党参种子真实性鉴定研究

目的：研究党参种子真实性鉴别方法,为党参种子品种鉴定以及党参种子质量标准的制定提供依据。方法：对不同来源党参分别进行了种子蛋白的SDS—PAGE电泳,子叶蛋白的SDS—PAGE电泳,子叶蛋白的非变性凝胶电泳。结果：三种电泳结果显示,种子蛋白的SDS—PAGE电泳,谱带清晰,分离到的差异谱带多;子叶蛋白的SDS—PAGE电泳,谱带模糊;子叶蛋白的PAGE电泳,谱带虽然清晰但是没有分离到有差异的谱带。结论：党参种子真实性鉴定应选择种子蛋白的SDS-PAGE电泳,通过电泳分析得到陕西凤县,甘肃文县,四川野生的亲缘关系比较近,比其他地方的党参种子多出一条R,值大约为0．060的谱带,根据Marker蛋白谱带可以初步推断这个差异蛋白的分子量为170KDa。     

刺五加与短梗五加种子的蛋白质电泳分析

目的:建立适用于刺五加和短梗五加种子的十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴别方法,为二者种子的鉴别及质量评价提供参考。方法:采用15%分离胶的SDS-PAGE电泳对15个产地的刺五加种子和2个产地的短梗五加种子中可溶性蛋白进行电泳分析,利用Band Scan 5.0软件对蛋白谱带蛋数目、谱带强度和相对分子质量等方面的差异进行比较。结果:17个种子样品共分离出31条清晰的蛋白谱带,其中2种种子的10条共有特征谱带和各自的1条标准特征谱带可作为刺五加和短梗五加种子的标准蛋白图谱。不同产地的刺五加种子蛋白电泳图谱具有一定的种内差异性。结论:该电泳方法和标准蛋白图谱可作为刺五加及短梗五加种子的鉴别依据。     

酸浆种子蛋白提取方法的比较研究

目的:建立适用于酸浆种子的SDS-PAGE和2-D PAGE蛋白样品提取方法。方法:比较直接提取法、TCA-丙酮法、Tris-丙酮法、饱和酚法、改良饱和酚法等7种提取方法所获酸浆种子总蛋白含量以及SDS-PAGE电泳的谱带数目、强度和电泳分辨率等方面的差异。结果:HEPES buffer直接提取法提取蛋白效率较高,杂质少,电泳谱带清晰,分辨率高;PVP buffer和Lysis buffer A直接提取法次之,但杂质较多;TCA-丙酮法、Tris-丙酮法、饱和酚法和改良的饱和酚法差别不大,蛋白纯度较高,但提取效率低,谱带数目少;此外,Lysis buffer A法、丙酮法和酚法易产生高丰度蛋白的干扰。结论:直接提取法中的HEPES buffer法最好,优于丙酮法、酚法和其它直接提取法。     

铁棒锤种子蛋白质提取及聚丙烯酰胺凝胶电泳研究

目的构建适合铁棒锤种子蛋白质研究的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)体系,为铁棒锤种子纯度检测及鉴别研究提供技术支撑。方法采用6种蛋白质提取法提取伏毛铁棒锤种子蛋白质,并筛选出最佳提取方法,在此基础上研究不同分离胶浓度、料液比、上样量对伏毛铁棒锤种子蛋白电泳分离效果的影响,并采用筛选出的蛋白质最佳提取分离方法对铁棒锤和伏毛铁棒锤种子进行鉴定。结果巯基乙醇法提取的伏毛铁棒锤种子蛋白质电泳图谱效果较佳,电泳谱带数最多(14条)、最清晰,适合于其种子纯度检测;分离胶浓度为15%、料液比为1∶10(M/V)、蛋白上样量稀释5倍时,其种子蛋白质电泳分离效果较好;铁棒锤和伏毛铁棒锤种子蛋白质电泳图谱在蛋白质谱带位置和强弱上有一定差异。结论本研究建立的铁棒锤种子蛋白样品制备方法及SDS-PAGE技术可用于铁棒锤种子纯度检测,其蛋白质图谱可作为铁棒锤与伏毛铁棒锤种子的鉴别依据。     

