沉默G250基因对肾癌786-0细胞移植瘤Skp2表达的影响

目的探讨沉默G250基因对肾癌786-0细胞移植瘤S期激酶相关蛋白2(Skp2)表达的影响。方法构建靶向G250的siRNA表达质粒pshRNA-G250并转染肾癌786-0细胞,12只BALB/c裸鼠分为阴性对照组和干扰成瘤组,干扰成瘤组每只裸鼠皮下接种5×106个G250基因沉默后的肾癌786-0细胞(786-0/si-G250-b),以转染空质粒的细胞(786-0/si-G250-0)为对照。成瘤3 w后,处死裸鼠后切取瘤块,采用组织芯片技术及免疫组化SP法检测Skp2的表达。结果 5×106个细胞皮下接种BALB/c裸鼠3 w后均成瘤,Skp2在阴性对照组和干扰成瘤组裸鼠的肿瘤组织中表达率分别为83.33%(5/6)和16.67%(1/6),两者有显著性差异(P=0.04)。结论 G250基因表达沉默抑制了肾癌细胞移植瘤Skp2的表达。     

枸橼酸西地那非(万艾可)20周年临床应用中国专家共识

枸橼酸西地那非(万艾可)自研发出以来,从心绞痛到勃起功能障碍,再到肺动脉高压以及生殖医学等领域,在临床中发挥了重要作用,使无数患者获益。为了使广大医生对万艾可临床应用有更清晰的认识,同时也为了更好地总结临床应用经验,中国性学会、中华医学会男科学分会组织相关学科的一线专家,结合国内外文献及国内专家的临床经验,共同讨论、制定本共识,旨在为临床医生提供用药指导和参考。     

肾癌相关抗原G250致敏的树突状细胞瘤苗体外诱导特异性抗肾癌免疫

目的 探讨肾癌相关抗原G250致敏的树突状细胞(DC)瘤苗体外诱导自体T淋巴细胞特异性抗肾癌免疫效应.方法 自健康人外周血中提取单核细胞,用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素-4刺激活化、经肾癌相关抗原G250致敏(同时设未致敏的DC为对照),用流式细胞仪检测DC细胞和T细胞表面分子的表达,MTT检测肾癌相关抗原G250致敏的DC刺激自体T淋巴细胞增殖效应,以及诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对不同靶细胞(肾癌细胞株786-0、肺癌细胞株A549)的杀伤活性.结果 两组细胞均高表达CD40、CD80、CD83、CD86、HLA-DR,较低表达CD1a,两组无明显差异(P＞0.05).经G250蛋白致敏的DC激发自体T细胞增殖的能力明显强于未致敏组的DC,由其激活的CTL对786-0的杀伤率明显高于对照组(P＜0.05),而两组对A549细胞均无明显杀伤活性.结论 肾癌相关抗原G250致敏的DC瘤苗体外可有效的诱导特异性抗肾癌效应.     

成人肾母细胞瘤的临床特点

目的 探讨成人肾母细胞瘤的临床特点.方法肾母细胞瘤患者6例.男4例,女2例.年龄21～58岁,平均31岁.临床表现为腰腹痛4例,其中伴肉眼血尿1例,伴发热1例;腰腹部肿块2例.查体腹部能触及肿块者4例,有肾区叩击痛5例,下腹部压痛1例.6例尿常规检查2例红细胞(++).6例B超检查发现5.0 cm×5.0 cm～22.0 cm×25.0 cm的低回声团块,边界尚清.4例CT检查均发现密度不均、边界不清的实质性肿块,其中1例增强后肿物不均匀强化,中心有出血坏死;CT值11～40 HU,平均22.5 HU,增强后CT值35～78 HU,平均63.5 HU.2例MRI检查,提示实性占位性病变.3例IVU检查提示肾影增大,肾盏受压变细,肾盂积水1例.术前诊断肾肿瘤5例、盆腔包块1例.6例均手术治疗.根治性肾切除术5例,卵巢切除术1例,均同时行腹膜后淋巴结清扫术.术中见肿瘤侵犯胰尾1例,侵犯侧腹壁1例,侵犯下腔静脉1例;2例肾门淋巴结＞1.5 cm×1.5 cm.剖开肿物见切面灰黄或灰白色,4例包膜完整,3例肿瘤中心出血坏死.术后接受化疗加放疗4例,单纯化疗2例.结果 按美国国家肾母细胞瘤研究组(NWTS)分期:Ⅰ期1例、Ⅱ期2例、Ⅲ期2例、Ⅳ期1例.6例均顺利手术切除肿瘤.肿瘤直径4.5 cm～25.0 cm,平均11.8 cm.术后病理确诊,其中组织学分型显示分化良好型5例,分化不良型1例.有淋巴结转移者2例,局部浸润者3例,肺转移者1例(同时存在局部浸润).术后随访1～7年,平均3.5年.5例无瘤生存,1例术后2年死于肺转移. 结论 成人肾母细胞瘤患者就诊时大多已有肿瘤转移或浸润,发生血行转移者也明显多于其他肾肿瘤,早期诊断、根治性手术及术后放化疗可提高生存率.     

