双重实时荧光PCR快速鉴别人参和西洋参＊

目的 建立一种能够快速鉴定人参和西洋参的双重实时荧光PCR方法。方法 通过对人参属及其近似种基因序列的分析比对，设计特异性的引物探针，建立双重实时荧光PCR检测方法。PCR反应体系为Premix Ex Taq （Probe qPCR） 10 μL，人参上下游引物各0.5 μL，西洋参上下游引物各0.3 μL，人参与西洋参特异性探针各0.4 μL，DNA模板2 μL，灭菌去离子水补至20 μL。反应条件为95℃预变性30 s；然后以95℃变性5 s，60℃退火延伸30 s进行40个循环。应用该方法测试了27份DNA样品，包括7份人参、6份西洋参、4份人参与西洋参混合样、10份其他人参属样品及其他常见中药材样品的DNA，以确定该方法的特异性。将人参与西洋参样品DNA混合后10倍稀释成不同浓度后进行检测，用以确定该方法的灵敏度。结果 人参及西洋参样品均在特定的荧光通道下出现典型的阳性扩增曲线，人参与西洋参混合样品均同时出现两条阳性扩增曲线，其它对照样品及空白对照均没有出现阳性扩增曲线。灵敏度检测结果显示该方法检测人参及西洋参的最低检测限均为2 pg DNA/反应。结论 本实验建立的双重实时荧光PCR方法能够同时快速、准确、灵敏地鉴别出人参和西洋参。     

复方五凤草液对大鼠慢性溃疡的药效学筛选研究

目的:观察复方五凤草液对大鼠几种常见慢性溃疡的治疗改善作用,进行药效学初筛研究。方法:构建下肢静脉性溃疡、烧伤性溃疡、压力性溃疡、糖尿病溃疡4种大鼠模型,每种模型24只,分为模型组、复方五凤草液组、阳性药组。分别于造模后第3d、第7d、第10d、第14d对大鼠溃疡创面进行相机拍照,采用Adobe Photoshop CS5软件图像处理创面,得创面面积,计算创面愈合率。结果:下肢静脉性溃疡实验结果表明,复方五凤草液给药前期显著促进了大鼠创面的愈合(P0.05, P0.05),效果优于阳性药复方黄柏液;烧伤实验结果表明,复方五凤草液给药后期能显著促进大鼠创面的愈合(P0.05,P0.01),效果优于阳性药康复新;压力性溃疡实验结果表明,复方五凤草液对大鼠创面的愈合没有显著影响,而阳性药康复新在给药后期显著促进了大鼠创面的愈合(P0.01,P0.05);糖尿病溃疡实验结果表明,复方五凤草液对大鼠创面的愈合没有显著影响,而阳性药复方黄柏液给药后期能显著促进大鼠创面的愈合(P0.05)。结论:复方五凤草液能有效促进大鼠下肢静脉性溃疡、烧伤创面的愈合,可以考虑进行进一步的药效与机制研究。     

张光华关于慢性肝病血瘀证的辨识和用药特点

张光华教授为四川省第二批老中医药专家学术经验继承工作指导老师,从事医教研五十余载,在治疗慢性肝病方面积累了丰富而独特的经验,学贯中西,成就卓著。现总结他关于慢性肝病血瘀证的体征辨识和用药特点。     

北京市海淀区居民超重/肥胖流行现状及其影响因素

目的了解北京市海淀区18~79岁常住居民超重/肥胖流行现状及其危险因素,为预防和控制超重/肥胖提供科学依据。方法采用多阶段整群随机抽样的方法,抽取海淀区20个街道18~79岁常住居民6 598人,对超重/肥胖及危险因素等情况进行流行病学调查。结果调查对象超重和肥胖率分别为38.53%和18.84%,标化率分别为34.82%和16.59%。多因素logistic回归分析显示:高年龄组、在婚、饮酒、口味偏咸是超重和肥胖的危险因素,女性、文化程度高中以上是超重和肥胖的保护因素。结论北京海淀区居民超重、肥胖患病形式严峻,需采取综合措施,有针对性的开展干预工作。     