瓜蒌种子蛋白质6种提取方法比较

目的:建立适合于瓜蒌种子的蛋白质提取方法。方法:比较水溶液直接提取法(3种)、三氯乙酸(TCA)-丙酮法、三羟甲基氨基甲烷(Tris)-丙酮法、蛋白质提取液提取法等6种蛋白质提取方法所获瓜蒌种子总蛋白含量、聚丙烯酰胺凝胶电泳的谱带等方面的差异。结果:蛋白质提取液提取法、TCA-丙酮法提取蛋白含量较高,但杂质多,电泳谱带严重展宽而且明显拖尾;Tris-丙酮法提出的蛋白质种类缺失严重;直接提取法提取蛋白含量少,但杂质少,电泳谱带清晰,离心2次谱带更加清晰。结论:水溶液直接提取法最适合用于聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质提取液提取法提出蛋白质含量最多。     

道地产区不同产地厚朴种子的电泳指纹图谱研究

目的:研究道地产区湖北恩施5个不同产地厚朴种子的十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)电泳图谱,以探索厚朴种子不同产地的鉴别方法,从而为厚朴的良种选育及种子质量评价提供依据.方法:应用SDS-PAGE方法比较不同产地厚朴种子的蛋白电泳图谱在谱带数目、谱带强度和相对分子质量等方面的差异.结果:5个产地的厚朴种子的电泳图谱存在明显产地差异.结论:该电泳方法可为厚朴种子的产地鉴别提供依据.     

燕窝鉴别中的蛋白质电泳研究

目的：探讨SDS-PAGE和等电聚焦电泳应用于燕窝蛋白分离及燕窝鉴定中的可行性。方法：提取印尼燕窝、怀集燕窝及常作为伪品的明胶、银耳、猪皮的蛋白质,进行SDS-PAGE和等电聚焦电泳研究。结果：印尼燕窝与怀集燕窝在SDS-PAGE图谱上可见明显差异,而明胶、银耳和猪皮等伪品可见特征性蛋白条带。燕窝蛋白经等电聚焦电泳可见清晰的蛋白条带,且主要集中于酸性端。结论：SDS-PAGE和等电聚焦电泳均可获得燕窝蛋白质的特征性电泳图谱,用于鉴别不同品种燕窝及掺伪燕窝是可行的。     

燕窝鉴别中的蛋白质电泳研究

目的：探讨SDS-PAGE和等电聚焦电泳应用于燕窝蛋白分离及燕窝鉴定中的可行性。方法：提取印尼燕窝、怀集燕窝及常作为伪品的明胶、银耳、猪皮的蛋白质，进行SDS-PAGE和等电聚焦电泳研究。结果：印尼燕窝与怀集燕窝在SDS-PAGE图谱上可见明显差异，而明胶、银耳和猪皮等伪品可见特征性蛋白条带。燕窝蛋白经等电聚焦电泳可见清晰的蛋白条带，且主要集中于酸性端。结论：SDS-PAGE和等电聚焦电泳均可获得燕窝蛋白质的特征性电泳图谱，用于鉴别不同品种燕窝及掺伪燕窝是可行的。     

全蝎蛋白药效组分的生物鉴定法研究

目的 :研究全蝎蛋白药效组分的提取方法,摸索全蝎蛋白药效组分SDS-PAGE的最佳电泳条件,测定全蝎蛋白药效组分电泳图谱条带的大致分子质量,确定其SDS-PAGE的表达特征,从而建立全蝎蛋白药效组分的电泳鉴别法。 方法 :采用水提与盐析法获得全蝎蛋白药效组分,考马斯亮蓝法测定蛋白药效组分的蛋白质含量,SDS-PAGE法和Alpha Ease FC 4.0.0软件测定全蝎蛋白药效组分的蛋白质相对分子质量。 结果 :全蝎蛋白药效组分的蛋白质质量分数为50.37%;得到较好的全蝎蛋白药效组分的10条电泳谱带,相对分子质量分别为94.162 0,66.400 0,40.357 0,27.541 0,22.518 0,19.520 0,12.766 0,11.190 0,9.665 3,8.534 2 KDa。 结论 :这10条谱带是全蝎蛋白药效组分的特征谱带,可用于全蝎蛋白药效组分的鉴别。     

