非甲～庚型肝炎患者血清中TTV的检测及序列分析

我们采用套式ＰＣＲ技术对 5 0例非甲～庚型肝炎患者进行ＴＴＶ ＤＮＡ检测 ,并对ＴＴＶ ＤＮＡ序列进行比较。　　对象与方法1.对象 :5 0例血清样本采自传染科诊断为急慢性非甲～庚型肝炎患者 ,血清病毒标志经ＥＬＩＳＡ和 (或 )ＰＣＲ法检测排除甲～庚型肝炎病毒、ＥＢ病毒及ＣＭＶ感染 ,并排除药物性、酒精性、自身免疫性肝炎及脂肪肝 ,无输血及血制品史。男性 41例 ,女性 9例 ,年龄 ( 30± 13)岁。2 .方法 :ＴＴＶ ＤＮＡ检测 :ＴＴＶ引物位于ＯＲＦ1区 ,外引物按ＮｉｓｈｉｚａｗａＴ报道序列合成 ,引物序列为 :正义链 (Ｐ1)ＡＣ ＣＧ…     

TTV在非甲-庚型肝炎患者中的检测、克隆及测序

目的分析ＴＴＶ（Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎｔｒａｎｓｍｉｔｅｄｖｉｒｕｓ）深圳分离株ＯＲＦ１部分基因序列。方法在ＴＴＶＯＲＦ１设计引物，建立巢式聚合酶链反应（Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ），检测４０例广东地区非甲－庚型肝炎患者血清中ＴＴＶＤＮＡ。对ＰＣＲ产物进行分子克隆，以荧光法（ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，３７３Ａ）测序。结果４０例非甲－庚型肝炎中２１例ＴＴＶＤＮＡ阳性（５２．５％）。对其中一株ＴＴＶ（ＳＺ１）ＯＲＦ１部分基因克隆、测序，并与Ｏｋａｍｏｔｏ等报道的２株（Ｎ２２、Ｇ１ａ）相比较，其核苷酸序列的同源性分别为９６．７％与９７．４％。结论本研究证实我国华南地区存在ＴＴＶ感染。ＴＴＶ的分子克隆与测序及ＰＣＲ诊断技术的建立对国内进一步开展ＴＴＶ感染的诊断与流行病学调查均具有重要意义     

TTV感染研究进展

１９９７年底日本Ｎｉｓｈｉｚａｗａ等首次从输血后非甲－庚型肝炎病人血清中分离到一种新的ＤＮＡ病毒,暂命名为ＴＴ病毒（ＴＴＶ）,并认为ＴＴＶ可能与非甲－庚型肝炎有关,本文对ＴＴＶ的病原学,流行病学及其与肝病的关系等方面的研究近况作一综述。     

山东地区部分人群中TTV感染调查及TTV山东株部分基因序列分析

了解山东地区输血后丙型肝炎和非甲～庚型病例中肝炎ＴＴＶ感染及基因变异的状况。应用套式ＰＣＲ方法检测 4 1例输血后丙型肝炎和 16例非甲～庚型肝炎患者血清中ＴＴＶＤＮＡ ,并对扩增的产物直接克隆测序 ,分析其基因变异的情况。结果表明 ,4 1例输血后丙型肝炎患者血清中ＴＴＶＤＮＡ阳性检出率为 19.5% ( 8/41) ,而 16例非甲～庚型肝炎患者血清中阳性检出率为 31.3% ( 5/16)。ＴＴＶ山东第一株序列与山东第二株序列相应位置核苷酸同源性与日本株和中国第一株相比较分别为 94 %和 91% ;山东ＴＴＶ的两株序列间同源性均为 91%。研究证实山…     

不明原因性肝炎118例

目前甲、乙、丙、丁和戊型肝炎均能明确诊断 ,少数学者认为庚型肝炎病毒 (ＨＧＶ)和输血传播病毒 (ＴＴＶ)也能导致肝炎 ,但临床上仍有较多病情、病程类似的病毒性肝炎 ,却无明确的致病因子。我们统计了 118例无明确致病因子的肝炎 ,并暂命名为“不明原因性肝炎”。现报道如下。材料与方法一、病例与诊断方法118例不明原因性肝炎病例来自我院 1997年 1月至2 0 0 0年 5月住院患者 ,诊断方法为排除法。入院后用酶联免疫吸附试验 (ＥＬＩＳＡ)检测甲～戊型肝炎血清标志物 2次以上 ,均为阴性。并检测ＨＧＶＲＮＡ (Ｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ )、抗 …     

