两种固定液对肺组织固定效果的比较

目的:比较Bouin和10%甲醛两种固定液对正常肺组织的固定效果。方法:取正常小鼠肺组织,分别用Bouin和10%甲醛两种固定液,按料液比1∶20固定24 h,常规制备肺组织石蜡切片,HE染色;光镜下分别在100倍和400倍比较两种切片的组织结构和染色情况并统计高倍镜下清楚细胞数;应用t检验进行统计分析。结果:Bouin固定的肺组织在低倍镜下见解剖结构无分离,组织着色均匀,细胞内外结构清晰,高倍镜下支气管上皮细胞核与质界限分明,Ⅰ型、Ⅱ型肺泡细胞清晰且易于辨别;10%甲醛固定的肺组织切片染色后,在低倍镜下观察效果与Bouin固定的肺组织切片无显著差异,高倍镜下支气管上皮细胞核与质界限不清,Ⅰ型、Ⅱ型肺泡细胞结构模糊,经t检验两者差异有统计学意义(P<0.001)。结论:Bouin固定的肺组织其HE染色效果较好,为肺组织切片的制备提供参考。     

SD大鼠皮肤组织教学石蜡切片的改进

目的:探讨一种改善皮肤组织教学切片质量的方法。方法:取大鼠的皮肤,用Bouin液固定、脱水﹑氯仿透明﹑浸蜡﹑包埋﹑切片﹑HE染色和封片,最后在光镜下观察。结果:新方法制作的皮肤组织切片结构完整,厚薄均匀,染色恰当,形态清晰无断裂破碎现象。结论:用Bouin固定液软化,降低组织硬度,氯仿透明不引起组织收缩变形及过度硬脆。这种改进的实验方法可切实提高皮肤组织石蜡切片效果,是可行的。     

小鼠整体胚胎和新生鼠石蜡切片技术的改进

目的探讨小鼠整体胚胎和新生鼠石蜡切片技术的改进。方法收集不同胚龄和日龄的小鼠整体胚胎及新生鼠14.5、15.5及16.5 d的胚胎,清洗后直接置于4%中性甲醛中固定24 h以上;胚龄17.5、18.5 d及日龄0、1、2 d的小鼠,先用注射器往胸腹部及脑部缓慢注入固定液,再整体固定于标本瓶中24 h以上。经全自动密闭式组织脱水机编程脱水,石蜡包埋技术制备小鼠整体胚胎和新生鼠切片。应用HE染色方法对切片进行染色检验,光学显微镜下观察小鼠整体胚胎和新生鼠的不同组织结构。结果使用全自动密闭式组织脱水机处理小鼠整体胚胎和新生鼠,经过特定的脱水程序处理,镜下观察不同胚龄及日龄的不同组织器官,结构完整,层次清晰,一致性好。结论本实验室利用全自动密闭式组织脱水机对小鼠胚胎和新生鼠进行处理,通过设置合理程序,能够同时处理不同胎龄和日龄的小鼠整体胚胎及新生鼠;脱水后制备的石蜡切片结果稳定,一致性好,为小鼠遗传学和发育学研究提供了良好的技术支持。     

冰冻切片制作方法改进探讨

目的:探讨制片效果比较理想的冰冻切片制作方法,以提高冰冻切片的质量.方法:择取新鲜活体组织,取材后直接冻结,经恒温式冰冻切片机切片,冰冻固定液固定,HE染色.剩余组织做石蜡切片对照.结果:质量较好,染色鲜艳,镜下组织结构细胞形态清晰,细胞核浆对比分明.结论:此方法简便快速,制片质量满意,可提高病理诊断的准确性.     

三种固定液对大、小鼠肠道组织石蜡切片质量的影响

目的对比三种固定液对大、小鼠肠道组织石蜡切片质量的影响,优选大、小鼠肠道组织切片固定液。方法选择三种常用的固定液:10%中性福尔马林固定液,Bouin’s固定液,改良Davidson’s固定液,对SD大鼠和KM小鼠小肠组织进行固定,常规制作石蜡切片、HE染色,对比观察其染色效果。结果三种固定液对大、小鼠肠道组织石蜡切片质量存在影响,单纯福尔马林固定的切片存在肠粘膜上皮脱落、坏死的假象;Bouin’s固定液和改良Davidson’s固定液则可避免这一假象的出现,而且切片结构更精细、清晰,但是,HE染色的色彩不如单纯福尔马林固定液的鲜艳。结论 Bouin’s固定液和改良Davidson’s固定液固定的大、小鼠肠道组织的石蜡切片质量优于10%中性福尔马林固定液。     

陈旧石蜡组织块的免疫组织化学染色及防脱片体会?

