活血化瘀、软坚散结法对子宫内膜异位症神经-内分泌-免疫网络的整体调节

探讨“活血化瘀、软坚散结”法对子宫内膜异位症神经一内分泌一免疫网络的整体调节机制。完成了活血化瘀、软坚散结法——妇痛宁颗粒冲剂治疗子宫内膜异位症的药效学、镇痛机制、神经一内分泌一免疫网络调节作用等多角度的实验研究，证实了“活血化瘀、软坚散结”法的整体调节作用。     

针灸作用原理的基本规律、特征和优势

系统回顾了中国针灸作用原理五十年研究工作。认为针灸作用的基本特征是调节作用，包括整体性调节和双向性调节两方面。针灸作用的基本规律是通过调控神经一内分泌一免疫网络途径实现其效应，具有多环节和多靶向特点。针灸作用原理研究的优势在于，为现代生命科学提供研究思路，丰富生命科学内涵，并成为最有望取得原始创新突破的我国传统学科领域。     

经络系统与神经内分泌免疫网络的比较

经络系统是人体的重要组成部分。经络呈线状，反复分支并相互联络，整体上构成网状结构。经络系统的网状结构把人体各组织器官联络成一个统一的整体，通过运行气啦、调理阴阳，达到沟通机体上下内外的整体调节作用。神经-内分泌-免疫网络则主要是通过神经递质、激素、免疫活性分子等的相互作用和影响，从细胞分子水平对机体的整体功能进行调控。本文从生物学基础与作用通路等角度将经络系统与神经内分泌免疫网络进行比较，对针灸经络与神经内分泌免疫网络的结合阐述自己的观点。     

“肝肾同源于脑”与肝肾本质研究

在《内经》“肾生骨髓,髓生肝”的理论基础上,历代医家继有“肝肾与脑相关”的认识。现代国内学者对肝肾本质研究的主要一致性结论是将肾虚定位于下丘脑,和肝病证候的出现与大脑皮层功能紊乱密切相关。我们首次建立了“左旋谷氨酸单钠—肝再生—大鼠模型”,观察了左归丸对该动物模型的影响及机理。结果表明,该动物模型的肝再生受到显著抑制,左归丸能显著促进该动物模型的肝再生;该动物模型的“神经—内分泌—免疫网络”功能紊乱,左归丸治疗后得到一定程度的纠正;从而将“肝肾同源于精血”的认识推进到“肝肾同源于脑”,“肝肾同源于下丘脑—垂体—肝轴”,“肝肾同源于神经—内分泌—免疫网络”。     

左归丸含药血清对成骨细胞分泌骨钙素的影响

目的：通过观察左归丸含药血清对成骨细胞分泌骨钙素（OC）的影响，探讨其治疗骨质疏松症的作用机制。方法：体外分离、培养成骨细胞，实验分为2组：成骨细胞（OB）＋正常血清组、OB＋左归丸含药血清组。采用放射免疫法，检测成骨细胞分泌OC的变化。结果：OB＋左归丸含药血清组与OB＋正常血清组相比，OB分泌OC的量显著增多，有统计学意义（P〈0.01）。结论：左归丸含药血清能促进成骨细胞分泌OC是其防治骨质疏松症的机制之一。     

补肾法对下丘脑-垂体-性腺-胸腺轴作用的研究概况

自从Crossman1997年首次提出下丘脑-垂体-性腺-胸腺轴概念以来，神经内分泌网络学说受到广泛注意。中医肾藏精、主生殖，是生育功能的枢纽，这与神经内分泌网络的性腺轴的作用相似。近年来，中医肾本质的研究结果表明，肾包括神经内分泌和免疫等多种功能，而补肾法能调节下丘脑-垂体-性腺轴和免疫功能的紊乱。本就此作了近十年来的献综述。     