2013年四川省放射工作人员个人剂量水平分析

目的了解四川省2013年放射工作人员个人剂量水平,评价放射防护状况。方法采用热释光剂量测量方法对2013年全省从事放射工作人员进行监测,并对其结果分析评价。结果全省共监测10 775人,人均年有效剂量为1.04 m Sv·a-1,集体有效剂量为11.24人·Sv,年人均有效剂量小于1 m Sv·a-1的人员占91.6%,小于2 m Sv·a-1的人员占97.4%,有2.58%的人员超过2 m Sv·a-1,有0.38%的人员超过5 m Sv·a-1,有18人在10~13 m Sv·a-1。工业应用类人员的年人均有效剂量高于医学应用类差异有统计学意义(t96.27,P0.01)。结论四川省放射工作人员个人剂量水平远低于国家规定的剂量限值20 m Sv·a-1,工作条件和环境是安全的,但放射防护工作仍有待进一步提高。     

半夏泻心汤含药血清对胃癌来源外泌体诱发腹膜间皮细胞上皮间质转化的影响

目的 探讨半夏泻心汤对胃癌来源外泌体（Exo）诱发人腹膜间皮细胞（HMrSV5）上皮间质转化（EMT）的影响。方法 制备半夏泻心汤含药血清，提取人胃癌NCI-N87细胞外泌体（NCI-N87-Exo），采用透射电镜及蛋白免疫印迹法（Western blot）进行鉴定，并用细胞膜红色荧光探针（Dil）标记。实验分为空白组、模型组、半夏泻心汤低、中、高剂量组（13.5，27，54 g·kg^-1）。空白组将HMrSV5细胞单独培养；模型组在HMrSV5中加入的NCI-N87-Exo （100 mg·L^-1）；半夏泻心汤低、中、高剂量组在模型组的基础上分别加入10%的半夏泻心汤低、中、高剂量含药血清。激光共聚焦显微镜观察24，48，72 h时HMrSV5细胞对NCI-N87-Exo的摄取情况，72 h后观察HMrSV5细胞形态学的变化，Western blot检测HMrSV5细胞中E-钙黏附蛋白（E-cadherin），细胞角蛋白19（CK19），α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和弹性蛋白（Elastin）及转化生长因子-β₁（TGF-β₁），Smad2/3，磷酸化（p）-Smad2/3蛋白表达。结果 透射电镜观察到NCI-N87-Exo呈椭圆或碟状的囊泡结构，粒径介于40~80 nm，高表达Exo标志蛋白CD9，CD63，不表达钙网蛋白（Calreticulin），证实为NCI-N87-Exo。共培养24，48，72 h后，荧显微镜下均可观察到NCI-N87-Exo被HMrSV5细胞摄取，与时间呈正相关。与空白组比较，半夏泻心汤可显著抑制HMrSV5细胞对NCI-N87-Exo的摄取，以半夏泻心汤中、高剂量组含药血清最为明显（P<0.05，P<0.01）。半夏泻心汤含药血清干预后HMrSV5细胞排列较为紧密，细胞间隙明显缩小，以半夏泻心汤含药血清大剂量组最为明显。Western blot显示，与模型组比较，半夏泻心汤中、高剂量组含药血清干预后HMrSV5细胞E-cadherin，CK19蛋白表达显著升高（P<0.01），α-SMA，Elastin蛋白表达显著降低（P<0.01），半夏泻心汤低、中、高剂量组TGF-β₁，p-Smad2/3蛋白表达明显降低（P<0.05，P<0.01），Smad2/3无明显变化。结论 NCI-N87-Exo能够被HMrSV5细胞摄取并诱发HMrSV5细胞EMT，半夏泻心汤能够阻抑HMrSV5细胞对NCI-N87-Exo的摄取，抑制NCI-N87-Exo诱发的HMrSV5细胞EMT，其作用机制与调控TGF-β₁/Smads信号通路有关。     