进一步开展对TTV的研究

１９９７年日本学者用新的检测技术─—代表性差异分析法从一例非甲～非戊型输血后肝炎病人血清中克隆到一个５００ｂｐ的片段（Ｎ２２），而分子流行病学研究证实Ｎ２２与不明病原的输血后肝炎高度特异，并命名为输血传播病毒（ＴＴＶ）。和丙型肝炎病毒一样，ＴＴＶ是应用病毒分子生物学、基因水平的检测技术而发现，并没有关于病毒直观的形态学资料，迄今还没有应用电镜进行病毒形态学研究的报道。日本学者Ｏｋａｍｏｔｏ完成了对ＴＴＶ的测序，证实ＴＴＶ是一３．７ｋｂ的单股ＤＮＡ病毒，具有细小病毒的核苷酸特征，用ＯＲＦ序列测定及…     

新疆地区输血传播病毒的检测

随着检测技术的发展，对肝炎病毒的认识更加深刻。除甲～戊型肝炎和已知的其它致病因素外，仍有１０％～２０％的因输血或散发性肝炎不能用现有的检测方法检出其病毒标志。１９９７年Ｎｉｓｈｉｚａｗａ等报告了一种新发现的，与人类肝炎相关的ＤＮＡ病毒ＴＴＶ。为了解新疆地区ＴＴＶ感染情况，我们用日本学者报道的ＴＴＶ核苷酸序列设计了两对引物，检测了新疆地区的１２８例各种肝炎患者和４１例血液透析患者血清，证实新疆地区存在ＴＴＶ感染的流行，现将检测结果和部分ＴＴＶ阳性核苷酸测序结果总结报道如下。材料与方法一、病例来源本…     

丙型及非甲-庚型肝炎患者血清TTV检测及临床分析

目的 了解郑州地区不同肝病患者中ＴＴＶ（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ ｖｉｒｕｓ）感染状况及其临床特点。方法 自行设计ＴＴＶ ＯＲＦ１保守区的两对引物,对２０例非甲－庚型肝炎和９７例丙型肝炎患者血清进行ＰＣＲ检测,并对３０例资料完整的丙肝患者是否合并ＴＴＶ感染及其临床特点进行分析。结果 丙型和非甲－庚型肝炎患者血清ＴＴＶ ＤＮＡ检出率分别为１６．５％（１６／９７）和２０％（４／２     

急性非甲～庚型肝炎患者血清TTVDNA检测分析

为了解非甲～庚型肝炎的病原学感染状况 ,对供血员 2 4例 ,急性非甲～庚型肝炎患者 31例血清采用ＰＣＲ技术进行ＴＴＶＤＮＡ检测。结果显示 ,供血员ＴＴＶＤＮＡ阳性率为 12 .5% ( 3/2 4 ) ;急性非甲～庚型肝炎患者阳性率为 4 1.9% ( 13/31)。ＴＴＶ感染不仅在不明病源的肝炎患者中有较高的检出率 ,在无症状供血员中也有一定的感染。除 1例因胰腺癌手术有输血史外 ,余均无输血及血制品史 ,说明粪 口传播即肠道感染乃是目前最广泛的途径。研究证明 ,沈阳地区存在着较高的ＴＴＶ感染 ,不仅在肝炎患者 ,且在供血员中均有ＴＴＶ阳性者 ,提示开…     

非甲～庚型肝炎患者中TTV感染的研究

检测了ＴＴＶ－ＤＮＡ在非甲－庚型肝炎病人中的感染状况。方法采用巢式聚合酶反应检测３８例非甲－庚型肝炎病人血清中ＴＴＶ－ＤＮＡ并观察与肝功能的关系。结果３８例非甲－庚型肝炎病人中１６例ＴＴＶ－ＤＮＡ阳性,占４２．１％,     

