沉默G250基因对肾癌786-0细胞移植瘤Skp2表达的影响

目的探讨沉默G250基因对肾癌786-0细胞移植瘤S期激酶相关蛋白2(Skp2)表达的影响。方法构建靶向G250的siRNA表达质粒pshRNA-G250并转染肾癌786-0细胞,12只BALB/c裸鼠分为阴性对照组和干扰成瘤组,干扰成瘤组每只裸鼠皮下接种5×106个G250基因沉默后的肾癌786-0细胞(786-0/si-G250-b),以转染空质粒的细胞(786-0/si-G250-0)为对照。成瘤3 w后,处死裸鼠后切取瘤块,采用组织芯片技术及免疫组化SP法检测Skp2的表达。结果 5×106个细胞皮下接种BALB/c裸鼠3 w后均成瘤,Skp2在阴性对照组和干扰成瘤组裸鼠的肿瘤组织中表达率分别为83.33%(5/6)和16.67%(1/6),两者有显著性差异(P=0.04)。结论 G250基因表达沉默抑制了肾癌细胞移植瘤Skp2的表达。     

实时荧光定量RT-PCR检测siRNA表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA的表达

目的评价实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测小干扰RNA（siRNA）表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA表达的可靠性,以建立稳定的RNAi技术。方法体外合成四条针对G250基因的siRNA,并设计阴性对照和空白对照,转染肾癌786-0细胞株;根据G250 mRNA的序列设计特异性引物,荧光染料SYBR Green Ⅰ法定量RT-PCR测定G250 mRNA的表达情况。结果四条siRNA分别使G250 mRNA表达量降低了35.56%、49.27%、45.88%、65.13%,阴性对照和空白对照组无明显变化。结论实时荧光定量RT-PCR技术可以准确地检测mRNA的表达,可以用来评价siRNA的有效性。     

肾盂鳞状细胞癌临床特点分析

目的 探讨肾盂鳞状细胞癌的诊治特点.方法 回顾性分析1991年10月至2009年5月收治8例肾盂鳞状细胞癌患者资料.临床表现血尿8例,腰痛7例,腹部包块1例.B超检查8例,IVU检查8例,CT检查4例.术前诊断为肿瘤3例,诊断为肾结石5例,结石术中发现肿瘤并经冰冻病理确诊2例.8例患者均经手术治疗,行根治性肾输尿管切除4例、单纯性肾切除3例、姑息性切除术1例.结果 8例病理诊断均为鳞状细胞癌.中分化6例,高分化和低分化各1例;pT1 1例,pT2 1例,pT3 3例,pT4 3例;淋巴结转移2例.获随访7例,失访1例.术后生存时间2～42个月,中位时间6个月,患者均死于肿瘤复发及转移.结论 肾盂鳞状细胞癌恶性程度高,常合并结石,术前诊断困难,确诊时多为中晚期,术后短期内易复发转移,预后极差.

Abstract：

Objective To review the diagnosis and treatment of squamous cell carcinoma of renal pelvis. Methods The clinical data from October 1991 to May 2009 of eight cases of squamous cell carcinoma of renal pelvis were reviewed and analyzed retrospectively. The symptoms of the patients were hematuria (eight cases), pain (seven cases) and abdominal mass (one case). All patients underwent B-ultrasound and IVU examination and four cases underwent CT scan. Three cases were diagnosed as having a tumor before surgery. Five cases were diagnosed as renal calculus, two of the five cases were diagnosed by intraoperative frozen section. Radical nephroureterectomy were performed in four cases, nephrectomy in three cases and palliative resection in one case. Results Histological classification revealed that six cases were moderately differentiated, one case was well differentiated and one case was poorly differentiated. Two cases had stage pT1/pT2 and six cases had stage pT3/pT4. 2 cases had regional lymph nodes metastasis. Seven cases were followed-up. All patients died of tumor recurrence or metastasis. The median tumor specific survive time was six months (range from two months to 42 months). Conclusions Squamous cell carcinoma of renal pelvis is often occurs concurrently with urolithiasis which could lead to difficulty in diagnose before operation. As the most of the patients were diagnosed with advanced stage disease, squamous cell carcinoma of renal pelvis tended to early recurrence and metastasis and the prognosis was very poor.     

成人肾母细胞瘤的临床特点

目的 探讨成人肾母细胞瘤的临床特点.方法肾母细胞瘤患者6例.男4例,女2例.年龄21～58岁,平均31岁.临床表现为腰腹痛4例,其中伴肉眼血尿1例,伴发热1例;腰腹部肿块2例.查体腹部能触及肿块者4例,有肾区叩击痛5例,下腹部压痛1例.6例尿常规检查2例红细胞(++).6例B超检查发现5.0 cm×5.0 cm～22.0 cm×25.0 cm的低回声团块,边界尚清.4例CT检查均发现密度不均、边界不清的实质性肿块,其中1例增强后肿物不均匀强化,中心有出血坏死;CT值11～40 HU,平均22.5 HU,增强后CT值35～78 HU,平均63.5 HU.2例MRI检查,提示实性占位性病变.3例IVU检查提示肾影增大,肾盏受压变细,肾盂积水1例.术前诊断肾肿瘤5例、盆腔包块1例.6例均手术治疗.根治性肾切除术5例,卵巢切除术1例,均同时行腹膜后淋巴结清扫术.术中见肿瘤侵犯胰尾1例,侵犯侧腹壁1例,侵犯下腔静脉1例;2例肾门淋巴结＞1.5 cm×1.5 cm.剖开肿物见切面灰黄或灰白色,4例包膜完整,3例肿瘤中心出血坏死.术后接受化疗加放疗4例,单纯化疗2例.结果 按美国国家肾母细胞瘤研究组(NWTS)分期:Ⅰ期1例、Ⅱ期2例、Ⅲ期2例、Ⅳ期1例.6例均顺利手术切除肿瘤.肿瘤直径4.5 cm～25.0 cm,平均11.8 cm.术后病理确诊,其中组织学分型显示分化良好型5例,分化不良型1例.有淋巴结转移者2例,局部浸润者3例,肺转移者1例(同时存在局部浸润).术后随访1～7年,平均3.5年.5例无瘤生存,1例术后2年死于肺转移. 结论 成人肾母细胞瘤患者就诊时大多已有肿瘤转移或浸润,发生血行转移者也明显多于其他肾肿瘤,早期诊断、根治性手术及术后放化疗可提高生存率.     

