半夏泻心汤含药肠吸收液对胃癌微环境中PMN-MDSCs凋亡的影响

目的 观察半夏泻心汤含药肠吸收液对胃癌微环境中多形核髓系来源抑制细胞（PMN-MDSCs）凋亡的影响。方法 制备半夏泻心汤含药肠吸收液,以Transwell小室将胃癌细胞与PMN-MDSCs非接触共培养建立胃癌微环境模型,采用细胞增殖与活性检测-8（CCK-8）法筛选0.63 g·mL^-1复溶液制备而成的0~100%半夏泻心汤含药肠吸收液的最佳干预浓度及时间,分为空白组、模型组、奥沙利铂组（10 mg·L^-1）及半夏泻心汤组（26%、18%、10%含药肠吸收液）,采用CCK-8法检测PMN-MDSCs的增殖,流式细胞术检测PMN-MDSCs的凋亡,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测PMN-MDSCs胃癌微环境凋亡相关蛋白,B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、胱天蛋白酶-3（Caspase-3）蛋白表达水平。结果 作用24、48 h,与空白组比较,5%、50%、75%、100%半夏泻心汤含药肠吸收液对PMN-MDSCs的抑制率均有升高（（P<0.05,P<0.01）,作用72 h,除50%半夏泻心汤含药肠吸收液对PMN-MDSCs的抑制率低于48 h（P<0.01）,其余浓度各自抑制率差异无统计学意义,且48 h半数抑制浓度（IC₅₀）为18.40%,说明18%半夏泻心汤含药肠吸收液在48 h为最佳干预浓度及时间。与空白组比较,模型组PMN-MDSCs的存活率明显升高（P<0.05）,凋亡率明显下降（P<0.05）;与模型组比较,半夏泻心汤组PMN-MDSCs存活率均明显降低（P<0.05）,凋亡率明显升高（P<0.05）,以半夏泻心汤组（26%含药肠吸收液）最为明显（P<0.05）。与空白组比较,模型组PMN-MDSCs促凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达明显降低（P<0.05）,抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显上升（P<0.05）。与模型组比较,奥沙利铂组、半夏泻心汤组PMN-MDSCs Caspase-3蛋白表达升高（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达明显降低（P<0.05）,奥沙利铂组、半夏泻心汤组（10%含药肠吸收液）Bax蛋白表达升高（P<0.05）。结论 半夏泻心汤含药肠吸收液能通过调控胃癌微环境PMN-MDSCs凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3及Bcl-2的表达,诱导PMN-MDSCs凋亡。     

宣痹汤临床应用

宣痹汤是治疗痹证的常用方剂之一。本方具有除湿清热之功效,马鸿斌主任医师用于治疗因湿热引起的持续高热,疗效显著。     

半夏泻心汤含药血清对胃癌来源外泌体诱发腹膜间皮细胞上皮间质转化的影响

目的 探讨半夏泻心汤对胃癌来源外泌体（Exo）诱发人腹膜间皮细胞（HMrSV5）上皮间质转化（EMT）的影响。方法 制备半夏泻心汤含药血清，提取人胃癌NCI-N87细胞外泌体（NCI-N87-Exo），采用透射电镜及蛋白免疫印迹法（Western blot）进行鉴定，并用细胞膜红色荧光探针（Dil）标记。实验分为空白组、模型组、半夏泻心汤低、中、高剂量组（13.5，27，54 g·kg^-1）。空白组将HMrSV5细胞单独培养；模型组在HMrSV5中加入的NCI-N87-Exo （100 mg·L^-1）；半夏泻心汤低、中、高剂量组在模型组的基础上分别加入10%的半夏泻心汤低、中、高剂量含药血清。激光共聚焦显微镜观察24，48，72 h时HMrSV5细胞对NCI-N87-Exo的摄取情况，72 h后观察HMrSV5细胞形态学的变化，Western blot检测HMrSV5细胞中E-钙黏附蛋白（E-cadherin），细胞角蛋白19（CK19），α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和弹性蛋白（Elastin）及转化生长因子-β₁（TGF-β₁），Smad2/3，磷酸化（p）-Smad2/3蛋白表达。结果 透射电镜观察到NCI-N87-Exo呈椭圆或碟状的囊泡结构，粒径介于40~80 nm，高表达Exo标志蛋白CD9，CD63，不表达钙网蛋白（Calreticulin），证实为NCI-N87-Exo。共培养24，48，72 h后，荧显微镜下均可观察到NCI-N87-Exo被HMrSV5细胞摄取，与时间呈正相关。与空白组比较，半夏泻心汤可显著抑制HMrSV5细胞对NCI-N87-Exo的摄取，以半夏泻心汤中、高剂量组含药血清最为明显（P<0.05，P<0.01）。半夏泻心汤含药血清干预后HMrSV5细胞排列较为紧密，细胞间隙明显缩小，以半夏泻心汤含药血清大剂量组最为明显。Western blot显示，与模型组比较，半夏泻心汤中、高剂量组含药血清干预后HMrSV5细胞E-cadherin，CK19蛋白表达显著升高（P<0.01），α-SMA，Elastin蛋白表达显著降低（P<0.01），半夏泻心汤低、中、高剂量组TGF-β₁，p-Smad2/3蛋白表达明显降低（P<0.05，P<0.01），Smad2/3无明显变化。结论 NCI-N87-Exo能够被HMrSV5细胞摄取并诱发HMrSV5细胞EMT，半夏泻心汤能够阻抑HMrSV5细胞对NCI-N87-Exo的摄取，抑制NCI-N87-Exo诱发的HMrSV5细胞EMT，其作用机制与调控TGF-β₁/Smads信号通路有关。     