目的：总结陈旧石蜡组织块的免疫组织化学染色及防脱片经验。方法选取包埋时间为4年的金黄地鼠胰腺和肝脏石蜡组织块各150个,按照本课题组改进的实验方法进行切片及免疫组织化学染色。结果镜下观察显示,切片染色阳性结构清晰,无非特异性背景着色,脱片率约为10%。结论陈旧石蜡组织块在自来水里浸泡3~4 d 后再切能够提高切片质量;在免疫组织化学中烤片、抗原修复、一抗均是影响脱片的关键环节。     

脂肪组织切片制备方法的改进

目的探讨脂肪组织石蜡切片及冰冻切片方法的改进。方法取脂肪组织迅速固定于10%中性福尔马林中,设置不同的脱水程序制备石蜡切片,HE染色。免疫组化法观察PPARγ和ITLN1的表达。取脂肪组织迅速固定于甲醛钙或10%中性福尔马林固定液中24 h以上,OCT包埋,置于-80℃冰箱至少30 min,设置冰冻切片机箱体温度-20℃,样品头温度-30℃,切片后HE染色。结果用改进方法制备的脂肪组织石蜡切片,切面平整,无皱褶,无裂隙,脂肪细胞结构完整,染色清晰,且对免疫组化结果无影响;冰冻切片的改进提高了切片质量,结构完整,形态好,染色清晰。结论改进的脂肪组织石蜡切片和冰冻切片均可成功应用于不同实验动物,为脂肪组织的研究提供了有力的支撑条件。     

不同固定液对冰冻切片质量的影响

目的 探讨不同固定液对冰冻切片质量的影响以指导临床应用.方法 冰冻切片采用五种不同固定液固定,HE染色,与同组织常规石蜡切片依照石蜡切片质量标准评判对照.结果 五种固定液都可用于冰冻切片,制片技术操作未发现问题,但不同固定液的冰冻切片镜下组织细胞形态有一定差别.结论 乙醚-无水乙醇固定液最佳,含有冰醋酸成分的固定液建议谨慎使用.     

尿脱落细胞琼脂石蜡双包埋连续切片法

目的 研究设计一种尿脱落细胞连续切片方法.方法 收集尿液标本离心沉淀,先用琼脂将沉淀物包埋成团块后进行脱水、透明、浸蜡,再用石蜡包埋,然后进行石蜡连续切片(3～4 μm)、苏木精-伊红(HE)染色.结果 镜下细胞集中、结构清晰、厚薄均匀,细胞量明显比涂片法丰富,部分可见组织结构;HE染色核质对比好,色彩鲜艳明亮.结论 尿脱落细胞琼脂石蜡双包埋连续切片法克服了涂片法的不足,设备简单,操作简便,宜于普及推广.     

简易大鼠组织芯片在石蜡切片制备中的应用

目的:探索制作大鼠各主要脏器的组织芯片的简易方法。方法:对SD大鼠多脏器不同组织分类处理,分批脱水,整体包埋,整体切片制作HE染色。结果:镜下观察各种组织结构完整,细胞核呈蓝黑色,细胞质呈桃红色,染色鲜艳,对比鲜明。结论:该法制备组织芯片具有高通量、高效率、低误差、低消耗等优点。     

