燕窝鉴别中的蛋白质电泳研究

目的：探讨SDS-PAGE和等电聚焦电泳应用于燕窝蛋白分离及燕窝鉴定中的可行性。方法：提取印尼燕窝、怀集燕窝及常作为伪品的明胶、银耳、猪皮的蛋白质，进行SDS-PAGE和等电聚焦电泳研究。结果：印尼燕窝与怀集燕窝在SDS-PAGE图谱上可见明显差异，而明胶、银耳和猪皮等伪品可见特征性蛋白条带。燕窝蛋白经等电聚焦电泳可见清晰的蛋白条带，且主要集中于酸性端。结论：SDS-PAGE和等电聚焦电泳均可获得燕窝蛋白质的特征性电泳图谱，用于鉴别不同品种燕窝及掺伪燕窝是可行的。     

采用聚丙烯酰氨凝胶电泳技术鉴别龟甲及其混伪品

目的:从蛋白水平上对龟甲药材及其混伪品进行鉴别,分析龟甲及其混伪品的差异。方法:本研究采用聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)技术对龟甲及其混伪品进行鉴别,并对龟甲的背甲与腹甲、不同批次正品龟甲药材进行对比分析。结果:对于同一品种的龟甲,其背甲与腹甲的蛋白质亚基相似,电泳得到的蛋白质条带几乎无明显差别;不同批次正品龟甲在一维电泳中显现出的蛋白亚基条带差异性很小,其电泳蛋白条带受产地、批次等因素影响较小;正品龟甲在14～19 kDa,有3条高丰度蛋白聚合在一起,这"二细一粗三聚合"的条带群,可以作为鉴别正品龟甲和其他龟甲混伪品的初步依据。结论:结果显示,SDS-PAGE电泳技术可以对龟甲及其混伪品药材进行初步的鉴别,利用蛋白条带的区别可对其进行区分。     

基于差异蛋白质鉴别僵蚕及其新型伪品

目的通过总蛋白含量、可溶性蛋白含量差异以及应用SDS-PAGE蛋白质电泳寻找差异蛋白质来鉴别僵蚕与伪品黑死蚕、空心僵蚕。方法采用SDS-PAGE法对僵蚕真品与伪品差异蛋白条带进行鉴别。结果发现僵蚕总蛋白含量不低于60.00%,可溶性蛋白含量不低于4.29%,伪品远低于上述指标,可作为僵蚕质量评价的检查项指标,辅助鉴别僵蚕与其伪品;僵蚕特有差异蛋白质(SP)的有无和含量差异,可有效鉴别上述两种新型伪品。结论本研究初步建立基于差异蛋白质的僵蚕真伪鉴别新方法,为下一步完善僵蚕质量标准,以及僵蚕的质量控制提供科学的依据。     

东南亚进口燕窝紫外光谱鉴别研究

目的探索进口燕窝真假鉴定技术。方法采用紫外光谱法鉴定燕窝真假。结果燕窝在(276±2)nm有特征波峰,(257±3)nm有特征波谷,A峰/A谷均在1.05~1.15范围内。银耳、猪皮等伪品均不具备燕窝的紫外光谱特征。结论紫外光谱法可用于鉴别进口燕窝真假。     

25种燕窝样品中唾液酸含量的测定与分析

目的: 研究分析燕窝样品中唾液酸的含量与品种的相关性,为燕窝质控提供参考。方法: HPLC测定燕窝样品中唾液酸的含量,以邻苯二胺盐酸盐为衍生化试剂,流动相乙腈-水(15:85),流速1.0 mL·min^-1,检测波长230 nm。结果: 25种燕窝中水分含量范围在9.13%~17.58%,唾液酸的含量范围在3.59%~15.22%。经实验方法检测,银耳、猪皮等伪品的唾液酸含量为零。结论: 该法简便、可靠、准确,可用于燕窝与银耳、猪皮等伪品区分的辅助手段;初步的数据显示,虽然白燕、血燕、黄燕中唾液酸的含量无显著性差异,但可为进一步的燕窝质量优劣研究提供参考。     

