DADS诱导HL-60细胞分化中的信号传导相关蛋白

目的 研究二烯丙基二硫(DADS)诱导人髓性白血病HL-60细胞分化过程中蛋白质组的差异表达.方法 运用蛋白质组学方法(双向凝胶电泳、质谱分析、生物信息学方法)分析鉴定DADS诱导HL-60细胞分化的差异表达蛋白质.结果 DADS作用HL-60细胞后,细胞形态发生明显变化,NBT还原能力明显增强.与未处理组比较,初步鉴定的差异蛋白质DJ-1蛋白在处理组中表达下调,其功能与转录调节有关.结论 DADS可能通过抑制DJ-1蛋白合成,活化PIAS蛋白抑制STATs转录因子的活性,进而抑制JAKs/STATs信号传导通路,诱导HL-60细胞分化.     

DADS诱导人白血病细胞分化中的代谢变化

目的 研究二烯丙基二硫诱导人髓性白血病HL-60细胞分化过程中蛋白质组的差异表达.方法 运用蛋白质组学方法(双向凝胶电泳、质谱分析、生物信息学方法)分析鉴定DADS诱导HL-60细胞分化的差异表达蛋白质.结果 初步鉴定的差异表达蛋白质点中二型碳酸酐酶、磷酸丙糖异构酶、醛缩酶A在处理组中均表达下调,其功能与细胞代谢调节有关.结论 DADS可通过抑制二型碳酸酐酶表达和抑制糖酵解途径,抑制HL-60细胞增殖,诱导其分化.     

双向电泳分析二烯丙基二硫诱导HL60细胞分化的蛋白表达差异

目的 以二烯丙基二硫(DADS)诱导人急性早幼粒细胞性白血病HL60细胞分化为模型，利用双向凝胶电泳(2-DE)技术分析比较DADS诱导HL60细胞分化的蛋白表达差异。方法 细胞形态学观察与NBT还原反应结合验证HL60细胞的分化；用双向电泳技术分析蛋白表达差异。结果 分化后细胞形态发生明显变化，细胞核变小；NBT还原能力明显增强。双向电泳技术分析筛选了32个差异点。结论 双向电泳技术可直接反映细胞蛋白表达的变化，DADS诱导HL60细胞分化后导致部分蛋白的表达增加和降低。     

二烯丙基二硫对人白血病细胞增殖和钙网蛋白表达的影响

观察二烯丙基二硫(DADS)对人白血病HL-60细胞增殖和钙网蛋白(CRT)表达的影响。DADS(1.25 mg/L)处理HL-60细胞24、48和72 h,siRNA抑制CRT的表达,采用MTT法检测细胞活力,实时定量PCR和Western blot检测CRT的表达。与对照组比较,DADS处理24、48和72 h组HL-6细胞的增殖水平均显著性降低,呈现时间依赖性(均P<0.05)。与对照组比较,siRNA瞬时转染显著降低了CRT mRNA的表达(P<0.05),也显著降低了细胞的增殖水平(P<0.05),与DADS具有协同效应。DADS抑制了HL-60细胞增殖,其机制可能与下调钙网蛋白的表达有关。     

二烯丙基二硫抑制HL-60细胞增殖及对c-myc基因表达调控

目的研究二烯丙基二硫(DADS)对人髓系白血病细胞株HL-60细胞增殖及对c-myc基因表达的影响。方法采用MTT和细胞记数法分析DADS对细胞生长的影响、蛋白印迹法检测细胞内c-myc蛋白表达水平。结果 DADS能抑制HL-60细胞增殖,并呈剂量和时间依赖性(P<0.05),DADS(20μmol/L)作用12 h后能下调c-myc蛋白的表达水平。结论 DADS抑制HL-60细胞增殖,其机制可能与下调c-myc表达水平密切相关。     