三种不同染色技术在体内组织工程中的组织学研究

目的分析对比三种染色方法在显示新生骨成骨情况的差异性,为体内组织工程研究提供更好的组织学鉴别方法。方法将大节段多孔生物陶瓷/聚乳酸复合支架植入犬4个不同的非骨部位,6个月后取材脱钙,石蜡包埋及切片分别做苏木精-伊红染色、Masson染色和亚甲基蓝-碱性品红染色,在光镜下观察其组织学形态并做比较。结果苏木精-伊红染色下可以清楚的观察到成骨细胞、类骨质等成分;Masson染色胶原纤维及成骨现象着色鲜艳,易于观察;亚甲基蓝-碱性品红染色成骨细胞更加清晰,与周围组织对比明显。结论苏木精-伊红染色更符合常规病理学观察习惯,Masson染色和亚甲基蓝-碱性品红染色在胶原纤维、成骨细胞等成分的观察上更具优势,因此三者结合更有利于镜下组织形态学观察。     

采用胸导管结扎术建立胰淋巴淤滞实验动物模型的观察

目的建立淋巴回流阻滞的实验动物模型,并通过形态学观察进行评价。方法 10月龄SD大鼠20只,随机分为两组,实验（手术）组15只和对照（假手术）组5只;术前30~60min用植物油2－5mL灌胃,经6%水合氯醛（5mL/kg）腹腔注射麻醉。在手术显微镜下,对照组只游离胸导管而不结扎。实验组在充分暴露胸导管的基础上,于腹部膈脚下将其结扎并进行观察。术后6个月在深度麻醉下切取大鼠胰组织标本,行石蜡包埋和组织切片,常规HE和刚果红染色后,进行光镜观察。结果肉眼可见,实验动物的胸导管被结扎后,可见乳糜池出现充盈,远端淋巴干和淋巴管明显扩张。HE染色组织切片光镜观察显示,实验组与对照组相比,胰腺小叶间隙显著增宽,呈现明显的淋巴管扩张、结缔组织增生和脂肪堆积。实验组动物的胰组织切片刚果红染色观察提示,除了胰腺小叶间隙明显增宽,胰岛还普遍表现为朱红色着色现象。结论胸导管结扎可导致胰淋巴回流障碍,引起胰淋巴淤滞、淋巴管扩张、结缔组织间隙增宽、脂肪堆积及淀粉样物质沉积等。采用腹部结扎大鼠胸导管的方法,可以建立胰淋巴淤滞的实验动物模型,为探讨淋巴淤滞对胰组织结构、内分泌及代谢的影响,奠定了基础。     

关节软骨钙化层界线结构特异性染色方法建立

目的 建立关节软骨钙化层界线结构特异性染色方法.方法 从组织库获取成人股骨髁标本10例,修剪、固定后常规方法制备石蜡切片,联合应用HE、天狼猩红、番红O/固绿和冯库萨等染色方法,对关节软骨钙化层界线结构进行观察.结果 HE染色仅能依据各层组织的结构、形态区分3层结构,两界线显示不清;天狼猩红染色和番红O/固绿染色可以清晰区分粘合线结构,但潮线界面显示不清;冯库萨染色可以清晰显示钙化软骨层两界线结构,但软骨下骨的形态结构显示不清.结论 通过对不同方法染色结果进行比较,番红O/固绿染色和冯库萨染色联合应用可以清晰显示钙化层界线结构.     

不同温度微波消融肝癌效果的酶组织化学检测

目的 比较HE染色和酶组织化学染色对判断微波消融灭活肝癌细胞效果的价值。方法 分别用60℃、3min和50℃、3min两种条件的微波消融，依次治疗A、B两组（每组6只）小鼠移植型肝癌，取微波消融前、后的肿瘤组织标本制成石蜡和冰冻切片，进行常规HE染色及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸黄递酶（NADH-diaphorase）化学染色，并在显微镜下观察两种染色情况。结果 从HE染色观察．两组小鼠肝癌组织在微波消融后的即刻．其细胞核形态和排列较消融前无明显改变；酶组织化学染色显示，A组肿瘤消融区内的NADH-diaphorase活性均消失，说明癌细胞灭活；B组肿瘤消融区内上述酶活性都呈散在阳性，提示部分癌细胞仍存活；两组肿瘤灭活效果明显不同（P〈0．01）。结论 HE染色不能评价微波消融对肝癌的即刻灭活效应，酶组织化学染色测定NADH-diaphorase活性能判定微波消融对肝癌的灭活效果。     