基于“神经-内分泌-免疫网络”中药外治机制探讨

中药外用治疗疾病，不仅在外科，在急症、儿科、妇科、内科等方面均存在广泛的应用，且其疗效确切，存在使用方便、直达病灶，避免肝脏首过效应等优点。但其作用机制不清，影响其临床推广使用。本文基于中药外治临床应用，常用外治中药治病特点分析，外治常见疾病与“神经-内分泌-免疫网络”关系3个层面进行分析归纳，结果发现外治中药临床应用广泛，疗效确切；常用外治中药主治疾病发病机制与“神经-内分泌-免疫网络”密切关联，且对外治中药现代药理作用整理发现，其与“神经-内分泌-免疫网络”相关性达100%。通过对中药外治常见疾病与“神经-内分泌-免疫网络”关系分析发现，中药外用所治疾病发病机制与“神经-内分泌-免疫网络”密切相关。因而笔者认为“神经-内分泌-免疫网络”系统很可能是中药外治的主要作用机制之一。该机制的验证，在今后的研究中还需各科共同努力，进行临床或实验验证，为阐明中药外用机制提供参考，为中药外治推广应用提供依据。     

亚健康状态的神经内分泌机制及中医养生学防治

亚健康状态是介于健康与疾病之间的一种生理功能低下的状态.亚健康状态与应激造成的神经内分泌、免疫、运动、睡眠、遗传、心理异常及个体差异等因素有关.中医在防治亚健康中有其独到的优势,养生方法能调节神经一内分泌一免疫网络,以恢复或增强自稳态,改善亚健康状态.应进一步加强中医养生学防治亚健康的研究.     

辨证论治和整体观的现代诠释

通过一些共同的介导物质——神经递质、激素和细胞因子交换信息,神经、内分泌、免疫三大系统构成网络,机体的生理病理现象皆是微观动态变化基础上宏观整合的结果。五脏证的实验指标具有非特异性。疾病既包括功能引起结构变化的过程,也包括结构的变化引起功能异常的过程,机体的疾病状态是以神经内分泌免疫网络的变化为主轴,相应引起机体器官组织的某些变化,并因之表现出某些症状。证是指疾病时机体与病因相互作用,涉及多系统多物质改变的反应状态。对神经内分泌免疫网络调节的整合效应是药物、方剂、针灸、气功等方法的治病机制。     

左归丸和右归丸对实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠髓鞘及轴突再生的影响

目的研究左归丸和右归丸对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠神经髓鞘和轴突再生的影响.方法应用髓鞘碱性蛋白(MBP)与完全福氏佐剂(CFA)按11(体积比)制成抗原,给动物两后足皮下注射MBP抗原免疫,建立大鼠EAE模型.以醋酸泼尼松作对照,利用髓鞘染色及免疫组织化学染色观察各组大鼠造模后14,28 d大脑和脊髓髓鞘和轴突损伤及再生的变化.结果左归丸成右归丸干预后大鼠髓鞘脱失程度均较模型组明显减轻,MBP及神经丝蛋白(NF200)表达显著高于模型组(P＜0.05或0.01).结论左归丸和右归丸能够修复EAE大鼠神经髓鞘和轴突的损伤,可能是其促进神经康复的分子机制之一.     

补肾方药对老年大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质所属组织结构形态变化的影响

目的:观察左归丸、右归丸对老年大鼠HPA轴所属组织形态结构变化的影响。方法:以自然衰老大鼠为肾虚证动物模型,HE染色,光镜观察HPA轴所属组织结构的增龄性变化,以及补肾方药(左、右归丸)的改善作用。结果:老年大鼠垂体、下丘脑、肾上腺皮质组织形态结构呈现明显的老年性退化,左归丸、右归丸能不同程度改善这些组织结构。结论:左归丸、右归丸能从组织结构形态方面延缓下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴的老年性变化。     

补肾方药对老年大鼠下丘脑-垂体-肾上腙皮质所属组织结构形态变化的影响

目的：观察左归丸、右归丸对老年大鼠HPA轴所属组织形态结构变化的影响。方法：以自然衰老大鼠为肾虚证动物模型，HE染色，光镜观察HPA轴所属组织结构的增龄性变化，以及补肾方药（左、右归丸）的改善作用。结果：老年大鼠垂体、下丘脑、肾上腺皮质组织形态结构呈现明显的老年性退化，左归丸、右归丸能不同程度改善这些组织结构。结论：左归丸、右归丸能从组织结构形态方面延缓下丘脑-垂体-肾上腺皮质（HPA）轴的老年性变化。     