肌电图评价肌萎缩侧索硬化389例嗅鞘细胞脑内移植的效果

背景：肌萎缩侧索硬化尚缺乏有效治疗手段，细胞学治疗是研究的重要方向之一。目前研究表明，嗅鞘细胞、骨髓基质细胞、脐血间质干细胞等具有一定临床疗效。 目的：观察嗅鞘细胞脑内移植治疗肌萎缩侧索硬化的肌电图改变，分析肌电图检查对肌萎缩侧索硬化疗效的评定价值。 设计、时间及地点：病例自身对照观察，于2003-09/2007-12在北京市虹天济神经科学研究院及北京康复中心神经外科完成。 对象：选择389例接受胚胎嗅鞘细胞脑内移植治疗的肌萎缩侧索硬化患者。 方法：局麻下作双额发际内2.0~3.0 cm，旁开中线2.5~2.9 cm，长约0.5 cm小切口2个，两侧共缓慢注射细胞数2×104/μL嗅鞘细胞悬液100 μL。移植前及移植后三四周分别采用丹麦Keypoint-4型肌电/诱发电位仪检查患者肌电图。 主要观察指标：每例患者检查8~12块肌肉，包括四肢近、远端肌肉以及舌肌、胸锁乳突肌。移植前后肌电图主要对比自发电位、运动单位电位以及大力收缩时募集波型的改变。 结果：①389例患者中332例（85.3%）肌电图检查显示不同程度改善，主要有3类：a.自发电位减少：122例出现不同程度此项改变。b.300例出现数量不等的肌肉募集波型由低级向高级转变，电位密度明显增加，如单纯相转变为混合相；混合相转变为干扰相。c.移植前未能测到运动单位电位而术后新出现者51例。②51例（13.2%）肌电图无变化，移植前后肌电图大致相同。③6例（1.5%）比移植前差，主要变化为自发电位增多或肌肉大力收缩时募集波型减弱。 结论：嗅鞘细胞移植近期能改善肌萎缩侧索硬化患者的神经功能，延缓病情的进行性恶化。肌电图检测用于胚胎嗅鞘细胞移植治疗肌萎缩侧索硬化疗效评定具有较好的应用价值，通过移植前后肌电图改变可以较客观反映治疗的有效性。     

名中医治疗狼疮性肾炎的文献理论研究

目的了解名老中医对狼疮性肾炎的治疗现状,吸取经验,提高临床治疗效果。方法检索了2002～2012年公开发表的名中医治疗狼疮性肾炎的经验、体会等文献,最终纳入分析的文献29篇,涉及26位中医及中西医结合专家,对文中涉及的邪实因素、中医辨证治疗中各证型及用方在文献中出现的次数进行统计分析。结果①专家认为狼疮性肾炎病变过程中涉及邪实因素以热毒、瘀血、湿热出现频率最高,三者分别占34.92%、30.16%及14.29%。②辨证分型中以热毒炽盛、气阴两虚、肝肾阴虚、脾肾阳虚、阴虚内热占有主导地位。③方剂使用频率排在前八位的分别为知柏地黄汤、犀角地黄汤、六味地黄丸、二至丸、清瘟败毒饮、真武汤、金匮肾气丸、参芪地黄汤。     

