不同TGF-β表达量的hAMSCs尾静脉移植对异种周围神经移植小鼠坐骨神经功能的影响

目的探讨不同转化生长因子-β(TGF-β)表达量的人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)尾静脉移植对异种周围神经移植小鼠坐骨神经功能的恢复作用。方法从健康剖宫产产妇志愿捐献的新鲜羊膜中分离出hAMSCs,并进行纯化及鉴定。构建上调和下调TGF-β表达的慢病毒质粒,并转染纯化的hAMSCs,构建出稳定的上调或下调TGF-β表达的hAMSCs。分离并剪去C57BL/6小鼠的部分坐骨神经,将SD大鼠的坐骨神经分离剪取并移植至小鼠的坐骨神经缺损处,构建出异种周围神经移植小鼠模型。将模型小鼠按随机数字表分为对照组、未修饰的hAMSCs治疗组、高表达TGF-β的hAMSCs治疗组、低表达TGF-β的hAMSCs治疗组,每组10只。各组于造模前1 d分别经尾静脉注射磷酸盐缓冲液或相应的hAMSCs重悬液进行移植治疗。于治疗后第14天时采用DigGait步态分析系统评估各组小鼠的坐骨神经功能恢复情况。结果治疗后第14天时,高表达TGF-β的hAMSCs治疗组小鼠的坐骨神经功能指数(-25.820±0.286)明显高于低表达TGF-β的hAMSCs治疗组(-33.413±0.920)和未修饰的hAMSCs治疗组(-30.755±0.421),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论高表达TGF-β的hAMSCs尾静脉移植能够更有效地改善异种周围神经移植小鼠的坐骨神经功能,其可能成为周围神经损伤治疗的新突破口。     

胃癌中VEGF、NRP1和干细胞标志物CD44的表达及相关性

目的探讨VEGF、NRP1和干细胞标志物CD44在胃癌组织中的表达及三者间的相关性。方法应用高通量组织芯片技术和免疫组化SP法检测72例胃癌和52例正常胃组织中VEGF、NRP1和CD44蛋白的表达,并分析三者之间的相关性以及与胃癌临床病理特征的关系。结果 (1)胃癌组织中VEGF、NRP1和CD44蛋白阳性率分别为76.4%、66.7%、83.3%,三者在胃癌组织中的表达显著高于正常胃组织,差异均具有统计学意义(P均<0.01)。(2)VEGF、NRP1蛋白表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移、临床分期有关(P均<0.05);CD44表达与Lauren分型、分化程度、淋巴结转移、临床分期有关(P均<0.05)。(3)胃癌组织中VEGF、NRP1和CD44蛋白的表达均呈正相关(rs=0.578,rs=0.278,rs=0.316,P均<0.05)。结论 VEGF、NRP1和干细胞标志物CD44在胃癌中均呈高表达,且与胃癌的恶性生物学行为密切相关。VEGF与NRP1之间可能存在协同作用,二者均与干细胞标志物CD44的表达密切相关,其具体机制有待进一步研究。     

加味地黄饮子治疗脑小血管病所致认知障碍患者的临床疗效及其对神经功能、炎性反应、氧化应激的影响

目的观察加味地黄饮子治疗脑小血管病所致认知障碍患者的临床疗效,并分析其对神经功能、炎性反应、氧化应激的影响。方法选取2017年6月—2018年5月海口市中医医院收治的脑小血管病所致认知障碍患者89例,采用随机数字表法分为对照组44例和观察组45例。对照组患者采用西医常规治疗,观察组患者在对照组治疗基础上给予加味地黄饮子治疗;两组患者均连续治疗2周。比较两组患者治疗前后中医症候积分、简易智能精神状态检查量表(MMSE)评分、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分、实验室检查指标[包括基质金属蛋白酶9(MMP-9)、β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)、脑源性神经生长因子(BDNF)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及超氧化物歧化酶(SOD)];并观察两组患者治疗期间不良反应发生情况。结果 (1)两组患者治疗前乏力、腰膝酸软、头晕耳鸣积分比较,差异无统计学意义(P0.05);观察组患者治疗后乏力、腰膝酸软、头晕耳鸣积分低于对照组(P0.05)。(2)两组患者治疗前MMSE评分、Mo CA评分比较,差异无统计学意义(P0.05);观察组患者治疗后MMSE评分、Mo CA评分高于对照组(P0.05)。(3)两组患者治疗前MMP-9、Aβ1-40、BDNF、hs-CRP及SOD水平比较,差异无统计学意义(P0.05);观察组患者治疗后MMP-9、Aβ1-40、hs-CRP水平低于对照组,BDNF、SOD水平高于对照组(P0.05)。(4)两组患者治疗期间不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论加味地黄饮子能有效减轻脑小血管病所致认知障碍患者的临床症状、炎性反应及氧化应激,改善患者认知功能、神经功能,且安全性较高。     

