Band3蛋白与配体ConA结合对红细胞膜粘弹性的影响

目的；研究红细胞膜蛋白Ｂａｎｄ３与其配体ＣｏｎＡ结合后对红细胞膜粘弹性的影响。方法：测量经ＣｏｎＡ作用后的红细胞在ｃ＝０轨道上的小变形指数，红细胞变形恢复半衰减时间，以及红细胞膜蛋白强弱固定比。结果；红细胞膜粘度及弹性均发生显著改变，且呈现明显的量效关系。     

慢性常压缺氧和缺氧伴高二氯化碳大鼠带3蛋白与红细胞内酸碱…

文中报道了慢性常压缺氧和缺氧伴高二氧化碳大鼠红细胞膜带３蛋白结构，含量和阴离子转运功能，以及红细胞内外血气研究结果：慢性常压缺氧和缺氧伴高二氧化碳大鼠红细胞膜带３蛋白阴离子转运功能降低。其产生机制可能是由于长期严重缺氧，使胞浆ＡＴＰ含量减少，影响幼稚红细胞中带３蛋白的合成，致使网织红细胞阶段嵌入红细胞膜下的带３蛋白量减少，阴离子转运位点数目减少所致。慢性常压缺氧和缺氧伴高二氧化碳大鼠带３蛋白阴离子     

慢性常压缺氧和缺氧伴高二氧化碳大鼠带3蛋白与红细胞内酸碱调节的实验研究

文中报道了慢性常压缺氧和缺氧伴高二氧化碳大鼠红细胞膜带３蛋白结构，含量和阴离子转运功能，以及红细胞内外血气研究结果：慢性常压缺氧和缺氧伴高二氧化碳大鼠红细胞膜带３蛋白阴离子转运功能降低．其产生机制可能是由于长期严重缺氧，使胞浆ＡＴＰ含量减少，影响幼稚红细胞中带３蛋白的合成，致使网织红细胞阶段嵌入红细胞膜上的带３蛋白量减少，阴离子转运位点数目减少所致。慢性常压缺氧和缺氧伴高二氧化碳大鼠带３蛋白阴离子转运功能降低，ＨＣＯ_３~－／ＣＬ~－交换受限，阻止红细胞内转移至细胞外，使红细胞内呈偏碱状态。因此，维护带３蛋白正常的结构和功能，将有助于维持红细胞内外的酸碱稳态．     

红细胞膜Band3蛋白质C—末端特性的研究

从人红细胞中分离纯化了Ｂａｎｄ３蛋白质末端的Ｃ１肽链，将该肽链与新鲜的未经处理的人红细胞一起温育。红主效液相色谱分析的结果显示，Ｃ１肽链与另一种红细胞膜蛋白血型糖蛋白Ｋ１０１－Ｄ１３０相互作用，同时Ｃ１肽链可激活一种新活性的蛋白酶，该酶可特异地水解血型糖蛋白的Ｌ１１８－Ｓ１１９肽键，这种蛋白水解酶在胰蛋白酶的作用下失去活性。     

Study of C-terminal Properties of Human Erythrocyte Membrane Protein Band 3

从人红细胞中分离纯化了Ｂａｎｄ３蛋白质Ｃ末端的Ｃ１肽链，将该肽链与新鲜的未经处理的人红细胞一起温育。经高效液相色谱分析结果显示，Ｃ１肽链与另一种红细胞膜蛋白血型糖蛋白Ｋ１０１－Ｄ１３０相互作用，同时Ｃ１肽链可激活一种新活性的蛋白酶，该酶可特异地水解血型糖蛋白的Ｌ１１８－Ｓ１１９肽键，这种蛋白水解酶在胰蛋白酶的作用下失去活性。     

NIDDM病人红细胞变形能力与膜骨架结构和收缩蛋白的关系

探讨非胰岛素依赖型糖尿病病人红细胞变形能力与红细胞膜骨架结构和收缩蛋白的关系。 方法 采用ＤＸＣ－３００Ａ型核孔膜红细胞变形能力测定仪，ＪＥＭ－１２００ＥＸ透民镜和ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳法，检测了６４例ＮＩＤＤＭ病人和３９例正常人红细胞滤过指数，红细胞膜骨架 收缩蛋白二聚体和四聚体的变化。     

