长春西汀对小鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨长春西汀对小鼠肾缺血再灌注(IR)损伤的保护作用及其作用机制。方法将48只健康小鼠分成假手术组、IR组、长春西汀低剂量干预组和长春西汀高剂量干预组,采用双侧肾蒂夹闭45min的方法建立小鼠肾IR损伤模型,HE染色后观察肾脏组织形态学变化,测定再灌注24h后各组血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6水平,观察肾脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平。结果与假手术组相比,IR组出现肾小管管腔扩张,刷状缘消失,管腔内有管型等病理改变,血清中SCr、BUN、TNF-α、IL-1β和IL-6水平明显升高,差异均有统计学意义(P0.05),肾组织SOD活性降低,差异有统计学意义(P0.05),MDA水平升高,差异也有统计学意义(P0.05);与IR组相比,长春西汀10mg/kg和20mg/kg干预可呈剂量依赖性改善肾组织病理损伤,SCr、BUN、TNF-α、IL-1β、IL-6和MDA水平减少,使肾组织SOD活性升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论长春西汀可通过抑制炎症和氧化应激来减轻肾IR损伤。     

胰腺干细胞移植治疗糖尿病研究进展

UKPDS及DCCT等一系列大规模的糖尿病强化治疗研究证实严格的血糖控制可以明显减少微血管及大血管并发症，而要完全控制糖尿病只有通过胰腺移植或胰岛移植。但胰岛移植需要足够的供体，目前胰腺供体严重匮乏，且受配型的限制，成功配型的机率过低。另外移植后长期的免疫抑制治疗给病人带来诸如排斥、感染、肿瘤等一系列问题。因此有必要寻找一种新的胰岛细胞来源，近年对胚胎干细胞（ES）及成体干细胞（AES）的研究为糖尿病的细胞替代治疗带来了新的思路。     

生脉注射液诱发多形性室性心动过速一例

生脉注射液诱发多形性室性心动过速一例赵新力，李建远，王勇患者女，６５岁，因反复胸闷、气短１年，加重２小时，于１９９４年９月２２日入院。既往无晕厥史。入院查体：体温３６．４℃，脉搏９６次／分，呼吸２２次／分，血压２０．６／１２．３ｋＰａ（１５４／９２ｍ...     

受体蛋白质酪氨酸激酶和血管内皮生长因子在人胚胎卵黄囊和胎肝中的表达

目的研究人胚胎发育不同时期卵黄囊和胎肝内受体酪氨酸激酶(KDR)、血管内皮生长因子(VEGF)和CD34的分布及表达,为胚胎造血分化提供理论依据。方法取15份不同胎龄的胎儿卵黄囊和胎肝,固定、切片,进行免疫组织化学SP法染色,观察KDR、VEGF和CD34的表达及分布。结果在卵黄囊和胎肝中均有KDR+、VEGF+和CD34+细胞。在中期胎肝组,KDR和VEGF的灰度值分别为103.8±6.1和96.4±6.3,表达强于晚期胎肝组(KDR和VEGF的灰度值分别为90.4±6.0和87.4±6.3)(P<0.05),KDR与VEGF的表达具有一定相关性(P<0.05)。结论KDR和CD34在胎肝和卵黄囊中广泛表达,提示在胎肝和卵黄囊中可能有成血管血液干细胞存在,KDR和VEGF相互作用,可能介导成血管血液干细胞的存活、扩增和分化。     

肽核酸的研究与应用

肽核酸(PNA)是近年设计合成的一种不带磷酸戊糖骨架的寡核苷酸类似物。不同碱基寡聚体PNA均能与DNA和RNA的序列特异性靶位点结合,形成稳定的特殊结构,可用于不同的目的:①基因组定点切割、基因克隆与图谱分析;②基因表达调控;③基因突变检测。如果PNA能在细胞内发挥作用,将成为最理想的基因靶向药物。     

附睾相关WFDC型丝氨酸蛋白酶抑制剂研究进展

精子在附睾中的成熟是通过管腔离子浓度的改变及许多糖苷酶和蛋白酶对精子表面膜的修饰过程来调控的,而这些蛋白酶的活动是受存在于附睾特定区域的蛋白酶抑制剂控制的。其中WFDC型丝氨酸蛋白酶抑制剂是一种在附睾中高度表达的蛋白,它在天然免疫与男性生育方面发挥重要作用。本文就该蛋白的结构、功能特征及其在开发男性抗生殖道感染药物、免疫避孕药物等方面的应用前景进行了综述。     

人线粒体DNA荧光定量PCR检测方法的建立

建立SYBR Green I实时荧光PCR定量检测人线粒体DNA的方法。选取人线粒体DNA高度保守基因片段,将该基因片段与pCF-T载体连接后,转化入E.coli DH5α,提取重组质粒PCR及测序鉴定后,作为阳性模板建立SYBR-Green I荧光定量PCR标准曲线和熔解曲线。结果表明:构建的标准曲线线性关系良好(反应体系中含101~108拷贝时,扩增反应CT值与拷贝数的对数成线性关系),相关系数为0.997。批内和批间重复性测定的变异系数分别为1.23%~3.29%以及3.10%~5.21%。我们成功建立了实时荧光定量PCR检测人线粒体DNA的方法,该方法可作为进一步研究线粒体DNA的方法,在相关疾病诊断和监测中具有一定的应用前景。     

人附睾ESC42基因真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

目的 构建人附睾ESCA2(hESCA2)的真核表达载体,分析其在COS-7细胞中的表达.方法 从人附睾cDNA文库中PCR扩增hESCA2片段,通过DNA重组构建真核表达载体pEGFP-N1-hESC42,瞬时转染COS-7细胞,应用RT-PCR、激光扫描共聚焦技术和Western blot检测融合蛋白的表达.结果 成功地构建了真核表达载体pEGFP-N1-hESC42;以重组载体转染COS-7细胞后,RT-PCR结果 显示hESC42与EGFP在mRNA水平正确拼接;共聚焦证实有hESCA2融合蛋白的表达;转染细胞的培养上清浓缩后,进行SDS-PAGE及Western blot分析,可检出hESC42融合蛋白的表达.结论 成功地构建了hESC42基因,并可在COS-7细胞中分泌表达,为其功能研究提供线索.     

Wnt/β-catenin信号通路与发育和疾病研究进展

Wnt信号通路是参与发育过程的关键信号网络,能够参与组织特化和细胞迁移等的发育过程。Wnt信号通路在成体动物组织内稳态的维持过程中同样发挥着重要的作用,异常的Wnt信号常与多种癌症的发生密切相关。本文概述了近两年来Wnt信号通路的激活机制、与其他功能蛋白和通路间的交互影响及其在发育和疾病方面的最新进展。     

诱导多能干细胞研究进展

通过反转录病毒载体系统,在小鼠和人高度分化细胞中表达干细胞因子Oct4,Sox2,Klf4和（或）c—Myc等基因,再经过干细胞标志因子Nanog等的筛选,可以获得与Es细胞特性十分近似的诱导多能干细胞系（iPS）。本文主要综述了诱导多能干细胞最近的研究现状,并对诱导重编程的机制和诱导多能干细胞系的临床应用前景进行了讨论。