高效液相色谱法测定银芍颗粒中绿原酸的含量

目的建立银芍颗粒中绿原酸的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定该药中绿原酸的含量，色谱条件：Agilent ZOBAXSB—C18（250mm&#215;3．0mm，5μm）色谱柱，乙腈～0．4％磷酸水溶液（9：91）为流动相；流速：1．0ml&#183;min^-1；检测波长327nm。结果绿原酸浓度范围在0．0025—0．04μg之间峰面积与浓度线性关系良好，r=0．9999，平均回收率99．6％，RSD=1．07％。结论该方法准确、可靠、专属性强，可用于银芍颗粒的质量控制。     

基于点击化学反应的聚乙二醇壳聚糖接枝共聚物的合成及其表征

聚乙二醇壳聚糖接枝共聚物在合成上存在过量的聚乙二醇难以后处理的困难,利用点击化学反应能够简单有效的解决这个问题。以天然的壳聚糖为原料,首次通过溴丙炔的卤代反应在其2-NH₂上引入炔基得到炔基化壳聚糖,再通过点击化学反应（一价铜催化的叠氮基与端基炔的1,3-环极化反应）将叠氮化单甲氧基聚乙二醇与炔基化壳聚糖合成为一系列聚乙二醇壳聚糖接枝共聚物。通过¹H NMR、FT-IR对其结构进行表征,通过差示扫描量热法（DSC）及热重分析（TG）对其物理性质进行表征。共聚物结构经¹H NMR、FT-IR确证正确。通过¹H NMR测定共聚物中聚乙二醇取代度约11%,DSC证明共聚物的结晶度降低,TG证明共聚物的热稳定性提高,该类共聚物有望作为药物载体材料。     

神农香菊化学成分研究

目的:研究神农香菊的化学成分.方法:运用柱层析、半制备液相色谱进行分离纯化,根据理化性质和光谱数据鉴定化合物结构.结果:共分离鉴定了7个化合物,分别为刺槐素(Ⅰ)、芹菜素(Ⅱ)、刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅲ)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅳ)、木犀草素(Ⅴ)、β-谷甾醇(Ⅵ)和β-胡萝卜苷(Ⅶ).结论:其中Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ为首次从该植物中分离得到.     

绞股蓝50%总皂苷提取物指纹图谱定性和人参皂苷Rb1定量分析的研究

目的：建立绞股蓝50%总皂苷提取物HPLC-ELSD法的指纹图谱定性和定量分析方法。方法：使用Agilent ZOBAXSB-C18（250 mm×3.0 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙酸-异丙醇-水（2∶8∶90）和乙腈进行梯度洗脱,ELSD检测器;流速：0.5 mL/min,柱温：20°C,理论塔板数按人参皂苷Rb1峰计算应不低于5 000。对绞股蓝50%总皂苷提取物进行指纹图谱定性分析,对其中的有效成分人参皂苷Rb1进行含量测定。结果：在色谱条件下,10份不同产地的绞股蓝50%总皂苷提取物的HPLC-ELSD指纹图谱中确定12个共有峰作为定性的指标峰;人参皂苷Rb1在1.03μg~5.32μg范围内呈线性关系（r=0.999 8）,平均加样回收率为98.0%,RSD为1.78%。结论：绞股蓝50%总皂苷提取物皂苷部位HPLC-ELSD指纹图谱定性和有效成分定量分析方法具有较强的针对性和准确性,可用于绞股蓝提取物及其制剂的质量控制。