山东地区TTV检测和部分基因克隆及序列测定

了解ＴＴＶ山东分离株感染状况及基因变异的情况。应用逆转录聚合酶链反应检测 2 6例山东地区非甲～庚型肝炎和 12例肝细胞癌患者血清中ＴＴＶＤＮＡ ,并对阳性扩增的产物利用ＰＣＲ技术片段直接克隆和测序 ,分析其基因变异的情况。结果显示 ,2 6例非甲～庚型肝炎中 11例ＴＴＶＤＮＡ阳性 ( 4 2 .3% )。对其中 2株 (ＴＴＶＳＤ4、ＴＴＶＳＤ5)部分基因克隆测序 ,并与日本株(ＡＢＯＯ8394 )相比较 ,其核苷酸序列同源性分别为 99.9%和 10 0 % ,而 12例肝细胞癌患者中 3例ＴＴＶＤＮＡ阳性(2 5.0 % ) ,对其中 1株 (ＴＴＶＳＤ6)部分基因克隆与…     

非甲－非庚型肝炎肝组织中经输血传播病毒DNA的原位检测

目的探讨非甲－非度型病毒性肝炎患者肝组织中经输血传播病毒（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄｖｉｒｕｓ,ＴＴＶ）ＤＮＡ的表达。方法采用地高辛素标记ＴＴＶＤＮＡ探针以原位杂交技术对１９例血清学甲、戊型肝炎病毒标志物、免疫组织化学检测肝组织中ＨＧＶＮＳＳ均用性的急、慢性病毒性肝炎患者肝组织进行检测。结果１９例肝组织中６例检出ＴＴＶ基因阳性（３１．５８％）,其中急性轻型肝炎４例（３０．８０％）,慢性肝炎２例（３３．３３％）。ＴＴＶＤＮＡ表达于肝细胞核或胞浆内。在急性肝炎,ＴＴＶ阳性细胞弥漫分布于肝小叶内,慢性肝炎于汇管区附近较为密集。６例中５例患者有转氨酶增高。结论非甲－非庚型病毒性肝炎肝组织中ＴＴＶＤＮＡ的检出表明ＴＴＶ为一种新型的嗜肝性病毒。     

输血传播病毒(TTV)部分基因序列的克隆、表达、活性鉴定及临床病理学、流行病学的研究

根据报道的ＴＴＶＯＲＦ2区段序列设计、合成套式ＰＣＲ引物 ,从 1例非甲～庚型肝炎病人血清中分离出ＴＴＶ部分基因片段。将该片段克隆到ｐＱＥ 30载体中 ,经过核苷酸序列测定证明该片段与日本株同源性为 96%。利用地高辛标记上述ＴＴＶ部分基因片段 ,作为探针 ,进行了 2 1例不同背景肝组织切片的原位杂交实验 ,并同时进行连续切片的苏木精 伊红染色 ,以了解肝中组织的病理改变。结果显示 ,肝组织中阳性杂交信号呈蓝紫色团块状或颗粒状 ,集中于肝细胞核内 ,在整个肝组织中均匀分布 ,证明ＴＴＶ具有嗜肝性。 2 1例中有 9例阳性 ,占 4 2 .8%…     

采用原位杂交法检测肝组织中的TT病毒

目的：检测肝组织中ＴＴ病毒。并探讨其致病性。方法：采用对称和不对称ＰＣＲ法,以地高辛素分别标记ＴＴＶ双链和单链探针,原位杂交法检测５６例肝组织。结果：５１例非甲￣非庚型肝炎肝组织中ＴＴＶ总检出率２７．５％（１４／５１）;５例非肝炎肝组织杂交阴性。ＴＴＶ ＤＮＡ主要见于肝细胞核内,在急性、慢性及重型肝炎组织中均有检出。双链探针杂交结果与单链探针检测病毒基因链的结果一致,２／６例组织ＴＴＶ基因链与互补链同时存在,结论：ＴＴＶ是导致肝炎的一种新病原,并且在肝脏内有复制。     

漳州地区各种肝炎患者感染TTV的研究

了解和掌握漳州地区各种肝炎病人感染ＴＴＶ情况及输血与感染ＴＴＶ的关系。采用ＴＴＶ套式ＰＣＲ法对漳州地区病原分型为甲、乙、丙、戊、庚型肝炎病人和非甲～庚型肝炎病人 (包括有输血史和无输血史 )及临床分型为急性肝炎、慢性肝炎和重型肝炎病人的血清进行ＴＴＶＤＮＡ检测分析。结果表明 ,甲、乙、丙、戊、庚型肝炎和非甲～庚型肝炎病人ＴＴＶ感染率分别为 10 .3%、2 5.9%、2 5.0 %、32 .4 %、2 6.3%和 36.8% ,各型间感染率无显著差异 (Ｐ >0 .0 5)。急性肝炎、慢性肝炎和重型肝炎患者ＴＴＶ感染率分别为2 1.3%、2 5.4 %和 34 .4 % ,…     