中国产燕窝总氮及氨基酸含量分析

对广东怀集、云南、海南等地产燕窝总氮量及氨基酸含量等进行分析,同时以印尼产燕窝对照,结果,两者含量相近。结论:中国产燕窝具有良好开发利用价值。     

三种伪品燕窝的鉴别

<正> 燕窝为雨燕科动物金丝燕属金丝燕Gouocaliaesculente L 及多种同属燕类,用吐出的唾液并带有少量羽绒毛混合凝结于悬崖哨壁所筑成的窝巢。又称燕窝菜、燕蔬菜、燕菜、燕根等。主含各种蛋白质,十多种氨基酸和多糖类成分。其性味甘平。归肺、胃、肾经。有养阴润燥,益气补中,化痰止咳之功效。主产于印尼、泰国、缅甸、日本等;我国福建、广东沿海等地亦有多量出产。 由于本品货源紧缺,一些不法商贩造假坑害消费者。近年,我们收到燕窝检品五种,经检验有三种系伪品。伪品(1)掺有白银耳和明胶,伪品(2)为浮皮,伪品(3)为未确定药材。现将三种伪品与正品进行对照鉴定。 1 性状鉴别 正品:呈黄白色、灰黄色或棕黄色不整齐的半月形,长约6.3～10cm,宽3～5cm中间凹陷成窝,附于岩石一侧平坦。表面粘液凝成的扁条状物,较整齐地顺行而又互相交叉地排列呈丝瓜络状。质硬而脆,半透明、角质状。用水浸泡后柔软,膨胀约3～5倍,咀嚼爽口,气微,味微咸。     

利用不同电泳技术对东亚蝎毒素ITX 蛋白组分分离的研究

目的 :初步建立蝎毒素ITX(Immunotoxin)蛋白组分的电泳分离方法和蛋白质组表达谱。 方法 :阴极电泳(T=18%,C=6%)对蝎毒进行分离,Bio-Rad Quantity-one电泳软件分析条带;双向电泳技术:第一向为固相pH梯度等电聚焦,第二向电泳为垂直平板SDS-PAGE(T=18%)。在以上过程中分别对上样方式、等电聚焦程序等条件进行优化控制,利用PDQ7.1软件分析获得二维凝胶图像。 结果 :阴极电泳图谱显示蝎毒素ITX由7个蛋白组分组成;二维凝胶图谱显示蝎毒素ITX包含相对分子质量相同(约为5.8×10³)而等电点不同9种蛋白组分,其中酸性蛋白质4种,碱性蛋白质5种。 结论 :通过各种条件的优化,初步建立了ITX的阴极电泳和双向电泳方法,获得了分辨率和重复性较好的阴极电泳图谱和二维凝胶图谱。     

FTIR结合化学计量学法鉴别燕窝的真伪

目的建立红外光谱结合化学计量学法鉴别燕窝的真伪。方法采用傅立叶红外变换光谱法(FTIR)采集28个不同产地血燕、白燕、黄燕窝及6个猪皮、银耳赝品的红外图谱,并应用SIMCA-P+12.0、SPSS 16.0对其数据进行聚类分析,考察不同样品间的区分程度。结果不同品种燕窝均有非常相似的红外特征图谱,结合主成分和聚类分析,可将28个真品燕窝与6个伪品完全区分开。结论该方法能简便、快速、无损地鉴别燕窝的真伪。     

山慈菇及其伪品的蛋白质电泳鉴别

目的:建立山慈菇与其伪品的蛋白质电泳鉴别方法.方法:采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对山慈菇正品和伪品丽江山慈菇、金果榄、白芨、山兰进行鉴别分析.结果: 山慈菇蛋白谱图有3条特征性谱带,与其伪品蛋白谱图具有明显的差异.结论:蛋白质凝胶电泳是鉴别山慈菇与其伪品的一种科学、简便、快捷的方法.     

