RHD1227A型弱D的D抗原表位分析

目的分析携带RHD1227A等位基因的Rh血型弱D型个体的红细胞D抗原表位。方法采用常规血清学方法检测Rh血型D、C、c、E和e抗原表型,间接抗人球蛋白试验(IAT)确认D抗原,序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)测定RHD基因,并检测RHD杂合型。对确认的弱D型,使用12种抗-D抗原不同表位的单克隆抗体,分析红细胞D抗原表位。结果血清学筛选和PCR-SSP检测鉴定出3例携带RHD1227A等位基因的弱D型样本,Rh小因子均为C+c+E-e+,RHD合子型鉴定均为RHD+/RHD-杂合型,提示3例个体基因型为CDe/cde。3例个体红细胞D抗原表位分析显示均具有基本完整D抗原表位,与Rh(D)阳性对照样本相同。结论发现3例RHD1227A型弱D型;不管RHD1227A等位基因表达DEL型或弱D型,其D抗原表位近似,均表达基本完整D抗原,提示该等位基因不同量的表达可能与其它调节因素有关。     

Rh阳性个体RHD杂合性分析

目的 分析中国汉族Rh(D)阳性个体的RHD杂合性,讨论Rh阴性妇女产前Rh同种免疫预防策略.方法 血清学检测31 115名汉族捐血者的Rh(D)表型,分析Rh(D)阳性个体的RHD杂合率;对其中3628名随机Rh阳性个体采用PCR方法直接测定RHD合子型,计算杂合率与前者比较.结果 31 115名捐血者中采用间接抗人球蛋白试验(indirect antiglobulin test,IAT)确认99名个体为Rh(D)阴性(0.318%),d基因频率0.056 41,D基因频率0.943 59,Dd杂合型0.106 45(10.6%),考虑IAT检测D放散型为Rh(D)阴性,计算后实际Dd杂合型为0.090 32(约9.0%);PCR测定3628名Rh阳性个体RHD合子型测定显示DD纯合型3383人(93.2%),Dd杂合体245名(6.8%),由于无效RHD等位基因的PCR结果为阳性(D),重新分析后实际携带1条功能性RHD基因的杂合性个体约7.4%.提示中国汉族Rh(D)阴性妇女当配偶为Rh(D)阳性时,子女Rh(D)阴性的比率约3.7%～4.5%.结论 中国新生儿Rh同种免疫预防进行侵入性胎儿Rh(D)血型预测意义不大,或可直接假定新生儿为Rh(D)阳性进行产前检查和同种免疫防护.

Abstract：

Objective To investigate the RHD zygosity of Rh(D)-positive Chinese Hans in order to study the mother-fetus Rh isoimmunization prophylaxis. Methods Rh(D) blood group of 31 115 donors were serotyped, and the RHD zygosities were analyzed, or determined through a PCR method for 3628 donors of Rh(D)-positive individuals. Results Among the 31 115 donors, 99 were tested Rh(D)-negative by indirect antiglobulin test (IAT) (0. 318%). The d frequency was 0. 056 41, D was 0. 943 59, and Dd heterozygosity was 0. 106 45 (10.6%). However the rate was 0.090 32 (about 9.0%) after excluding DEL (IAT-negative). For the 3628 PCR tested donors, 3383 were DD (93. 2%), 245 were Dd (6.8%). After excluding nonfunctional RHD alleles, 7. 4% of the donors were carrying one functional RHD. It showed that an Rh(D)-negative Chinese Hah woman gives an Rh(D)-negative child at a rate of 3.7%-4. 5% when her husband is Rh (D)-positive. Conclusion Fetus Rh (D)-genotyping may be unnecessary for Chinese Hans if invasive operation was needed for prenatal diagnosis. The Rh prophylaxis could be chosen assuming an Rh(D)-positive fetus.     

