基于LC-MS的甘草炮制雷公藤降低肝毒性的代谢组学研究

目的 观察甘草炮制雷公藤Tripterygium wilfordii后对小鼠血清中代谢产物的影响，初步探讨其降低肝毒性的可能代谢通路。方法 将C57BL/6小鼠随机分为对照（Con）组、雷公藤（Raw）组、甘草炮制雷公藤（Pro）组，观察小鼠肝组织病理变化，检测小鼠肝功能生化指标、炎症因子水平；利用液质联用（LC-MS）技术结合代谢组学方法，对各组间的代谢差异进行表征。结果 与Raw组相比，Pro组小鼠肝组织损伤显著改善，肝功能生化指标、炎症因子水平显著降低，表明甘草炮制雷公藤后可以降低小鼠肝毒性；共筛选出脂肪酸、磷脂酸、甘油酯、磷脂酰胆碱、胆酸等12个潜在生物标志物，主要涉及脂肪酸生物合成、甘油磷脂代谢、花生四烯酸代谢等9个代谢通路。结论 甘草炮制雷公藤可有效降低小鼠的肝毒性，其机制可能与调节脂肪酸代谢等通路相关，为其临床合理应用提供参考依据。     

何首乌致肝损伤大鼠的动态血清代谢组学研究

该文采用液相色谱-质谱方法测定服用何首乌大鼠的血清代谢指纹谱,同时利用多元统计分析方法比较代谢谱差异并筛查显著相关的生物标志物,考察其动态变化趋势。探讨何首乌致大鼠肝脏损伤的代谢组学动态变化,寻找其显著相关的生物标志物,并考察标志物的动态变化趋势,以期为何首乌致肝损伤的内在机制与临床早期诊断提供依据。结果显示给药后不同时间点大鼠的血清代谢轮廓存在一定的差异,经比较分析,共筛选得到6个潜在生物标志物:oleamide,lyso PC(16∶0),leukotriene A4,trans-tetra-dec-2-enoic acid,dihydrocortisol和7a-hydroxydehydroepiandrosterone,这些标志物在何首乌致肝损伤动态过程中呈现一定的变化趋势。所筛选到的生物标志物在给药1周后含量即出现明显变化,相比于ALT,AST来说更加敏感。一定程度上可揭示出何首乌造成肝损伤的动态机制以及肝脏自我修复表现,对于监测服用何首乌患者肝功能、早期发现何首乌肝损伤具有潜在的应用价值和意义。     

雷公藤多苷肝毒性血清药物化学的初步研究

目的:通过对雷公藤多苷引起肝毒性入血成分的分析研究,探讨雷公藤潜在的肝毒性物质基础。方法:观察雷公藤多苷临床20倍等效剂量给药大鼠的肝组织病理形态学、血清AST和ALT来评价雷公藤多苷造成肝损伤的客观真实性;采用血清药物化学研究方法,在MSE质谱正负模式下,建立雷公藤多苷UPLC-Q/TOF-MS指纹图谱和其大鼠血清指纹图谱,比较确定雷公藤多苷的入血原型成分。结果:正常组与给药组大鼠肝组织病理切片指标、血清AST和ALT差异有统计学意义,血清指纹图谱的研究共鉴定Othosphenic Acid、Triptotriterpenic Acid、Demethylregelin、Wilforlide、Cangoronine 5个原型成分。结论:初步确定了雷公藤多苷引起肝毒性的入血成分,为其肝毒性物质基础的阐明奠定了基础。     

基于肝细胞毒价检测的雷公藤质量评价方法研究

目的建立基于肝细胞毒价检测的雷公藤药材质量评价方法。方法以正常人肝细胞(L02细胞系)为研究载体,以细胞抑制率为检测指标,优化建立肝细胞毒价检测方法 ,评价不同产地雷公藤及其地方习用品昆明山海棠药材的质量。结果以对乙酰氨基酚(毒价定义为400 U/g)为阳性对照品,50%乙醇超声提取雷公藤后真空干燥为干膏,用培养基配制生药量3 mg/m L的供试液,稀释比1∶0.65,量反应平行线法检测,18份雷公藤样品肝细胞毒价17.78~4 131.4 U/g(相差超过200倍),5份昆明山海棠样品肝细胞毒价209.42~7 422.2 U/g(相差超过30倍),不同产地雷公藤及昆明山海棠药材的肝细胞毒价差异显著;并且所检测样品鲜品较市售干品毒性大。结论初步建立了基于肝细胞毒价检测的雷公藤质量评价方法 ,直接关联其临床肝脏毒副反应,对从质量控制角度提高雷公藤临床用药安全具有参考价值,也为雷公藤肝毒性成分筛选提供准确定量的方法 。     