哈蟆油蛋白抗疲劳活性及SDS-PAGE凝胶成像分析研究

目的对哈蟆油蛋白抗疲劳活性及不同来源的哈蟆油与混伪品的鉴别研究。方法采用Lowry法测定哈蟆油总蛋白的含量,并运用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离哈蟆油总蛋白;采用整体动物实验观察小鼠游泳和爬杆时间;利用SDS-PAGE和凝胶成像分析系统对不同来源哈蟆油及其混伪品进行鉴别。结果测得哈蟆油水溶性蛋白的含量为42%,哈蟆油中蛋白的分子量在1万~12万可以分离出较清晰的蛋白质点,并具有7条主蛋白带;哈蟆油组和哈蟆油蛋白组相对于对照组均能延长小鼠游泳和爬杆的时间,差异具有统计学意义,且哈蟆油蛋白组优于哈蟆油组;经SDS-PAGE电泳的凝胶成像分析系统分析,表明4个不同地区的哈蟆油均有相同的电泳行为,泳道上有6条主带,而伪品大蟾蜍的干燥输卵管只有一条明显的主谱带。结论哈蟆油总蛋白是哈蟆油中抗疲劳有效组分,SDS-PAGE电泳的凝胶成像分析法可用于不同来源的哈蟆油与混伪品的鉴别,为哈蟆油的开发利用提供了必要的科学依据。     

四种产地全蝎粉可溶性蛋白质SDS-PAGE法分离研究

目的:探索四种产地野生全蝎粉中可溶性蛋白质SDS-PAGE法所获得电泳图谱条带的一致性,并确定其大致分子量。方法:采用55%乙醇提取、75%以上乙醇沉淀的方法获得全蝎粉可溶性蛋白质,考马斯亮蓝法测定其蛋白质含量,SDS-PAGE法和Quantity one软件测定全蝎粉可溶性蛋白质的相对分子量。结果:山东平邑、山东龙口、山东长清、山东沂源四种产地全蝎粉的水溶性蛋白饱和溶液中的蛋白含量分别为4.006,2.894,3.795,4.649 mg/mL;四种产地全蝎粉可溶性蛋白质通过SDS-PAGE法均获得了7条较清晰的电泳谱带,对应的相对分子量分别为42.563,33.938,27.060,22.354,19.402,3.422,1.929 KDa。结论:这7条全蝎可溶性蛋白质的特征谱带可用于中药全蝎粉的真伪鉴别。     

地龙的鲜品和干品可溶性蛋白及纤溶酶活性的对比研究

目的:对比研究地龙的鲜品和干品的可溶性蛋白及纤溶酶活性.方法:采用Bradfold方法测定蛋白含量,SDS-PAGE进行蛋白谱带的分析,并采用琼脂糖-纤维蛋白平板法进行纤溶酶活性的测定.结果:以干燥品计,鲜品的蛋白提取率为( 13.89±0.86)％,蛋白含量为(63.14±0.38)％,体外纤溶酶活性为(8 743 ±17) IU·g-1;干品蛋白提取率为(9.82±0.75)％,蛋白含量为(45.16 ±0.12)％,体外纤溶酶活性为(206±14) IU·g-1;SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,鲜品共显示12条蛋白谱带,干品的谱带较少,且不清晰.结论:鲜地龙的可溶性蛋白提取率、含量及体外纤溶酶活性均明显高于干品,且蛋白组分有较大的差异.     