JNK通路对左归丸含药血清调控MC3T3 成骨细胞Runx2 mRNA表达的影响

目的:探讨c-Jun氨端激酶(JNK)信号通路在左归丸含药血清调控成骨前体细胞(MC3T3-E1)增殖和成骨特异转录因子核心结合因子(Runx2) mRNA表达中的作用.方法:以MC3T3-E1为研究对象,制备左归丸含药血清,选用JNK特异抑制剂SP 600125,实验分为空白对照组、SP 600125组、左归丸组、左归丸加SP 600125组、倍美力组、倍美力加SP 600125组.孵育48 h后,采用噻唑蓝(MTT)法检测SP600125对左归丸含药血清干预MC3T3-E1成骨前体细胞增殖作用的影响,采用Western blot法分析JNK蛋白磷酸化水平,采用Real Time RT-PCR法检测成骨细胞特异转录因子Runx2 mRNA表达情况.结果:与空白对照组比较,左归丸含药血清组显著促进细胞增殖,明显上调p-JNK蛋白和Runx2 mRNA表达(P＜0.01);SP600125显著抑制左归丸含药血清诱导的增殖和p-JNK蛋白表达(P＜0.01),对Runx2 mRNA表达的影响不显著.结论:JNK信号通路的激活可能参与了左归丸含药血清诱导的MC3T3-E1成骨前体细胞增殖,但左归丸含药血清诱导的Runx2mRNA高表达对JNK信号通路依赖不显著.     

左归丸、右归丸复方及相关成分对小鼠胚胎干细胞1B10向生殖细胞方向分化的影响

目的:探索左归丸、右归丸及其相关成分对干细胞向生殖细胞分化的影响。方法:制备左归丸、右归丸、左归丸和右归丸共有成分的大鼠含药血清,以此作为实验药物;以小鼠胚胎干细胞1B10(MESC-1B10)为干细胞代表;然后以上述大鼠含药血清干预MESC-1B10,干预过程中进行显微照像追踪,干预72 h后,提取相关被干预细胞的RNA,立即合成c DNA,最后利用实时荧光定量PCR(q PCR)检测各干预细胞的10种与生殖分化相关基因的表达模式。结果:左归丸大鼠含药血清(ZGWRS)显著上调了Oct-4和SCP3,显著下调了GDF-9和Stra8;右归丸大鼠含药血清(YGW-RS)显著上调了Oct-4,GDF-9,Mvh和SCP3,显著下调了Stra8,Itga6和Itgb1;左归丸和右归丸共有成分的大鼠含药血清(ZGWYGW-RS)显著上调了Oct-4,SCP3和ZP3,显著下调了GDF-9,Stra8,Itga6和Itgb1。结论:ZGW-RS能启动MESC-1B10向减数分裂方向变化,但是尚不足以推动1B10向生殖细胞分化;YGW-RS能启动MESC-1B10向减数分裂方向变化,同时推动1B10向雌性生殖细胞分化;ZGWYGW-RS能启动MESC-1B10向减数分裂方向变化,同时能轻微推动MESC-1B10向雌性生殖细胞分化,但是作用弱于YGW-RS。实验结果一方面增强了对左归丸和右归丸及其相关成分影响干细胞生殖分化的认识,另一方面有助于解释左归丸和右归丸治疗不孕不育症的机制。     

左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨钙素和降钙素含量的影响

目的：探讨左归丸防治骨质疏松症的机理。方法：以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为模型。采用骨组织形态计量学方法测定胫骨骨小梁体积百分比（TBV%），骨小梁吸收表面百分比（TRS%）和骨小梁形成表面百分比（TFS%），采用放射免疫分析法测定外周血清中雌二醇（E2），骨钙素（BGP）和降钙素（CT）的含量。结果：左归丸能使胫骨TBV%显著增高，使TRS%和TFS%显著降低，大鼠切除卵巢后，在E2含量大幅度降低的同时。BGP含量明显增加，CT含量明显降低，左归丸对E2含量无显著影响，但能使CT含量增加。使BGP含量降低。结论：左归丸能使CT含量增加是其防治骨质疏松症的机理之一。     

