支原体全DNA光敏生物素探针杂交方法的建立

支原体基因组全ＤＮＡ分子量较小，本研究直接制备肺炎支原体，人型支原体和解脲脲原体中３个型ＳＵ１，ＳＵ４，ＳＵ８全ＤＮＡ光敏生物毒探针，用斑点杂交鉴定表明探针可用于检测同种支原体，但３个型ＵＵ探针不能用于型别鉴定。探针检测灵敏义较一般片段ＤＮＡ探针灵敏度低，可能是由于前者分子量较大，降低了杂交速率和效率。     

人IL—3cDNA探针制备及应用

采用多聚酶连反应（ＰＣＲ）扩增人ＩＬ—３ｃＤＮＡ片段,以地高辛（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ—１１—ｄＵＴＰ）为标记物,随机引物法标记ＩＬ—３ｃＤＮＡ探针。探针经斑点杂交和核酸原位杂交证明：用制备ＩＬ—３ｃＤＮＡ探针检测细胞ＩＬ－－３ｍＲＮＡ表达具有特异性强,灵敏度高,使用简便,杂交结果直观,探针可较长时间保存和无放射性污染等优点。     

女性生殖道感染支原体培养及药敏分析

了解女性生殖道支原体感染及耐药情况。方法 对可疑患者４７２例宫颈分泌物进行支原体培养，型别鉴定及药敏试验检测。结果 支原体培养阳性２５８例（５４．７％），其中解脲支原体（ＵＵ）阳性１６８例（３５．６％），明显高于人型支原体（ＭＨ）１１例（２．３％）和ＵＵ＋ＭＨ阳性７９例（１６．７％）。２５８例支原体阳性患者１０种药物的敏感率为５９．７％，其中敏感率最高的是交沙霉素，达９１．１％，敏感率最低是乙酰螺     

cDNA探针地高辛标记法检测肺中诱生型一氧化氮合成酶的表达

目的：探讨内毒素（ＬＰＳ）诱导后家兔肺组织中诱生型一氧化氮合成酶（ｉＮＯＳ）的表达。方法：采用地高辛标记ｉＮＯＳｃＤＮＡ探针，并用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术和比色法检测ｉＮＯＳ表达。结果：经内毒素诱导后ｉＮＯＳ在家兔肺组织中有表达，注射ＬＰＳ５小时后表达量最大，２４小时表达量减少。结论：地高辛标记ｉＮＯＳｃＤＮＡ探针可较好地用于ｉＮＯＳ基因表达的研究。     

人型结核杆菌克隆DNA探针的制备及其应用的研究

用限制性内切酶ＰｓｔⅠ消化人型结核杆菌Ｈ３７ＲｖＤＮＡ,与质粒ｐＵＣ１９ ＤＮＡ连接后转化大肠杆菌,经同位素３２Ｐ标记的人型结核杆菌Ｈ３７Ｒｖ全染色体ＤＮＡ探针筛选出６个阳性克隆（ＭＴ１￣６）,其中克隆ＤＮＡ片段ＭＴ２（４．２Ｋｂ）、ＭＴ４（３．５Ｋｂ）和ＭＴ５（３．０Ｋｂ）标记成探针,检测了２２种分支杆菌标准株和１５侏人型结核杆菌临床分离侏以及２种非分支杆菌,其杂交结果完全相同,与人型结核杆菌及     

58例不孕症宫颈沙眼衣原体和解脲支原体检测分析

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对５８例不孕症患者（不孕组）及８０例正常生育者（对照组）行宫颈沙眼衣原体（ＣＴ）和解脲支原体（ＵＵ）检测。结果 不服组宫颈分泌物ＣＴＤＮＡ和ＵＵＤＮＡ阳性检出率分别为３４．５％和４８．３％,与对照组比较,有极显著性差异（Ｐ〈０．０１）。提示对于不孕症患者应常规生殖道ＣＴ及ＵＵ检测,尤其是对于原因不明的不孕症、继发性不孕症及患有宫颈糜烂的不孕症患者检测意义更大。     

生物素交联补骨脂素标记HPV基因探针的制备

对含ＨＰＶ１６和ＨＰＶ１８ＤＮＡ质粒的大肠杆菌进行培养、扩增，提取大量质粒ＤＮＡ，纯化、酶切、回收ＨＰＶＤＮＡ片段，用国产生物素交联补骨脂素标记，再经纯化鉴定。制备的ＨＰＶＤＮＡ探针用亲合素辣根过氧化物酶显色，敏感性可达ｌｐｇ。检测靶核苷酸的敏感性可达５ｐｇ。该探针用于原位杂交检测１０例食管癌组织及相应癌旁粘膜组织中的ＨＰＶＤＮＡ，也取得良好结果。结果提示：用生物素交联补骨脂素标记基因探针是一种简单的方法，且效果良好，适于研究和临床检测。     

光敏生物素标记DNA探针检测海南大劣按蚊

光敏生物素标记ＤＮＡ探针检测海南大劣按蚊刘斌陆晓林刘忠湘（第四军医大学寄生虫学教研室西安７１００３３）关键词大劣按蚊光敏生物素斑点杂交中图号Ｒ３９１．１同位素３２Ｐ标记的质粒ｐＡＤ－３２０是一株特异性、敏感性均较好的海南大劣按蚊探针．但是，由于同位素...     