二烯丙基二硫对人白血病细胞HL-60增殖、细胞周期及p21表达的影响

目的观察二烯丙基二硫(DADS)作用于人白血病细胞系HL-60后，细胞增殖、细胞周期及细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白p21表达的变化，探讨DADS抑制HL-60增殖、诱导G／M阻滞的作用机制。方法不同浓度DADS作用HL-60后，MTF法检测细胞增殖情况，流式细胞仪检测细胞周期，Western blot检测p21蛋白水平。结果在一定浓度范围之内，DADS能抑制HL-60细胞增殖，细胞周期发生G2／M期阻滞，并上调p21蛋白水平。结论DADS能通过上调p21的表达而抑制HL-60增殖，诱导其G／M期阻滞。     

DADS活化HL-60细胞G2/M检查点与cyclinB1亚细胞分布的关系

目的研究二烯丙基二硫（DADS）诱导人急性髓性白血病细胞系HL-60细胞G2/M期生长阻滞的分子机制。方法采用MTT法检测DADS对细胞增殖活性的影响、流式细胞术检定细胞增殖周期、蛋白印迹法检测细胞内cyclinB1表达水平。结果DADS呈浓度依赖性抑制HL-60细胞增殖活性，且DADS（20μmol／L）与ATRA（10^-6mol／L）对HL-60细胞增殖活性影响相近（P〈0．01），DADS（20μmol／L）作用12h后能引起G2，M期细胞百分数增高并达到最大值，上调cyclinBl的表达水平并诱导cyclinB1细胞质定位。结论DADS能启动HL-60细胞G2/M检查点，它的激活与cyclinB1细胞质定位有关。     

纳升电喷雾质谱鉴定维甲酸诱导HL60细胞分化相关蛋白质

目的鉴定维甲酸诱导肿瘤细胞分化有关蛋白质.方法双向电泳分离维甲酸诱导分化前后HL660细胞蛋白,PDQuest软件分析筛选分化肿瘤细胞特异表达的蛋白点,用纳升电喷雾质谱对酶解消化样品进行部分氨基酸的序列测定,数据库比较即可得知是已知或未知蛋白.结果PDQuest分析全反式维甲酸(atRA)诱导分化前后HL60细胞蛋白双向电泳图谱,有许多蛋白表达水平有变化,我们对两个在分化细胞中明显表达的两个蛋白点进行了鉴定,质谱测序结合数据库检索表明两个蛋白点为同一种蛋白,即S100钙结合蛋白A9.结论S100A9蛋白在atRA诱导的HL-60细胞表达.     

二烯丙基二硫诱导HL-60细胞系凋亡及其与Caspase-3的关系

目的研究二烯丙基二硫（DADS）诱导白血病细胞凋亡及其机制。方法实验分对照组、DADS处理组、Ae—DEVD—CHO预处理组，进行体外细胞培养，采用形态学观察、MTT法、流式细胞术、DNA凝胶电泳等方法，进行细胞形态学观察、细胞增殖抑制作用研究，检测细胞凋亡率、Caspase-3活性以及DNALadder检测。结果DADS诱导前后，HL-60细胞形态学发生明显改变，DADS以剂量依赖的方式抑制细胞的生长，在DADS诱导HL-60细胞凋亡过程中有Caspase-3的活化，且与剂量和作用时间呈依赖关系，Caspase-3抑制剂Ac—DEVD—CHO能抑制DADS诱导HL-60细胞凋亡。结论DADS能有效地诱导HL-60细胞凋亡，其过程与Caspase-3活化相关。     