刘冬梅从肝脾论治反流性食管炎经验

介绍刘冬梅教授从肝脾论治反流性食管炎的经验。刘教授认为本病病机主要为肝气犯胃,胃失和降;以疏肝和胃降逆为治疗大法,根据疾病的不同症状,选用柴胡疏肝散、化肝煎合左金丸、益气运脾汤合通幽汤加减治疗,效果显著。     

现代神经修复学治疗方案临床初探

目的探讨现代神经修复学干预策略,提高I临床疗效。方法综合应用细胞移才直（嗅鞘细胞、间充质细胞、神经干／祖细胞、雪旺细胞）、药物（神经生长因子、脑蛋白水解物、单唾液酸四已糖神经节苷脂、小牛血去蛋白提取物、环孢素等）、神经康复训练等方法,多疗程多途径治疗中枢神经系统难治性疾病。结果报告4例陈旧性完全性脊髓损伤患者,接受综合治疗后,部分神经功能获得较满意的恢复。结论以细胞移植为核心的综合神经修复治疗方案,能够微创安全有效地改善患者的神经功能,提高生存质量。     

脑内神经网络修复关键点的临床验证

背景：细胞移植的安全有效靶点选择,是临床研究的重要方向。对脑内是否存在能发挥重要治疗作用的点或区域,以最大限度对神经网络发挥良性影响进而修复,是研究先行者必须优先考虑的课题之一。 目的：通过临床资料分析,证实细胞移植脑内神经网络修复关键点(KPNNR)理论的客观性、真实性和实用性。 方法：2003-05/2009-01共有631例各类中枢神经系统疾病患者接受神经网络修复关键点嗅鞘细胞移植,其中609例资料齐全,男392例,女217例;年龄1.2~84(42.87±19.64)岁,病程0.4~35(5.11±5.46)年。疾病分布：肌萎缩侧索硬化432例次、脑性瘫痪110例次、多发性硬化25例次、共济失调12例次、多系统萎缩7例次、遗传性痉挛性截瘫6例次、持续性植物状态6例次、痴呆2例次、脑缺氧后遗症2例次、帕金森叠加综合征2例次、非特异性脑炎后遗症2例次、肾上腺脑白质营养不良1例、核黄疸后遗症1例、皮质基底核变性1例。患者来自75个国家或地区。 结果与结论：细胞移植后随访2~8周,平均4周,609例次中526例次神经功能获不同程度改善,近期总改善率为86.37%,其中肌萎缩侧索硬化改善率为87.96%。脑性瘫痪改善率为82.7%,特别是4例伴有癫痫者,术后发作明显减少。共济失调改善率为83.3%。遗传性痉挛性截瘫改善率为83.3%。围手术期出现不良事件共33例次,发生率为5.4%,主要为术后头痛、发热等,多经对症治疗后痊愈。结果提示,大脑内神经网络修复关键点(KPNNR)客观存在,在该点进行嗅鞘细胞移植安全可行,能改善多种中枢神经系统疾病患者的神经功能和(或)延缓病情的进行性恶化。     

胃息肉“病”“证”“体”相关性的研究进展

胃息肉为临床常见病,是公认的癌前疾病,检出率增高、易反复,"病"指胃息肉的病理类型,其病理组织学分为!生性息肉、炎性息肉、胃底腺息肉及腺瘤性息肉,其病理类型与癌变率直接相关;"体"指胃息肉的中医体质类型,分为正常的平和质以及8种偏颇体质:气虚质、阳虚质、阴虚质、痰湿质、湿热质、血瘀质、气郁质、特禀质;"证"指胃息肉的中医证型,主要分为肝胃不和证、脾胃湿热证、痰湿中阻证、胃络瘀血证、脾胃虚弱证。检索近些年的相关临床研究文献,基于中医体质学说提出的"辨体、辨病、辨证"的诊疗模式,通过探讨其病理类型与中医证型、体质的相关性,为现代中医药防治本病提供理论依据,以便更好地指导临床。