脑出血患者红细胞免疫功能的研究

目的：了解脑出血患者红细胞免疫功能的变化。方法：采用红细胞C3b受体花环（ＲＢＣ－Ｃ３bR)试验和红细胞免疫复合物花环（ＲＢＣ－ＩＣＲ）试验测定患者红细胞免疫粘附功能同时进行红细胞免疫调节因子的测定。结果：与对照组相比。患者组入院时的ＲＢＣ－Ｃ３bＲ及红细胞免疫粘附促进因子（ＲＦＥＲ）明显降低,ＲＢＣ－ＩＣＲ及红细胞免疫粘附抑制因子明显升高,入院２周时患者组的上述指标有明显改善。结论：提示红细胞免疫粘附功能状态与脑出血的发展及恢复密切相关。     

慢性肾功能衰竭患者红细胞 SOD、LPO 与红细胞免疫功能关系的探讨

观察６２例慢性肾衰患者ＲＢＣ－ＳＯＤ活性、ＲＢＣ－ＬＰＯ浓度和红细胞免疫功能，结果表明，肾衰患者ＲＢＣ－ＳＯＤ活性较对照组降低（Ｐ＜０．０１），ＲＢＣ－ＬＰＯ浓度较对照组明显升高（Ｐ＜０．０１）；红细胞Ｃ３ｂ受体花环率（ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ）、红细胞免疫粘附促进因子（ＲＦＥＲ）活性较对照组明显降低（Ｐ均＜０．０１），红细胞免疫复合物花环率（ＲＢＣ－ＩＣＲ）、红细胞免疫粘附抑制因子（ＲＦＩＲ）活性较对照组明显升高。ＲＢＣ－ＳＯＤ活性与ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ呈正相关，与ＲＢＣ－ＩＣＲ呈负相关，ＲＢＣ－ＬＰＯ浓度与ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ呈负相关（Ｐ＜０．０１），与ＲＢＣ－ＩＣＲ浓度呈正相关（Ｐ＜０．０５），提示肾衰患者红细胞内抗氧化能力降低，脂质过氧化反应增强，红细胞免疫粘附功能降低，红细胞免疫粘附调节功能紊乱；红细胞ＳＯＤ活性、红细胞ＬＰＯ浓度能直接影响ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ的活性，进而影响红细胞清除免疫复合物的能力，与红细胞免疫功能的强弱有直接关系。     

烧伤后胰岛素受体信呈传导缺陷机理的研究

目的：为了探索烧伤后胰岛素受体信号传递的缺陷的机理，以阐明烧伤胰素抵抗的分子基础，方法：采用ＷＧＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层杆纯化大鼠肝脏和肌肉细胞膜胰岛纱受体，通过胰岛素受体蛋白γ－＾３２Ｐ磷酸化的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ放射自显影和外源底物磷酸化，观察烫伤大鼠早期胰岛素受体β－亚基自身磷酸化和受体酪氨酸蛋白激酶（ＩＲ－ＴＰＫ）活性变化，结果３０％ＴＢＳＡⅢ°烫伤３ｄ大鼠肝和肌肉胰岛素受体β－亚基自     

糖尿病病人红细胞免疫功能与膜脂质成分的关系

①目的探讨非胰岛素依赖性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）病人红细胞免疫功能变化与红细胞膜脂质成分的关系。②方法对５４例ＮＩＤＤＭ病人进行了红细胞免疫功能检测，同时也检测了红细胞膜脂质成分的变化。③结果ＮＩＤＤＭ病人红细胞Ｃ３ｂ受体花环率（Ｅ－Ｃ３ｂＲＲ）明显降低（ｔ＝３．６６１，Ｐ＜０．００１），红细胞膜胆固醇（Ｃｈ）、胆固醇／磷脂（Ｃｈ／ＰＬ）和丙二醛（ＭＤＡ）明显增高，与对照组比较，差异有极显著性（ｔ＝３．５２８～３．７９４，Ｐ＜０．００１），ＰＬ明显低于对照组（ｔ＝３．６２０，Ｐ＜０．００１），有血管病变者变化更明显；ＮＩＤＤＭ病人Ｅ－Ｃ３ｂＲＲ与Ｃｈ，Ｃｈ／ＰＬ和ＭＤＡ呈负相关（ｒ＝－０．２７６～－０．６５３，Ｐ＜０．０５～０．０１），与ＰＬ呈正相关（ｒ＝０．３１６，Ｐ＜０．０５），以Ｃｈ／ＰＬ和ＭＤＡ升高与红细胞免疫功能降低关系更密切。④结论ＮＩＤＤＭ病人红细胞膜脂质成分异常可能是红细胞免疫功能低下的重要原因之一。     

HEREDITARY PROTEIN S DEFICIENCY——SURVEY OF A CHINESE FAMILY

A 76-year-old woman was diagnosed as having left lilac deep vein thrombosis due to a hereditary deficiency of protein S, seventeen members of her family were studied with the measurements of total protein S (TPS), free protein S (FPS), protein C (PC) and anti-thrombin-Ⅲ(AT-Ⅲ). The results showed that the level of FPS of thepatient was only 7%, while that of TPS 137.1%. Her secondson had a low FPS level (13.4%) too, and his TPS level was 48.1%. PC and AT-Ⅲwere all normal It was thus the first case of hereditary PS dificiency reported in China.     

