半巢式PCR检测淋巴细胞白血病微小残留病

半巢式ＰＣＲ检测淋巴细胞白血病微小残留病徐兵，周淑芸，孙竞免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排可作为Ｂ－淋巴细胞白血病的克隆标志，一次ＰＣＲ方法检测ＩｇＨ重排敏感性可达１０￣（－４）～１０￣（－５）水平，我们采用更灵敏的半巢式多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测了...     

白血病人骨髓间充质干细胞是否是恶性细胞?

本研究探索白血病人的骨髓间充质干细胞是否也具有白血病恶变特征。分别分离培养急性早幼粒细胞白血病(APL)及慢性髓系白血病(CML)患者的骨髓间充质干细胞并与正常对照比较其形态、生长曲线、细胞表面标志及是否带有白血病细胞的恶性克隆性的基因异常标志。结果表明:白血病患者的骨髓间充质干细胞在细胞生物学特征方面与正常健康人无任何明显差异,未发现白血病患者的骨髓间充质干细胞带有白血病细胞的恶性克隆性基因改变。结论:来源于白血病患者的骨髓间充质干细胞并无相应白血病细胞的克隆性异常,提示可能作为自体移植的辅助治疗和细胞治疗或基因治疗的可供选择的细胞载体。     

竞争性逆转录-聚合酶链反应和毛细管电泳定量检测慢性髓系白血病患者bcr/abl mRNA

ｂｃｒ ａｂｌ融合基因绝大部分融合方式为ｂ3ａ2或ｂ2ａ2型。我们根据竞争性逆转录 酶合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)的原理 ,设计和构建了该基因的竞争性参照物 ,并利用毛细管电泳技术对竞争性ＲＴ ＰＣＲ的产物进行分离分析 ,建立了对该基因精确的定量分析方法。材料和方法1　细胞标本　Ｋ5 6 2细胞系 (含ｂ3ａ2型融合基因 )和ＨＬ 6 0细胞系为本室冻存。含ｂ2ａ2型融合基因的白血病细胞采自1例住院慢性髓系白血病 (ＣＭＬ)患者。ＲｉｂｏＭＡＸＴＭ 体外转录试剂盒购自Ｐｒｏｍｅｇａ公司。毛细管电泳无胶筛分ＤＮＡ专用试剂盒购自中国科学…     

BioArchive自动液氮储存系统保存的胎盘脐血的冷冻生物学特征

为了解在特定降温和复温过程中于BioArchive自动液氮储存系统保存的胎盘脐血 (PCB)的冷冻生物学特征 ,采用Procount方法流式细胞术测定CD34+ 细胞含量 ,细胞集落形成单位 (CFU)检测CD34+ 细胞的增殖能力 ,台盼蓝拒染法和白细胞分类测定有核细胞活存率和白细胞分类变化。结果显示 ,冻存复温后PCB有核细胞平均活存率为 (73.3± 12 .5 ) % ;PCBCD34+ 细胞的含量在冻存前为 (0 .3± 0 .2 1) % ,冻存复温后为 (0 .4 5± 0 .36 ) %。冻存复温后PCBCFU GM / G/ GEMM形成能力为冻存前的 (97.9± 39.9) %。比较大、小冷冻袋冻存复温后PCB细胞活存率和CFU GM/ G/ GEMM的形成能力无显著差异。另外 ,冻存复温后PCB的白细胞分类明显改变 ,粒细胞百分比明显降低 ,淋巴细胞和单核细胞百分比明显升高。结论 :在本研究中所采用的降温与复温程序不适于保存粒细胞 ,但是能够很好地保存淋巴细胞和单核细胞 ,尤其是CD34+ 的幼稚造血细胞。     

肝脾T细胞淋巴瘤转变为淋巴瘤白血病1例临床观察及文献复习

目的:提高对肝脾T细胞淋巴瘤诊断和治疗的认识.方法:报道1例罕见肝脾T细胞淋巴瘤并胸膜浸润及转变为淋巴瘤白血病的全过程,并进行文献复习.结果:肝脾T细胞淋巴瘤属外周T细胞淋巴瘤的一种亚型,临床以发热、脾脏显著肿大、肝大为主要表现,淋巴结一般不受累.其病理特征是淋巴瘤细胞的增殖高度局限在肝脾和骨髓的窦内.PCR检测TCRγ或δ基因重排阳性.结论:本病进展快、疗效差,生存期短,可转变为白血病.PCR检测骨髓标本TCRγ基因重排对该病诊断有帮助.对于合并骨髓浸润的肝脾T细胞淋巴瘤应考虑应用白血病的化疗方案,可能会获得较好疗效.     

