CCR5-△32突变基因地域和人群分布的研究进展

艾滋病即获得性免疫缺陷综合症(AIDS)对人类健康造成极大威胁。引起该病的病原体是人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)。HIV-1通过与CD4~+受体以及CC趋化因子受体5(CCR5)或CXC趋化因子受体4(CXCR4)辅受体结合而感染细胞,当CCR5发生32个碱基缺失突变时,其在细胞膜的表达量减少,导致HIV-1无法有效地入侵细胞。我们把这种突变的CCR5称为第一外显子缺失32个碱基的CC趋化因子受体5(CCR5-△32)。近年来,通过对CCR5-△32的深入研究, AIDS的治疗获得很大进展。我们主要总结了该基因的结构功能并且详细统计了不同地区不同人群该基因的分布情况,以期对AIDS的治疗提供帮助。     

小鼠Notch1胞外段高抗原区编码基因的克隆与表达

目的 :克隆小鼠Notch1胞外段高抗原区编码基因 ,并进行原核表达及蛋白纯化 ,为制备mNotch1的单克隆抗体做准备。方法 :计算机分析小鼠Notch1全长 ,PCR扩增其胞外段高抗原区编码基因 ,克隆入载体T -vector进行序列测定 ,然后将测定正确的片段连入GST融合表达载体pGEX - 4T - 1,得到pG -NEF ,转化宿主菌DH5α ,经IPTG诱导 ,SDS -PAGE分析 ,以及新生条带表达形式分析以后 ,用GST亲和层析柱纯化。结果 :小鼠Notch1分子胞外段近膜处约 170个氨基酸区域抗原性较高 ,PCR扩增得到大小约 5 0 0bp的特异性片段 ,序列测定结果与文献报导的完全一致 ;原核表达产物大小约Mr 43× 10 3 ,以包涵体形式存在 ,约占总蛋白的2 5 % ,纯化后目的蛋白含量 >95 %。结论 :成功地进行了小鼠Notch1胞外段高抗原区编码基因的基因克隆、原核表达及蛋白纯化。     

复方抗溃混悬液Ⅱ对创面愈合的疗效观察

目的：探讨自制中药复方抗溃混悬液Ⅱ（ CAUSⅡ）对皮肤溃疡愈合的有效性和安全性。方法将患者随机分为复方抗溃混悬液（ CAUS）组、CAUSⅡ组和对照组,分别为35、39、34例,分别以CAUS、CAUSⅡ、乳酸依沙吖啶溶液湿敷换药。记录疗效情况、创面愈合时间,并观察、记录不良事件情况。结果与对照组比较,CAUS组、CAUSⅡ组痊愈率及有效率,均有显著差异（痊愈率分别为88．57％vs 58．82％,89．74％vs 58．82％,有效率分别为97．14％vs 61．76％,94．87％vs 61．76％,P＜0．05）,但CAUS组与CAUSⅡ组差异无统计学意义（ P＞0．05）。与对照组比较,CAUS组、CAUSⅡ组创面痊愈患者的创面愈合时间,均有显著差异;但CAUS与CAUS组Ⅱ差异无统计学意义（P＞0．05）。三组均未发生明显不良事件。结论 CAUSⅡ可优选用于溃疡创面愈合治疗,安全有效。     

庆大霉素误注眼球内致盲的教训

我院曾收治2例在外院误治的眼科病例,虽经积极救治,也无力挽回视力,教训极其深刻。特予以报道,供同行借鉴。1　病例资料【例1】　因左眼红、痛1周在当地某医疗单位就诊。专科情况:双眼视力0 8,- 2 5DS =1 0。左眼颞侧睫状充血( ) ,压痛( ) ,屈光间质透明,眼底未见异常。诊断     

靶向X区的siRNA抑制乙型肝炎病毒基因的表达和复制

目的构建针对乙型肝炎病毒（HBV）X基因的siRNA表达载体，观察其对HBV基因表达和复制的影响。方法设计并合成针对HBVX区基因的siRNA寡核苷酸，经退火形成双链后克隆人pSUPER载体，构建成功的siRNA表达载体与pTK-Hyg质粒共转染稳定表达HBV的HepG22．2．15细胞，潮霉素抗性筛选获得稳定细胞克隆，对所得细胞培养上清液中的HBsAg和HBeAg进行定量检测，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测靶基因mRNA的抑制效果，荧光定量PCR检测HBVDNA。结果成功构建了针对HBVX基因的siRNA表达载体pSUPER-X1和pSUPER-X2，两种siRNA均能明显抑制HepG22．2．15细胞的HBsAg和HBeAg分泌，抑制率分别为97％和88％，RT-PCR结果显示HBV的mRNA表达降低，荧光定量PCR结果证实siRNA能降低HBVDNA拷贝数2个数量级。结论载体产生的针对HBVX基因的siRNA能高效、特异地抑制HBV基因的表达和复制。     