燕窝蛋白质在模拟胃肠环境中的降解研究

目的:研究燕窝蛋白质在模拟胃肠环境中的降解情况。方法:制备燕窝水提物,分别与等体积的人工胃/肠液混合,37℃消化,按时间梯度0、1、5、10、15、30、60 min准确计时并终止反应,Bradford法检测上清液的蛋白质浓度,SDS-PAGE凝胶电泳方法检测燕窝蛋白质的降解情况。结果:燕窝总蛋白经胃蛋白酶或胰蛋白酶消化后,大部分降解到40 kD以下,部分中高分子量的蛋白质不降解,而且在70 kD左右新增一条蛋白条带。结论:部分中高分子量的燕窝蛋白质具有抗消化性,推测可能以抗原的形式直接作用于肠上皮细胞启动肠道免疫系统发挥疗效。     

体视镜在燕窝鉴别中的应用

目的:研究体视镜在燕窝鉴别中的可行性。方法:观察白燕碎、血燕盏、银耳碎及涂胶白燕盏在体视镜下的特征区别。结果:体视镜可区分燕窝碎与伪品银耳,主要区别在于两者的透明度及表面纹理:体视镜还可根据燕窝的表面纹理及绒羽的存在状态识别出涂胶燕窝。讨论:体视镜可用于燕窝的鉴别,尤适于在研究初期对大量商品作普查时使用。     

阿胶及其伪品的IFE研究

应用等电聚焦电泳（Isoelectricfocusingelectrophoresis简称IFE）技术，对阿胶及其伪品进行鉴别分析。结果表明，清晰的电泳谱带既可用于鉴别药材真伪，也可用于确定样品所含主要蛋白质的等电点（PI），从而为中药材及其制剂的鉴别、产生、贮藏提供定量参考数据。     

全蝎蛋白药效组分的生物鉴定法研究

目的 :研究全蝎蛋白药效组分的提取方法,摸索全蝎蛋白药效组分SDS-PAGE的最佳电泳条件,测定全蝎蛋白药效组分电泳图谱条带的大致分子质量,确定其SDS-PAGE的表达特征,从而建立全蝎蛋白药效组分的电泳鉴别法。 方法 :采用水提与盐析法获得全蝎蛋白药效组分,考马斯亮蓝法测定蛋白药效组分的蛋白质含量,SDS-PAGE法和Alpha Ease FC 4.0.0软件测定全蝎蛋白药效组分的蛋白质相对分子质量。 结果 :全蝎蛋白药效组分的蛋白质质量分数为50.37%;得到较好的全蝎蛋白药效组分的10条电泳谱带,相对分子质量分别为94.162 0,66.400 0,40.357 0,27.541 0,22.518 0,19.520 0,12.766 0,11.190 0,9.665 3,8.534 2 KDa。 结论 :这10条谱带是全蝎蛋白药效组分的特征谱带,可用于全蝎蛋白药效组分的鉴别。     

哈蟆油蛋白抗疲劳活性及SDS-PAGE凝胶成像分析研究

目的对哈蟆油蛋白抗疲劳活性及不同来源的哈蟆油与混伪品的鉴别研究。方法采用Lowry法测定哈蟆油总蛋白的含量,并运用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离哈蟆油总蛋白;采用整体动物实验观察小鼠游泳和爬杆时间;利用SDS-PAGE和凝胶成像分析系统对不同来源哈蟆油及其混伪品进行鉴别。结果测得哈蟆油水溶性蛋白的含量为42%,哈蟆油中蛋白的分子量在1万~12万可以分离出较清晰的蛋白质点,并具有7条主蛋白带;哈蟆油组和哈蟆油蛋白组相对于对照组均能延长小鼠游泳和爬杆的时间,差异具有统计学意义,且哈蟆油蛋白组优于哈蟆油组;经SDS-PAGE电泳的凝胶成像分析系统分析,表明4个不同地区的哈蟆油均有相同的电泳行为,泳道上有6条主带,而伪品大蟾蜍的干燥输卵管只有一条明显的主谱带。结论哈蟆油总蛋白是哈蟆油中抗疲劳有效组分,SDS-PAGE电泳的凝胶成像分析法可用于不同来源的哈蟆油与混伪品的鉴别,为哈蟆油的开发利用提供了必要的科学依据。     

