B3、C型胸腺瘤发生浸润或转移者分别为12.5%（1/8）、23.1%（3/13）、75%（15/20）、84.6%（22/26）、100%（9/9）、100%（3/3）。B型胸腺瘤浸润性明显高于A型、AB型胸腺瘤（P〈0.01）。在各型胸腺瘤中,以C型胸腺瘤浸润性最强。在所有胸腺瘤中,5年总生存率为72．4％。A型、AB型5年生存率为93．5％,B型胸腺瘤为71．8％,其中B1型、B2型、B3型分别为81．6％、70．4％和56．4％。A型、AB型胸腺瘤5年生存期明显长于B型（P〈0．05）。COX回归模型多因素分析发现胸腺瘤WHO组织学分型、Masaoka分期、手术切除方式是影响胸腺瘤预后的独立危险因素。结论胸腺瘤WHO组织学分型与伴发MG相关,反映肿瘤上皮细胞的浸润功能,可以评价患者预后。     

热激诱导Jurkat细胞中主要组织相容性复合物Ⅱ类转录激活因子基因和人白细胞抗原的表达

目的 检测热激对Jurkat细胞中主要组织相容性复合物Ⅱ类转录激活因子(CⅡTA)的表达,及其对下游人类白细胞抗原(HLA-DR)表达的影响.方法 采用实时RT-PCR检测42℃热激和干扰素-γ(IFN-γ)作用前后Jurkat细胞中CⅡTA mRNA的变化.采用Western blot检测热激和IFN-γ作用前后Jurkat细胞中CⅡTA 蛋白的表达变化.采用流式细胞仪荧光分析热激前后Jurkat细胞表面HLA-DR的表达.结果 在Jurkat细胞中,热激可诱导CⅡTA mRNA和蛋白的表达,而IFN-γ处理后无明显变化.与正常Jurkat细胞相比,热激后HLA-DR在Jurkat细胞表面的抗原浓度明显增加(P<0.01).结论 热诱导Jurkat细胞中CⅡTA和HLA-DR先后表达增高.提示热激可能在免疫基因表达缺陷的细胞中,重建相关基因的功能,为肿瘤热疗提供新的依据.     

重症肌无力患者外周血单个核细胞中癌蛋白的表达和NK亚群的状况

作者在非胸腺瘤性重症肌无力(MG)患者外周血单个核细胞中检查了C-myc、kiras和Ha-ras三种癌蛋白的表达和自然杀伤细胞(NK)亚群的状况.结果发现,MG患者外周血淋巴细胞和单核细胞中上述三种癌蛋白的阳性率均极显著地高于健康对照组,而患者NK细胞中的Leu 7,11c~+亚群细胞数则显著地低于对照组,提示NK亚群的改变可能与癌蛋白的表达有关.作者认为癌蛋白的高度表达可能与MG患者容易并发胸腺瘤的事实相关.