多参数磁共振影像数据及报告(PI-RADS)评分系统(第二版)联合经直肠超声弹性技术对诊断前列腺癌的临床应用价值

目的探讨多参数磁共振影像数据及报告评分系统第二版(PI-RADS V2)联合直肠超声弹性成像(TRTE)评分法对诊断前列腺癌的价值。方法回顾性分析经前列腺穿刺活检病理证实的前列腺癌163例患者资料。记录经直肠超声弹性成像(TRTE)、多参数磁共振影像数据及报告(PI-RADS V2)评分特征。穿刺方法均采用前列腺系统穿刺(10针)联合磁共振模拟融合靶向穿刺法,以穿刺病理结果作为"金标准",计算TRTE评分法、PI-RADS V2评分法及两者联合应用诊断前列腺癌的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值。结果163例患者中穿刺病理诊断为前列腺癌的患者96例,前列腺良性增生67例;TRTE评分法、(PI-RADS V2)评分法以及两者联合应用诊断前列腺癌的ROC曲线下面积分别为0.674,0.738,0.884。通过ROC曲线得出TRTE评分≥4分为诊断前列腺癌的最佳临界值;RI-RADS V2评分≥4分为诊断前列腺癌的最佳临界值。结论PI-RADS V2评分法高于TRTE评分法,PI-RADS V2评分法及TRTE评分法单独使用或者联合使用能够均能显著提高在临床诊断前列腺癌准确性,两种方法联合使用可以减少不必要的前列腺穿刺;两种方法分别或联合使用均可作为前列腺癌诊断方法。     

糖尿病视网膜病变相关因素的研究进展

糖尿病(Diabetesmellitus,DM)是一种多种病因引起的原发性糖代谢紊乱,糖尿病视网膜病变(DiabeticRetinopathy,DR)是糖尿病最为常见和严重的微血管并发症,已成为主要致盲病因之一,发病率随病程发展而增加。DR具有高发病率、高致盲率、高复发率的特点,严重威胁着人类的生存质量。目前我国DR患病率在城市糖尿病患者中约为50%,其中增殖期糖尿病视网膜病变的比例约为6%[1]。预计到2030年美国将有2500万、全球约有3亿DR患者[2]。中国DM患者中DR发生率为25.2%,且初诊断的2型糖尿病患者中DR发生率就高达12.4%[3]。DR的发生发展与血糖、血脂…     

瞬时转染和稳定转染对RNAi抑制乙型肝炎病毒S基因表达的影响

目的:构建针对乙型肝炎病毒(HBV)S基因的siRNA表达载体Psuper-S1和Psuper-S2,观察瞬时转染及稳定转染对RNAi抑制HBV基因表达作用的影响.方法:设计并合成针对HBV S基因的siRNA寡核苷酸,经退火形成双链后克隆入Psuper载体,构建成功的siRNA表达载体分别瞬时转染和稳定转染表达HBV的2.2.15细胞,对所得细胞上清中的HBsAg和HBeAg进行定量检测,RT-PCR检测siRNA对靶基因Mrna的抑制效果,并比较两种转染方式对RNAi抑制HBV基因表达作用的影响.结果:在稳定转染并经潮霉素筛选所得的单克隆细胞株中,Psuper-S1和Psuper-S2均能明显抑制HBsAg及HBeAg的分泌(P<0.01),抑制率分别为83%和78%,RT-PCR结果证实HBV的Mrna明显降低,而瞬时转染细胞在蛋白质水平上及Mrna水平上的结果则比稳定转染的结果逊色.结论:针对HBV S基因的siRNA能稳定、高效、特异地抑制HBV基因的表达,转染效率对于靶基因的RNA干涉作用有明显的影响.     

针对尿激酶型纤溶酶原激活剂的siRNA的载体构建与表达

目的:构建针对尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)mRNA的siRNA的表达载体,并观察其对转染细胞中的uPA表达的抑制作用. 方法:化学合成用于产生针对uPA的发卡状RNA的寡核苷酸,各64个碱基,退火后插入线性化的pSUPER载体的H1启动子下游. 重组载体经限制性酶切和测序. 把构建的载体转染乳腺癌细胞系MDA-MB 231,观察其对uPA的干扰作用. 结果:限制性酶切和序列测定表明成功构建了可以表达针对uPA的发卡状RNA表达载体,该载体表达的发卡状RNA能够有效的下调uPA的表达. 结论:成功的构建了针对uPA的发卡状RNA表达载体,为进一步研究uPA的功能和肿瘤的基因治疗打下基础.