雷公藤柱层析中段和末段组分的急性毒性实验

目的:比较雷公藤柱层析中段和末段组分对小鼠急性毒性和大鼠急性肝损伤的影响,评价中段和末段组分的毒性强弱和毒性物质基础,初步探讨中段和末段组分中成分与毒性的关系。方法:HPLC法测定中段和末段组分中6个有效成分(毒性成分)的含量。采用经典的急性毒性实验方法,Bliss法计算半数致死量(LD_(50))。SD大鼠单次灌胃中段和末段组分,观察急性肝损伤情况。给药后48 h眼眶采血,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活力,肝脏HE染色,光镜下观察肝组织形态学改变,原位末端转移酶标记技术(TUNEL染色法)检测中段和末段组分对肝细胞凋亡的影响。结果:中段和末段组分中所测成分的含量差异较大,LD_(50)分别为297.551、558.578 mg·kg~(-1)。大鼠灌胃后造成不同程度的急性肝损伤,与正常对照组比较,中段组分的高、低剂量组和末段组分的高剂量组均能明显升高大鼠血清中AST和ALT活性(P0.01),明显诱导大鼠肝细胞凋亡(P0.01)。结论:雷公藤柱层析中段组分毒性强于末段组分,毒性物质基础以二萜、生物碱类为主,毒性主要表现为急性肝损伤,毒性成分与毒性存在量效关系。     

丙泊酚、依托咪酯对小鼠离体子宫平滑肌收缩功能的影响

目的观察丙泊酚、依托咪酯对小鼠离体子宫平滑肌收缩功能的影响。方法制备孕9d雌性ICR小鼠子宫平滑肌肌条,采用Med—Lab—U／4cs生物信号采集处理系统记录不同浓度的丙泊酚（2．7、5．4、10．8ug／mL）和依托咪酯（0．2、0．4、0．8ug／mL）对子宫平滑肌收缩张力、强度、频率的影响。结果与基础值比较,2．7ug／mL的丙泊酚使子宫平滑肌的张力、强度降低（P〈0．05）,对其频率、活动力无影响（P〉0．05）;5．4ug／mL、10．8ug／mL丙泊酚使子宫平滑肌的张力、强度、活动力显著降低（P〈0．01）,对频率无影响;而三种浓度依托咪酯对子宫平滑肌的张力、强度、频率、活动力均无影响（P〉0．05）。结论浓度为2．7、5.4、10．8ug／mL的丙泊酚对子宫平滑肌收缩功能有浓度依存性抑制作用。     

血清乙肝病毒DNA煮沸抽提法的建立和应用

目的 建立一种简便的血清HBVDNA抽提方法一煮沸抽提法，并将其应用于巢式PCR扩增。方法 选取16份CHB血清，分别应用直接煮沸法和异硫氰酸胍-酚／氯仿法进行HBVDNA抽提后，进行荧光定量PCR测定；并以煮沸法抽提样品为模板，进行HBVDNAP区部分片段巢式PCR扩增。结果 将上述两种抽提方法的荧光定量PCR结果取对数后进行直线相关分析和配对样本I检验，结果显示：两种方法的定量PCR结果之间存在良好的相关性(r=0．696，P=0．003)，且二者定量PCR结果无差异(P=0．663)。16份标本巢式PCR扩增均为阳性，PCR产物分子量大小与预期值相符。结论 直接煮沸法抽提HBVDNA，简便、快速、效果好，适用于HBV的科研和临床检测工作。     

核酸序列扩增早期诊断人类免疫缺陷病毒感染

人类免疫缺陷病毒 (ＨＩＶ)是艾滋病的病原体 ,ＨＩＶ的早期诊断具有非常重要的意义。目前 ,用于诊断ＨＩＶ早期感染的方法主要有细胞培养 (病毒分离 )、Ｐ2 4抗原检测和核酸检测。适合于ＨＩＶ的早期诊断[1 ,2 ] 。为此 ,我们采用核酸序列扩增对几组可能处于ＨＩＶ感染早期的高危人群的 86份样品进行了检测 ,并结合抗体检测结果进行分析 ,报告如下。一、材料和方法1 .研究对象 :来自四川、云南、河南和北京的ＨＩＶ 1抗体阳性母亲的婴儿、ＨＩＶ 1抗体阳性的配偶、ＨＩＶ 1抗体检测阴性 ,但自述近段时间有过高危行为的人群及发生针刺事故的…     

穿心莲提取物对口腔溃疡豚鼠细胞因子表达的影响

目的 探讨穿心莲提取物(andrographis paniculata extract,APE)对口腔溃疡豚鼠细胞因子表达的影响。方法 用90%苯酚溶液灼烧豚鼠左侧面颊,造成口腔溃疡模型,观察APE对口腔溃疡豚鼠溃疡面积、溃疡程度及组织病理变化,给药5 d后测定血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果 用苯酚溶液制作豚鼠口腔溃疡模型成功,与模型组比较,高剂量APE外用组和桂林西瓜霜组均可显著减小溃疡面积(P<0.01),明显改善口腔溃疡程度和溃疡的病理变化,显著降低血清TNF-α水平(P<0.01)和IL-6水平(P<0.01),VEGF表达有显著差异(P<0.01),且2组间无显著差异。结论 APE对口腔溃疡豚鼠有治疗作用。     