供者淋巴细胞输注对异基因造血干细胞移植后白血病复发的防治作用

自从 1989年报道第 1例急性淋巴细胞白血病 (ＡＬＬ)异基因造血干细胞移植 (ａｌｌｏ ＨＳＣＴ)后白血病复发患者采用供者淋巴细胞输注 (ＤＬＩ)治疗获得成功[1 ] 以来 ,许多研究报告已肯定ＤＬＩ对治疗各种类型白血病ａｌｌｏ ＨＳＣＴ后白血病复发有较好的疗效。目前ＤＬＩ除用于恶性血液病和实体瘤ａｌｌｏ ＨＳＣＴ后肿瘤复发的患者外 ,发展到预防ａｌｌｏ ＨＳＣＴ后白血病的复发 ,甚至有人提出用ＤＬＩ作为白血病化疗获完全缓解(ＣＲ)后的强化治疗[2 ,3 ] 。现就有关ＤＬＩ治疗各类白血病的疗效、治疗方案、应用时机选择、并发症的防…     

急性白血病骨髓细胞外基质的改变

作者应用组织化学、免疫组织化学染色及自动图象分析仪观测５９例急性白血病（ＡＬ）患者１１８次骨髓活检标本骨髓细胞外基质（ＥＣＭ）成分变化及其与造血细胞增殖的关系。其中男性３８例，女性２１例，中位数年龄３４岁。急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）４１例，急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）１８例，初诊未治者（ＰＬ）２７例，难治复发者（ＲＬ）３２例，正常对照１０例。结果显示，ＡＬ与正常人骨髓ＥＣＭ成分有显著性差异（Ｐ＜０．０５）；ＡＬ网硬蛋白增加，纤维连接蛋白（Ｆｎ）、酸性粘多糖减低，中性粘多糖初诊未治者增高，难治复发者减低。ＡＬＬ和ＡＮＬＬ之间未见显著性差异；ＲＬ中难以缓解与复发再治者比较，后者改变更明显，而同复发次数无显著性差异。ＰＬ中追踪观察，６／８例（７５％）未缓解患者及８／１９例（４２．１％）完全缓解后复发患者骨髓基质Ｆｎ、酸性粘多糖、中性粘多糖有不同程度改变。骨髓基质Ｆｎ与造血细胞增殖在正常对照组显示呈正相关，而在ＡＬ呈负相关，ＰＬ与ＲＬ尚存在显著性差异（Ｐ＜０．０５）。提示ＡＬ骨髓造血微环境ＥＣＭ有明显变化，与发病机制及预后关系密切。     

利用DNA池和变性高效液相色谱分析bcr和 abl基因序列标签位点多态性

为了探讨bcr和abl基因的单核苷酸多态性(SNP)与慢性髓细胞性白血病(CML)的关系，利用DNA池(DNA pooling)结合变性高效液相色谱(dHPLC)技术对bcr和abl基因上的9个序列标签位点(sequence-tagged site，STS)进行序列变异的筛查分析，并通过测序对筛查结果进行验证。研究结果表明，在9个STS片段中检出了4个片段中的多态性位点和3个片段中与参考序列不一致的变异。结论：U07000片段中的SNP在慢性髓性细胞白血病病人和对照人群中的基因频率分布有显著差异。     

聚合酶链反应检测急性非淋巴细胞白血病患者FLT3/ITD基因突变及临床意义

目的　探讨急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)患者FLT3基因及内部串联重复 (ITD)突变及临床意义。方法　采用聚合酶链反应 (PCR )方法扩增 71例ANLL患者FLT3 /ITD基因突变。结果　 71例ANLL患者中有 65例 ( 91 5% )FLT3基因检测阳性 ,其中有 17例出现FLT3 /ITD基因突变 ,71例ANLL患者FLT3 /ITD基因突变阳性率为 2 3 9%。FLT3 /ITD基因突变阳性ANLL患者外周血白细胞计数及骨髓白血病细胞比例显著高于FLT3 /ITD基因突变阴性ANLL患者 (P <0 0 1和P <0 0 5)。FLT3 /ITD基因突变阳性ANLLCR后 1年内复发率显著高于FLT3 /ITD基因突变阴性组(P <0 0 5)。结论　FLT3 /ITD基因突变可作为部分ANLL患者微小残留病检测的新的基因标记 ;FLT3 /ITD基因突变阳性ANLL常伴外周血高白细胞数、骨髓中高白血病细胞比例及明显增高的复发率 ,FLT3 /ITD基因突变阳性ANLL预后较差     

浅谈WHO—AML分类

对于血液系统髓系肿瘤的分类研究文章较多 ,但国内临床上多沿用FAB分类方案 ,自WHO发表了髓系肿瘤分类方案后 ,国内血液病临床工作者争论较多。　　急性非淋巴细胞白血病是一组影响到定型或不定型造血干细胞的高度异质性血液髓系肿瘤疾病 ,目前可利用传统细胞形态学、单克隆抗体、细胞遗传学、分子生物学等检测手段来进行分析 ,并结合临床观察对治疗反应及疗效作出统一评价。近几年来对细胞遗传学、单克隆抗体表型、特异性的融合基因表达日趋重视 ,认为免疫表型及分子遗传信息对决定诊断和治疗原则都是极为重要的 ,避免了形态学上的主观…