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1.
目的:构建噬菌体β‐GT蛋白的原核重组体系,诱导表达、纯化GST‐β‐GT 融合蛋白并对其进行酶活性测定。方法利用PCR技术从T4噬菌体中扩增β‐GT基因;经T‐A克隆,获得β‐GT基因片段,经酶切连接,构建原核表达载体pGEX‐6P‐1‐β‐GT ;经测序鉴定序列正确后,将所构建的载体转化进入大肠埃希菌BL21(DE3)中进行表达。利用IPTG诱导,经10% SDS‐PAGE鉴定目的蛋白表达后,采用GST柱纯化目的蛋白;通过酶切和qPCR鉴定其活性。结果成功扩增了噬菌体β‐GT基因;重组质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达出GST‐β‐GT融合蛋白;通过GST柱纯化后获得了GST‐β‐GT融合蛋白,纯度达95%;通过酶切和qPCR验证,此GST‐β‐GT融合蛋白具有T4‐β‐GT酶的活性。结论。原核表达GST‐β‐GT融合蛋白具有糖基转移酶活性。 相似文献
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<正>基因克隆技术,又称重组DNA技术,是将目的基因与具有自主复制能力的载体DNA进行体外重组,获得新的重组DNA后导入受体细胞中表达相应蛋白,以研究蛋白结构与功能及其与其他分子的相互作用。最近,随着非编码RNA的发现,这项技术也用于RNA的研究。基因克隆技术从发明到现在经历了三个发展阶段。第一个阶段是20世纪70年代初经典的基因克隆技术的创建[1-2]。经典的基因克隆技术是需要限制性内切酶和连接酶的克隆方法,至今仍被广泛应用。第二个阶段是20世纪90年代初不依赖 相似文献
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分子生物学是医学专业学生的一门必修课,是学生了解当代医学发展前沿和将来独立进行科研所需的理论知识和科研思维的有力保证。为适应当今医学人才培养目标,根据医学院校中医专业学生的特点和要求,以癌基因和抑癌基因教学内容设计为例,探讨了几种教学方法的结合应用。主要采用介绍相关理论课中有关内容的研究和探索过程,引导学生自己归纳和总结出相应的规律。结果提示:几种教学方法结合激发了学生学习兴趣,有利于学生对基础知识的掌握,和培养主动思考的能力。 相似文献
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为了解城区学校、幼儿园食品卫生状况 ,防止学校、幼儿园集体人群发生食物中毒和食源性急性传染病暴发流行 ,保障师生、儿童身体健康 ,我们于 1999年 9~ 10月组织专业人员 12名 ,对城区 5 8所学校、幼儿园 (大专院校 9所、技工学校 2 6所、中小学 14所、幼儿园 9所 )的食品卫生组织管理、从业人员“三证”持有率及霍乱弧菌带菌情况、食品卫生质量、餐饮用具消毒质量、生活饮用水的末梢水余氯含量、教学场所开水供应、厕所的洗手设施进行了监督、监测 ,现将结果报道如下。1 对象与方法1.1 对象 学校、幼儿园的食堂、餐饮用具及食品从业人… 相似文献
7.
目的 探讨影响原发性肝癌患者介入治疗的因素,最佳发挥导管动脉栓塞(TAE)的效能,提高病人的远期生存率。方法 46例原发性肝癌患者采用经导管动脉介入治疗,导管选择性插入肿瘤所在肝叶或肝段,使用药物碘油混悬及明胶海绵粒栓塞靶动脉。结果 肝区病灶碘油完全充填,出现坏死萎缩者,生存期较长。碘油大部分或部分充填病灶者,生存期较碘油完全充填为短。病灶内仅见少量碘油者,生存期最短。本组病例1年和3年生存率分别为60.5%和18.4%。结论 TAE治疗原发性肝癌疗效肯定,延长了病人生存期,但尚有一些问题需进一步探讨。 相似文献
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10.
戾某 ,女 ,1 7岁 ,学生。 1 999年 7月 ,坐车发生车祸 ,当时颈部疼痛 ,医院拍片检查颈椎部无异常 ,服药后将 2年颈部无疼痛感。今年 8月自觉项强背肩痛 ,手麻木 ,眩晕恶心 ,头痛 ,耳鸣 ,视力模糊 ,心慌 ,上课思想不能集中 ,记忆力下降 ,有时全身震颤。医院复查心电图、脑电图无异常 ,诊断 :颈部损伤病。服多种西药不效。遂所要求中药治疗。发病原因 :主要经络阻滞、血脉不通、髓海失充 ,肝风内动、风火上扰神明。治疗原则平肝息风 ,活血通络。处方 :天麻钩藤饮加减 :天麻、半夏、全蝎、僵蚕各 9g,白芍 5 0 g,钩藤、丹参、葛根各 2 0 g,云苓1… 相似文献