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1.
目的:研究乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)重组腺病毒对HepG2细胞的IL-17R和接头蛋白Act1表达的影响,以及HBV对IL-17诱导NF-B活化的影响.方法:采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测HepG2细胞的IL-17、IL-17R和Act1的mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测IL-17R和Act1的蛋白表达;免疫荧光检测NF-B核移位;ELISA检测上清的IL-17含量.结果:各组HepG2细胞培养上清液中均未检测到IL-17且亦未检测HepG2细胞有IL-17的mRNA表达;HBV重组腺病毒组的IL-17R mRNA和蛋白的表达明显低于相应浓度对照组(0.68±0.02vs0.89±0.03,0.33±0.06vs0.81±0.01,0.12±0.01vs0.86±0.05,P<0.05;蛋白:0.84±0.12vs1.01±0.13,0.56±0.09vs1.01±0.08,0.24±0.08vs0.98±0.05),且呈剂量和时间依赖性.但HBV重组腺病毒组与对照组比较,对HepG2细胞接头蛋白Act1的mRNA和蛋白表达水平无明显影响;同时HBV重组腺病毒能抑制IL-17R诱导Hep G2细胞的NF-B活化.但HBV重组腺病毒与对照组比较,对接头蛋白Act1在mRNA和蛋白表达水平上影响无明显变化;同时HBV重组腺病毒能抑制IL-17R诱导Hep G2细胞的NF-B活化.结论:HBV重组腺病毒可降低HepG2细胞的IL-17R mRNA和蛋白的表达,抑制IL-17R诱导Hep G2细胞的NF-B活化,对HepG2细胞的IL-17R信号通路发挥抑制作用.  相似文献   
2.
为适应社会发展的需要,培养实用型药学人才,加强药学专业学生的实践教学,开展药学实践教学的改革势在必行。本文结合目前药学专业人才就业现状,分析了实践教学在药学人才培养中的重要性,提出药学实践教学改革的举措:阶段性全面推进实践教学,完善考核监控体系与激励机制,加强实践基地的建设,促进师资队伍建设。  相似文献   
3.
白屈菜红碱对肝纤维化大鼠肝脏TGF-β1和α-SMA表达的影响   总被引:8,自引:0,他引:8  
目的:探讨白屈菜红碱对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠肝脏组织转化生长因β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.方法:用四氯化碳皮下注射, 同时联合营养控制和饮用100 mL/L乙醇复合法制备SD大鼠肝纤维化模型, 在实验第4周末, 肝纤维化模型建立(2期肝纤维化形成), 然后用低、中、高剂量白屈菜红碱(0.2、0.6、2.0 g/L)治疗, 同时实验设立病理模型组、空白对照和阳性对照(INF-γ)组. 给药8 wk后, 采用免疫组织化学检测各组大鼠肝脏组织TGF-β1和α-SMA的表达.结果:各剂量白屈菜红碱组肝脏TGF-β1和α-SMA表达明显低于病理模型组(TGF-β1:6.08±2.35, 4.31±2.10, 4.7±1.70 vs 9.33±3.08; α-SMA:3.75±1.76, 3.23±1.42, 3.20±1.17 vs 6.67±2.29, 均P <0.01), 而与INF-γ组比较无明显差异(4.23±2.24, 3.38±1.39, 均P >0.05).结论:白屈菜红碱能降低四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠模型肝脏组织TGF-β1和α-SMA.  相似文献   
4.
5.
目的研究二烯丙基二硫(DADS)诱导人急性髓性白血病细胞系HL-60细胞G2/M期生长阻滞的分子机制。方法采用MTT法检测DADS对细胞增殖活性的影响、流式细胞术检定细胞增殖周期、蛋白印迹法检测细胞内cyclinB1表达水平。结果DADS呈浓度依赖性抑制HL-60细胞增殖活性,且DADS(20μmol/L)与ATRA(10^-6mol/L)对HL-60细胞增殖活性影响相近(P〈0.01),DADS(20μmol/L)作用12h后能引起G2,M期细胞百分数增高并达到最大值,上调cyclinBl的表达水平并诱导cyclinB1细胞质定位。结论DADS能启动HL-60细胞G2/M检查点,它的激活与cyclinB1细胞质定位有关。  相似文献   
6.
目的:研究胞内M-CSF及其受体在肝癌SMMC 7721细胞的表达与性质,探讨胞内M-CSF对SMMC 7721细胞增殖的影响及其机制。 方法: 以高表达M-CSF的人肝癌细胞系(SMMC 7721细胞)为模型,以免疫组化、流式细胞计数、反义技术与蛋白印迹等方法观测胞内M-CSF对SMMC 7721细胞增殖的影响及其机制。 结果: M-CSF 及其受体主要在SMMC 7721细胞的胞质、胞核中表达,胞内的M-CSF的相对分子量为20 000,M-CSFR的相对分子量为120 000;免疫共沉淀分析证明M-CSF在细胞内与M-CSFR以复合物的形式存在;M-CSF的单克隆抗体及其反义寡聚核苷酸能抑制SMMC 7721细胞的增殖、下调cyclinD1/E的表达和上调p16的表达,且M-CSF的单克隆抗体及其反义寡聚核苷酸的联合使用能进一步加强对SMMC 7721细胞抑制作用和增加下调cyclinD1/E和上调p16的表达幅度。 结论: SMMC 7721细胞受M-CSF胞外自分泌和胞内自分泌的双重调控。  相似文献   
7.