DADS上调RORα抑制人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭

目的 研究二烯丙基二硫(DADS)是否通过上调维甲酸相关孤核受体α(RORα)表达抑制人胃癌MGC803细胞增殖、细胞周期与迁移侵袭。方法实验组分为6组,对照组,空载体组,RORα干扰组(miR-RORα),DADS组,空载体联合DADS组,miR-RORα联合DADS组。Western blot检测RORα、MMP-9与TIMP3蛋白表达。MTT、流式细胞术、迁移和侵袭实验分别检测细胞增殖、细胞周期与迁移侵袭的改变。结果DADS处理细胞24 h后,与对照组和空载体组比较,DADS上调RORα和TIMP3、下调MMP-9蛋白表达。干扰组较对照组与空载体组RORα表达明显下调。与DADS处理组比较,干扰RORα表达上调MMP-9、下调TIMP3蛋白表达。MTT实验显示,DADS抑制MGC803细胞增殖,而干扰RORα表达促进增殖。流式细胞术显示,DADS诱导G2/M期阻滞,下调RORα削弱其作用。迁移实验显示,DADS处理组迁移距离明显减少。RORα干扰组迁移距离明显高于对照组和空载体组。侵袭实验显示,DADS处理组较对照组和空载体组穿膜细胞明显减少。干扰组穿膜细胞明显多于对照组和空载体组。干扰RORα表达降低DADS对细胞迁移和侵袭的抑制作用。结论DADS上调TIMP3表达,下调MMP-9表达,抑制MGC803细胞增殖与迁移侵袭,其作用机制与上调RORα表达有关。     

Growth inhibition and differentiation of promyelocytic cells (HL-60) induced by BC-4, an active principle from Boswellia carterii Birdw.

The induction of cell differentiation and growth inhibition of HL-60 cells by Bc-4, an active principle from Boswellia carterii, was studied in vitro and in vivo. The proliferation of HL-60 cells was found to be inhibited by Bc-4 at a concentration of 5-10 micrograms/ml. Under the action of Bc-4, the acid phosphatase and NBT reduction activities in HL-60 cells were increased, and phagocytosis of cells was also induced. All these activities were concentration dependent. The HL-60 cells were induced by Bc-4 to differentiate into more mature cells morphologically. The in vivo growth of HL-60 cells in mouse subrenal capsules (SRC) and in diffusion chambers inoculated into mice was inhibited by Bc-4 at a dose of 50 mg/kg. The morphology of HL-60 cells treated by Bc-4 in diffusion chambers exhibited characteristics of mature granulocytic cells.     

HFCL细胞下调HL-60细胞cxcr4基因的表达及意义

目的:研究正常人骨髓成纤维样基质细胞HFCL对急性髓细胞白血病HL-60细胞cxcr4基因表达的影响及意义. 方法:采用流式细胞仪检测细胞周期,NBT还原实验和CD11b, CD14, CD13, CD33细胞表面抗原的测定作为细胞分化的指标;采用半定量RT-PCR, Northern blot检测cxcr4基因的表达. 结果:HL-60细胞与HFCL细胞共培养后,NBT阳性细胞增高,CD11b和CD14的表达增多,并有明显的统计学意义;而且cxcr4 mRNA的表达下调. 结论:HFCL细胞能诱导HL-60细胞部分向单核细胞分化,并使趋化因子受体cxcr4表达下调.     

小檗碱对HL-60细胞的诱导分化及增殖抑制作用

目的 研究盐酸小檗碱对人早幼粒白血病HL-60细胞增殖与分化的影响。方法 应用锥虫蓝排染法、生长曲线测定法、克隆形成实验检测药物对HL-60细胞生长的影响；细胞分化根据细胞形态、硝基四氮唑蓝(NBT)还原能力、细胞表面标记的改变来判断；细胞周期变化用流式细胞仪测定。结果 HL-60细胞经小檗碱处理后生长明显受抑，IC50为5．29(24h)，2．65(48h)，0．74(72h)mg／L。选择1，2，4，8mg／L小檗碱作用于HL-60细胞，动态观察发现HL-60细胞向成熟细胞分化：细胞核变小，核浆比减少；NBT还原能力显著增强；CD11b表达升高，4mg／L组CD11b阳性率高达85．1％。细胞周期分析发现，小檗碱处理后细胞阻滞于G0／G1期，S期细胞明显减少。结论 盐酸小檗碱可抑制HL-60细胞的增殖，并诱导HL-60细胞向成熟细胞分化。     

