Ⅰ型胶原/聚乙烯醇共聚纺丝的生物相容性研究

目的检测Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)/聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)共聚纺丝的生物相容性。方法使用小鼠成纤维细胞(L-929),分为100%浓度Col-Ⅰ/PVA共聚纺丝浸提液、50%浓度Col-Ⅰ/PVA共聚纺丝浸提液、空白对照、阳性对照4个组,MTT法测定各组细胞在1、2、3、4、5、6、7 d的光密度值,计算细胞相对增殖率(relative growth rate,RGR),判定细胞毒性的级别;直接接触共培养L-929细胞,倒置显微镜和扫描电镜观察细胞在Col-Ⅰ/PVA共聚纺丝上的生长情况;将Col-Ⅰ/PVA共聚纺丝和聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)纤维分别植入昆明小鼠皮下,于术后1、3、9周取标本大体观察包膜情况,HE、Mallory三色法进行组织学观察。结果 MTT法:2个实验组细胞在不同时间点的相对增殖率均为90%～123.61%,Col-Ⅰ/PVA共聚纺丝的细胞毒性评级为0～Ⅰ级;直接接触法:细胞与Col-Ⅰ/PVA共聚纺丝直接接触共培养,生长良好、形态正常,并附着生长。皮下植入的Col-Ⅰ/PVA共聚纺丝和PET纤维在1、3、9周均有包膜形成,且随时间的延长包膜透明度增高,包膜周围炎细胞主要为中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞,随时间的延长炎细胞数量明显减少。结论 Col-Ⅰ/PVA共聚纺丝的生物相容性良好,且细胞毒性和组织相容性均在临床应用的允许范围内。     

微创人工关节置换治疗髋关节强直

目的 探讨微创全人工关节置换治疗髋关节强直的疗效.方法 2006年6月至2009年7月,13例(21髋)髋关节强直患者在微创入路下行人工全髋关节置换,年龄20～66岁(平均46岁),病因为:强直性脊柱炎5例(10髋),类风湿性关节炎4例(6髋),股骨头无菌性坏死继发严重骨性关节炎2例(3髋),髋关节感染后遗强直畸形2例...     

脱细胞骨软骨支架复合自体骨髓间充质干细胞修复羊骨软骨缺损的研究

目的探讨脱细胞骨软骨支架接种自体骨髓间充质干细胞(BMSCs)修复羊骨软骨缺损效果,探索骨软骨缺损新的修复方式。方法制备直径为8mm骨软骨脱细胞支架,培养羊BMSCs,接种于骨软骨支架,制备羊负重区骨软骨缺损模型,分空白、空白支架及细胞支架复合物3组,每组4只羊,3个月后处死动物取标本行大体及组织学检测。结果修复羊负重区骨软骨缺损模型实验结果显示细胞支架复合修复组骨软骨有较好修复,空白支架组软骨下骨基本修复、软骨侧无明显修复,空白对照组未见明显修复,缺损边缘软骨退变。结论含骨软骨连接结构的脱细胞骨软骨支架接种种子细胞能较好的修复羊负重区骨软骨缺损。     

新型MRI磁标记技术对兔骨髓基质干细胞自体皮下移植进行活体示踪的研究

目的 利用超顺磁性氧化铁(SPIO)粒子标记骨髓基质干细胞(BMSCs),探讨用0.2T MRI活体示踪自体皮下移植磁化标记BMSCs的分布和迁移的可行性. 方法 从兔骨髓中分离培养BMSCs,实验组经体外采用SPIO和BrdU双重标记后,与壳聚糖复合植入兔自体大腿皮下.设立自体皮下移植未标记BMSCs组和皮下单纯注射SPIO组为对照组,每组6只.于术后1、5 d及2、4、8周连续行MRI梯度回波T2加权(GRE T2* WI)扫描序列对磁标记细胞成像示踪,并行组织学检查. 结果 磁标记细胞普鲁士蓝染色和电镜检查显示细胞胞浆内含致密铁颗粒.磁标记后自体皮下移植的兔BMSCs在GRE T2* WI序列成像时产生特征性的低信号改变至少维持8周,并观察到从移植部位发出低信号线进入宿主组织.组织学检查显示宿主组织中发现普鲁士蓝阳性细胞和BrdU阳性细胞.结论 体外SPIO能有效地标记BMSCs,利用0.2T MRI活体示踪体自体皮下移植的磁标记兔BMSCs分布和迁移是可行的.     

X线“阴性”髋痛患者髋股撞击征的临床影像学研究

目的 髋股撞击征(femoroacetabular impingement,FAI)作为髋关节骨性关节炎的可能病因近年愈受重视,但尚缺乏国人流行病学相关研究,本研究回顾性分析既往X线"阴性(未见异常)"髋痛患者中FAI的临床流行病学特点及其临床意义.方法 整理2007年12月至2008年8月期间西南医院影像中心保存的所有患者门诊骨盆前后位X线资料1 128例,按设定的纳入和排除标准筛选出研究对象.FAI诊断标准:(1)Cam型FAI:ɑ角大于55°;(2)Pincer型FAI:"8"字征阳性.分别统计FAI患者性别、年龄段及发生部位.测量髋痛一侧的髋关节前后位X线的ɑ角测量、半径高与半径比值(1/1Ra)和1/2半径高与半径比值(1/2Ra)并观察是否存在"8"字征,对以上统计及测量进行流行病学分析.结果 1 128例患者骨盆前后位X线符合纳入标准269例,均表现单髋痛,其中男121例,女148例.影像学诊断符合FAI 42例(15.6%),男、女性分别为27例(22.3%)和15例(10.1%),两者差异有统计学意义(P<0.05).Cam型与Pincer型和混合型比较差异有统计学意义(P<0.05).ɑ角测量:Cam型FAI组为 86.3°±16.7°;非FAI组为46.3°±4.1°,两组间差异有统计学意义(P<0.05).1/1Ra和1/2Ra: Cam型FAI组分别为1.02±0.04 和0.74±0.06;非FAI组分别为0.86±0.03 和0.69±0.05.1/2Ra在Cam型FAI组和非FAI组间差异有统计学意义(P<0.05),而 1/1Ra在两组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 FAI在X线"阴性"的髋痛患者的高发病率,提示其可能作为患者髋痛原因,具有不可忽略的临床意义.1/2半径高与半径比值可以作为Cam型FAI诊断的特异参数以进一步筛选出.     

