宫颈癌手术患者健康教育体会

女性肿瘤疾病中,宫颈癌发病率仅次于乳腺癌,位居第2位,而且年轻宫颈癌患者上升趋势明显,已成为威胁女性健康的一大杀手.宫颈癌患者大多数都会出现强烈而复杂的心理反应,其心理反应及精神状态与癌症的康复密切相关,对这些患者进行必要的健康教育可以减轻病人痛苦,增强病人的抵抗力和战胜癌症的信心,对帮助病人积极配合治疗起到举足轻重的作用.     

针对尿激酶型纤溶酶原激活剂的siRNA的载体构建与表达

目的:构建针对尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)mRNA的siRNA的表达载体,并观察其对转染细胞中的uPA表达的抑制作用. 方法:化学合成用于产生针对uPA的发卡状RNA的寡核苷酸,各64个碱基,退火后插入线性化的pSUPER载体的H1启动子下游. 重组载体经限制性酶切和测序. 把构建的载体转染乳腺癌细胞系MDA-MB 231,观察其对uPA的干扰作用. 结果:限制性酶切和序列测定表明成功构建了可以表达针对uPA的发卡状RNA表达载体,该载体表达的发卡状RNA能够有效的下调uPA的表达. 结论:成功的构建了针对uPA的发卡状RNA表达载体,为进一步研究uPA的功能和肿瘤的基因治疗打下基础.     

瞬时转染和稳定转染对RNAi抑制乙型肝炎病毒S基因表达的影响

目的:构建针对乙型肝炎病毒(HBV)S基因的siRNA表达载体Psuper-S1和Psuper-S2,观察瞬时转染及稳定转染对RNAi抑制HBV基因表达作用的影响.方法:设计并合成针对HBV S基因的siRNA寡核苷酸,经退火形成双链后克隆入Psuper载体,构建成功的siRNA表达载体分别瞬时转染和稳定转染表达HBV的2.2.15细胞,对所得细胞上清中的HBsAg和HBeAg进行定量检测,RT-PCR检测siRNA对靶基因Mrna的抑制效果,并比较两种转染方式对RNAi抑制HBV基因表达作用的影响.结果:在稳定转染并经潮霉素筛选所得的单克隆细胞株中,Psuper-S1和Psuper-S2均能明显抑制HBsAg及HBeAg的分泌(P<0.01),抑制率分别为83%和78%,RT-PCR结果证实HBV的Mrna明显降低,而瞬时转染细胞在蛋白质水平上及Mrna水平上的结果则比稳定转染的结果逊色.结论:针对HBV S基因的siRNA能稳定、高效、特异地抑制HBV基因的表达,转染效率对于靶基因的RNA干涉作用有明显的影响.     

创伤骨科患者护理中的不安全因素与防治对策

创伤骨科护理工作中可能出现的不安全因素，分别从护理人员的素质、技能、收费问题、病人及家属的配合、医院各项设施的配备等方面来分析，为保证护理工作的顺利进行制定相关的防范措施。     

RNA干扰基因敲除MAGE-1在恶性胶质瘤U87细胞中的初步研究

目的：通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸（siRNA）表达载体，鉴定其在人恶性胶质瘤细胞系U87细胞中对MAGE．1基因表达的干涉作用。方法：化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE—1基因寡核苷酸链，克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上，重组构建核糖核酸干扰（RNAi）质粒载体。利用RT-PCR、流式细胞术和荧光显微镜，检测经稳定转染后胶质瘤U87细胞中MAGE-1的表达，以了解siRNA的干涉效果。结果：重组构建的pSUPER—MAGE—1载体经双酶切、电泳及插入基因片段序列分析，表明寡核苷酸链成功地插入至预计位点，且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的U87多克隆细胞MAGE-1的表达经RT—PCR、流式细胞术和荧光显微镜检测，2对siRNA均有较明显的干扰作用。结论：载体的成功构建并能对U87细胞中的MAGE—1分子进行RNAi，为进一步研究MAGE—1在肿瘤中的作用，分析基因功能，展开肿瘤基因治疗奠定了基础。     

针对MAGE-1基因RNAi在恶性胶质瘤SHG-44细胞中的作用研究

目的构建抑制黑色素瘤抗原-1(MAGE-1)的siRNA表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞系SHG-44细胞中对MAGE-1基因表达的干涉作用。方法化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE-1基因寡核苷酸链,克隆到经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上,重组构建RNA干涉(RNAi)质粒载体。利用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、流式细胞术和荧光显微镜,检测经稳定转染后SHG-44细胞中MAGE-1的表达,以了解siRNA的干扰效果。结果重组构建的pSUPER-MAGE-1载体经双酶切电泳及插入基因片段序列分析,表明寡核苷酸链成功插入到预计位点,并且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的SHG-44多克隆细胞MAGE-1的表达经RT-PCR、流式细胞术和荧光显微镜检测,2对siRNA均有较明显的干涉作用。结论成功构建了针对MAGE-1基因的siRNA表达载体,抑制SHG-44细胞中的MAGE-1分子的表达。     