γδT细胞对系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞凋亡和CD69表达的影响

目的:研究γδT细胞对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞凋亡和CD69表达的影响,探索其在SLE发病中的调控作用。方法:采用单克隆抗体固相法,对8例正常人外周血γδT细胞进行体外扩增建系,并进行细胞纯度和表型鉴定;利用不同数量比的γδT细胞与15例SLE患者外周血单个核细胞进行体外共同培养3d,流式细胞仪检测单个核细胞凋亡和CD69表达的情况。结果:建立了正常人外周血γδT细胞系,其平均纯度为(80.3±9.2)%,细胞表型以γδ2[(86.1±8.0)%]和γγ9[(83.3±6.3)%]为主;SLE患者外周血单个核细胞的凋亡率在1∶100组[(2.48±3.86)%]和1∶50组[(1.17±1.38)%]均低于对照组[(3.77±3.96)%](P<0.05、P<0.01);γδT细胞对活动组和稳定组SLE患者外周血单个核细胞的凋亡均有明显的抑制作用(均P<0.05),但对两组之间的抑制强度无明显差异(P>0.05);CD69阳性率对照组、1∶100组和1∶50组之间差异无统计学意义(P<0.05)。结论:γδT细胞体外能够抑制SLE患者外周血单个核细胞的凋亡,且这种抑制作用与狼疮的活动性无关,与外周血细胞的活化无关。     

1例新的弱D型的鉴定

目的分析1例新的Rh血型弱D型个体的RHD等位基因及其红细胞D抗原表位。方法采用常规血清学方法检测Rh血型D、C、c、E和e抗原表型,间接抗人球蛋白试验(IAT)确认D抗原,并分析D抗原表位;序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)测定RHD基因,然后分析RHD编码区全长序列,并检测RHD杂合型。结果血清学显示该个例为D抗原弱表现型,Rh因子为D+C+c+E-e+,PCR-SSP检测RHD基因显示与正常Rh(D)阳性对照相同。RHD编码区序列分析发现第9外显子存在1 212C>A碱基突变,其余外显子序列则与正常RHD基因一致(GenBank EF103573),RHD合子型鉴定为RHD+/RHD-杂合型,提示该个体基因型为CDe/cde。红细胞D抗原表位分析显示其具有基本完整D抗原表位。结论该个例为RHD1 212C>A碱基突变形成弱D72型。     

汞作业工人免疫状况的研究

本实验采用酸性α-醋酸萘酯酸法对汞作业工人外周血T淋巴细胞进行了测定,并采用单克隆抗体检测了T淋巴细胞亚群的变化;同时测定了血清免疫球蛋白IgG、IgA和IgM的含量。结果表明ANAE阳性细胞、OKT3、OKT4阳性细胞及OKT4~+/OKT8~+比值均明显低于对照组;血清IgM含量低于对照组,而IgG含量则高于对照组。说明汞接触者细胞免疫和体液免疫功能均会发生改变。结合作业环境条件、汞接触者工种、工龄及中毒情况进行综合分析,提示免疫功能的检查可考虑作为汞毒性损伤的敏感指标之一,有必要进行进一步研究和探讨。     

中国交通警察职业性影响及防护对策研究──城市污染对交通警察健康及行为功能的影响

为了配合中国交通警察职业性影响及防护对策研究，以某市有代表性的七个交通路口进行环境监测，并对该区交通警察（外勤警１０４人，内勤警９３人）进行了健康状况检查和神经行为功能测试。结果表明：该市污染较为严重，交通噪声昼Ｌｅｑ日均值为７６．７５ｄＢ（Ａ），超过国家建议交通噪声Ｌｅｑ每日标准７０ｄＢ（Ａ），颗粒物浓度、一氧化碳、氮氧化物浓度超过大气环境质量三级标准。外勤警的呼吸系统、关节酸痛、眼结膜炎等症状和体征出现率、ＨｂＣＯ百分含量、收缩压与内勤警比较均有显著性差异。在排除年龄、工龄、文化程度等因素的ＮＣＴＢ测试，在情感特征、数字跨度、数字译码、提转捷度和目标追踪等方面，外勤警较内勤警有显著性差异。提示：交通警察（外勤警）的健康状况及神经行为功能变化与城市污染有关。     