盐酸小檗碱对HL-60细胞的诱导分化及其作用机制

目的：研究盐酸小檗碱对人早幼粒白血病HL-60细胞诱导分化的作用履其分子机制。方法：HL-60细胞经盐酸小檗碱处理后，观察细胞形态学变化，以及细胞NBT还原能力的改变，用流式细胞仪测定细胞增殖周期、CD11b、C-myc、C-fos表达。结果：盐酸小檗碱作用于HL-60细胞后，形态学观察显示分化细胞的特征；NBT还原能力增强；CD11b表达升高；细胞被阻滞于G0／G1期，S期细胞数明显减少；C-myc基因表达减弱，C-fos基因表达增强。结论：盐酸小檗碱可诱导HL-60细胞分化戍熟，其机制可能是通过调控与HL-60细胞增殖、分化相关基因表达，抑制DNA合成，从而抑制细胞增殖，诱导细胞分化。     

竹节参总皂苷对人白血病细胞株HL-60的作用

目的:研究竹节参总皂苷(total saponins of Panax japonicus,TSPJ)对人白血病细胞HL-60的作用,探讨其作用机制,为进一步开发竹节参提供理论依据。方法:体外培养人早幼粒白血病细胞HL-60,细胞计数法观察TSPJ对细胞活力的影响,四唑氮蓝(nitroblue tetrazolium,NBT)测定其对细胞还原能力的影响,流式细胞仪检测细胞周期变化和膜表面分化抗原CD11b的表达情况。结果:和阴性对照组比较,不同浓度TSPJ处理的细胞活力显著下降,NBT阳性细胞增多,G_0/G_1期细胞增多,S期细胞减少,膜表面分化抗原CD11b的表达量增多。结论:TSPJ对体外培养的HL-60细胞生长育一定抑制作用,其作用机制与诱导细胞分化和周期阻滞有关。     

普乐林诱导HL-60细胞分化和凋亡研究

目的 :研究中药葛根的提取物普乐林对HL 6 0细胞的诱导分化和促凋亡作用。方法 :采用硝基苯唑氮兰(NBT)还原、NBT/MTT值及细胞表面抗原CD11b表达 ,观察细胞分化程度 ;通过细胞形态、DNA片段电泳、流式细胞(FCM)DNA含量分析检测细胞凋亡。结果 :80 μg .ml 1,16 0 μg .ml 1和 32 0 μg·ml-1普乐林对HL 6 0细胞具有诱导分化效应 ;且 32 0 μg .ml 1普乐林与 1μmol.L 1全反式维甲酸效果相当。 32 0 μg .ml 1和 6 40 μg.ml 1普乐林分别作用HL 6 0细胞 36h ,可出现典型的细胞凋亡形态。DNA凝胶电泳出现片段化的梯状带谱 ;普乐林同时可影响HL 6 0细胞的细胞周期进展 ,且随其浓度的增高 ,亚G1期细胞所占比例增加。结论 :普乐林具有诱导HL 6 0细胞分化及凋亡的双重作用。     

Study on the differentiation and apoptosis of HL-60 cell line induced by Puerarin]

OBJECTIVE: To investigate the differentiation of HL-60 cells induced by different doses of Purerarin(PR) comparing with all-trans retinoic acid(ATRA) and to see if PR can induce apoptosis of HL-60 cells. METHODS: Cell differentiation was analyzed by NBT reduction, the ratio of NBT/MTT and CD11b, apoptosis by morphology, DNA electrophoresis, and flow cytometry(FCM). RESULTS: 80 micrograms.ml-1, 160 micrograms.ml-1, 320 micrograms.ml-1 PR could induce differentiation of HL-60 cells, no significant difference was observed between the cells treated with 1 mumol.L-1 ATRA and 320 micrograms.ml-1 PR. Treated with 320 micrograms.ml-1, 640 micrograms.ml-1 PR, HL-60 cells exhibited a morphological characteristic of apoptosis and typical DNA ladder on gel electrophoresis. FCM analysis showed that PR could interfere with cell cycle in HL-60 cells, with a increased ratio of sub-G1 in HL-60 cells. CONCLUSION: PR exerts effect on differentiation and induces apoptosis in HL-60 cells.