针对HER2/neu的siRNA对非小细胞肺癌细胞生长的抑制作用

目的:构建针对HER2/neu的RNA干涉载体,观察对HER2/neu表达抑制及抑制后对非小细胞肺癌生长的影响. 方法:设计和合成长度为64nt的脱氧寡核苷酸链,退火互补成双链,克隆至pSUPER质粒载体,转化DH5α菌株,提取质粒,转染过表达HER2/neu的肺腺癌细胞系SPC-A-1,RT-PCR检测HER2/neu的mRNA表达,Western blot和间接免疫荧光法检测HER2/neu的蛋白表达,FCM分析细胞周期变化,MTT法观察细胞生长. 结果:肺腺癌细胞系SPC-A-1存在HER2/neu过表达;成功构建了HER2/neu特异性RNA干涉载体pSUPER-siHER2;瞬时转染SPC-A-1细胞,HER2/neu的mRNA及蛋白表达均降低;G1期细胞较亲代增加9.9%;肿瘤细胞增殖速度减慢(P＜0.05). 结论:成功构建了HER2/neu RNA干涉载体,转染后可有效降低肺腺癌细胞系SPC-A-1 HER2/neu的mRNA转录及蛋白水平表达,阻滞转染细胞于G1期,造成转染细胞生长速度减慢,这有望为肺癌基因治疗提供一种选择手段.     

VEGF及CD147在单核细胞来源的泡沫细胞中表达动力学的研究

目的:研究CD147,VEGF在单核细胞来源的泡沫细胞中的表达动力学的,探讨CD147,VEGF与动脉粥样硬化的关系.方法:以氧化型低密度脂蛋白诱导,建立人单核细胞系(U937细胞)分化的泡沫细胞模型,通过油红O特殊染色的形态学鉴定.将U937细胞在不同浓度氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL,0,25,50,100,200 mg/L)条件下培养48 h;在100 mg/L ox-LDL条件下,在培养的不同时间点(0,6,12,24,48 h)分别收集泡沫细胞和培养上清,采用流式细胞术检测细胞膜表面CD147,ELISA检测培养上清中VEGF的表达和RT-PCR检测mRNA表达水平.结果:CD147及VEGF表达出现最高峰时的ox-LDL浓度分别为25 mg/L和50mg/L;与100mg/L的氧化型低密度脂蛋白作用6,48 h后,CD147,VEGF表达分别出现最高峰;VEGF mRNA水平出现最高峰时,ox-LDL作用浓度及时间分别为200 mg/L,48 h.CD147mRNA水平出现最高峰时ox-LDL作用浓度及时间分别为25 mg/L,6 h,此后,mRNA水平不变.结论:VEGF及CD147在单核细胞来源的泡沫细胞表达均升高;CD147表达上调早于VEGF,低浓度ox-LDL促进CD147表达,高浓度促进VEGF的表达;U937泡沫细胞中VEGF的mRNA水平与ox-LDL的作用浓度及时间成正相关,泡沫细胞中CD147的mRNA与ox-LDL的作用浓度及时间无关.     

siRNA抑制HER2/neu过表达肺腺癌细胞生长和增殖

背景与目的：30％NSCLC存在HER2／neu过表达，与肿瘤发生、转移、肿瘤血管形成、抗凋亡及化疗耐药等有关。本文通过RNA干涉抑制肺腺癌细胞SPC—A-1 HER2／neu过表达，观察肿瘤细胞周期、增殖及集落形成能力的变化。方法：构建针对HER2／neu的siRNA重组质粒，稳定转染SPC—A-1，通过RT—PCR和Western Blot检测HER2／neu表达；FCM分析细胞周期；MTT法观察细胞增殖，绘制细胞生长曲线；平板集落形成实验检测肿瘤细胞的集落形成能力。结果：成功构建了HER2／neu的siRNA重组质粒，稳定转染靶细胞后可显著降低HER2／neu表达；与亲代细胞相比，G0／G1期细胞增加17．1％，S期细胞减少12．8％；细胞生长速度减慢，集落S1抑制率达到49．0％。结论：针对HER2／neu的siRNA可以显著降低肺腺癌细胞过表达HER2／neu，肿瘤细胞阻滞于G0／G1期，造成细胞增殖减慢，集落形成能力明显下降。因此，siRNA对过表达HER2／neu肺癌的治疗具有潜在应用价值。     

前列腺非霍奇金淋巴瘤6例临床病理学分析

目的:探讨前列腺非霍奇金淋巴瘤的临床病理特征。方法:收集2001～2017年病理诊断为前列腺非霍奇金淋巴瘤6例患者的临床资料,患者年龄49～76岁,中位年龄62岁,临床主要表现为前列腺无痛性肿大伴下尿路梗阻,对6例患者的临床特征、组织学、免疫组化和B系基因重排检测进行观察,结合文献对临床病理特征及鉴别诊断进行探讨。结果:组织学分型包括:弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)4例(66.7%),B淋巴母细胞性淋巴瘤(B-LBL)1例(16.7%),Burkitt淋巴瘤(BL)1例(16.7%)。组织学特征:DLBCL的肿瘤组织呈弥漫性分布,浸润性生长,肿瘤细胞中等偏大,呈圆形、卵圆形;B-LBL主要为形态一致、较多中等偏小呈弥漫分布的淋巴样细胞,凋亡小体和核分裂象易见;BL的肿瘤细胞呈弥漫浸润性生长,瘤细胞呈中等大小,核圆或卵圆形,形态较一致,染色质粗,核分裂象非常易见。1例DLBCL患者进行5次R-CHOP化疗后,至今仍在随访中,余3例DLBCL患者失访;B-LBL患者于诊断1个月后死亡,BL患者放弃治疗后失访。结论:前列腺非霍奇金淋巴瘤分型多为DLBCL,确诊需结合临床及组织病理学基础上应用免疫组化检查及相关分子检测。