DG01株HSN1亚型禽流感病毒全基因组序列分析

根据国内外已公布的AIVH5N1亚型全基因组序列设计了8对引物，对H5N1亚型高致病力禽流感病毒毒株A／Duck／Guangdong／DG01／05（简称DG01）毒株进行了全基因组RT-PCR、测序及序列分析。DG01株基因组由PB22341bp，PB1 2341bp，PA2 233bp，HA1 779bp。NP1 565bp，NA1 398bp，M1 027bp。NS 875bp8个节段组成，与往年及同年一些流行株比较分析结果显示。DG01株具有高致病性禽流感病毒基因特征，NA基因及NS1基因均有部分缺失，从基因特点分析属于2005年流行代表株。     

石蜡切片研究H9N2亚型禽流感病毒的免疫原性

目的 用石蜡切片评估龠流感病毒A／Chicken／Guangdong／SS／94(H9N2)株的免疫原性，以获得免疫原性良好的疫苗候选株。方法 以A／CKcken／Guangdong／SS／94(H9N2)株为抗原制备油乳剂灭活疫苗免疫1Od龄SPF鸡，免疫21d后，以该毒株静脉注射免疫组与非免疫对照组，定期剖杀试验鸡并取脑、心肌、肺、胰腺、肝、肾、脾、气管和法氏囊等组织用石蜡切片进行病理组织学检查。结果 两组试验鸡的的病理组织学变化有明显差异，免疫组试验鸡获得保护，而对照组病变明显。结论 A／CKcken／Guangdong／SS／94(H9N2)株的免疫原性良好，可作为制备油乳剂灭活疫苗的候选株。     

病毒性关节炎的研究

作者根据广东省江门市某鸡场以破行鸡为主的鸡病流行情况,临床症状及病理变化等,作出鸡病毒性关节炎的假定性诊断。 从病鸡的关节滑液中分离到一种病毒,该病毒能在鸡胚卵黄囊内、尿囊腔内和绒毛尿囊膜上生长并致死鸡胚,使鸡胚皮肤呈暗红色。病毒也能在鸡胚肾细胞、鸡胚成纤维细胞上生长并引起细胞病变。病毒对鸡红细胞无凝集作用,用含病毒的鸡胚尿囊液接种敏感鸡后,可复制出与临床所见相类似的疾病。 在电镜下观察,病毒直径为63～74nm,在感染的鸡胚绒毛尿囊膜上可见到胞浆内的包涵体,经测定,病毒含有双股RNA,对氯仿、乙醚、60~0C1小时有抵抗力,对胰酶敏感。 实验结果表明:被分离到的病毒为传染性关节炎病毒,因此江门市某鸡场所发生的以跛行为主要特征的疾病可以确诊为鸡病毒性关节炎。     

鸡传染性支气管炎的研究——Ⅰ.广州地区鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定

本文概述了广州地区某鸡场传染性支气管炎病的发生及流行情况并说明了该场的鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定过程。 被分离出来的病毒自第二代鸡胚继代起,引起鸡胚产生萎缩等病变,在雏鸡气管内接种,经18～36小时,被接种的雏鸡出现气管罗音等IB病的临床症状。病毒对1％的鸡红细胞无凝集作用,并在鸡胚内干扰了B_1系新城疫病毒的血凝素的形成;病毒也可被人工诱发病的康复鸡免疫血清所中和。从临床观察及实验室检验的结果来看,可以证明,被分离出来的病毒为IBV。某鸡场的呼吸道病中,除CRD外,还有IB的存在。     

金刚烷胺和奥司他韦体外抗H5N1亚型禽流感病毒的作用

 【目的】 观察体外单用金刚烷胺?奥司他韦及两药联合使用对两株H5N1亚型的禽流感病毒分离株(AIV127?AIV174)的抑制作用,了解广东地区分离的不同H5N1毒株之间药物敏感性的差异,为临床合理应用抗病毒药物提供科学依据?【方法】 建立体外H5N1感染模型,根据药物与病毒?细胞的不同作用,通过3种给药方式,使用细胞病变(CPE)?组织培养半数感染量(TCID50)评估抗病毒药物对H5N1的体外抑制作用? 【结果】 三种给药方式金刚烷胺联合奥司他韦,均比单用金刚烷胺体外抑制AIV127及AIV174效果明显(P < 0.01);而仅在治疗给药方式,两者联合比单用奥司他韦效果明显(P < 0.01)?三种给药方式金刚烷胺?奥司他韦及联合用药对同一亚型H5N1 AIV127比AIV174毒株均较敏感(P < 0.01)? 【结论】 抗病毒药物对不同的禽流感病毒毒株之间敏感性存在差异,应根据不同毒株给予相应的抗病毒治疗     