HE染色在临床病理诊断中的应用研究

目的：探讨临床病理诊断中HE染色的应用价值。方法选取750张石蜡切片进行研究,所有石蜡切片均源于该院病理科,时间在2013年2月-2016年2月,方便选择其中的200个蜡块制片给予重点观察,比较病理技术改进前后的HE染色结果。结果胃镜活检、脂肪组织、骨组织改进后HE染色结果分别为98.36%、97.67%、96.67%,明显高于改进前81.97%、79.07%、80.00%,病理技术改进前后的HE染色结果对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论在病理诊断工作中,合格的HE切片是诊断的基石,病理科需要采取措施,促使HE染色技术得以提升,从而提高切片质量,确保病理诊断的准确性。     

等离子喷涂硅酸二钙涂层与骨组织相容性的形态学研究

目的观察硅酸二钙喷涂的钛合金植入动物体骨组织后局部组织的反应,研究硅酸二钙涂层与骨的组织相容性。方法应用等离子喷涂技术于钛合金基体表面喷涂硅酸二钙涂层,将该种植体植入动物股骨髁内,分别于1月、2月和3月处死实验动物,截取含有种植体的股骨髁,作HE染色、甲苯胺蓝染色和四环素荧光标记,分别行光镜和荧光显微镜观察。结果植入硅酸二钙涂层的钛合金后,涂层周围骨组织的修复属于正常的骨修复过程,种植体-骨界面直接发生骨整合,无纤维包囊形成。结论等离子喷涂硅酸二钙涂层的钛合金与骨组织具有良好的组织相容性。     

成人和成体羊心脏组织动力学比较

目的:比较正常成人和成体羊心脏的组织动力学过程,探讨心脏组织演化的规律.方法:取12只山羊和6例人尸检心脏组织标本及羊心脏传导系统标本,常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜观察.结果:正常成人与成体羊心脏组织演化均包括心内膜-心肌演化体系、房室间区-心肌演化体系和肌层内心肌演化体系,但在羊心内膜-心肌演化体系中的优势演化途径是心内膜细胞-心肌生成单位-心肌细胞演化系,人的优势演化途径是心内膜细胞-非心肌生成单位-心肌细胞演化系;在肌层内心肌演化体系中有细胞重建的重要演化方式.结论:正常成人和成体羊心肌演化总体模式基本相似,但各自具有不同优势演化途径.     

下咽癌连续大切片的病理学观察

目的:探讨下咽癌不同类型与其浸润部位。方法:对7例下咽癌进行连续大切片,常规石蜡切片,HE、 Mallory三色染色法,光镜观察。结果:不同类型下咽癌浸润部位有一定差别。结论:对下咽癌浸润范围的 研究对于手术范围确定和保留喉功能非常重要。     

骨髓活检与涂片联合应用于MDS诊断探讨

对我院1994～1996年经临床、外周血象,骨髓涂片和骨髓活检确诊为骨髓增生异常综合征(MDS)的32例患者资料,进行了研究观察.外周血和骨髓涂片根据法美英协作组(FAB)分型标准,骨髓活检采用塑料包埋半薄切片.结果:组织病理形态分类对以涂片为基础的FAB分型是很好的补充.两者相结合是诊断MDS非常有效的方法.     

一种优化的大鼠视网膜组织石蜡切片制作方法

目的针对大鼠视网膜石蜡切片过程中易出现标本脱离及断裂分离的问题,寻找并优化大鼠视网膜石蜡切片的制作方法并评估效果．方法分别用10％多聚甲醛固定液;4％多聚甲醛固定液;单独固定及使用4％多聚甲醛、95％酒精、冰醋酸混合固定液（FAA固定液）;预处理后再使用10％多聚甲醛分别固定等4种方法对大鼠视网膜组织进行固定,HE染色后显微镜下进行观察．结果单独使用10％多聚甲醛以及4％多聚甲醛固定均出现视网膜脱离及各层结构断裂分离现象,但经FAA固定液预处理的视网膜切片HE染色后颜色鲜明均匀,虽部分区域视网膜偶有脱离,但不易脱片,各层结构完整,未出现断裂分离．结论经FAA固定液及多聚甲醛处理过的视网膜石蜡切片固定效果明显优于单独使用多聚甲醛,甲醛浓度对HE染色结果无明显影响．