不同TGF-β表达量的hAMSCs尾静脉移植对异种周围神经移植小鼠坐骨神经功能的影响

目的探讨不同转化生长因子-β(TGF-β)表达量的人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)尾静脉移植对异种周围神经移植小鼠坐骨神经功能的恢复作用。方法从健康剖宫产产妇志愿捐献的新鲜羊膜中分离出hAMSCs,并进行纯化及鉴定。构建上调和下调TGF-β表达的慢病毒质粒,并转染纯化的hAMSCs,构建出稳定的上调或下调TGF-β表达的hAMSCs。分离并剪去C57BL/6小鼠的部分坐骨神经,将SD大鼠的坐骨神经分离剪取并移植至小鼠的坐骨神经缺损处,构建出异种周围神经移植小鼠模型。将模型小鼠按随机数字表分为对照组、未修饰的hAMSCs治疗组、高表达TGF-β的hAMSCs治疗组、低表达TGF-β的hAMSCs治疗组,每组10只。各组于造模前1 d分别经尾静脉注射磷酸盐缓冲液或相应的hAMSCs重悬液进行移植治疗。于治疗后第14天时采用DigGait步态分析系统评估各组小鼠的坐骨神经功能恢复情况。结果治疗后第14天时,高表达TGF-β的hAMSCs治疗组小鼠的坐骨神经功能指数(-25.820±0.286)明显高于低表达TGF-β的hAMSCs治疗组(-33.413±0.920)和未修饰的hAMSCs治疗组(-30.755±0.421),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论高表达TGF-β的hAMSCs尾静脉移植能够更有效地改善异种周围神经移植小鼠的坐骨神经功能,其可能成为周围神经损伤治疗的新突破口。     

抗生素诱导的小鼠肠动力减弱与肠胶质细胞过度活化相关

目的探讨抗生素处理小鼠肠动力与肠胶质细胞活化的关系。方法通过联合抗生素处理获得低肠道菌群的小鼠,通过胭脂红溶液灌胃后记录色素排出时间以及相同时间内排出粪便颗粒,比较抗生素组与对照组小鼠的肠动力;采用免疫荧光技术比较两组小鼠肌间神经丛内胶质细胞与神经元的形态与分布,采用实时荧光定量PCR检测两组小鼠结肠与回肠组织内肠胶质细胞活化与功能相关的基因胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、 S100B、神经生长因子(NGF)的mRNA水平,采用流式细胞术检测小鼠肠黏膜固有层淋巴细胞内调节性T细胞(Treg)和分泌白细胞介素17(IL-17)的Th17细胞的比例。结果抗生素处理后的小鼠肠道菌群数量显著降低,盲肠体积膨大,结肠萎缩变短,肠动力减弱,结肠内胶质细胞GFAP、 GDNF、 S100B、 NGF的mRNA水平增加,而结肠黏膜固有层内Treg和Th17细胞比例均降低。结论抗生素处理后肠动力的降低可能与肠胶质细胞的过度活化相关,且抗生素处理后肠胶质细胞的活化与肠道炎症无关。