不孕妇女衣原体及支原体感染对性交后试验的影响

目的：探讨不孕妇女生殖道沙眼衣原体（ＣＴ）及解脲支原体（ＵＵ）感染对性产后的试验（ＰＣＲ）的影响。方法：本研究用ＰＣＲ方法检测了２０３例不孕妇女性交后宫颈粘液分泌物中ＣＴ及ＵＵ－ＤＮＡ表达。结果：ＰＣＲ不良组ＣＴ及ＵＵ－ＤＮＡ阳性率分别为３０．３％和２８．３％,显著高于ＰＣＴ正常组（Ｐ〈０．０５）。结论：ＣＴ及ＵＵ感染改变宫颈粘液性状,阻止精子从宫颈穿过是导致不孕的原因之一。     

生物素交联补骨脂素标记HPV基因探针的制备

对含ＨＰＶ１６和ＰＶ１８ＤＮＡ质粒的大肠村菌进行培养、扩增，提取大鼠质粒ＤＮＡ，纯化、酶切、回收ＨＰＶＤＮＡ片段，用国产生物素交联补骨脂素标记，再经纯化鉴定，制备的ＨＰＶＤＮＡ探针用亲合素－辣根过化物酶显色，敏感性可达１ｐｇ。检测靶核苷酸的敏感性可达５ｐｇ。该探针用于原位杂交检测１０例食管癌组织及相应癌旁粘膜组织中的ＨＰＶＤＮＡ，也取得良好结果，结果提示：用生物素交联补骨脂素标记基因探针是一种简单     

输卵管性不孕与生殖道解脲支原体感染

目的：探讨因输卵管炎症性闭塞引起的不孕与女性生殖道解脲支原体（ＵＵ） 感染关系。方法：用聚合酶链反应方法检测３９ 例因输卵管闭塞性不孕住院手术治疗患者的宫颈管分泌物、患侧输卵管粘膜的ＵＵＤＮＡ; 以同期住院行输卵管结扎、因附件良性肿瘤而行一侧附件切除的３０ 例病人为对照组。结果：输卵管闭塞组宫颈管ＵＵＤＮＡ阳性率为９４．９％ ,显著高于对照组的２３．３ ％（ Ｐ＜ ０．０１） 。病变输卵管的ＵＵＤＮＡ阳性率为８２．１ ％ ,显著高于对照组１３．３％ ,（ Ｐ＜０．０１）。结论：输卵管炎症性闭塞引起不孕与生殖道解脲支原体上行感染有关。     

Alu-PCR联合荧光原位杂交技术鉴定bcr基因相关YAC克隆

目的制备慢性髓细胞性白血病（ＣＭＬ）ｂｃｒ基因重排的ＤＮＡ探针。方法应用Ａｌｕ－ＰＣＲ和荧光原位杂交（ＦＩＳＨ） 技术,对３个酵母人工染色体（ＹＡＣ）候选克隆进行鉴定,制备ＤＮＡ探针,并经正常人外周血淋巴细胞和慢性髓细胞性 白血病患者骨髓细胞筛选。结果确定了ＹＡＣ７６５Ｅ３为非嵌合体,定位于染色体２２ｑｌｌ ｂｃｒ基因区域,而且可在Ｐｈ染 色体阳性细胞中易位至９ｑ３４。探针特异性杂交效率达９５％。结论ＦＩＳＨ技术是染色体、染色体畸变鉴定和染色体上特 殊序列定位的重要检测方法。联合应用Ａｌｕ－ＰＣＲ技术特异性扩增载体ＹＡＣ中人类基因组来源的ＤＮＡ制备探针,为慢性髓细胞白血病的诊断和监测微小残留病提供了一个新的手段。     

泰安地区非淋菌性尿道炎病原学研究

对９０例疑似非淋菌性尿道炎（ＮＧＵ）患者进行了直接免疫荧光沙眼衣原体检测及解脲支原体、人型支原体培养，并同时观察了１８例淋病患者上述三种病原体的感染情况。     

恶性疟原虫SSUrDNA特定片段的体外扩增及鉴定

恶性疟原虫ＳＳＵｒＤＮＡ特定片段的体外扩增及鉴定｜｜［万磊，陈培霞，薛采芳等．中国寄生虫学与寄生虫病杂志，１９９４；１２（３）：１６９～１７１］作者根据已知疟原虫、其它寄生人体原虫及人的小亚单位核糖体核糖核酸基因（ＳＳＵｒＤＮＡ）编码区序列，借助计算...     