绿色荧光蛋白-小鼠纤维介素蛋白融合基因表达载体的构建和表达

目的：构建绿色荧光蛋白(GFP)和小鼠纤维介素蛋白(mfgl2)的融合蛋白表达载体，在仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达，为mfgl2的RNA干扰体外研究提供简便的判断手段。方法：用PCR从mfgl2cDNA文库中扩增出mfgl2cDNA片段，插入到GFP表达载体pEGFP—N2中GFP基因序列的上游，构建成GFP—mfgl2融合基因表达载体pEGFP—mfgl2，将该载体转染到CHO细胞后24—48h，通过荧光显微镜观察并摄片。结果：扩增出长约1．3kb的基因片段，经双酶切鉴定和测序鉴定无误；重组载体转染CHO细胞后，在荧光显微镜下可观察到GFP的表达。结论：成功构建了pEGFP．mfgl2融合基因表达载体；重组载体可在CHO细胞中表达出GFP—mfgl2融合蛋白，为下一步进行mfgl2RNA干扰研究提供了简便的判断手段。     

鼠尾胶原蛋白提取、分离、纯化方法的建立及鉴定

目的建立一种高效提取、分离、纯化鼠尾胶原蛋白的方法。方法通过对鼠尾进行剥离获得鼠尾腱,用Tris-HCl缓冲液、胃蛋白酶处理获得鼠尾胶原蛋白原液、反复使用氯化钠溶液进行分级盐析、醋酸溶液复溶进行鼠尾胶原蛋白的纯化。超纯水透析除去无机盐类获得纯化的鼠尾胶原蛋白。通过SDS-PAGE蛋白质电泳、氨基酸含量分析等技术手段鉴定。结果本研究建立的方法可以获得高纯度的鼠尾胶原蛋白,纯度达到电泳纯。与国外进口的商业化鼠尾胶原蛋白产品相比无差异。研究了提取、分离、纯化参数对得率、纯度的影响,建立了最优的鼠尾胶原蛋白提取条件,胃蛋白酶用量:1∶500,酶解时间:72 h,盐析浓度:2 mol/L,提取所用酸溶液:0.05mol/L醋酸溶液。结论为鼠尾胶原蛋白的扩大化生产提供了合适的工艺参数,为大量获得鼠尾胶原蛋白并进行更深层次的功效方面研究提供了理论支持和实践基础。     

Akt的PH结构域与其调节区的结合

目的 从人T细胞中克隆Akt的PH结构域及其调节区基因并进行6-his和GST融合表达，研究二者的体外结合情况，为进一步研究Akt的调节区在其分子激活中的作用打下基础。方法 以RT-PCR的方法从人T细胞中扩增目的基因片段，测序证明序列正确，再将正确的目的基因片段定向克隆到表达载体pRSET-A和pGEX-4T-1中，以IPTG诱导，获得Akt的PH结构域及其调节区与6-his和GST的融合表达。表达的PH结构域融合蛋白经谷胱甘肽耦联的琼脂糖珠纯化，以pull-down法检测该PH结构域与6-his调节区的结合。结果 Akt的PH结构域和调节区基因序列完全正确。得到与GST和6-his的融合表达，表达产物有较高可溶性。结论 SDS-PAGE检测到PH结构域可在体外与调节区特异地结合。     

Survivin、Her-2、P16和PTEN在膀胱癌中的表达及意义

目的研究Survivin、Her2、P16和PTEN蛋白在膀胱癌中的表达及其生物学意义。方法采用免疫组织化学SP法检测43例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱组织中以上4种蛋白的表达。结果4种蛋白在膀胱癌中的表达与在正常膀胱黏膜比较差异均有显著性意义(均为P<0.01)。不同临床分期间Her2和PTEN表达的差异具有显著性意义(P<0.05);不同病理分级间Survivin、Her2和PTEN表达的差异具有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。Her2和Survivin蛋白表达间存在正相关(r=0.821,P<0.05)。结论Her2和Survivin的高表达是膀胱癌预后不良的指征;P16可作为早期诊断的标记物;PTEN则可作为膀胱癌预后不良的独立性指标。     