非甲—庚型肝炎患者TT病毒感染的检测及序列分析

在急慢性输血后肝炎、散发性肝炎及爆发性肝炎中，有相当比例的患者用现有甲、乙、丙、丁、戊、庚型肝炎实验室诊断方法尚不能分型，在排除已知的致病因素外，仍有３．５０～１５％的肝炎病人病因不明。通常将这些不明原因的肝炎称之为非甲－庚型肝炎。１９９７年日本学者报道发现一种新的肝炎病毒，并命名为ＴＴ病毒（ＴＴＶ）［１］。我们根据日本报道的ＴＴＶ基因序列，建立套式聚合酶链反应（ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）方法，在我国北京地区非甲庚型肝炎患者中检测出ＴＴＶ基因，并进行了序列分析，现将结果报道如下。材料与方法一、标…     

肝炎患者TT病毒感染的研究

关于ＴＴ病毒 (ＴＴＶ)的致病性及是否属嗜肝病毒目前仍有争论 ,为了解肝炎患者中ＴＴＶ感染情况及有ＴＴＶ感染患者的临床特点 ,我们从 1998年 10月～ 1999年 10月对北京地坛医院肝炎科收治的 5 4 7例各型病毒性肝炎患者 ,留取血清标本进行ＴＴＶ ＤＮＡ检测 ,从中发现 12 0例血清ＴＴＶ ＤＮＡ阳性者 ,并对其临床特征进行分析。1　 材料与方法1.1　 研究对象　 1998年 10月～ 1999年 10月 ,某传染病院肝炎科收治的各型病毒性肝炎患者共 5 4 7例 ,其中男性 4 4 6例 ,女性 10 1例 ,年龄 17～ 81岁。1.2　 方法　 5 4 7例患者入院后均留取血…     

不同来源热原试验用兔的合格率比较

若从农村直接收购热原试验用兔，其合格率仅为49．2％．若从农村引进种兔自行繁殖，所得热原试验用兔的合格率升为68．2％。从其他兔场引进新西兰白兔后自行封闭式饲养繁殖，逐步形式封闭群，其热原试验用兔合格率逐年增加，到第4代合格率可达86．5％，以后则保持这个水平。不同季节的热原试验用免合格率似有差异。     

婚检人群乙、丙型肝炎、梅毒及艾滋病毒检测

目的 了解北京市婚检人群乙型和丙型肝炎、梅毒及艾滋病病毒感染情况。方法 乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎抗体和艾滋病毒抗体采用酶免法检测；梅毒采用快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)和梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)检测：乙型和丙型肝炎病毒载量采用PCR荧光定量方法检测，病毒基因型采用直接PCR基因分型法测定。结果 800例婚检人群乙型和丙型肝炎感染率分别为12．0％，6．0％，梅毒和艾滋病病毒未检出。96例乙肝表面抗原阳性婚检人群中。乙型肝炎病毒载量小于10^5拷贝／ml占88．5％，大于10^5拷贝／ml仅占11．5％。5例丙型肝炎病毒RNA阳性中，病毒载量均小于10^4拷贝／ml，该婚检人群HBV感染中，B型占18．6％，B和C混合型占42．4％．C型占23．7％。3例丙型肝炎病毒感染均为HCV1b型。结论 该婚检人群中，乙型和丙型肝炎病毒感染率相对较高，但病毒载量相对较低。未发现梅毒和艾滋病毒感染。     

临床诊断为非甲～戊型肝炎患者的病原学研究

目的探讨临床诊断为非甲-戊型肝炎患者的病原学。方法 采用巢式PCR（nPCR)检测HBV、TTV、B19、和SENV DNA；用逆转录巢式PCR（RT-nPCR)检测HGV和HCV RNA。结果 60例临床诊断为非甲-戊型肝炎患者中，单独HBVDNA阳性30例（阳性率为50.0%)，HBV和TTVDNA阳性10例（16.7%)，HBV和B19DNA阳性6例（10.0%)，HCVRNA、HBV和SENVDNA阳性1例（1.7%)，单独HCVRNA阳性1例（1.7%)，HCVRNA和B19DNA阳性1例（1.7%),HGVRNA无一例阳性，单独B19DNA阳性2例（3.3%)。单独TTVDNA阳性1例（1.7%)，另8例（13.3%)上述病毒核酸均为阴性。HBV合并感染TTV或B19对其血清学生化指标无影响。结论HBV是临床诊断为非甲-戊型肝炎的主要病原，HGV、TTV、B19和SENV与非甲-戊型肝炎无关。