后腹腔镜配合经皮肾盂镜治疗输尿管结石合并肾结石:附2例报告

目的 探讨后腹腔镜配合经皮肾盂镜治疗输尿管结石合并肾结石的可行性.方法 后腹腔镜配合经皮肾盂镜治疗输尿管结石合并肾结石2例.术中暴露满意,手术时间分别为70、80min,术中出血约20ml.结果 结石全部取出,术后恢复快,无并发症.结论 后腹腔镜配合经皮肾孟镜治疗输尿管结石合并肾结石安全有效.     

实时荧光定量RT-PCR检测siRNA表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA的表达

目的评价实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测小干扰RNA（siRNA）表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA表达的可靠性,以建立稳定的RNAi技术。方法体外合成四条针对G250基因的siRNA,并设计阴性对照和空白对照,转染肾癌786-0细胞株;根据G250 mRNA的序列设计特异性引物,荧光染料SYBR Green Ⅰ法定量RT-PCR测定G250 mRNA的表达情况。结果四条siRNA分别使G250 mRNA表达量降低了35.56%、49.27%、45.88%、65.13%,阴性对照和空白对照组无明显变化。结论实时荧光定量RT-PCR技术可以准确地检测mRNA的表达,可以用来评价siRNA的有效性。     

肾盂鳞状细胞癌临床特点分析

目的 探讨肾盂鳞状细胞癌的诊治特点.方法 回顾性分析1991年10月至2009年5月收治8例肾盂鳞状细胞癌患者资料.临床表现血尿8例,腰痛7例,腹部包块1例.B超检查8例,IVU检查8例,CT检查4例.术前诊断为肿瘤3例,诊断为肾结石5例,结石术中发现肿瘤并经冰冻病理确诊2例.8例患者均经手术治疗,行根治性肾输尿管切除4例、单纯性肾切除3例、姑息性切除术1例.结果 8例病理诊断均为鳞状细胞癌.中分化6例,高分化和低分化各1例;pT1 1例,pT2 1例,pT3 3例,pT4 3例;淋巴结转移2例.获随访7例,失访1例.术后生存时间2～42个月,中位时间6个月,患者均死于肿瘤复发及转移.结论 肾盂鳞状细胞癌恶性程度高,常合并结石,术前诊断困难,确诊时多为中晚期,术后短期内易复发转移,预后极差.

Abstract：

Objective To review the diagnosis and treatment of squamous cell carcinoma of renal pelvis. Methods The clinical data from October 1991 to May 2009 of eight cases of squamous cell carcinoma of renal pelvis were reviewed and analyzed retrospectively. The symptoms of the patients were hematuria (eight cases), pain (seven cases) and abdominal mass (one case). All patients underwent B-ultrasound and IVU examination and four cases underwent CT scan. Three cases were diagnosed as having a tumor before surgery. Five cases were diagnosed as renal calculus, two of the five cases were diagnosed by intraoperative frozen section. Radical nephroureterectomy were performed in four cases, nephrectomy in three cases and palliative resection in one case. Results Histological classification revealed that six cases were moderately differentiated, one case was well differentiated and one case was poorly differentiated. Two cases had stage pT1/pT2 and six cases had stage pT3/pT4. 2 cases had regional lymph nodes metastasis. Seven cases were followed-up. All patients died of tumor recurrence or metastasis. The median tumor specific survive time was six months (range from two months to 42 months). Conclusions Squamous cell carcinoma of renal pelvis is often occurs concurrently with urolithiasis which could lead to difficulty in diagnose before operation. As the most of the patients were diagnosed with advanced stage disease, squamous cell carcinoma of renal pelvis tended to early recurrence and metastasis and the prognosis was very poor.     

枸橼酸西地那非有效治疗2型糖尿病患者勃起功能障碍

男性糖尿病患者中90%为2型糖尿病(非胰岛素依赖型),勃起功能障碍(ED)是这类患者的常见并发症。Boulton等的研究评价了西地那非对2型糖尿病患者ED的疗效,并将结果与糖化血红蛋白浓度和慢性糖尿病并发症等因素进行了关联比较。在这项双盲、对照试验中,患者(平均年龄59岁)随机接受     

尿道球部多发巨大结石1例

患者,男,42岁。于7年前无明显诱因出现排尿稍受限,尿线略变细;自己能于会阴部触及肿物,可活动;肿物移动后常可排尿顺畅,无血尿、尿频、尿急、尿痛及肉眼血尿。因症状不重,一直未进行诊治。2005年3月到当地医院行B超检查示尿道结石,于2005年4月25日以“尿道结石”收入我科。入院     

抗人晚期糖基化终产物受体胞外段不同表位单克隆抗体的制备

目的 制备抗人晚期糖基化终产物受体(RAGE)胞外段单克隆抗体。方法 用纯化人重组RAGE胞外段(氨基酸序列23～342)免疫Balb／c小鼠，取其脾细胞与NS—1融合制备杂交瘤，经筛选和两次克隆化，从制备的腹水中纯化单克隆抗体。结果和结论 获得两株杂交瘤细胞B2．2和E10，其分泌单抗的亚型均为IgG2b。经ELISA、Westernblot和流式细胞仪鉴定，证明两株单抗均可结合重组RAGE及表达于细胞表面的RAGE，且两株抗体识别的位点为远隔表位，所建立的双夹心法可用于检测可溶性重组RAGE。这两株抗体将为研究RAGE相关疾病提供有效的工具。