亲和层析纯化重组中性粒细胞激活蛋白

目的:直链淀粉树脂亲和层析法分离纯化重组麦芽糖结合蛋白-中性粒细胞激活蛋白(recombinantmaltose-binding protein-neutrophil-activating protein,rMBP-NAP)。用于支气管哮喘模型小鼠进行免疫调节实验。方法:IPTG诱导基因工程菌E.coli TB1(pMAL-c2X-nap)表达rMBP-NAP,离心收获细胞,过柱缓冲液重悬菌体并超声破碎,再次离心取上清和沉淀,SDS-PAGE分析rMBP-NAP可溶性;直链淀粉树脂亲和层析法分离纯化rMBP-NAP;SDS-PAGE凝胶扫描分析纯化后rMBP-NAP纯度;蛋白定量试剂盒测定rMBP-NAP浓度。结果:IPTG诱导工程菌表达的rMBP-NAP主要以可溶性形式存在于超声上清中,相对分子质量约为57 kD,与预期结果一致;亲和层析法纯化rMBP-NAP纯度可达96.5%,浓度可达0.625 g/L。结论:用直链淀粉树脂亲和层析法,可纯化得到高纯度、高浓度的融合蛋白rMBP-NAP。     

骨肉瘤p16与Rb蛋白的表达及其相关性的研究

目的 检测ｐ１６和Ｒｂ蛋白在骨肉瘤中的存在情况，以探讨骨肉瘤中ｐ１６和Ｒｂ蛋白的表达及其相关性。方法 采用免疫组化ＡＢＣ法对３２例骨肉瘤手术标本使用抗ｐ１６和Ｒｂ蛋白抗体进行检测。结果 ｐ１６和Ｒｂ蛋白阳性表达分别为３７．５％（１２／３２）和５６．３％（１８／３２）；在１２例Ｒｂ蛋白阳性或强阳性表达的骨肉瘤中，ｐ１６蛋白表达缺失或弱阳性表达８例（６７％）；相反，在１０例Ｒｂ蛋白阴性或弱阳性表达中，     

非小细胞肺癌患者肺耐药蛋白和多药耐药相关蛋白的表达及其临床意义

目的 检测肺耐药蛋白和多药耐药相关蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达情况.并探讨其临床意义.方法 采用免疫组化方法对术前未经化疗、术后病理诊断明确的92例肺癌组织标本并以20常肺组织作为对照进行了多药耐药相关蛋白（MRP）、肺耐药蛋白（LRP）表达的检测.并对病理类型、分化程度、临床分期、预后等进行统计学分析.结果 （1）92例肺癌组织中MRP、LRP及其两者共表达的阳性率分别为53%、52%和45%,均显著高于正常肺组织中的表达水平（P〈0.05）.（2）MRP、LRP蛋白表达在不同病理类型、不同分化程度之间具有统计学差异（P〈0.05）,而在不同年龄、性别、临床分期、淋巴结转移情况等均无明显差异.另外,MRP、LRP蛋白的表达与患者预后密切相关,且随着耐药蛋白表达种类的增加,生存曲线水平下降.结论 NSCLC中MRP、LRP的表达可能在肺癌的原发性多药耐药中起不同程度的作用,检测NSCLC中MRP、LRP在判断患者预后.指导肿瘤化疗方面具有重要的临床意义.     

肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达及意义

目的　探讨肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达及其与临床病理因素的关系。方法　应用免疫组织化学S P法检测 6 2例肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达。结果　肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达阳性率分别为 5 3.2 %和6 4 .5 % ,PCNA蛋白表达阳性肺癌Fhit蛋白阳性率明显低于PCNA蛋白表达阴性肺癌 (P <0 .0 1)。Fhit蛋白和PCNA蛋白在肺癌中表达与肺癌的分化程度、淋巴结转移、3年生存期均密切相关 ,PCNA蛋白与肺癌病理类型亦有关。结论　Fhit蛋白和PC NA蛋白异常表达与肺癌发生、发展密切相关 ,二者相互抑制 ,呈明显负相关     

树舌多糖对HepA小鼠瘤细胞蛋白质表达影响的研究

目的探讨树舌多糖抗肿瘤的作用机制,寻找特异蛋白。方法将各组小鼠的眼血清蛋白、匀浆蛋白、膜糖蛋白分别做PAGE电泳,分析其蛋白组分的变化。结果树舌多糖作用后血清蛋白、匀浆蛋白、膜糖蛋白的蛋白组分都有变化。