幼年和成年猪松质骨脱细胞基质有机成分和成骨诱导能力的比较

目的：比较幼年和成年猪松质骨脱细胞基质（DCBM）的成骨特性。方法：制备幼年和成年猪DCBM并验证脱细胞效果。胶原和糖胺聚糖（GAGs）定量检测、Masson三色和阿利新蓝染色评估脱细胞前后胶原和GAGs含量及分布。免疫组化检测松质骨基质中骨形态发生蛋白-2（BMP-2）、基质金属蛋白酶-13（MMP-13）和骨钙蛋白（OCN）的分布情况。qPCR检测幼年和成年DCBM诱导复植间充质干细胞（MSC）的I型胶原（Col-I）、碱性磷酸酶（ALP）、BMP-2和OCN等成骨分化指标的基因表达。纳米液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）分析DCBM的蛋白组成。结果：定量分析显示,幼年松质骨较成年松质骨在脱细胞前后胶原和GAGs含量更高。幼年松质骨脱细胞前后BMP-2、MMP-13、OCN等的表达均高于成年松质骨。成骨诱导实验显示复植于幼年DCBM的MSC,ALP、Col-I等的mRNA的表达量高于复植于成年DCBM。蛋白质谱GO分析和丰度分析显示幼年DCBM较成年DCBM肽链种类丰富,包含成纤维细胞生长因子、转化生长因子、胰岛素样生长因子等促骨生长细胞因子。结论：同等条件下制备的幼年DCBM与成年猪DCBM比较含有更丰富的促骨生长细胞因子,具有更强的成骨诱导性能。     

氢气生物学机制的研究进展

在传统生物学意义上,氢气被广泛用于生物医学、航空、化工等领域。近年来有报道认为,氢气可作为一种抗氧化剂,可特异性中和体内毒性自由基,同时减少炎症递质释放、改善血流动力学、抑制白细胞活性从而达到抗感染作用。此外,氢气还可对抗自由基引起的致电辐射而具备抗辐射作用。现就氢气的抗氧化生物学作用进行综述。     

新医改视野下医生多点执业及其政府监管研究——以温州市为例

新医改提出了“研究探索注册医师多点执业”方案,这意味着我国医师制度的重大变革,医生的多点执业再次成为各方关注的焦点。以温州市为例,分析医生多点执业的现状与存在的问题,认为政府应在医生多点执业的考核、监管、对多点执业中医生和民众的引导上扮演重要角色。     

MELD相关评分体系对乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭患者预后的预测价值

目的比较分析MELD、MELD-Na、MELDNa、MESO、iMELD、UKELD六种MELD相关评分体系预测乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭(ACHBLF)患者的预后。方法纳入温州医学院附属第一医院327例ACHBLF患者,分别计算各个MELD评分体系值,比较各评分系统在死亡组和生存组中的差异。通过受试者工作特征(ROC)曲线和曲线下面积(AUC)进行比较分析。结果死亡组MELD、MELD-Na、MELDNa、MESO、iMELD、UKELD值分别是29.2±5.6、37.1±12.6、31.1±5.1、26.4±13.8、57.6±23.3、72.8±27.5,虽高于生存组的27.1±6.1、36.3±13.8、29.2±5.8、27.0±16.7、56.1±29.8、70.2±21.4,但除MELD(P=0.02)和MELDNa(P=0.02)评分外,其余差异无统计学意义(P=0.374,P=0.745,P=0.639,P=0.375);各评分系统的AUC分别为0.630、0.556、0.609、0.537、0.555、0.530。结论除MELD和MELDNa评分可能有一定评判价值外,MELD相关评分体系总体上对预测ACHBLF的预后表现较差,无法对ACHBLF进行有效、准确的预测。     

参麦注射液对肝硬化失代偿期患者凝血系统的影响

目的:探索参麦注射液对肝硬化失代偿期患者凝血系统的影响。方法:采用随机数字表法将62例失代偿期肝硬化患者随机分为治疗组与对照组,治疗组为综合治疗的基础上加用参麦注射液治疗,对照组仅采用综合治疗。分别测定治疗前与治疗后28d的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)等凝血系统指标,同时观察两组患者治疗期间的出血情况。结果:同组治疗前后PT、APTT和FIB的改变均有统计学意义(P<0.05)。对照组治疗前后各凝血指标差值分别为(1.3±0.4)s,(4.1±0.6)s,(-0.1±0.1)g/L,而治疗组治疗前后各凝血指标差值分别为(3.4±0.7)s,(7.3±1.0)s,(-0.4±0.1)g/L,两组差值的比较差异有显著统计学意义(P<0.05)。两组治疗期间的出血发生率差异无统计学意义。结论:参麦注射液能改善肝硬化失代偿期患者的凝血功能,并有良好的临床安全性。     