左归丸对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠血清中E_2、PTH含量的影响

目的:探讨左归丸对糖皮质激素性骨质疏松症的治疗作用及机理。方法:将42只雌性Wistar大鼠随机分为3组:空白对照组12只,模型组15只,左归丸组15只。造模给药8周后,采用骨组织形态计量学方法对不脱钙骨切片进行形态计量,并采用ELISA法检测大鼠外周血血清中E2、PTH的含量。结果:与空白对照组相比,模型组大鼠胫骨TBV%及TFS%显著降低,TRS%显著增高;且大鼠血清中PTH含量显著增高,E2含量则显著降低。而左归丸组大鼠TBV%则显著高于模型组,TFS%亦显著增高,TRS%虽无差异,但有明显降低趋势;且血清中PTH含量显著降低,E2含量较之模型组显著增高。结论:左归丸可使糖皮质激素所致骨质疏松大鼠血清中PTH的水平下调,同时上调E2水平,使其紊乱状态基本恢复正常,这可能是其治疗糖皮质激素所致大鼠骨质疏松症的机理之一。     

左归丸对免疫性卵巢早衰小鼠抗卵巢抗体的影响

目的探讨左归丸对免疫性卵巢早衰(POF)小鼠生殖内分泌及抗卵巢抗体(AoAb)的影响。方法以SD雌性大鼠卵巢组织制备卵巢抗原,皮下多点免疫接种BALB/C雌性小鼠,建立POF模型。用左归丸处理造模过程中不同时间点小鼠,以泼尼松为阳性对照,光镜下观察卵巢组织的形态学特征,放射免疫法检测外周血血清卵泡刺激素(FSH)及雌二醇(E2)水平,酶联免疫法检测外周血AoAb。结果POF小鼠卵巢间质可见淋巴细胞浸润,外周血FSH升高,E2下降,AoAb阳性。左归丸能减缓POF小鼠外周血FSH升高,提高体内E2水平,抑制AoAb产生,早期用药比后期用药作用显著。结论左归丸能改善POF小鼠卵巢免疫性炎症的损伤,对POF具有一定的预防和治疗作用。     

左归丸对雌性小鼠阴虚模型生殖内分泌的影响

目的　通过左归丸对实验性雌性阴虚小鼠生殖内分泌的影响探讨其滋补肾阴的作用机制。方法　采用甲状腺素片灌胃造成雌性小鼠阴虚模型 ,造模前 2d起给予中药灌胃。采用放射免疫测定法测定小鼠外周血FSH及E2 含量。电子天平称取胸腺及卵巢的质量。结果左归丸组及左归丸去温阳药组E2 含量较模型组高 (P <0 .0 1) ,且左归丸组胸腺质量与模型组相比减少较少 (P <0 .0 5 ) ,两组中药复方之间在影响FSH ,E2 、卵巢质量及胸腺质量方面差异不明显 (P >0 .0 5 )。结论　补阴复方左归丸调节雌性阴虚小鼠生殖内分泌的功能可能是其滋补肾阴的作用机制之一     

左归丸对肾虚大鼠MSCs增殖的影响

目的探讨补肾益精代表方左归丸对肾虚大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖的影响。方法 SD雌性大鼠双侧卵巢切除增龄3月法复制肾虚模型,用左归丸给予部分模型大鼠灌胃。分离、培养正常组、模型组、左归丸组大鼠MSCs。观察各组大鼠MSCs细胞形态,生长周期,P3、P5代细胞生长曲线,β-半乳糖苷酶衰老细胞染色结果。结果模型组大鼠P3、P5代MSCsOD值明显低于正常组、左归丸组(P<0.05)。各组大鼠MSCs细胞周期无明显差异(P>0.05)。模型组衰老细胞阳性率最高,明显高于正常组(P<0.01),但与左归丸组间差异不明显(P>0.05)。结论去卵巢大鼠MSCs增殖能力减弱,左归丸一定程度上改善肾虚大鼠MSCs增殖能力。     

左归丸对MSG-大鼠胸腺及淋巴细胞增殖反应的影响

新生期大鼠给予左旋谷氨酸单钠（ＭＳＧ）损害下丘脑弓状核（ＡＲＣ），成年后大鼠除表现生长发育迟缓外，还可见到胸腺体积缩小、重量减轻，脾脏Ｔ淋巴细胞对Ｃｏｎ－Ａ诱导的增殖反应减弱。滋补肾阴代表名方左归丸能明显改善ＭＳＧ－大鼠的胸腺与淋巴细胞增殖反应的异常。提示：１．下丘脑弓状核参与细胞免疫功能的调节；２．左归丸能明显改善ＭＳＧ－大鼠的胸腺与淋巴细胞增殖反应的异常