IRF-4结合蛋白对人涎腺腺样囊性癌细胞增殖的抑制作用

目的 探讨IRF-4结合蛋白(IRF-4 binding protein,IBP)对人涎腺腺样囊性癌细胞增殖的影响.方法 用免疫组化(S-P法)染色技术对27例人涎腺腺样囊性癌组织和20例正常涎腺组织标本进行IBP表达的检测和分析.用脂质体法转染IBP过表达及空白对照载体至人腺样囊性癌细胞株ACC2,G418筛选后建立...     

抗preS1分子高效单克隆抗体的制备及其在血清LHBs检测中的应用

目的 制备可用于血清LHBs检测的针对preS1高效单克隆抗体并进行初步临床应用研究.方法 对乙肝preS1区段基因(B基因型,adr血清亚型)全长序列(1～119 aa)进行密码子偏嗜性改造后,克隆入质粒pET32a构建原核表达重组质粒并转化入大肠杆菌BL21 (DE3),采用离子交换、HIS亲和层析柱以及肠激酶(E...     

兔抗人APE1多克隆抗体的制备及鉴定

目的:制备兔抗人脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶多克隆抗体并进行鉴定.方法:以纯化的全长APE1蛋白为抗原, 采用改良的快速免疫法制备兔抗人APE1多克隆抗体并进行特异性亲和纯化, ELISA、Western blot和免疫组化检测制备抗体的效价和特异性.结果:ELISA检测显示该抗体的效价达到1:128 000, 相对亲和力常数为8.96×10-6 mol/L.Western blot显示该抗体能与APE1蛋白特异性结合, 免疫组化检测显示阳性反应产物主要定位于细胞核.此外, 该抗体还可用于小鼠和大鼠组织APE1蛋白的检测.结论:制备的多克隆抗体特异性和效价良好, 不仅为今后深入研究人APE1蛋白的性质与功能提供了有用的实验工具, 还可用于检测小鼠和大鼠组织中APE1蛋白的表达.     

一氧化氮与正常妊娠及妊高征的关系研究进展

妊娠期母体一氧化氮(NO)的合成明显增多，在调节母体血液循环、保护宫内胎儿发育等方面起着重要作用。妊高征(PIH)的发病机制与妊娠期间母体NO代谢紊乱存在一定关系。现就此作一简要综述。     

临床生物化学和生物化学检验教学改革与实践

临床生物化学和生物化学检验是由生物化学、分析化学、临床医学等学科交叉渗透逐渐形成的一门独立学科[1].既是医学检验专业的主干课程之一,同时其内容也不断渗透到临床医学专业相关课程和医学检验专业其他专业课程如生物化学与分子生物学、分析化学和病理生理学等,具有教学内容多、抽象、难以理解的特点.为此,我们在近年的教学实践中,结合我校医学检验专业的培养要求和特点,着重从教学内容、教学方法和教学手段以及考核方式等几个方面开展了教学改革与实践,本文就此作一总结.     

IBP促进人涎腺腺样囊性癌细胞对紫杉醇耐药

目的探讨IBP对SACC细胞抗紫杉醇凋亡能力的影响及其机制。方法将ACC2转染IBP组和空白对照组各自根据不同紫杉醇浓度分成5组,紫杉醇作用72 h后,MTT法检测在紫杉醇作用下IBP对SACC细胞增殖的影响;通过微管蛋白Tubulin免疫荧光染色,观察紫杉醇作用前后ACC2细胞微管的变化及IBP与微管的关系。结果 IBP使ACC2细胞对紫杉醇产生一定程度的耐药,在5μg/ml的紫杉醇浓度下最为明显;紫杉醇开始作用后,ACC2-C1细胞的微管点状聚集成团,而ACC2-C1/IBP细胞的微管则出现明显的紊乱、断裂,IBP能促进微管的解聚;IBP所发的绿色荧光与微管的红色荧光糅合在一起呈黄色,IBP与微管存在一定程度的共定位。结论 IBP促进SACC细胞对紫杉醇耐药。     

IBP表达抑制后活化T淋巴细胞基因表达谱变化分析

目的 利用全基因组寡核苷酸芯片检测干扰素调节因子-4结合蛋白(IRF-4 binding protein,IBP)表达抑制后活化T淋巴细胞基因表达谱的差异.方法 采用本室构建的IBP表达抑制的Jurkat T细胞及相应对照细胞为实验对象,Anti-CD3、CD28 mAb处理细胞后提取刺激24、48 h的细胞总RNA,利用北京博奥生物有限公司22K Human Genome Array芯片检测基因表达的差异,以MAS.doc.V1软件,结合KEGG、NCBI等生物信息学数据库检索分析差异表达基因功能和网络关系.结果 IBP基因表达抑制的Jurkat T细胞在TCR信号刺激24、48 h后,细胞能量代谢、周期生长、转录调控及凋亡等多种类型的基因发生差异表达改变,2个时相组共有56个差异表达趋势一致基因,其中17个基因共同上调,39个基因共同下调.结论 在活化的Jurkat T细胞中IBP表达抑制所致多个基因差异表达.     

一种新的T细胞相关分子IBP表达水平定量检测方法的建立

目的 建立一种定量检测IBP表达水平的方法 ,为研究IBP在免疫细胞分化以及在免疫性疾病当中的作用奠定基础.方法 利用反转录PCR和PCR技术获得目的 基因和内参基因片段,构建重组质粒,以重组质粒为标准品,建立实时PCR标准曲线;测定外周血白细胞IBP和β-actin表达水平.以β-actin为内参照,均一化检测结果 .结果 重组质粒的阳性克隆经PCR扩增,0.8%琼脂糖凝胶电泳鉴定,目的 基因片段插入载体内;建立起实时PCR标准曲线.检测20例正常人全血标本,得到比较稳定的检测结果 .结论 成功建立了用实时PCR定量检测IBP mRNA表达水平方法 ,为进一步研究IBP奠定了基础.     

NGAL测定在急性肾损伤诊断中应用的研究进展

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)存在于中性粒细胞的过氧化物酶阴性颗粒中,并在人体组织细胞中广泛分布。近年研究发现,NGAL与肾脏关系十分密切,可能参与启动肾脏发育并发挥保护肾脏的作用。众多实验室和临床研究表明,急性肾损伤(AKI)时NGAL表达明显增高并分泌释放入体液中。尤其是尿液中的NGAL水平与肾脏损伤的程度密切相关且很早就表现出来,NGAL被认为是新的有效的AKI早期生化标志物。     

人肝癌细胞系HCC—9204的建立及其特性研究

作者用组织块培养法，对１２例肝细胞肝癌手术标本进行培养，并对能存活的细胞进行形态学观察，ＬＤＨ同工酶谱和ＡＦＰ检查，核型分析，对数求解和放射自显影测定细胞增殖周期，异种移植及生物学特性研究。结论：ＨＣＣ－９２０４是一株人体肝癌细胞系，可用于肝癌防治研究。