人晚期糖基化终产物受体胞质内段融合蛋白表达载体的构建与表达

目的构建人晚期糖基化终产物受体胞质内段(hRAGE-C)GST融合蛋白的重组原核基因表达载体并进行表达与纯化,研究其功能并鉴定与其相互作用的蛋白。方法采用PCR方法扩增hRAGE基因编码区的胞质内段,并将其重组于pGEX-KG载体中。重组质粒经PCR、酶切、序列鉴定分析后,转化大肠杆菌BL21,以异丙基β-D硫代半乳糖(IPTG)诱导产生hRAGE胞质内段的GST融合蛋白。结果PCR、酶切和测序结果表明所克隆的GST/hRAGE-C原核表达载体完全正确,继而表达、纯化获得了相对分子质量约35 000的融合蛋白(符合预期大小)。结论将hRAGE胞质内段构建于含有GST标记的载体上并获得融合蛋白的高效表达。     

枸橼酸西地那非有效治疗2型糖尿病患者勃起功能障碍

男性糖尿病患者中90%为2型糖尿病(非胰岛素依赖型),勃起功能障碍(ED)是这类患者的常见并发症。Boulton等的研究评价了西地那非对2型糖尿病患者ED的疗效,并将结果与糖化血红蛋白浓度和慢性糖尿病并发症等因素进行了关联比较。在这项双盲、对照试验中,患者(平均年龄59岁)随机接受     

用T7噬菌体展示筛选系统筛选与靶蛋白相结合的蛋白

目的 :建立有效的T7噬菌体筛选系统 ,筛选与靶蛋白 (信号分子 )有结合关系的多肽或蛋白。方法 :以p38MAPK、PRAK为靶蛋白 ,分别用不同的介质 (ELISA平板和Ni-NTA亲和树脂 ) ,通过结合 -洗脱 -扩增 3个步骤 ,筛选噬菌体cDNA文库 (T7人肝和 /或人肺cDNA文库 )。结果 :选择第四轮筛选后的洗脱噬菌体单个噬斑克隆 ,经EDTA处理后利用特异性PCR引物扩增插入片断 ,回收PCR产物并进行顺序 ,将获得的序列在美国国立卫生院 (NIH)的GenBank数据库中进行同源序列比较 ,获得若干编码蛋白的序列。在这些蛋白中有激酶、转录因子、细胞骨架…     

尿道球部多发巨大结石1例

患者,男,42岁。于7年前无明显诱因出现排尿稍受限,尿线略变细;自己能于会阴部触及肿物,可活动;肿物移动后常可排尿顺畅,无血尿、尿频、尿急、尿痛及肉眼血尿。因症状不重,一直未进行诊治。2005年3月到当地医院行B超检查示尿道结石,于2005年4月25日以“尿道结石”收入我科。入院     

抗人晚期糖基化终产物受体胞外段不同表位单克隆抗体的制备

目的 制备抗人晚期糖基化终产物受体(RAGE)胞外段单克隆抗体。方法 用纯化人重组RAGE胞外段(氨基酸序列23～342)免疫Balb／c小鼠，取其脾细胞与NS—1融合制备杂交瘤，经筛选和两次克隆化，从制备的腹水中纯化单克隆抗体。结果和结论 获得两株杂交瘤细胞B2．2和E10，其分泌单抗的亚型均为IgG2b。经ELISA、Westernblot和流式细胞仪鉴定，证明两株单抗均可结合重组RAGE及表达于细胞表面的RAGE，且两株抗体识别的位点为远隔表位，所建立的双夹心法可用于检测可溶性重组RAGE。这两株抗体将为研究RAGE相关疾病提供有效的工具。     

肾结核延误诊断19例临床分析

目的 探讨肾结核发病和临床表现的新特点及诊断方法。方法 回顾性分析误诊的肾结核患者19例，外院首诊泌尿系感染11例（57．9％），肾积水5例（26．3％），泌尿系结石3例（15，8％）。出现症状至确诊时间为2个月-20a，平均2.7a。结果 11例行手术，其中6例为术前诊断不明确，手术探查明确诊断，并经病理证实。14例（73．7％）最终经病理结果证实为结核，5例（26．3％）依靠病原学诊断。结论 对肾结核的诊断，应依靠患者病史、病原学、影像学、病理活检及手术探查多种方法，综合分析，减少误诊和漏诊。