庚型病毒性肝炎动物模型—恒河猴肝的超微结构及免疫组织化学研究

庚型肝炎由单股正链ＲＮＡ病毒引起，是一种新型病毒性肝炎［１３］。１９９６年我们曾对８例单纯庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染患者进行过临床病理分析，并作了报道［４，５］。为了进一步探索庚型肝炎的发生，发展规律，我们建立了恒河猴庚型肝炎动物模型，并对它的血清学及肝脏组织学改变进行动态观察，现将观察结果报告如下。材料与方法一、研究动物选用中国云南健康恒河猴，雌雄各１只，年龄２～２．５岁，体重２～３ｋｇ，动物购于中国科学院动物研究所，经血清病原学检测，甲，乙，丙，戊，庚肝炎病毒指标均阴性。二、血清学检测实验…     

柯萨奇B组病毒性肝炎56例

为探讨非嗜肝病毒在散发性病毒性肝炎病原学中的地位 ,我们于 1997年开始对 398例肝炎患者进行柯萨奇Ｂ组病毒 (ＣＶＢ)、巨细胞病毒 (ＣＭＶ)和甲～庚型肝炎病毒及输血传播病毒 (ＴＴＶ)等 9种病毒指标的检测 ,共检出抗ＣＶＢ ＩｇＭ阳性 5 6例 ,现将ＣＶＢ感染者情况分析如下。材料与方法一、研究对象5 6例多为肝炎住院患者 ,其中 6例系原因不明丙氨酸转氨酶升高门诊发现。男 39例 ,女 17例 ,年龄 8～ 73岁 ,平均 38.5岁。临床诊断标准参照第五次全国传染病和寄生虫病学术会议修订的病毒性肝炎防治方案[1] 。二、检测方法抗ＣＶＢ ＩｇＭ…     

慢性非甲—戊型肝炎患者血清中庚型肝炎病毒核酸的检测及部分核苷…

目的 了解庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在慢性非甲－戊型肝炎发病中的作用，并测定其非结构基因５（ＮＳ５）区部分核苷酸序列，方法 以逆转录－套式－聚合酶链反应法检测ＨＧＶＲＮＡ，并对阳性者血清中扩增出的９９４ｂｐ长的ｃＤＮＡ直接测序。结果 ３５例慢性非甲－戊型肝炎患者中１例血清ＨＧＶＲＮＡ阳性（２．９％）。该患者ＨＧＶＮＳ５区部分核苷酸序列与美国株ＰＮＦ２１６１及Ｒ１０２９１的同源性分别为８７．９５％及８９     

山东地区庚肝病毒的流行病学及部分核酸序列测定

庚型病毒性肝炎是１９９５年才确认的一种新型肝炎［１］．为探讨庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染的检测方法及ＨＧＶ山东株感染及变异的情况,我们对部分慢性肝病（ＣＬＤ）患者的血清进行ＲＴＰＣＲ检测,并对ＰＣＲ扩增产物作ＨＧＶＣＥ１区部分核苷酸序列分析．１　材料和方法１．１　材料　本组９６例ＣＬＤ患者血清来自山东地区系１９９４／１９９７在本院住院和门诊长期随访患者．全部病例均经临床和病理确诊证实．１．２　方法　①引物设计与ＰＣＲ扩增采用半巢式ＰＣＲ技术扩增中国山东株ＨＧＶＣＥ１区部分基因片段．根据中国株ＨＧ…     

一种新的可经输血传播病毒(TTV)的分子流行病学研究

目的 分析深圳地区不同人群中ＴＴＶ（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ ｖｉｒｕｓ，ＴＴＶ）感染情况及其基因型。方法 在ＴＴＶ ＯＲＦ１设计引物，建立巢式聚合酶链反应，检测深圳地区不同人群血清中ＴＴＶ ＤＮＡ。对ＰＣＲ产物进行分子克隆，以荧光法（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，３７３Ａ）测序。结果 ９０例一般人群、８８例有偿献血员、７９例静脉毒瘾者、５２例非甲￣非庚型肝炎、６７例