外侧半月板损伤患者病程与关节软骨损伤的关系

目的 探讨外侧半月板损伤患者病程与膝关节软骨损伤的关系.方法 纳入2010-2011年于本中心关节镜下诊断为外侧半月板损伤的患者376例,根据病程长短,参照Keene时间划分法将患者分为3组:急性期组(≤2个月),亚急性期组(＞2 ～12个月),慢性期组(＞12个月).统计患者病程及软骨损伤程度,分析病程与软骨损伤之间的关系.结果 有软骨损伤者共129例(34.31％),其平均病程长于无软骨损伤患者(P＜0.05).Ⅰ～Ⅳ级软骨损伤患者分别为7例(5.43％)、42例(32.56％)、59例(45.74％)、21例(16.28％);急性期、亚急性期、慢性期患者软骨损伤发生率依次递增,分别为23.64％、30.59％、42.38％,慢性期患者软骨损伤发生率显著高于急性期与亚急性期(P＜0.05);其中急性期软骨损伤以Ⅰ～Ⅲ级为主,亚急性期、慢性期软骨损伤以Ⅱ～Ⅲ级为主并有部分Ⅳ级损伤.结论 膝关节软骨损伤发生率随外侧半月板损伤病程延长逐渐增加,应及时治疗.     

利用胶原和聚乙烯醇构建组织工程软骨支架

目的 依据仿生学原理,应用Ⅱ型胶原蛋白(type-Ⅱ collagen,CoⅡ)、硫酸软骨素(chondroitin sulfate,CS)、透明质酸(hyaluronan,HA)和聚乙烯酸(polyvinyl alcohol, PA)来制备组织工程支架材料.方法 依据人体正常关节软骨细胞外基质主要成分Ⅱ型胶原、硫酸软骨素和透明质酸;添加高分子聚合物PVA来提高支架强度,应用冷冻干燥等技术制备复合支架,接种细胞体外静态培养7 d,通过力学测试、扫描电镜和组织染色等方法 对支架进行检测.结果 支架孔隙均匀,孔隙率为93%～95%,CoⅡ-CS-HA-PVA复合支架最大张力约为1.19 N,单纯CoⅡ-CS-HA复合支架约为0.55 N,差异有统计学意义(t=4.985,P=0.002),细胞在支架上均匀分布,活力旺盛.结论 CoⅡ-CS-HA-PVA复合支架具备良好的生物相容性,可为种子细胞增殖分化提供一个适宜的环境,有很好的临床应用前景.     

骨髓间充质干细胞在壳聚糖凝胶中体外三维培养的实验研究

目的研究猪骨髓间充质干细胞在壳聚糖/β-甘油磷酸钠凝胶中体外三维培养的生长和增殖情况,探讨壳聚糖/β-甘油磷酸钠凝胶与骨髓间充质干细胞的细胞相容性。方法将间充质干细胞与壳聚糖/β-甘油磷酸钠凝胶混合,体外三维培养3周,采用倒置相差显微镜观察细胞在凝胶内粘附、生长和增殖等情况,复合物行组织形态学观察。结果间充质干细胞能良好地在壳聚糖/β-甘油磷酸钠凝胶内伸展、粘附、生长和增殖,细胞在新形成的组织内保持成活。结论壳聚糖/β-甘油磷酸钠凝胶与间充质干细胞具有良好的细胞相容性,可作为间充质干细胞的载体。     

Egr-1基因启动子介导肿瘤基因放疗的研究进展

Egr-1基因是一种即刻早期基因，其启动子可感受自由基、电离辐射等理化刺激，继而诱导Egr-1基因或其下游基因表达。对转染了Egr-1基因启动子启动的肿瘤杀伤基因的肿瘤细胞．实施局部照射可诱导基因表达，通过射线与基因的双重作用杀伤肿瘤。此方法既解决了外源基因靶向表达的难题，又降低了照射剂量．减少了正常组织的损伤。     

关节软骨钙化层研究进展

目的综述关节软骨钙化层的结构和功能及其在骨关节炎(osteoarthritis,OA)发病机制中的作用。方法广泛查阅近年来关于钙化层研究的文献,对钙化层的结构、成分、生物力学和生物化学功能进行总结分析。结果钙化层有特殊的结构和材料特性,并且具备半透膜的性质,钙化层软骨细胞保留部分生长板细胞特性,在维持正常软骨功能和OA发生、发展过程中起重要作用。因此重建关节软骨钙化层已成为近年来兴起的界面组织工程领域研究热点。结论对软骨钙化层的研究需要进一步深入,这在OA治疗和组织工程骨-软骨复合体制备方面都具有重要意义。