全蝎可溶性蛋白质TRICINE-SDS-PAGE电泳法分离研究

目的:探索全蝎可溶性蛋白质电泳法分离的最佳体系。方法:用TRICINE-SDS-PAGE法对全蝎蛋白提取液所含混合蛋白进行分离,用Quantity One软件确定各蛋白谱带分子量。结果:用该法可获得11条较高分辨率的蛋白谱带,其对应分子量分别为42.000,33.515,27.509,25.524,21.615,17.640,15.839,13.994,11.318,10.000,8.357 kDa。结论:TRICINE-SDS-PAGE电泳法可用于全蝎可溶性蛋白的分离。     

野生全蝎粉可溶性蛋白质SDS-PAGE电泳分析研究

目的:探索野生全蝎粉水溶性蛋白质SDS-PAGE电泳的最佳分离条件,测定各蛋白质的大体分子量。方法:采用55%乙醇提取,75%以上乙醇沉淀的方法获得全蝎粉水溶性蛋白质,考马斯亮蓝法测定其蛋白质含量,SDS-PAGE法和Quantity one软件测定全蝎粉水溶性蛋白质的相对分子量。结果:全蝎粉水溶性蛋白质的含量为4.649 mg/mL;得到较好全蝎粉可溶性蛋白质的7条电泳谱带,相对分子质量分别为70.447,64.730,54.139,40.832,29.939,26.494,19.172 kDa。结论:这7条全蝎粉水溶性蛋白质的特征谱带可用于全蝎粉水溶性蛋白质的种类鉴别。     

山茱萸种子形态和蛋白电泳分析

目的:建立不同果型山茱萸种子的鉴别方法。方法:对山茱萸7个果型的种子(果核)的性状进行了观察描述,并作了蛋白电泳分析。结果;山茱萸不同果型种子的形状、种形指数(直径/长度)和千粒重都有差别。蛋白电泳图谱显示,不同果型山茱萸种子的电泳谱带非常近似,特别是A区的一级带都是三条,显示出种的一致性。但在B区和C区,谱带的着色度及数量却有区别。结论:实验结果可为山茱萸栽培品种划分及选育种提供理论依据。     

牛蒡种子萌发初期的代谢研究

目的：探讨牛蒡种子萌发初期的代谢变化。方法：采用电泳方法检测过氧化物酶和蛋白质的变化。结果：随着牛蒡种子的萌发进程，过氧化物酶的谱带不断加深，一些原有谱带缺失，一些新的谱带出现。可溶性蛋白质的变化主要是颜色深浅的变化，萌发９６ｈ后和萌发１２０ｈ后谱带的变化最明显。结论：牛蒡种子的萌发存在着复杂的代谢过程，萌发９６ｈ和１２０ｈ是代谢的关键时期。     

梯度PAGE鉴别桃仁

目的：介绍一种含蛋白中药材鉴定的新方法-梯度PAGE。方法：利用梯度PAGE分离几种不同来源的桃仁蛋白质，观察其分离效果并照相。结果：由梯度凝胶照片可见谱带清晰，分辨率极高。结论：梯度PAGE是含蛋白中药材鉴定的好方法。     

白花丹参和紫花丹参生化标记分析

目的 分析白花丹参和紫花丹参在蛋白水平的遗传差异.方法利用叶片过氧化物酶和种子贮藏蛋白两种生化标记对白花丹参和紫花丹参进行了分析.结果同工酶分析表明,两种丹参间过氧化物酶同工酶谱存在差异;贮藏蛋白分析表明,丹参种子蛋白主要是以盐溶性蛋白为主,水溶蛋白和醇溶蛋白较少,碱溶性蛋白更少;两种丹参种子贮藏蛋白谱带之间的差异性不明显.结论二者在蛋白水平存在一定差异.     

当归及其混伪品的过氧化物同工酶电泳鉴别

对当归及其混伪品欧当归、独活的鲜叶、干药材做了过氧化物同工酶电泳谱带比较实验,结果表明,当归、欧当归、独活的过氧化物同工酶谱带都有差异,这三者又有共同的谱带。其中叶的过氧化物酶谱带较干田品的清晰。     

甘肃产党参种子的鉴定学研究

目的：探讨党参种子的鉴定方法,旨在为党参种子的鉴定和质量标准的制定提供科学依据。方法：从党参种子的来源、性状、显微、理化等方面对其进行鉴定研究。结果：党参种子的性状、脂肪油滴、种皮石细胞、胚乳细胞、糊粉粒等均可作为质量鉴定的依据。结论：通过性状鉴定、显微特征、蛋白电泳图谱鉴定评价甘肃党参种子科学实用,可为党参种子的鉴定学研究与质量标准的制定提供参考。