守宫水蛭组方对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用   总被引:6,自引:1,他引:5  
为观察守宫水蛭组方是否对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用 ,将 4 8只Wester大鼠随机分为偏瘫康大、小剂量组、模型组、假手术组、西比灵及华佗再造丸阳性对照组 ,分别给予一周药物后用尼龙线栓塞大脑中动脉 ,栓塞 1h后再通 ,制做局部脑缺血再灌注损伤模型 ,于手术后分别对大鼠行为障碍进行术后评分 ,断脑取血测血清乳酸脱氢酶和肌酸激酶含量 ,取手术侧脑测定含水量及脑组织Na 、K 、Ca2 和Mg2 含量。结果发现 ,脑缺血再灌注损伤 6h后 ,大鼠行为障碍术后评分增高 ,出现脑水肿 ,Na 含量增高 ,血清乳酸脱氢酶和肌酸激酶含量也明显升高 ;而预先服用不同剂量的守宫水蛭组方均可明显逆转大鼠脑缺血再灌注损伤的上述变化。说明守宫水蛭组方对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用  相似文献   
8.
Caveolin-1对胃癌细胞系MGC803细胞生长的影响   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的:研究Caveolin-1对胃癌细胞增殖、分化的影响,以探讨Caveolin-1作为基因治疗的候选基因的可能性.方法:运用基因重组技术,将人全长 Caveolin-1基因稳定转染胃癌细胞系MGC803.建立能稳定表达Caveolin-1的胃癌细胞系.同时建立空载体转染的MGC803细胞系作为空白对照,另用PD98059处理48 h作为阳性对照.以重组细胞系作为研究模型,通过免疫细胞化学及Western blot确认Caveolin-1蛋白在被转染细胞中的稳定表达.运用光学显微镜观察转染前后MGC803细胞形态的变化;另运用细胞计数检测了Caveolin-1对MGC803细胞生长的影响,流式细胞术分析了Caveolin-1对MGC803 细胞周期分布的影响.结果:Western blot结果显示,基因转染组及阳性对照组细胞中Vaveolin-1表达比未处理组细胞中明显增强(P<0.001,q值分别为23.067 与13.3376),且基因转染组中Caveolin-1表达比阳性对照组更强(P<0.00l,q=9.7294);基因转染后的MGC803细胞形态发生明显变化,由异形性明显、核大、胞质很少、核分裂明显变得形态较一致、胞质丰富、核/质比明显变小、核分裂相很少见;基因转染后细胞的群体倍增时间明显延长,由46.67 h延长至65.46 h,差异有统计学意义(P<0.05,q =4.8695):基因转染后细胞周期分布发生了明显变化,G0/G1期细胞数明显增多(P<0.01, q=9.1824),S期细胞数明显减少(P<0.01,q= 7.827),G2/M期细胞数无明显变化(P>0.05), Caveolin-1基因转染组与阳性对照组间细胞周期分布的变化也有明显差异性(其中G0/G1期 P<0.01,q=4.9323;S期P<0.05,q=3.3295).结论:Caveolin-1既能诱导MGC803细胞分化又能将其阻滞于G0/G1期,通过延长细胞群体倍增时间而抑制胃癌细胞的体外增殖.  相似文献   
9.
目的 探讨外源性Caveolin-1基因在人胃腺癌细胞中的表达作用.方法 将pcl-neo-caveolin-1人全长质粒转染入MGC803细胞中,用G418筛选得到细胞克隆并扩大培养,获得稳定表达caveolin-1的细胞系,通过Western-blot、细胞计数及流式细胞术等方法检测基因表达、细胞增殖分化等情况.结果 与对照组和pcl-neo空质粒转染组相比,转染caveolin-1基因后的MGC803细胞的caveolin-1的表达明显增高,而P-ERK1/2的表达却明显下降;细胞的群体倍增时间明显延长:由46.67或47.32小时延长至65.46小时,差异有显著性(P<0.01); 细胞周期分布发生明显变化:G0/G1期细胞比例由35.02%增加到51.98%,S期比例由56.97%下降至39.80%,G2、M期无明显变化.结论 Caveolin-1通过抑制MGC803细胞的增殖而导致其发生G0/G1期阻滞,可为肿瘤基因治疗提供实验依据.  相似文献   
10.
目的观察二烯丙基二硫(DADS)作用于人白血病细胞系HL-60后,细胞增殖、细胞周期及细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白p21表达的变化,探讨DADS抑制HL-60增殖、诱导G/M阻滞的作用机制。方法不同浓度DADS作用HL-60后,MTF法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot检测p21蛋白水平。结果在一定浓度范围之内,DADS能抑制HL-60细胞增殖,细胞周期发生G2/M期阻滞,并上调p21蛋白水平。结论DADS能通过上调p21的表达而抑制HL-60增殖,诱导其G/M期阻滞。  相似文献   
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