党参种子真实性鉴定研究

目的：研究党参种子真实性鉴别方法,为党参种子品种鉴定以及党参种子质量标准的制定提供依据。方法：对不同来源党参分别进行了种子蛋白的SDS-PAGE电泳,子叶蛋白的SDS-PAGE电泳,子叶蛋白的非变性凝胶电泳。结果：三种电泳结果显示,种子蛋白的SDS-PAGE电泳,谱带清晰,分离到的差异谱带多;子叶蛋白的SDS-PAGE电泳,谱带模糊;子叶蛋白的PAGE电泳,谱带虽然清晰但是没有分离到有差异的谱带。结论：党参种子真实性鉴定应选择种子蛋白的SDS-PAGE电泳,通过电泳分析得到陕西凤县,甘肃文县,四川野生的亲缘关系比较近,比其他地方的党参种子多出一条Rf值大约为0.060的谱带,根据Marker蛋白谱带可以初步推断这个差异蛋白的分子量为170 KDa。     

树舌多糖GF注射液对小鼠HepA瘤细胞可溶性蛋白质组影响的实验研究

目的：研究树舌多糖GF注射液对小鼠HepA瘤细胞可溶性蛋白质组的影响。方法：应用SDS—PAGE分离瘤组织的可溶性蛋白，同时应用PDQest软件分析电泳结果。结果：在可溶性蛋白的SDS—PAGE中，与空白组相比，肿瘤组有3个蛋白质组分条带表达下调，11个蛋白质组分条带表达上调。树舌多糖GF注射液可以使肿瘤细胞3条表达下调的蛋白质组分条带和8条表达上调的蛋白质组分条带恢复至正常水平。结论：树舌多糖CF注射液对小鼠HepA瘤细胞可溶性蛋白质组有质和量的影响。     

不同产地山羊角凝胶电泳指纹图谱及其混伪品鉴别研究

目的:研究建立不同产地山羊角药材的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)的指纹图谱以及与混伪品的鉴别方法。方法:采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法对山羊角及其伪品的蛋白成分进行分析比较。结果:不同产地山羊角电泳图谱相似,有5个共有带峰,可作为山羊角的专属条带。结论:该方法简单易行、灵敏度高,可为山羊角的产地鉴别及与伪品的鉴别提供参考。     

不同寄主的管花肉苁蓉可溶性蛋白的电泳分析

目的:对5个管花肉苁蓉材料进行鉴别,探索可溶性蛋白电泳指纹图谱与鉴定之间的关系,同时为建立中药材电泳图谱库提供材料。方法:研究了不同寄主的5个管花肉苁蓉材料的可溶性蛋白在SDS-PAGE条件下的电泳特性。结果:不同寄主的管花肉苁蓉可溶性蛋白的SDS-PAGE图谱分辨率高,重现性强,其多态性条带为55.56%。结论:各个材料的电泳图谱可以相互区别。不同寄主管花肉苁蓉可溶性蛋白的SDS-PAGE图谱可作为种间鉴定的依据。     

高效毛细管电泳技术在中药分析中的应用简析

高效毛细管电泳技术 ,包括在毛细管中进行的自由溶液区带电泳 (CapillaryZoneElectrophoresis;CZE)、等速电泳(CapillaryIsotachophoresis ;CITP)、等速电泳凝胶电泳 (Capil laryGelElectrophoresis;CGE) ,等电聚焦电泳 (CapillaryIso -Electricfocusing ;CIEF)以及电泳与色谱法相结合的毛细管胶束电色谱 (MicellarElectrokineticchromatography ;MEKC0和毛细管电色谱 (CapillaryElectrochromatography ;CEC)。毛细管电泳技术的应用范围十分广泛 ,可分离无机离子、小分子有机物、氨基酸、肽、蛋白质、核苷酸及药物等。中药有…