孕期营养指导在围产期孕妇保健中的应用

目的:探究孕期营养指导在围产期孕妇保健中的临床应用效果。方法:抽选我院2017年1月~2017年6月接收的80例围产期孕妇作为本次临床研究资料,采用随机分组方式将孕妇分成两组,其中40例未进行孕期营养指导的孕妇命名为对照组,40例进行孕期营养指导的孕妇命名为观察组,观察两组围产期孕妇保健效果。结果:进行孕期营养指导的观察组孕妇与未进行孕期营养指导的对照组孕妇相比,钙、铁、锌、镁、维生素A、蛋白质营养元素摄入明显增多,脂肪摄入量相对减少。结论:对围产期孕妇进行孕期营养指导,可以帮助孕妇更好的控制营养元素摄入量,为母婴健康全提供保障。     

八珍汤加减治疗透析低血压的临床观察

目的:观察八珍汤加减对治疗维持性血液透析患者透析中低血压的疗效。方法:入选规律血液透析低血压的患者。给予煎服八珍汤,50ml/次,每日1次,连续1个月。观察治疗前后连续1个月透析中低血压发生率。结果:试验组患者透析中低血压的发生率较治疗前明显下降(P<0.05)。结论:八珍汤能减少患者低血压的发生率。     

重症肺炎支原体肺炎CD3+HLA-DR表达与VitA水平相关性分析

  目的   探讨重症肺炎支原体肺炎外周血淋巴细胞CD3+HLA-DR表达、血清Vitamin A（VitA）水平及其相关性。  方法   回顾性分析2017年1月至2020年12月入住昆明医科大学第二附属医院儿科病房,符合重症肺炎支原体肺炎诊断标准的24例患儿,随机选取同期住院的普通肺炎支原体肺炎47例为普通组;单纯上呼吸道感染、身材矮小症住院的23例为对照组;入院次日晨采集空腹静脉血,其中非抗凝血1 mL和抗凝血3 mL送检;肺炎支原体抗体滴度测定选用微量血被动凝集法,CD19,CD4,CD8,CD3+HLA-DR选用美国贝曼流式细胞仪及试剂测定,血清VitA检测:采用高效液相色谱法;统计学分析:采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验;相关性分析采用 Pearson 分析;危险因素采用Logistic分析。  结果  （1） 重症肺炎支原体肺炎者 24 例,男14 例、女 10 例,年龄（4.97±1.79）岁;普通肺炎支原体肺炎者 47 例,男30 例、女 17 例,平均年龄（4.87±1.79）岁;同期单纯上呼吸道感染、身材矮小症住院的23例患儿,男12例、女11 例,平均年龄（4.77±2.11）岁,3组患儿年龄、性别比较,差异无统计学意义（P > 0.05） ;（2）3组患儿CD19,CD4,CD8,CD3+HLA-DR,VitA值比较:重症组淋巴细胞CD4,CD3+HLA-DR表达及血清VitA水平明显降低[（34.2±4.54）,（11.83±2.57）,（0.23±0.10）],CD19（18.66±2.56）明显增高,与普通组[（38.1±4.04）,（17.11±2.71）,（0.33±0.14）]和对照组[（39.35±3.86）,18.78±1.86）,0.40±0.14）]比较,差异有统计学意义（P < 0.05）;VitA与CD4,CD3+HLA-DR正相关（r = 0.371,0.688,P < 0.05）;Logistic回归分析结果显示,血清VitA水平、CD3+HLA-DR表达的下降均是SMMP的独立危险因素（OR = 4.42、2.38,P < 0.05）。  结论  淋巴细胞活化参与了MPP的发生发展,过强的免疫反应不仅会诱发过分的免疫反应,而且还会导致自身免疫损伤（免疫麻痹）,重症发生的基础,推测VitA也参与调控淋巴细胞的活化。