柴胡桂枝汤联合替加环素对大鼠白细胞减少性耐药鲍曼不动杆菌感染肺炎的干预作用

目的:探讨柴胡桂枝汤联合替加环素对大鼠白细胞减少性耐药鲍曼不动杆菌感染肺炎的干预作用及其可能机制。方法:实验分组:空白组、模型组、替加环素9mg/kg组、柴胡桂枝杨11. 2g/kg组、柴胡桂枝汤11. 2g/kg联合替加环素9mg/kg组。除空白组外其他各组建立耐药鲍曼不动杆菌肺炎大鼠模型,给药后观察大鼠体重变化、生存时间,采用HE染色观察肺组织病理改变;检测血清中炎症因子TNF-α、IL-2、IL-6含量变化;肺组织中NF-κB-p65和TLR-4蛋白表达情况等指标考察柴胡桂枝汤联合替加环素对鲍曼不动杆菌肺炎的干预作用。结果:柴胡桂枝汤11. 2g/kg联合替加环素9mg/kg组大鼠体重下降较模型组缓慢,存活时间长,死亡率低;大鼠肺组织病理切片显示模型组大鼠肺泡腔隙变小、消失,广泛肺泡上皮细胞变性、坏死,联合组大鼠肺组织损伤较轻,部分肺泡上皮细胞变性、坏死;肺组织细菌培养结果显示联合组细菌数量显著低于模型组;联合组大鼠血清中TNF-α的含量显著低于模型组;联合组血清中IL-2和IL-6的含量显著低于模型组;联合组大鼠肺组织中P65表达量显著低于模型组。结论:柴胡桂枝汤联合替加环素干预鲍曼不动杆菌肺炎有一定效果,该研究结果可为临床治疗鲍曼不动杆菌感染提供参考。     

不同款冬花药材中槲皮素和山柰素的定量分析及 HPLC 指纹图谱研究

目的 建立款冬花药材中槲皮素和山柰素的定量测定方法,测定不同来源的药材中槲皮素和山柰素的量,评价产地、生长方式及炮制对款冬花中槲皮素和山柰素量的影响;并建立款冬花中黄酮醇苷类成分指纹图谱,为款冬花质量控制的制定提供依据。方法 采用 HPLC 建立款冬花药材中槲皮素和山柰素的定量测定方法,色谱条件：Diamonsil C18 (200 mm×4.6 mm, 5 μm),流动相为乙腈-水 (77∶23),检测波长：365 nm。采用 HPLC 法建立款冬花药材中黄酮醇苷类成分指纹图谱,色谱条件：ODS-BP C18 (200 mm×4.6 mm, 5 μm);流动相：乙腈-0.1% H3PO4 水溶液梯度洗脱;检测波长为 365 nm。结果 不同产地,炮制品与生品之间,其槲皮素和山柰素的量差异较大,不同生长方式的药材之间无明显差异;不同产地及批次的款冬花药材的指纹图谱相似度较高。结论 本研究建立的槲皮素和山柰素的定量测定方法简便、准确、重现性好,可用于款冬花药材中黄酮醇苷类成分的质量控制;不同来源的款冬花药材中的槲皮素和山柰素的量有明显差异;所建立的黄酮醇苷类成分的指纹图谱方法操作性强、重现性好,可作为款冬花黄酮醇苷类成分指纹图谱研究的基础。     

湿热发黄证之乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭不同分期的生物标志物筛查

目的通过对湿热发黄证之乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭(HBV-related acute-on-chronic liver failure,HBVACLF)不同分期(早、中和晚期)的人血清样本进行代谢组学轮廓分析,分析其相关性与差异,并从中筛选具有差异性的小分子代谢物,即生物标志物。方法湿热发黄证HBV-ACLF样本27例,其中早期14例,中期6例,晚期7例,运用高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱仪技术检测3个不同分期血清样本中的小分子代谢产物,通过Data Analysis和Mzmine软件进行色谱峰识别后进行偏最小二乘法-判别分析,找出潜在生物标志物。结果共筛选出8个生物标志物;湿热发黄证之HBV-ACLF患者早、中、晚期之间具有明显的代谢组学差异,小分子代谢物也发生了显著性变化。结论影响湿热发黄证HBV-ACLF不同分期的生物标志物种类有视黄醇维生素类物质、前列腺素类物质、环氧脂肪酸、甾体类激素、甘油三酯类物质、甘油双酯类物质、磷脂酰乙醇胺类物质、甲状腺素葡萄糖苷酸。     

基于谱-效相关的雷公藤抗炎药效物质的研究

目的:基于谱-效相关分析方法,对雷公藤体外抗炎药效物质进行初步筛选。方法:运用LC-Q/TOFMS技术表征不同产地雷公藤的化学成分并初步指认其成分;以小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)为模型,检测细胞上清液中的白介素-6和白介素-10及诱导性一氧化氮合成酶,评价雷公藤的体外抗炎效应。采用相关回归分析方法分析效应与成分之间的关系。结果:指认出雷公藤的10个有效成分;确认BMDM模型可以有效评价雷公藤体外抗炎效应,并通过简单及多元相关回归分析可知雷公藤甲素、雷公藤晋碱应对雷公藤抗炎效应有较大相关。结论:雷公藤晋碱可能与雷公藤抗炎效应相关性较高。     

从2005—2023年国家自然科学基金资助项目浅谈中药多糖的研究现状

该文通过对2005—2023年国家自然科学基金中医药领域资助的中药多糖相关的项目进行回顾性分析,系统梳理和总结中药多糖的研究内容和热点。分析发现,中药多糖的主要研究内容集中于“活性及作用机制”“构效关系”和“吸收和代谢”等方面,主要研究热点包括“黄芪多糖”“肠道菌群”“当归多糖”和“枸杞多糖”等。最后提出了我国中药多糖研究领域主要存在的3个潜在问题：多糖化学结构的表征技术无法满足实际需求;多糖吸收与代谢途径的有待明确;中药多糖与小分子的整体协同作用有待阐明。旨在为今后我国中药多糖的研究者提供参考,并为相关项目的申请者提供借鉴。