离体大鼠胰腺去细胞生物支架的制备与鉴定

目的 通过离体灌注加浸泡的方法制备大鼠胰腺去细胞生物支架(PDBC),为胰岛和胰腺的组织工程研究提供新型天然生物支架. 方法 健康成年大鼠20只,以物理冻融及灌注洗脱法(脱氧胆酸钠+ DNAase),采用胆管、胰管联合逆向在体灌流法获取胰腺去细胞生物支架.并通过基因组DNA定量定性分析,组织化学染色、免疫荧光组织化学染色、荧光积分吸光度分析、透射电镜观察等进一步测定细胞残留以及观察去细胞支架,如胶原IV、纤维连接蛋白和层黏连蛋白等成分的保留. 结果 DNA定性分析显示,实验组未见明显DNA条带,对照组DNA条带可达100bp,定量检测实验组DNA残留不足对照组的5％;组织化学染色和透射电镜观察均表明,去细胞支架无细胞残留,细胞外支架连续性完好,脉管支架保存完整;免疫荧光结果表明,胶原蛋白、弹性蛋白等细胞外支架成分保留较完整,未见明显细胞核成分残留. 结论 运用冻融加浸泡灌注制备的胰腺去细胞生物支架,细胞去除彻底,细胞外支架保留完好.     

灌注法制备离体大鼠心脏脱细胞基质

目的 探索制备离体大鼠心脏脱细胞生物支架材料的新方法,为心脏组织工程研究提供三维立体天然支架.方法 取30只成年SD大鼠心脏,运用冻融加化学萃取的组织工程学方法 (胰蛋白酶、十二烷基硫酸钠和曲拉通X-100)处理离体大鼠心脏,同时观察心脏大体形态及颜色变化,并对脱细胞支架进行基因组DNA分析;HE染色,免疫荧光法,扫描和透射电镜进一步检测鉴定脱细胞支架的生物学特征.结果 心脏脱细胞支架外观透明,包膜完整,维持心脏三维立体结构,肉眼可见心脏内脉管系统;脱细胞支架DNA残留量不及对照组的3%;HE染色、扫描和透射电镜结果 显示,心脏脱细胞生物支架去细胞彻底,细胞外基质网状结构保留完整;免疫荧光结果 表明,胶原、弹性蛋白等细胞外支架成分保留较完整,未见明显细胞核成分残留.结论 运用冻融加化学萃取法所制备的离体心脏脱细胞生物支架去细胞彻底,细胞外基质保留较完整,是较为理想的心脏三维立体生物支架材料.     

去细胞全肾生物支架的制备与鉴定

目的 通过灌注加浸泡法制备全肾细胞外基质支架,并对该生物支架进行鉴定。方法 健康成年SD大鼠20只,取肾,行肾动脉留置针插管,灌注压3.6mmHg,恒温37℃依次浸泡灌注肝素化PBS溶液、0.05%胰蛋白酶溶液、1%十二烷基硫酸钠（SDS）溶液、1% Trition X-100溶液以及含青、链霉素的PBS溶液。处理后,行DNA定量与定性分析,透射电镜、HE染色及免疫荧光观察残留细胞核成分,进一步丙烯腈-丁二烯-苯乙烯树脂(ABS)铸型观察肾内血管分布情况。结果 去细胞组DNA含量较对照组下降了97%,琼脂糖凝胶电泳未见明显DNA条带;透射电镜、HE染色及免疫荧光观察去细胞组保留了大量细胞外基质,未见明显细胞核成分残留;铸型标本显示去细胞组血管较稀疏,分支完整、清晰。结论 联合酶消化法与去垢剂洗涤法,经灌注加浸泡法处理的全肾,可有效清除肾内所有细胞成分,较好地保留细胞外基质支架和血管网络结构,是一种简单易行且较为理想的制备组织工程肾生物支架的方法。     

医药企业社会责任现状分析及模型重建

目的：了解当前浙江省医药企业社会责任履行现状,提出医药企业社会责任的理论模型。方法：基于卡罗尔社会责任金字塔理论,综合考虑当前浙江省医药企业的特殊性,阐述医药企业社会责任内涵并构建其理论模型。结论：医药企业社会责任的金字塔模型以质量安全保障为基础,向上依次为经济责任、法律责任和公益责任。该模型的提出使医药企业可以根据自身发展的水平履行相应的社会责任,同时有利于维护医药行业自身的品质。