鼻咽癌体外传代细胞株SUNE中EBV-LMP_1全基因的扩增

用长片段高保真度ＰＣＲ扩增系统（ｅｘｐａｎｄＴＭｈｉｇｈｆｉｄｅｌｉｔｙＰＣＲｓｙｓｔｅｍ）从鼻咽癌（ＮＰＣ）体外传代细胞株ＳＵＮＥ中扩增出ＥＢ病毒（ＥＢＶ）潜伏膜蛋白（ＬＭＰ１）全基因，经凝胶电泳分析和ＤＮＡ斑点杂交进行鉴定。扩增片段长度为３．４３ｋｂ，相当于Ｂ９５－８细胞ＥＢＶ基因序列位置为１７００３３～１６６６０８ｎｔ，包括ＬＭＰ１基因的上游启动子／增强子序列、ＬＭＰ１编码序列的３个外显子、两个内含子及下游ｐｏｌｙＡ信号序列。ＬＭＰ１全基因的扩增对于深入研究ＬＭＰ１基因的结构与功能以及ＬＭＰ１在ＮＰＣ发生发展中的作用机制具有十分重要的价值。     

SPA协同凝集法快速检测解脲支原体抗原的研究

ＳＰＡ协同凝集法快速检测解脲支原体抗原的研究第一临床学院皮肤科张林，钟淑侠，陈世义关键词ＳＰＡ，解脲支原体，抗原，协同凝集试验中图号Ｒ３９２─３３非淋菌性尿道（宫颈）炎（ＮｏｎｇｏｎｏｌｏｃｃａｌＵｒｅｔｈｒｉｔｉｓ，ＮＧＵ），近年来发病率逐年增高，...     

泌尿生殖道病原体感染及其分离鉴定

目的：了解泌尿生殖道病原菌分布及支原体感染情况,进一步探讨支原体感染在性传播疾病中的重要性及体外药敏情况。方法：对１４４例因有泌尿生殖道系统症状而来就诊的门诊患者的尿道或宫颈分泌物,采用ＶｉｔｅｋＡＭＳ全自动微生物分析仪进行细菌鉴定,ＩＳＴ培养基进行支原体培养及药敏试验。结果：检出淋球菌７例（４９％）,其他病原菌７０例（４８６％）,支原体５３例（３６８％）。其中解脲支原体（ＵＵ）感染３５例（６６０％）,人型支原体（ＭＨ）感染２例（３８％）,ＵＵ＋ＭＨ混合感染１６例（３０２％）,ＵＵ感染显著高于ＭＨ和ＭＨ＋ＵＵ混合感染（Ｐ＜００１）。结论：泌尿生殖道病原体感染以细菌为主,而支原体感染也占了较大比例,表明非淋菌性尿道炎已超过淋病而跃居首位,应引起临床极大重视。     

我国铁路人群生殖道支原体感染的血清流行病学研究

用ＰＨＡ法对２９个铁路地区７５４９名健康人和昆明铁路分局１００３名不同职业人群进行了解脲脲原体（Ｕｕ）和人型支原体（Ｍｈ）抗体水平检测。结果表明，生殖道支原体流行范围相当广泛，所有地区都存在不同程度的感染。Ｕｕ抗体平均阳性率为９．１０％，ＧＭＩ为１：３．５９；Ｍｈ抗体平均阳性率为２．６６％，ＧＭＴ为１：４．４１。揭示了我国铁路人群Ｕｕ和Ｍｈ感染的基本特点，为我国（尤其铁路系统）制定泌尿生殖道支原体感染症的防治措施提供了依据。     

简易菌落斑点杂交法快速检测志贺氏菌ipaH基因的实验研究

采用ＰＣＲ扩增技术，制备了Ｄｉｇ标记志贺氏菌多拷贝的ｉｐａＨ基因探针。用该探针通过菌落点杂交试验，探索快速，特异，敏感，简单检测志贺氏菌的方法。本法检测灵敏度达５－１０ｐｇＤＮＡ／μ１。含菌量为３×１０＾－６ＣＦＵ／ｍｌ的粪便上清液直接抽滤点膜２５μｌ杂交结果为阳性。     

336例宫颈分泌物支原体的培养与鉴定

对妇科门诊３３６例拟诊为女性急慢性生殖道感染者的宫颈分泌物进行支原体（解脲支原体Ｕｕ和人型支原体Ｍｈ）培养鉴定。结果２２１例阳性，阳性率６０．５％。其中Ｕｕ和Ｍｈ双阳性４２例，占阳性例数１９％；Ｍｈ阳性１８例，占阳性例数８．１％。提示支原体感染已成为女性生殖道感染的主要致病原，应当引起重视。