噬菌体生物扩增法检测痰中结核分枝杆菌的价值

目的评价噬菌体生物扩增法快速检测痰中结核分枝杆菌的应用价值。方法应用噬菌体生物扩增法快速检测27例痰标本,通过与改良罗氏培养法进行比较,对应用噬菌体生物扩增法检测痰中结核分枝杆菌进行初步的分析和评价。结果对于27例痰标本,噬菌体生物扩增法检测出阳性12例(44.44%),改良罗氏培养法检出阳性9例(33.33%),两种方法均阳性8例(29.63%);噬菌体生物扩增法检测痰中结核分枝杆菌与改良罗氏培养法无显著性差异(2=0.80,p>0.05)。结论噬菌体生物扩增法可简便、快速地检测痰中的结核分枝杆菌,具有很好的临床应用价值。     

抗核小体抗体、免疫球蛋白及补体与系统性红斑狼疮活动性的相关性研究

目的:分析抗核小体抗体(AnuA)在系统性红斑狼疮(SLE)检测中的敏感性,并且探讨AnuA、免疫球蛋白及补体与系统性红斑狼疮活动性的关系。方法:速率散射免疫比浊法检测免疫球蛋白及补体;酶联免疫吸附法检测抗核小体抗体、抗dsDNA抗体,同时用免疫印迹法检测SLE病人血清抗Sm抗体。结果:SLE患者血清AnuA阳性率是59%,其与对照组血清中AnuA阳性率差别具有高度显著性(P<0.001);66例SLE患者血清AnuA与免疫球蛋白IgG、IgM和IgA存在明显相关性,(P<0.01和P<0.05),与补体C3呈明显负相关,P<0.01,但与补体C4无相关性。结论:检测抗核小体抗体较检测抗dsDNA抗体和抗Sm抗体更敏感,对SLE的诊断具有重要意义。     

PCR-SSP技术检测乳腺癌易感基因

[目的]建立简易的PCR方法检测BRCA1及其等位基因.[方法]根据BRCA1基因(EMBL/GenBank/DDBJ U14680)和在中国人乳腺癌患者中高频存在的BRCA1-2201T2430C2731T3232G3667G等位基因(AY304547)序列,设计二对特异性引物,分别针对正常BRCA1和上述等位基因,同时引入一对内对照引物,建立简易的序列特异性引物-pCR技术(PCR-SSP),并用于检测30份已知BRCA1序列的乳腺癌患者DNA样本,以及67名未知的健康女性捐血者样本.[结果]30份已知的患者DNA样本的PCR-SSP检测结果与样本的序列完全相符.67名健康女性检测结果显示6名个体(9.0%)为等位基因纯合体,32人(47.8%)携带正常BRCA1,其余29名个体(43.3%)为杂合体.[结论]PCR-SSP方法能特异性检测BRCA1基因和BRCA1-2201T2430C2731T3232G3667G等位基因,可作为检测该等位基因以及判断个体在这一突变热点位点是否发生变异的简易手段.     

采用流式细胞术诊断急性白血病的探讨

采用免疫荧光法通过流式细胞仪分析１例急性白血病患者骨髓细胞ＣＤ系列抗表达情形。抗原包括ＣＤ３、ＣＤ５、ＣＤ７、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３３以及ＨＬＡ－ＤＲ位点抗原。结果流式细胞仪散点图显示有一群非正常细胞,对此群细胞分析显示ＨＬＡ－ＤＲ抗原阳性细胞大于８０％,ＣＤ２２阳性细胞占８３．９１％、表达ＣＤ１９的细胞占３０．１１％、表达ＣＤ２０的细胞占３３．７５％,而同时表达