桂蚕沙多糖组分的制备与GC-MS分析

目的:制备桂蚕沙的多糖并分析其组分,为专属性鉴定特征的建立奠定基础.方法:桂蚕沙多糖制备流程脱脂后水提醇沉→三氯乙酸除蛋白→大孔吸附树脂纯化→活性炭脱色.桂蚕沙多糖组分的确定采用衍生化后GC-MS分析.结果:桂蚕沙多糖提取率为23.5％.桂蚕沙多糖组分:核糖-木糖-鼠李糖-半乳糖-吡喃葡萄糖-阿拉伯糖(1.97∶3.14∶0.58∶0.92∶5.62).结论:气相色谱-质谱联用技术能够有效的分析桂蚕沙中的多糖组分.     

全蝎蛋白药效组分对L1210肿瘤细胞凋亡的影响

Objective To investigate the effects of protein active composition of Scorpio on apoptosis of L1210 tumor cells for the purpose of establishing the quality evaluation method of biological effect of Scorpio. Methods L1210 cells were examined by trypan blue exclusion. The proliferation of cells was determined by improved MTT assay. Flow cytometry was performed to analyze cell apoptosis with propidium iodide (PI). Results When the concentration of protein active composition of Scorpio exceeded or equaled 37 mg/ml, the coefficient correlation of the growth inhibiting curve of L1210 cells was 0.9357, and IC50 was 175 mg/ml. The excellence time was 0 to 48 hours. When the concentration of protein active composition of Scorpio exceeded or equaled 9.25 mg/ml, the apoptosis ratio of L1210 cells was raised significantly.Conclusion The protein active composition of Scorpio might promote the apoptosis and restrain the proliferation of L1210 cells. The value of anti-tumor biological effect of the protein active composition of Scorpio was 9.25 ～ 175 mg/ml. This value may be one of the indexes for quality evaluation of biological effect of Scorpio.     

全蝎蛋白药效组分对Bel7402肿瘤细胞凋亡的影响

目的:研究全蝎(Scorpio)蛋白药效组分对Bel7402肿瘤细胞凋亡的影响,为建立全蝎与临床疗效对应的生物效应质量评价方法奠定基础。方法:蛋白质提取和冷冻干燥的方法获得全蝎蛋白药效组分,采用改良MTT法、流式细胞法研究全蝎蛋白药效组分对Bel7402细胞毒和细胞周期抑制的作用。结果:抑制癌细胞生长的浓度大于或等于37 g.L-1,剂量与效应呈正比,相关系数为0.912 5,IC50为241 g.L-1,显效时间0～48 h;全蝎蛋白药效组分浓度大于或等于9.25 g.L-1时,能显著提高Bel7402细胞的凋亡率。结论:全蝎蛋白药效组分具有促进Bel7402细胞凋亡、抑制增殖的作用,其生物效应指标为:9.25～175 g.L-1,可作为全蝎生物效应质量评价的指标之一。     

桂蚕沙的氨基酸组分和金属元素及有害元素分析

目的:测定桂蚕沙中的氨基酸组分、金属元素及有害元素的含量,并对其营养价值及安全性进行评价.方法:采用氨基酸自动分析仪测定氨基酸组分;采用火焰原子吸收法测定Cu,Fe,Mn,Zn,K,Na,Mg,Ca;石墨炉原子吸收法测定Pb,As,Cd.结果:测得桂蚕沙中含有16种氨基酸,总含量为7.95％,其中谷氨酸含量最高,占总氨基酸的12.45％.测得Fe,Mn,Zn等10种金属元素,其中Ca的含量高达34000 μg·g-1,重金属的含量为Cu 8.2 μg·g-1,Pb 3.1 μg·g-1,Cd 0.088 μg·g-1,As0.28 μg·g-1.结论:桂蚕沙含有较丰富的氨基酸组分和金属元素,其重金属及有害元素的含量均在安全范围内,是一种安全有效且营养价值丰富的保健及药用原料.     

全蝎蛋白药效组分对L1210肿瘤细胞凋亡的影响

目的 研究全蝎(Scorpio)蛋白药效组分对L1210肿瘤细胞凋亡的影响,为建立全蝎与临床疗效对应的生物效应质量评价方法奠定基础.方法 采用改良MTT法、流式细胞法研究全蝎蛋白药效组分对L1210细胞毒和细胞周期抑制的作用.结果 抑制癌细胞生长的浓度≥37 mg/ml,剂量与浓度呈正比,相关系数为0.9357,IC50为175 mg/ml,显效时间0～48 h;全蝎蛋白药效组分浓度≥9.25 mg/ml时,可显著提高L1210细胞的凋亡率.结论 全蝎蛋白药效组分具有促进L1210细胞凋亡、抑制增殖的作用,其抗肿瘤生物效应指标为:9.25～175 mg/ml,可作为全蝎生物效应质量评价的指标之一.     

零陵香水溶性多糖组分的GC-MS分析

目的:鉴定零陵香水溶性多糖组分,为建立专属性的质量评价指标和中药药效组分新药研发奠定基础。方法:采用水提醇沉法制备零陵香粗多糖,Sevag法除蛋白、H₂O₂脱色、透析得到精制多糖,衍生化后用GC-MS分析。结果:零陵香水溶性多糖主要组分依次为鼠李糖醇-阿拉伯糖-核糖-葡萄糖-木糖,其相对含量比例为1.03:9.17:4.74:18.95:17.11。结论:GC-MS联用法可快速鉴定零陵香水溶性多糖组分。     

全蝎蛋白药效组分的生物鉴定法研究

目的 :研究全蝎蛋白药效组分的提取方法,摸索全蝎蛋白药效组分SDS-PAGE的最佳电泳条件,测定全蝎蛋白药效组分电泳图谱条带的大致分子质量,确定其SDS-PAGE的表达特征,从而建立全蝎蛋白药效组分的电泳鉴别法。 方法 :采用水提与盐析法获得全蝎蛋白药效组分,考马斯亮蓝法测定蛋白药效组分的蛋白质含量,SDS-PAGE法和Alpha Ease FC 4.0.0软件测定全蝎蛋白药效组分的蛋白质相对分子质量。 结果 :全蝎蛋白药效组分的蛋白质质量分数为50.37%;得到较好的全蝎蛋白药效组分的10条电泳谱带,相对分子质量分别为94.162 0,66.400 0,40.357 0,27.541 0,22.518 0,19.520 0,12.766 0,11.190 0,9.665 3,8.534 2 KDa。 结论 :这10条谱带是全蝎蛋白药效组分的特征谱带,可用于全蝎蛋白药效组分的鉴别。