沙门氏菌的invA基因序列分析与分子检测

目的采用聚合酶链反应和DNA序列分析,了解沙门氏菌侵袭蛋白A(invasionproteinA,invA)基因核苷酸序列有何差异,建立沙门氏菌的分子快速检测方法。方法根据沙门氏菌的invA基因核苷酸序列设计一对引物,应用聚合酶链反应技术,分别对3种沙门氏菌标准菌株的invA基因及6种非沙门氏菌株进行PCR扩增,并将扩增的片段进行克隆及序列分析。结果3种沙门氏菌标准菌株PCR均扩增出283bp的特异条带,非沙门氏菌皆无特异带扩增;DNA序列分析证实,沙门氏菌的invA基因核苷酸序列比较保守。结论本研究建立的检测沙门氏菌方法具有较高的特异性与灵敏性,invA基因的序列分析为进一步研究沙门氏菌不同分离株的流行病学、遗传学与分子致病机理奠定了基础。     

抗鸡法氏囊病和新城疫高免蛋黄液的研制与应用

本文报道了用鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)和新城疫病毒(NDV)经多次、高度免疫的健康蛋鸡,从其所生产的蛋中,提取蛋黄,制成抗IBDV和NDV二联高免蛋黄液。其抗NDV的HI抗体和抗IBDV的中和抗体、沉淀抗体均达到较高的水平。经室内人工发病治疗试验及大田生产应用证明:鸡只注射二联高免蛋黄液之后,在短时间内对IBD及ND有预防作用;对刚发病的鸡群,及时用其注射治疗,效果显著。     

广东地区家畜、家禽肠道大肠杆菌药物敏感性和O157:H7分离状况

目的：了解O157大肠杆菌在健康人、家畜和家禽中的存在情况和粪便中分离到的大肠杆菌的药物敏感性，为病原大肠杆菌耐药率增高寻找依据。方法：2000～2001年选健康成人、小孩和健康家畜、禽粪便标本620份，一部分直接划种于选择培养基，37℃培养24h；另一部分用EC肉汤培养基，37℃培养18h，以进行增菌，然后转种于CT-SMAC平板，37℃培养24h。然后进行血清学鉴定以判断是否为O157大肠杆菌。用低片法测定分离到的620株大肠杆菌对氨苄西林(AMP)、氨苄西林／舒巴坦(AMS)、庆大霉素(GEN)、环丙沙星(CIP)和氧氟沙星(OFX)的药物敏感性；用琼脂平皿二倍稀释法测定不同来源标本分离的部分大肠杆菌对CIP和OFx的MIC值。结果：在健康猪、牛和鸡的粪便中均找到了O157大肠杆菌，检出率在1．5％左右，健康成人和小孩粪便中均未找到O157大肠杆菌；健康成人、小孩、家畜和家禽粪便中分离的大肠杆菌，β-内酰胺酶产生率较低，在6％～12％之间；分离的大肠杆菌对氨苄西林、氨苄西林／舒巴坦和庆大霉素的耐药率较低，在10％以下，且人和家畜、禽粪便分离的大肠杆菌的耐药率差别不大；从人粪便分离的大肠杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药率低，而从家畜、禽粪便分离的大肠杆菌的耐药率高。结论：在广东，O157大肠杆菌亦存在于部分家畜、禽肠道中，有造成食物污染的危险；人类和动物肠道中正常菌群的大肠杆菌B一内酰胺酶产生率低，对常用的抗生素亦有耐药的情况，但耐药率低；对氟喹诺酮类药物，人和家畜、禽粪便分离的大肠杆菌的耐药率差别较大。     

DG01株H5N1亚型禽流感病毒全基因组序列分析

根据国内外已公布的AIV H5N1亚型全基因组序列设计了8对引物,对H5N1亚型高致病力禽流感病毒毒株A/Duck/Guangdong/DG01/05 (简称DG01)毒株进行了全基因组RT-PCR、测序及序列分析.DG01株基因组由PB2 2 341bp, PB1 2 341bp, PA 2 233bp, HA 1 779bp, NP 1 565bp, NA 1 398 bp, M 1 027bp, NS 875 bp 8个节段组成,与往年及同年一些流行株比较分析结果 显示,DG01株具有高致病性禽流感病毒基因特征,NA基因及NS1基因均有部分缺失,从基因特点分析属于2005年流行代表株.     

禽流感病毒感染小鼠前后表面蛋白编码基因变异情况分析

目的了解禽流感病毒（AIV）在感染小鼠前后表面蛋白编码基因的特点及变异情况。方法在A／Goose／Guangdong／NH／2003（H5N1）感染小鼠肺组织的第12小时和第9天各分离1株AIV病毒，通过鸡胚增殖后提取RNA，反转录合成cDNA，经PCR扩增和产物纯化构建重组质粒，用双脱氧链终止法进行核苷酸序列测定并进行基因特性分析。结果3株病毒HA基因的核苷酸序列同源性为99．6％～99．8％，推导氨基酸序列的同源性为99．3％～99．6％。3株病毒NA基因的核苷酸序列同源性为99．8％-99．9％，均为同义突变。M基因未发生任何变异。结论AIV感染小鼠后HA基因出现变异，NA和肘基因未出现有意义的突变。